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PP333对怀地黄试管苗生长和一些生理指标的影响



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月624
PP333对怀地黄试管苗生长和一些生理指标的影响
李明军* 徐 鑫 陈明霞 张晓丽 杜琳
河南师范大学生命科学学院,河南新乡 453007
收稿 2005-01-06 修定  2005-04-11
资助 河南省重点科技攻关项目(0423032100)。
*E-mail: limingjun2002@263.net, Tel: 0373-3328189
针对怀地黄试管苗细弱和移栽成活率较低的
问题,本文研究了PP333对其生长发育和一些生理
指标的影响。以怀地黄[Rehmannia glutinosa
Libosch. f. hueichingensis (Chao et Sbhih) Hsiao]品
种“9302”的无菌试管苗为材料,MS 为基本培
养基并附加不同浓度的PP333 (0、0.01、0.05、0.1、
2.0 mg·L-1),蔗糖浓度 3%,琼脂浓度 0.6%,pH
5.8~6.2,培养容器为 2.5 cm×20 cm 的大试管,
每个试管装 20 mL 培养基,加盖封口膜,在 1.1
kg·cm-2 的压力下灭菌20 min。在超净工作台上,
把无菌试管苗切成 2 cm 左右带 2~3 片叶的的小
段,随机接种在各种培养基上,每个试管中接 1
段,每种培养基接种30管。培养温度为(25±2)℃,
光照14 h·d-1,光照度2000 lx。每 5 d测量 1次
叶片生理指标。可溶性蛋白含量采用考马斯亮蓝
G-250 比色法测定,可溶性糖含量测定采用蒽酮
比色法,过氧化物酶(POD)活力测定采用愈创木
酚-过氧化氢法。得到以下结果(表 1、2):
1. 低浓度(0.01﹑0.05 mg·L-1) PP333处理的试管
苗茎生长速率开始时较慢,以后加快,茎增长量
显著增大,苗叶片大,叶色较浅,茎较细;高
浓度PP333 (0.1、2.0 mg·L-1)处理的茎增长量减小,
2.0 mg·L-1 PP333 处理下的茎粗壮,叶肥厚深绿,
壮苗效果最佳。不同浓度PP333处理的试管苗腋芽
萌发数量均增加。 不同浓度PP333处理的试管苗比
未作处理的晚 3 d 生根,培养的前 15 d 生根少,
以后生根条数迅速增加,根粗壮且侧根较多,呈
黄褐色,根长与 PP333 浓度呈负相关。0.1 mg·L-1
PP333 的根数最多,约为不作处理的2倍。不同浓
度 PP 333 处理的试管苗的根冠比均显著增加,以
表1 PP333对怀地黄试管苗生长的影响
PP333浓度/mg·L-1 茎增长量/cm 芽数/个·株-1 根数/条·株-1 根长/cm 根冠比
0 3.7 (100.0) 0.6 (100.0) 41.0 (100.0) 6.5 (100.0) 0.170 (100.0)
0.01 5.1 (139.7) 1.2 (200.0) 54.0 (131.7) 6.0 (92.3) 0.247 (145.3)
0.05 5.0 (137.0) 0.8 (133.3) 59.6 (145.4) 5.0 (76.9) 0.365 (214.7)
0.1 3.5 (95.9) 1.2 (200.0) 80.4 (196.1) 4.2 (64.6) 0.280 (164.7)
2.0 2.2 (60.3) 1.0 (166.7) 43.6 (106.3) 3.8 (58.5) 0.296 (174.1)
  培养 25 d 时测定,括弧中为相对数(%)。
0.05 mg·L-1处理的为最大(表1)。
2. 不同浓度的PP333处理的试管苗叶中可溶性蛋
白含量均呈先下降再上升又下降的趋势,从培养
10 d 开始,可溶性蛋白含量维持在较高水平。叶
中可溶性糖含量呈逐渐下降趋势,培养10 d 时高
于未作PP333处理的,其它均低于此。不同浓度PP333
处理的试管苗叶中POD活性均呈先降后升再降的趋
势。低浓度PP333 (0.05 mg·L-1)处理的在5~15 d增
高,高浓度PP333 (2.0 mg·L-1)培养5~10 d时的上升
快,出现显著的高峰,之后又迅速下降(表 2)。
表2 PP333对怀地黄试管苗一些生理指标的影响
PP333浓度/ 培养 可溶性蛋白 可溶性糖 POD活力/
mg·L-1 时间/d 含量/mg·g-1(FW) 含量/% U·g-1(FW)
0 0 22.3 4.5 252.8
5 8.7 2.4 51.2
10 6.9 1.4 100.8
15 15.2 0.4 131.2
20 17.4 0.8 185.6
0.05 0 22.3 4.5 252.8
5 7.6 1.8 73.6
10 17.4 1.7 128.0
15 19.7 0.4 131.4
20 18.3 0.5 128.0
2.0 0 22.3 4.5 252.8
5 6.8 1.9 48.0
10 14.2 1.7 196.8
15 20.3 0.4 104.0
20 18.0 0.3 116.8
  培养 25 d 时测定。