全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 3期，2008年 6月 557
根癌农杆菌介导法在禾本科植物遗传转化中的应用
谭伟，杨俊杰，彭金环，于元杰 *
山东农业大学农学院，泰安 271018
Application of Agrobacterium tumefaciens-mediated Genetic Transformation
Methods in the Monocotyledons
TAN Wei, YANG Jun-Jie, PENG Jin-Huan, YU Yuan-Jie*
College of Agronomy, Shandong Agricultural University, Tai’an 271018, China
提要：在植物基因工程中，农杆菌质粒介导的遗传转化是比较完善与有效的基因转移方法，但在单子叶植物中应用较少。
文章介绍了农杆菌介导遗传转化技术在禾本科植物改良中的研究进展，并对此法的应用前景作了分析。
关键词：根癌农杆菌；遗传转化；禾本科植物
收稿 2008-01-07 修定 2008-04-07
* 通讯作者 ( E - m a i l：y u a n j y @ s d a u . e d u . c n；Tel：
0 5 3 8 - 8 24 29 0 3)。
自从 1983年Zambryski等以根癌农杆菌Ti质
粒为转化载体，将 T-DNA上的基因转入烟草细
胞，获得第一株转基因植物(转基因烟草)以来，
作物遗传转化的研究得到迅速发展。1 9 8 7 年
Grimsley等最早将玉米条纹病毒的cDNA通过根癌
农杆菌转入玉米，转化植株表现出感染症状；而
通过根癌农杆菌首次获得水稻和小麦转基因植株分
别在 1990年和 1991年。据统计，2006年全球转
基因作物种植面积比 2005年增加 13%，种植转基
因作物的农户数量首次超过 1 000万户，在种植
的转基因作物中，转基因玉米种植面积为252×105
hm2 (占全球转基因作物总种植面积的 25%，位居
第二)。在植物遗传转化中农杆菌介导法是首选的
方法之一。
1 根癌农杆菌介导的转化方法及其特点
1.1 根癌农杆菌介导的转化方法 最常用的根癌农
杆菌介导转化单子叶植物的方法是共培养法。此
法由Márton等于1979年首次报道，1985年Horsch
等建立了农杆菌叶盘共培养转化法，以后这一共
培养系统又广泛用于愈伤组织细胞、悬浮培养细
胞、茎切段、子叶切片、下胚轴切段等离体材
料的转化。共培养前农杆菌感染愈伤组织大致有
3种方式(易自力等 2001) ：(1)整块愈伤组织浸泡于
菌液中静置培养；(2)整块愈伤组织浸泡于菌液中
摇动培养；(3)菌液加在愈伤组织上。常用的是第
1种方法。载体法中新的转基因方法有：基于Ac/
Ds转座系统建立的转化载体；利用噬菌体 P1Cre-
lox位点的特异性重组系统；利用酵母线粒体 I-
Scel核酸内切酶特异性诱导植物DNA双链断开引
起的同源重组系统；利用双链细菌人造染色体载
体系统等，这些方法都可提高转化率和转基因位
点的质量(华志华和黄大年 1999)。
农杆菌转化的过程可以用图 1简单地说明。
1.2 农杆菌介导的遗传转化特点 农杆菌介导的转
化系统是模仿或称之为利用天然的转化载体系统，
成功率高，效果好。农杆菌转化系统是一种生物
转化系统，具有主动性，能选择性地转移 Ti 质
粒上以 2个 25 bp重复序列为两端的 T-DNA；在
VirD2的帮助下，它可以主动地插入到植物染色体
上。T-DNA上含有引导DNA转移和整合的序列，
以及能够被高等植物细胞转录系统识别的功能启动
子和转录信号，促使插入到T-DNA区的外源基因
能够随同T-DNA一道在植物细胞中表达。整合进
植物基因组中的T-DNA和插入其间的外源基因能
够在再生植株的各种组织器官中特异性表达，也
就是说可进行人为的控制。农杆菌 Ti质粒转化系
统转化的外源基因以单拷贝为多数，并且多数符
合孟德尔遗传规律，转基因植株能较好地为育种
提供中间选育材料(王关林和方宏筠 2002)。
植物生理学与农业及生产应用 Plant Physiology and Agriculture and Applications
植物生理学通讯 第 44卷 第 3期，2008年 6月558
2 根癌农杆菌介导的遗传转化法在禾本科作物中
的应用
早期的禾本科植物农杆菌介导的遗传转化，
研究多用其幼胚评估不同条件下受农杆菌侵染的可
能性。随后人们用大量的实验测试不同谷类植物
的不同外植体对农杆菌侵染的反应能力，以期获
得稳定的转化细胞或植株。Grimsley等(1987)最
早将玉米条纹病毒的cDNA通过根癌农杆菌转入玉
