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双荚决明的组织培养与植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第2期,2006年4月 245
双荚决明的组织培养与植株再生
韩珊* 石大兴 王米力 廖静 麦苗苗
四川农业大学林学园艺学院,四川雅安 625014
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Cassia bicapsularis Linn.
HAN Shan*, SHI Da-Xing, WANG Mi-Li, LIAO Jing, MAI Miao-Miao
College of Forestry and Horticulture, Sichuan Agricultural University, Yaan, Sichuan 625014, China
收稿 2005-06-01 修定  2005-11-25
资助  四川省重点学科建设项目(SZD0419)。
*E-mail: hsslpy_2003@yahoo.com.cn, Tel: 0835-2882787
1 植物名称 双荚决明(Cassia bicapsularis Linn.)。
2 材料类别 成熟种子无菌苗的下胚轴。
3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1)种子萌发培
养基:不含任何激素的 M S;( 2 )诱导分化培养
基:MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+2,4-D 0.01+
NAA 0.1;(3)增殖培养基:MS+6-BA 0.5+2,4-D
0.01+NAA 0.01;(4)生根培养基:1/2MS+IBA
0.5+NAA 0.01。上述培养基中附加 0.7% 琼脂;
生根培养基中蔗搪为1.5%,其余为3%;pH 5.8。
培养温度为(25±2)℃;光照时间为12 h·d-1,光强
为30~40 mmol·m-2· s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 供试材料来源于四川农业大
学读书公园。挑选子粒饱满且色泽好的种子,先
用 1% 的洗衣粉将种壳洗干净,在超净工作台上,
用 75% 酒精消毒 30 s,然后在 0.1% 升汞中消毒
13 min,用无菌水冲洗5次。用剪刀将种壳剪开,
用镊子取出,接种于培养基(1)上培养。4 d 后,
种胚开始萌发。待子叶展开后,只取下胚轴,将
下胚轴切成1 cm×1 cm 大小的方块平放在培养基
(2)上。
4.2 丛生芽的诱导与增殖 以上外植体在培养基(2)
上培养 8 d 后,下胚轴两端开始膨胀萌动,15 d
左右,膨胀部分长出小芽,形成丛芽。丛生芽
在培养基(3)上都能较好地增殖。30 d 后,增殖
率可达 7 0 %。
4.3 根的诱导 把丛芽中的健壮芽苗剪切后转入培
养基(4)中。10 d 后,在芽苗基部产生暗褐色不
定根。20 d 后,根长达5 cm 左右,且有许多侧
根,生根率达 9 3 % 。
4.4 试管苗的移栽 待幼苗长至7 cm左右时,在培
养室中开瓶3~5 d 后,洗去根部培养基,移栽到
盛有已配好的炼苗基质的营养袋中,覆以地膜进
行炼苗。起始的 1 周内,试管苗从异养过渡为自
养,这是试管苗能否移栽成活的关键时期。在此
时期应精心护理,每天浇水 1 次并打开地膜透
气,待试管苗长出新叶片后,可去掉地膜,苗
长至10 cm高时可移植至户外排水灌溉良好的大田
中,适当遮荫,移栽成活率为 83% (图 1)。
5 意义与进展 双荚决明为豆科决明属灌木或小乔
木,在世界热带及亚热带地区被广泛栽培为绿篱
和庭院植物。它的枝叶茂盛,四季常青,开花
期长,产花量大,且其花叶可作为饲料资源。其
固氮能力在营造生态林中具有一定作用。但由于
木本豆科植物在培养过程中存在外植体培养初期褐
变以及植株再生能力低,生根较困难等问题,目
前对其研究较少 。本文采用双荚决明成熟种子无
菌苗的下胚轴为外植体,诱导丛生芽繁殖并再生
完整植株,为其快速繁殖及种质资源的保存开拓
了一条途径。双荚决明的快速繁殖尚未见
报 道 。
图1 双荚决明移栽成活