全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月 319
收稿 2006-12-06 修定 2007-03-09
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三尖杉的离体胚培养
何碧珠 1,*,何官榕 2
福建农林大学 1园艺学院,2植物保护学院,福州 350002
In vitro Culture of Immature Embryos of Cephalotaxus fortunei Hook. f.
HE Bi-Zhu1,*, HE Guan-Rong2
1College of Horticulture, 2College of Plant Protection, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
1 植物名称 三尖杉(Cephalotaxus fortunei Hook. f.)。
2 材料类别 离体胚。
3 培养条件 芽诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+IAA 1.0+NAA 0.1;芽增殖培养基:
MS+6-BA 2.0+IAA 1.0+NAA 1.0;生根培养基:
1/2MS+IBA 1.0+NAA 0.5+KT 0.2。以上各培养基
均加入 25 g·L-1蔗糖、0.7%琼脂、0.25%活性炭,
pH 5.8。培养温度为(25±2) ℃,光强为 30~40
µmol·m-2·s-1,光照时间 14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 种子的预处理 三尖杉种子采自福建野生三尖
杉树种,采摘后用湿巾包好,置于 4℃下暂存。
带回实验室后用洗涤剂洗净,纱布捆扎,流水冲
洗 3 h,在超净工作台内以 75%的酒精消毒 30 s,
无菌水冲 3~4遍后,用消毒滤纸吸干表面水分。
再用小眼镊和手术刀将种子的外壳在无菌条件下迅
速而完整地剥开,取出胚后直接接种于芽诱导培
养基上。
4.2 胚的生长 接种在诱导培养基上的胚于 1周后
开始变绿,逐渐增大、伸长;15 d左右可以明
显看到 2片子叶,胚轴亦随之伸长;30 d左右,
子叶张开,胚根伸长,形成完整的幼苗。
4.3 快速增殖 将幼苗切成带腋芽的茎段(二叶二
芽),转接到增殖培养基上。3周后,每个芽又
分化出 2~3丛饱满的丛生芽(图 1)。
4.4 生根及移栽 将长到 3 cm以上的无根幼苗切
下,转到生根培养基上。18 d时开始发根,23 d
后每株可长出形态正常的根 1 ~2 条,有完整须
根,生根率可达 62%。将试管苗放在自然光下炼
苗 1周左右后打开瓶盖,3 d后取出苗,洗净并
栽至装有珍珠岩石、森林土(1:1)的基质中,保持
一定湿度,3周后成活率在 95% 以上。
5 意义与进展 三尖杉为我国特有珍稀树种,属
于三尖杉科三尖杉属植物,共有 9种,我国有 8
种,其中福建省内有 3 种。三尖杉的根、茎、
叶、皮、果中均含有 1 0 多种抗癌性的生物碱,
对血癌和淋巴肉瘤等有特殊的疗效,近年来备受
医学界关注(傅立国 1984;吴承卫 1993)。由于
三尖杉植物对环境气候的要求较特殊,自身繁殖
率低,生长缓慢,自然资源稀少,其酯类生物
碱含量很低;分布区域十分狭窄,产量少,因
而难以满足临床上日益增长的需求。本实验通过
三尖杉离体胚培养,诱导不定芽再生植株,进而
大量繁殖组织培养苗,对三尖杉资源的开发利用
可能具有一定的参考价值。三尖杉离体胚诱导不
定芽再生植株尚未见报道。
参考文献
傅立国(1984). 三尖杉属的研究. 植物分类学报, 22 (45): 277~288
吴承卫(1993). 三尖杉及其生物碱类成分的研究进展. 国外医学
药学分册, 20: 321~325
图 1 三尖杉增殖的丛生芽