米，转化植株表现出感染症状；Mooney等(1991)
采用根癌农杆菌感染小麦胚得到转化细胞；
Raineri等(1990)和Chan等(1992)用根癌农杆菌感染
未成熟胚得到少量的水稻转基因植株，这些研究
得到的转化频率很低，且没有足够的分子和遗传
证据，很少能为大家接受，但为禾谷类作物转基
因研究奠定了基础。直到 1993年这方面的研究才
取得了重大突破，Chan等(1993)以水稻开花授粉
后 10~12 d的幼胚为受体，经农杆菌感染后获得
转基因植株；Hiei等(1997)以水稻成熟胚愈伤组织
和未成熟幼胚为受体，获得较多有严格分子生物
学证据的转基因植株，并对农杆菌介导法转化水
稻的影响因素进行了详细研究，从而建立了一套
比较成熟的农杆菌转化水稻的技术体系。此后，
农杆菌介导法的转化范围又扩展到了许多重要的单
子叶植物。
水稻转基因大部分用农杆菌介导，至2007年
8月为止，国内用农杆菌介导的水稻转基因的文
献已经超过 200篇，而经过严格检测说明转化成
功的报道则比较少。农杆菌转化小麦取得了不小
的成就，已经成功转入小麦的目标基因有抗病性
基因、抗衰老基因、抗除草剂类基因、嵌合雄
性不育类基因、抗盐基因、胆碱脱氢酶基因、甜
菜碱醛脱氢酶和胆碱单加氧酶基因。禾本科中还
有许多种植物的农杆菌转化获得了成功(表 1)。
3 结语
农杆菌介导遗传转化技术已日臻成熟；但仍
有以下问题尚待解决。
3.1 植物受体因子与农杆菌间的作用机制 目前对
农杆菌介导转化的机制及分子调控研究比较深入，
图 1 农杆菌 T-DNA转化植物细胞过程(李卫等 2000)
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表 1 农杆菌介导禾本科植物的遗传转化
作物种类 农杆菌菌株 外源基因 参考文献
水稻(Oryza sativa) A281 gus, nptll Chan等(1993)
LBA4404, EHA101 gus, hpt Hiei等(1994)
EHA101 gus, hpt Rashid等(1996)
LBA4404 gus, hpt Aldemita和 Hodges (1996)
EHA101 bar Park等(1996)
LBA4404, EHA105 Bt, gus, hpt Cheng等(1998)
LBA4404 BADH 卢德赵等(2003)
EHA105 IPT 许明等(2003)
EHA105 RCA 金松恒等(2004)
EHA105, pCAMBIA1300 Ac/Ds, gus 王爱民等(2005)
pCAMBIA1300 GS1,GS2 Sun等(2005)
LBA4404 ICE1, hpt 向殿军等(2007)
EHA105 AGP 吕桂兰等(2007)
小麦(Triticum aestivum) A281 gus Zaghmout和 Trolinder (1993)
AGL0 npt Xia等(1999)
LBA4404, EHA101 bar uidA Amoah等(2001)
EHA101 NptII, gus Zeng等(2001)
AGL0, AGL1 Pto134, pbgx1 Weir等(2001)
LBA440 pHK21, pHK22 Khanna和 Daggard (2003)
AGL1 pAL156 Wu等(2003)
EH105, AGL-1 pC3301, pDM805 王翠亭和卫志明(2003)
GV3101 NptII, gus 毕瑞明和王洪刚(2006)
LBA4404 pad Yan等(2006)
C58C1, EHA105, LBA4404 Ecppc, npt, gus 张彬等(2007)
玉米(Zea mays) C58*, A2034* 条纹病毒 DNA Grimsley等(1987)
EHA1 Gus, nptll Gould等(1991)
LBA4404 gus, bar lshida等(1996)
C58C, LBA4301 gus Shen等(1999)
LBA4404 Bt, hpt, sck, gus 伍晓丽等(2004)
C58 Gfp, nptll Sidorov等(2006)
燕麦(Avena sativa) C58* 条纹病毒 DNA Donson等(1988)
大麦(Hordeum vulgare) C58 Bar, gus Tingay等(1997)
C58 gus, nptll Cheng等(1997)
EHA105,PKYLX7 反义磷脂酶 Dγ 吕维涛等(2005)
AGL0 GFP Holme等(2006)
LBA4404 pUGAB7 Shrawat等(2007)
