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多花黄精的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第1期,2006年2月78
多花黄精的组织培养与快速繁殖
徐忠传1,2,* 何俊蓉3 郁达1 周静亚1 徐晖2
1 常熟理工学院生物科学与工程系,江苏常熟 215500;2 浙江科技学院生物与化学工程系,杭州 310023;3 四川省农
业科学院生物技术核技术研究所,成都 610066
Tissue Culture and Rapid Propagation of Polygonatum cyrtonema Hua
XU Zhong-Chuan1,2,*, HE Jun-Rong3, YU Da1, ZHOU Jing-Ya1, XU Hui2
1Department of Biology Science and Engineering, Changshu Institute of Technology, Changshu, Jiangsu 215500, China; 2Depart-
ment of Biological and Chemical Engineering, Zhejiang University of Science and Technology, Hangzhou 310023, China; 3Institute
of Biological and Nuclear Technology, Sichuan Academy of Agricultural Science, Chengdu 610066, China
收稿 2005-06-20 修定   2005-10-08
资助  浙江省自然科学基金(302312)。
*E-mail: xuzc18@cslg.edu.cn, Tel: 0512-51528007
1 植物名称 多花黄精(Polygonatum cyrtonema
Hua),采自浙江省天台山的野生苗。
2 材料类别 带芽根茎。
3 培养条件 诱导培养基:(1) MS+6-BA 4.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.2;增殖培养基(都加NAA 0.2):
(2) MS+6-BA 1.0,(3) MS+6-BA 2.0,(4) MS+6-BA
3.0,(5) MS+6-BA 4.0,(6) MS+6-BA 5.0,(7)
MS+6-BA 6.0;生根培养基:(8) 1/2MS,(9)
MS+NAA 0.5,(10) MS+2,4-D 0.5。各培养基中
均添加30 g·L-1白糖、7 g·L-1 琼脂,pH 5.8。培
养条件:温度白天 24~26℃,夜间 18~20℃; 光
强为 30 mmol·m-2·s-1,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得及不定芽的诱导 将取回的野
生黄精根茎在清水中洗掉泥土,用洗衣粉溶液浸
30 min,洗净,剪去须根,切取根茎段芽端 1~2
cm,置于 0.15% 升汞溶液中消毒 10 min,然后
用无菌水冲洗 4 次,切去切口后接种在诱导培养
基(1)上。接种15 d 后,芽开始萌发,并长出叶
片。30 d 后,诱导不定丛芽。50~60 d 后,切
割丛芽继续接种在培养基(1)上进行不定芽诱导或
继代培养。
4.2 增殖培养 将诱导所得丛芽切成2~3株一丛,
分别接种于增殖培养基(2)~(7)上。接种20 d后,
在培养基(5)上丛芽的增殖率最高,分别为(6)、
(7)、(4)、(3)的 1.6、1.9、3.6、5.2 倍,并且丛
芽大小适中,稍为黄绿色 ;在培养基(2)上丛芽几
乎不增殖,但可以诱导芽的叶片正常发育。
4.3 壮苗及生根培养 先将分化丛芽转接到培养基
(2)上培养 30 d,再将丛芽分开,取健壮单个根
茎芽,接种于培养基(8)~(10)上进行生根培养,
以(9)效果最好。培养约20 d,小根茎开始长出
白色粗根,30 d 后生根率达 100%。再经过 20~
30 d 培养后,将瓶装苗搬到炼苗棚内,敞口炼
苗 3 d。
4.4 移栽 将经过炼苗的黄精根茎从接种瓶中取
出,用清水洗掉培养基,在 0.1% 高锰酸钾溶液
中消毒 1 min,用清水冲洗干净后,假植在沙床
上,保持空气湿度 95% 以上,用 75% 遮阳网遮
荫。30 d 后假植成活率达 90% 以上。以后每隔
7 d 喷施 1 次 MS 营养液。10 月下旬,将假植的
黄精根茎栽种到整好的露地畦内,将根茎段芽眼
向上,每隔10~15 cm 平放 1个根茎,行距20~25
c m,覆土 4 ~ 6 c m,浇足水。在土壤封冻前,
畦面上盖一层有机肥或薄膜,以利保暖越冬。翌
年 4 月,黄精出苗生长。
5 意义与进展 多花黄精系百合科黄精属药用植物,
其根茎作中药黄精用。由于长期大量采挖,野生
资源面临枯竭的境地。目前已可人工栽培,但由
于生产上多采用分根繁殖,其繁殖系数低,生根
困难,质量不稳定,故黄精种苗问题成了人工大
面积种植的瓶颈。用组织培养技术建立快速繁殖
体系,有望能进行规模化生产优质黄精种苗。多
花黄精的组织培养与快速繁殖尚未见报道。