全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期,2004 年 4 月 199
花叶日本醉鱼草的微型快繁
曾春霞1 孙卫邦1,2,*
1 中国科学院昆明植物研究所,昆明 650204;2 南京林业大学,南京 210037
Rapid Micropropagation of Buddleja japonica ‘Variegata’
ZENG Chun-Xia1, SUN Wei-Bang1,2,*
1Kunming Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650204; 2Nanjing Forestry University, Nanjing 210037
收稿 2003-04-03 修定 2003-06-13
资助 中国科学院知识创新工程西南基地创新基金(KZ:I-29)。
* 通讯作者(E-mail:sunnet@public.km.yn.cn, Tel:0871-
5223622 或 0871-5223905,Fax:0871-5216350)。
1 植物名称 花叶日本醉鱼草(Buddleja japonica
‘Variegata’)。
2 材料类别 茎尖和带腋芽的茎段。
3 培养条件 启动培养基:(1)MS+6-BA 0.05 mg.L-1(单
位下同)+IBA 0.05+NAA 0.05。增殖培养基:(2)
MS+6-BA 0.1+NAA 0.1; (3)MS+6-BA 0.2+NAA 0.1;
(4)MS+6-BA 0.5+NAA 0.1。生根培养基:(5)
MS+IAA 0.1+IBA 0.05。以上培养基均加入3%蔗
糖、0.65%琼脂,pH 5.8。培养温度为 (23 ± 1)℃,
光照时间12 h.d-1, 光照度1 000~1 500 lx。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 切取顶芽和带腋芽的茎段,首先用肥
皂及自来水清洗,然后用蒸馏水冲洗干净,在超
净台上用70%酒精消毒30 s,再用 0.1% 的 HgCl2
溶液消毒 3~5 min,无菌水冲洗 5~6 次后,接
种到启动培养基(1)上。经过10~15 d的培养,茎
段腋芽开始萌动,茎尖明显伸长;30 d 芽可长成
3~5 cm 的新梢,无丛生芽产生。
4.2 增殖培养 将启动培养获得的无菌苗在无菌条
件下,去掉基部叶片,切成长 1 cm 左右、含 1
个腋芽的茎段或茎尖,接种在增殖培养基(2)~(4)
上进行增殖培养。20 d 后统计表明:培养基(2)中
的芽体生长最佳,形成丛生芽,芽基部有极少的
愈伤组织形成,花叶保持不变,约 10% 的增殖芽
会长出1~3条不定根。增殖培养30 d 的增殖系
数可达到4。培养基(3)中的芽体矮小且叶片明显
变小,有愈伤组织产生,增殖系数为 6。培养基
(4)中的芽体增殖形成莲座状,产生10%左右的玻
璃苗,且花叶性状发生变化,基部丛生芽条叶面
的绿色部分减小,叶面有趋于黄白色的症状,基
部愈伤组织增大。
4.3 生根培养 将增殖培养产生的丛芽,选取2~3
cm长的顶芽接种于生根培养基(5)上诱导生根。12
d左右芽体开始生根,17 d 后每芽条可生根4~6
条,生根率达 9 5 % 以上。
4.4 移栽 当不定根长至0.5~1 cm时,在实验室
内自然光照条件下不打开瓶盖炼苗2~3 d后取出小
苗,小心洗去根部的培养基,用 1∶1 000 的多
菌灵溶液浸泡15 min,栽于温室内以珍珠岩为基
质的苗床中,加盖塑料薄膜保湿。1 周后揭去薄
膜,2 周后成活率达 97%。移栽成活的小苗再转
入自然红土、腐叶土、珍珠岩(体积 4∶2∶1)混
合的基质中进行壮苗培养和开花栽培(图 1)。
5 意义与进展 花叶日本醉鱼草系马钱科醉鱼草属
的常绿小灌木,是最近从国外引进的适宜盆栽或
花坛布置的观赏新品种。其株形优美,枝繁叶
茂,叶缘金黄色,叶中部深绿色,极具观赏价
值。国内外已对部分醉鱼草属观赏种类及其品种
的营养繁殖和种子繁殖进行了研究,但尚未见对
该品种进行微型快繁的报道。本研究用花叶日本
醉鱼草的茎尖或茎段为外植体,实现了其花叶特
征稳定性遗传的微型快繁。这对研究叶斑类观赏
品种的遗传稳定性和实现该品种资源的离体保存以
及花叶日本醉鱼草在我国的 工厂化生产都有一定
的参考价值。
图1 花叶日本醉鱼草的移栽苗