早熟禾(Poa pratensis) AGL1 Gus, CR Chai等(2003)
LBA4404 Bt 佘建明等(2005)
高羊茅(Festuca arundinacea) EHA105 CBF1 胡繁荣(2005b)
EHA105 Hpt, bar Hu等(2005)
AGL1, GV3101 AtNHX1 赵军胜等(2005)
C58C1 NptII, gus 王艳丽等(2007)
老芒麦(Elymus sibiricus) EHA105 ppIP 李达旭等(2006)
荞麦(Fagopyrum esculentum) B-256 Gus 陆小平和小岛峰雄(2003)
黑麦草(Loliumperenne) LBA4404 BADH 刘萍等(2005)
EHA101 NptII, gus Bajaj等(2006)
LBA4404 Hyg, gus 张振霞等(2007)
C58C1 NptII, gus 王艳丽等(2007)
谷子(Foxtail millet) LBA4404 Bt, Bar 王永芳等(2003)
LBA4404 PBI121 Liu等(2007)
狗牙根(Cynodon dactylon) EHA105 gus 胡繁荣(2005a)
LBA4404 Hyg, gus 张振霞(2005)
高粱(Sorghum bicolor) LBA4404 bar, gus Zhao等(2000)
EHA105 cryIAb 肖军等(2004)
甘蔗(Saccharum officenarum) C58C, Rif bar, nptll Enriquez-Obregon等(1998)
EHA105 TSase 王自章等(2003)
EHA105, LBA4404 GFP 罗敬萍等(2003)
LBA4404 cryIA 李瑞美等(2006)
结缕草(Zoysia sinica) EHA105 cryIAb 胡繁荣等(2003)
　　* 为天然农杆菌。
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但对有关植物因子的作用机制还知之甚少。农杆
菌介导单子叶植物遗传转化已具备了与双子叶植物
相似的农杆菌条件，但单子叶植物的转化相对要
困难得多，这可能不仅是农杆菌一方的问题，单
子叶植物本身也可能起关键作用，至于农杆菌和
这些植物之间的相互作用也值得考虑。拟南芥农
杆菌侵染突变体和酵母的成功转化( B a l l a s 和
Citovsky 1997；Bravo-Angel等 1999；Nam等 1999)
拟于借鉴。
3.2 转化范围 据统计已经被成功转化的单子叶植
物包括禾本科、石蒜科、百合科、鸢尾科、薯
蓣科等 8科 30多种单子叶植物(吴关庭 2004)，并
且大部分为禾本科植物，而单子叶植物大概有 4
万余种，转化成功的单子叶植物太少，而且单子
叶植物的转化有限。因此扩大其遗传转化范围可
能是今后这一领域研究的重点之一。
3.3 转化率 大多数单子叶植物的转化受其基因
型、外植体来源、组织培养难易程度等因素的影
响，比较难，以至在重要禾谷类作物中的应用受
到一定的限制。与双子叶植物相比，农杆菌转化
单子叶植物还存在较大差距，其中烟草、葡萄等
双子叶植物的转化效率高达 60%以上，而单子叶
植物中转化效率较高的禾本科植物还不到30% (蒋
玉宝和于元杰 2005；孟芮等 2006)。据统计，单
子叶植物用农杆菌转化获得成功的遗传转化率玉米
为 5%~30%、水稻为 29%、籼稻为 22%，接近
双子叶植物(任永霞等 2005)。
3.4 Ti载体容量 禾谷类作物的一些性状，如抗
逆、高产优质等是数量性状，或是与质量性状相
关的基因成簇排布，定位在片段范围较大 DNA
上。这些性状的改造需要一个能将大片段DNA导
入植物细胞并稳定表达的转化体系，但改造的 Ti
质粒是难以胜任的，因此研究携带大片段DNA的
双元细菌人工染色体(binary bacterial artificial
chromosome, BBAC)和具转化功能人工染色体
(transformation-competent artificial chromosome,
TAC)分别对烟草和拟南芥进行转化(Hamil ton
1997；Liu等 1999)，这对实现禾谷类作物中导入
大片段DNA并进行遗传改良来说是有意义的。
此外，农杆菌介导的遗传转化还有其他的不
足之处。如农杆菌感染过程中会对植物材料造成
损伤，T-DNA整合时边界可能会发生截断(Rashid
等 1996；Lee等 1999)，T-DNA以串连形式整合
(王关林和方宏筠 1998)，基因依赖性较高(Lee等
1999)，以及甲基化等原因会造成基因表达失活
(Kumpatla 等 1997；Kumpatla 和 Hall 1998；
