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胡杨雄花和花序轴离体培养的适宜培养基



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第4期,2006年8月 801
胡杨雄花和花序轴离体培养的适宜培养基
周燕1 朱小虎2 王晓炜2 江华2 梁蕊1 高述民1,* 李凤兰1
1 北京林业大学生物科学与技术学院,北京 100083;2 新疆农业大学林学院,乌鲁木齐 830052
收稿 2005-10-17 修定  2006-02-10
资助 北京林业大学林木、花卉遗传育种教育部重点实验室
开放基金和国家自然科学基金(30460010)。
*通讯作者(E-mail: gsm689@sohu.com, Tel: 010-
62338717)。
·小经验·
本文以胡杨(Populus euphratica Oliver)雄花和
花序轴为外植体,在11种培养基(表 1)上诱导愈
伤组织,在 8 种培养基(表 2)上诱导芽分化,在
5种培养基(基本培养基为1/2MS,表 3)上诱导根
分化,得到如下结果:
1. 表 1显示,以MS为基本培养基,6-BA浓
度为1.0 mg·L-1时,雄花愈伤组织诱导率以培养基
中添加1.0 mg·L-1 NAA最大(3号),花序轴愈伤组
织诱导率差异不大,以培养基中添加0.25 mg·L-1
NAA (1 号)最大。以 MS 为基本培养基,在 1.0
mg·L-1 6-BA 下,添加0.5 mg·L-1 2,4-D (7号)的雄
花和花序轴愈伤组织诱导率最大,花序轴愈伤组
织诱导率差异不明显。以MS 为基本培养基,加入
1.0 mg·L-1 6-BA后,只添加0.5 mg·L-1 NAA (2号)
和只添加1.0 mg·L-1 2,4-D (6号)的培养基不如同时
添加0.5 mg·L-1 NAA和1.0 mg·L-1 2,4-D (5号)的
好,说明同时添加2,4-D与 NAA有助于胡杨雄花、
花序轴的愈伤组织形成。以 M S 为基本培养基,
NAA 浓度为 0.5 mg·L-1 时,以培养基中添加 1.0
mg·L-1 6-BA的雄花愈伤组织诱导率最大(2号); 花
序轴愈伤组织诱导率以添加1.5 mg·L-1 6-BA的最
大(8号)。培养基中加1.0 mg·L-1 6-BA和0.5 mg·L-1
NAA 后,雄花和花序轴愈伤组织诱导率最大的都
是 11 号培养基。
2. 以花序轴诱导的愈伤组织进行继代培养,
选出较适宜的继代增殖培养基为B5+1.0 mg·L-1 6-
BA+1.25 mg·L-1 NAA 和 MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5
mg·L-1 NAA。低浓度的 NAA 不利于愈伤组织的增
殖且愈伤组织边缘出现褐化。NAA 浓度达 1.25
mg ·L-1 时增殖速度最快。而在恒定浓度的 6-BA
(1.0 mg·L-1)和 NAA (0.5 mg·L-1)的情况下,LS、
MS 的增殖效果相当,都略微好于 B5 培养基,且
均有少量愈伤组织分化出芽。
3. 表2显示,以MS为基本培养基(12~15号),
6-BA 与 NAA 比值为 2.0 (13、15 号)时,芽诱导
表2 不同培养基诱导芽的效应
生长调节物质
培养基 基本 浓度/mg·L-1  芽诱导 芽健壮
编号 培养基 率/% 程度
6-BA NAA
12 M S 0.5 0.2 31.2 一般
13 M S 0.4 0.2 29.4 一般
14 M S 1.0 0.25 26.6 一般
15 M S 1.0 0.5 30.7 一般
16 LS 1.0 0.5 33.3 一般
17 B 5 1.0 0.5 13.3 一般
18 1/2MS 0.2 0.5 23.0 较好
19 LS 0.2 0.5 0 一般
表1 不同培养基对愈伤组织诱导的影响
生长调节物质
愈伤组织诱导率/%培养基 基本 浓度/mg·L-1
编号 培养基
6-BA NAA 2,4-D 雄花 花序轴
1 M S 1.0 0.25 46.0 74.7
2 M S 1.0 0.5 59.9 64.9
3 M S 1.0 1.0 89.5 72.3
4 M S 1.0 1.5 52.3 66.7
5 M S 1.0 0.5 1.0 67.7 86.8
6 M S 1.0 1.0 44.3 76.9
7 M S 1.0 0.5 62.5 77.6
8 M S 1.5 0.5 45.9 74.5
9 M S 2.0 0.5 37.8 53.6
10 LS 1.0 0.5 27.4 0
11 B 5 1.0 0.5 68.7 98.0
植物生理学通讯 第42卷 第4期,2006年8月802
率差异不大;6-BA与 NAA比值为2.5 (12号),芽
诱导率为31.2%;6-BA与 NAA比值为4.0 (14号),
芽诱导率为26.6%。6-BA (1.0 mg·L-1)和 NAA (0.5
mg·L-1)浓度恒定时(15~17号),3种培养基中以LS
(16号)的诱导率最高。据此认为,诱导芽分化较
好的培养基为 16 号和 12 号。在 LS 培养基(16、
19号)中,NAA (0.5 mg·L-1)浓度恒定,比值小于
表3 不同培养基诱导生根的效应
培养基 生长调节物质种类 生根率/ 平均根  最多生根
编号  及浓度/mg·L-1 % 数/条  数/条
20 IBA 0.1 22.6 3.0 5
21 IBA 0.5 37.0 5.0 8
22 IBA 1.5 38.0 2.6 5
23 IBA 2.0 47.8 2.5 4
24 NAA 0.5 13.8 1.0 2
1 的 6-BA 与 NAA,不利于芽分化,这与张昌伟
等(2004)的结论相同。丛芽增殖培养基以18号培
养基为宜,培养 1 个月左右即可得到叶色浓绿、
粗壮的植株。
4. 根诱导率最大的是23 号培养基,但根最
多的是21 号培养基(表 3)。
5. 实验中常出现黄化苗,且难以生根,这与
张林(1991)的结论相同。即使缩短继代时间,仍
然有黄化苗出现。
参考文献
张昌伟, 侯喜林, 袁建玉, 李海莲(2004). 太仓大蒜根尖离体培养
直接诱导不定芽及其试管鳞茎的形成. 植物生理学通讯, 40
(2): 167~170
张林(1991). 影响瑞香组织培养生根的几个因素. 植物生理学通
讯, 27 (6): 425~426