全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月 783
醉香含笑的组织培养与植株再生
李雪* 王淑芬 蒋雄辉
泉美园艺有限公司,福建泉州 362014
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Michelia macclurei Dandy
LI Xue*, WANG Shu-Fen, JIANG Xiong-Hui
Sunshine Horticulture Company, Limited, Quanzhou, Fujian 362014, China
收稿 2004-11-05 修定 2005-04-08
*E-mail: snowthlee@yahoo.com.cn, Tel: 0595-22032882
1 植物名称 醉香含笑(Michelia macclurei Dandy)。
2 材料类别 茎段、茎尖。
3 培养条件 诱导培养基:(1) 1/3MS+6-BA 0.2 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.02;增殖培养基:(2) 1/3MS+
6-BA 0.3+NAA 0.2;壮苗培养基:(3) 1/3MS+活
性炭 0.3%;生根培养基:(4) 1/4MS+IBA 2.0+NAA
3.0。以上培养基均加2.0 g·L-1 Gelrite,除生根培
养基(4)加 1.5% 蔗糖外,其余加 2.5% 蔗糖,pH
5.8。培养温度为(26±1)℃,光照12 h·d-1,诱导培
养时光强为 6 mm o l ·m - 2 ·s - 1 左右,其它为 5 0
mmol·m-2·s-1 左右。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 2002年8月,从泉州市五台
山林场海拔约 600 m 林地采回幼嫩枝,小心去枝
条及芽上的平伏绒毛,自来水冲洗30 min后,剪
成长度约2 cm的茎段,无菌水再清洗3次并用无
菌纸吸干水。70% 的酒精消毒 10~15 s 后立即转
入0.15%升汞(加吐温20滴 ·L-1) 消毒 10~12 min,
无菌水冲洗6次。将其分割成0.5~1.0 cm的小段,
每段需带节,接种在诱导培养基(1)中。
4.2 芽的诱导 培养3 d后,茎段、茎尖基部有大
量的褐色物质产生,茎尖褐化程度更严重,需及
时转代于同样培养基中,否则材料会因褐化而死
亡。再培养10 d 后,顶芽开始萌动、伸长;30 d
后,茎段隐芽开始萌动;培养 80 d 时,茎段上
的隐芽长至0.5~1.0 cm,茎尖顶芽可长到1.0~1.5
c m。茎尖、茎段基部均会形成浅黄色的疏松愈
伤组织。诱导芽继代接种到诱导培养基上,再培
养60 d 后,顶芽继续生长 1.5~2.2 cm,基部节
段可见有长出新芽,茎段节上可长出 1 ~ 2 个新
芽;节段长出新芽比茎段早 40 d 左右;原茎段、
顶芽基部浅黄色愈伤组织无法再分化出芽,最后
慢慢变成褐色直至死亡。
4.3 增殖 将分化出芽接种到增殖培养基(2),40 d
转代 1 次。前 3 代,每个芽长 1~2 个新芽,第 4
代后新芽可达到 3~7 个。长新芽的方式是“芽生
芽”,芽的高度在0.5~2.0 cm,芽粗细均匀,颜
色为淡绿色,多数芽的叶片未抽出。芽的基部呈
现出黑色,偶尔也有白色呈晶体状的愈伤组织产
生。每次继代,小芽切成 2~3 个芽丛效果更好;
单芽太小,在增殖过程中易褐化死亡。通过在增
殖培养基(2)不断继代,很快获得大量的芽苗。
4.4 壮苗与生根 因增殖芽矮小,经壮苗培养基(3)
培养30~35 d,小芽会长成健壮的高度为2.5~4.0
cm 的枝条,基部微膨大,叶色颜色由淡绿色转为
深绿色,叶片展开数量增加到3~6 片。经壮苗培
养的小枝条再转入生根培养基(4),15 d后开始生
根,35 d 后从原来的小枝条基部长出浅褐色的根
1~4条,最后形成完整的小植株。生根率93.25%。
4.5 炼苗与移栽 将生好根的苗,放置到室外25~
30℃、100~160 mmol·m-2·s-1下炼苗 3~5 d后,取出
小苗,洗去根部培养基,移植到沙、椰糠和泥炭土
(2∶2∶1)的基质中,注意保湿,20 d后可施4 000
倍花多多1 号。50 d 后统计,成活率达97.6%。
5 意义与进展 醉香含笑又称火力楠,是木兰科含
笑属,生长在华南海拔 200~800 m 的地区。属
高大常绿乔木植物,树姿美,15~20 年成材,木
材优良,常用作森林防火林带,也是一种新的园
林绿化树种,有较高的观赏性,逐渐受到人们的
重视。主要靠种子繁殖,周期长,种苗差异大,
不利于大面积造林或绿化使用。醉香含笑组培国
内有研究,但本文所用方法与之不同,我们的技
术已成功应用于生产。采用组培技术大规模产业
化生产尚未见报道。