Pawlowski和 Somers 1998)，而且转移 T-DNA区
的 2个基因未必共表达(Nam等 1999)等。至于转
基因作物及其产品的安全性，培育具有安全选择
标记或无选择标记的转基因植物(李晓兵等2003)，
农杆菌介导的遗传转化中转化效率的提高，植物
因子对其作用机制，大容量的可调控的表达载体
都值得探讨。
参考文献
毕瑞明, 王洪刚(2006). 农杆菌介导的小麦成熟胚遗传转化体系
建立及抗储粮害虫转基因小麦分析[学位论文] . 泰安: 山东
农业大学
胡繁荣(2005a). 根癌农杆菌介导的金边狗牙根遗传转化条件的
优化. 植物资源与环境学报, 14 (2): 15~18
胡繁荣(2005b). 农杆菌介导的高羊茅遗传转化体系的优化. 分子
植物育种, 3 (3): 375~380
胡繁荣, 吴殿星, 夏英武(2003). 结缕草农杆菌介导遗传转化影
响因子的初探. 分子植物育种, 1 (5/6): 687~691
华志华, 黄大年(1999). 转基因植物中外源基因的遗传学行为. 植
物学报, 41 (1): 1~5
蒋玉宝, 于元杰(2005). 农杆菌在单子叶植物上的研究进展. 中
国农学通报, 21 (10): 47~52
金松恒, 翁晓燕, 王妮妍, 李雪芹, 毛伟华, 蒋德安(2004). Rubisco
活化酶基因反义表达载体的构建与水稻的遗传转化. 遗传,
26 (6): 881~886
李达旭, 张杰, 赵建, 张艺, 李力, 刘素君, 陈飞, 杨志荣(2006). 根
癌农杆菌介导转化川草二号老芒麦胚性愈伤组织. 植物生理
与分子生物学学报, 32 (1): 45~51
李瑞美, 郑回勇, 陈永快, 吴水金, 鞠玉栋, 吴松海(2006). 根癌农
杆菌介导的甘蔗遗传转化体系的研究. 江西农业学报, 18 (2):
22~25
李卫, 郭光沁, 郑国锠(2000). 根癌农杆菌介导遗传转化研究的
若干新进展. 科学通报, 45 (8): 798~807
李晓兵, 陈彩艳, 翟文学(2003). 培育具有安全选择标记或无选
择标记的转基因植物. 遗传, 25 (3): 345~349
刘萍, 张振霞, 苏乔, 袁剑刚, 席嘉宾, 辛国荣, 杨中艺(2005). 应
用农杆菌介导法的多年生黑麦草遗传转化研究. 中山大学学
报(自然科学版), 44 (3): 126~128
卢德赵, 王慧中, 华志华, 颜美仙, 钱前, 黄大年(2003). 转甜菜碱
醛脱氢酶基因水稻的获得及其耐盐性研究. 科技通报, 19 (3):
179~182
陆小平, 小岛峰雄(2003). 整体植株转化法在荞麦上的应用. 作
物学报, 29 (1): 159~160
吕桂兰, 王之旭, 沈枫, 马秀芳, 唐志强, 丁芬, 华泽田(2007). 农
杆菌介导的淀粉合成关键酶基因导入超级粳稻的研究. 辽宁
农业科学, (3): 5~8
吕维涛, 刘芳, 崔德才, 赵檀方(2005). 农杆菌介导法获得转反义
植物生理学通讯 第 44卷 第 3期，2008年 6月 561
磷脂酶 Dγ基因大麦. 生物技术, 15 (5): 11~13
罗敬萍, 张树珍, 杨本鹏(2003). 农杆菌介导甘蔗基因转化技术的
优化. 热带作物学报, 24 (4): 23~28
孟芮, 王跃进, 刘雅莉(2006). 农杆菌介导的百合 ACC氧化酶反
义基因遗传转化研究[学位论文]. 西安: 西北农林科技大学
任永霞, 季静, 王里, 王萍(2005). 植物遗传转化方法概述. 河北北
方学院学报(自然科学版), 21 (6): 38~42
佘建明, 张保龙, 何晓兰, 陈志一, 倪万潮(2005). 草地早熟禾农杆
菌介导法基因转化条件. 草地学报, 13 (1): 39~43
王爱民, 陈石燕, 沈革志, 王新其, 鞠丹花, 王钟林, 王宗阳, 蔡秀玲
(2005). Ac/Ds (GUS)结构介导的水稻启动子捕获系统的建
立. 植物生理与分子生物学学报, 31 (6): 575~580
王翠亭, 卫志明(2003). 根癌农杆菌介导小麦幼胚遗传转化的影
响因素. 植物生理与分子生物学学报, 29 (6): 521~529
王关林, 方宏筠(1998). 植物基因工程原理与技术. 北京: 科学出
版社, 6: 323~329
王关林, 方宏筠(2002). 植物基因工程. 北京: 科学出版社, 402
王艳丽, 叶兴国, 董芳, 乔卫华, 陶丽莉, 李晓璐, 许兴(2007). 高羊
茅和黑麦草农杆菌介导转化体系的研究. 中国生物工程杂志,
27 (1): 22~27
王永芳, 李伟, 刁现民(2003). 根癌农杆菌共培养转化谷子技术体
系的建立. 河北农业科学, 7 (4): 1~6
王自章, 张树珍, 杨本鹏, 李杨瑞(2003). 甘蔗根癌农杆菌介导转
化海藻糖合酶基因获得抗渗透胁迫能力增强植株. 中国农业
科学, 36 (2): 140~146
吴关庭(2004). 农杆菌介导高羊茅遗传转化体系的建立及 CBF耐
逆相关基因的导入[学位论文]. 杭州: 浙江大学
伍晓丽, 朱祯, 李晚忱, 潘光堂, 曹墨菊, 荣廷昭(2004). 农杆菌介
导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)在玉米中的遗传转化. 作
物学报, 30 (3): 297~298
向殿军, 张瑜, 殷奎德(2007). 农杆菌介导寒地水稻遗传转化的研
究. 生物技术通报, (2): 139~142
肖军, 石太渊, 郑秀春, 段有厚(2004). 根癌农杆菌介导的高粱遗
传转化体系的建立. 杂粮作物, 24 (4): 200~203
许明, 刘峰, 郑金贵(2003). IPT 基因遗传转化谷秆两用稻的研
究. 福建农林大学学报(自然科学版), 32 (2): 205~208
易自力, 曹守云, 王力, 储成才, 李祥, 何锶洁, 唐祚舜, 周朴华, 田
文忠(2001). 提高农杆菌转化频率的研究. 遗传学报, 28 (8):
235~258
张彬, 丁在松, 张桂芳, 石云鹭, 王金明, 方立锋, 郭志江, 赵明
(2007). 根癌农杆菌介导获得稗草 Ecppc转基因小麦的研究.
作物学报, 33 (3): 356~362
张振霞(2005). 影响农杆菌介导狗牙根遗传转化的因素. 植物生
理学通讯, 41 (4): 449~452
张振霞, 刘萍, 杜雪玲, 苏乔, 杨中艺(2007). 农杆菌介导GUS基因
对多年生黑麦草转化的研究. 广西植物, 27 (1): 121~126
赵军胜, 支大英, 薛哲勇, 夏光敏(2005). 根癌农杆菌介导的高羊
茅遗传转化研究. 遗传学报, 32 (6): 579~585
Aldemita RR, Hodges TK (1996). Agrobacterium tumefaciens-
mediated transformation of japonica and indica rice varieties.
Planta, 199: 612~617
Amoah BK, Wu H, Sparks C, Jones HD (2001). Factors influencing
Agrobacterium-mediated transient expression of uidA in
wheat inflorescence tissue. J Exp Bot, 52: 1135~1142
Bajaj S, Ran Y, Phillips J, Kularajathevan G, Pal S, Cohen D,
Elborough K, Puthigae S (20 06). A high throu ghput
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation method
for functional genomics of perennial ryegrass (Lolium
perenne L.). Plant Cell Rep, 25 (7): 651~659
Ballas N, Citovsky V (1997). Nuclear localization signal binding
protein from Arabid opsis mediates nuclear import of
Agrobacterium VirD2 protein. Proc Natl Acad Sci USA, 94:
10723~10728
Bravo-Angel AM, Gloeckler V, Hohn B, Tinland B (1999).
Bacterial conjugation protein MobA mediates integration of
complex DNA structures into plant cells. J Bacteriol, 181:
5758~5765
Chai BF, Liang AH, Wang W, Hu W (2003). Agrobacterium-
mediated transformation of kentucky bluegrass. Acta Bot
Sin, 45 (8): 966~973
Cha n MT , Cha ng H , H o SL, T ong WF, Y u SM (1 99 3) .
Agrobacterium-mediated production of transgenic rice plants
expressing a chimeric α-amylase promoter/β-glucuronidase
gene. Plant Mol Biol, 22: 491~506
Chan MT, Lee TM, Chang HH (1992). Transformation of indica
rice (Oryza sativa L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens.
Plant Cell Physiol, 33 (5): 577~583
Cheng M, Fry JE, Plant SZ, Zhou HP, Hironaka CM, Duncan DR,
Conner TW, Wan YC (1997). Genetic transformation of
wheat mediated by Agrobacterium tumefaciens. Plant Physiol,
115: 971~980
Cheng X, Sardana R, Kaplan H, Altosaar I (1998). Agrobacterium-
transformed rice plants expressing synthetic cryIA (b) and
cryIA (c) genes are highly toxic to striped stem borer and
yellow stem borer. Proc Natl Acad Sci USA, 95: 2767~2772
Donson J, Gunn HV, Woolston CJ, Pinner MS, Boulton MI,
Mullineaux PM, Davies JW (1988). Agrobacterium-medi-
ated infectivity of cloned digitania streak virus DNA.
Virology, 162 (1): 248~250
Enriquez-Obregon GA, Vazquez-Padron RI, Prieto-Samsonov DL,
Riva GA, Selman-Housein G (1998). Herbicide-resistant sug-
arcane (Saccharum officinarum L.) plants by Agrobacterium-
mediated transformation. Planta, 206 (1): 20~27
Gould J, Devey M, Hasegawa O, Ulian EC, Peterson G, Smith RH
(1991). Transformation of Zea mays L. using Agrobacterium
tumefaciens and the shoot apex. Plant Physiol, 95: 426~434
Grimsley N, Hohn T, Davies JW, Hohn B (1987). Agrobacterium-
mediated delivery of infectious maize streak virus into maize
plants. Nature, 325: 177~179
Hamilton CM (1997). A binary-BAC system for plant transforma-
tion with high-molecular-weight DNA. Gene, 200: 107~116
Hiei Y, Komari T , Kubo T (1997). Transformation of r ice
mediated by Agrobacterium tumefaciens. Plant Mol Biol, 3
(5): 3039~3041
Hiei Y, Ohta S, Kumashiro T, Komari T (1994). Efficient
transformation of r ice (Oryza sativa L.) mediated by
Agrobacterium and sequence analysis of the boundaries of the
T-DNA. Plant J, 6 (2): 271~282
Holme IB, Brinch-Pedersen H, Lange M, Holm PB (2006). Trans-
formation of barley (Hordeum vulgare L.) by Agrobacterium
植物生理学通讯 第 44卷 第 3期，2008年 6月562
tumefaciens infection of in vitro cultured ovules. Plant Cell
Rep, 25 (12): 1325~1335
Horsch RB, Fry JE, Hoffmann NL, Eichholtz D, Rogers SG, Fraley
RT (1985). A simple and general method for transferring
genes into plants. Science, 227 (4691): 1229~1231
Hu ZH, Chen JQ, Wu GT, Jin W, Lang CX, Huang RZ, Wang FL,
Liu ZH, Chen XY (2005). Highly efficient transformation
a nd pla nt r egenera t ion of t a l l fescu e med ia ted by
Agrobacterium tumefaciens. J Plant Physiol Mol Biol, 31 (2):
149~159
Ishida Y, Sslto H, Ohta S, Hiei Y, Komari T, Kumashiro T (1996).
High efficiency transformation of maize (Zea mays L.)
mediated by Agrobacterium tumefaciens. Nat Biotechnol, 14
(6): 745~750
Khanna HK, Daggard GE (2003). Agrobacterium tumefaciens-
mediated transformation of wheat using a superbinary vec-
tor for infection and polyamine modified medium for recov-
ery of transformants. Plant Cell Rep, 21: 429~436
Kumpatla SP, Hall TC (1998). Recurrent onset of epigenetic
silencing in rice harboring a multi-copy transgene. Plant J,
14: 129~135
Kumpatla SP, Teng W, Buchholz WG, Hall TC (1997). Epigenetic
transcriptional silencing and 5-azacytidine-mediated reacti-
vation of a complex transgene in rice. Plant Physiol, 115:
361~373
Lee LY, Gelvin SB, Kado CI (1999). pSa causes oncogenic
suppression of Agrobacterium by inhibiting VirE2 protein
export. J Bacterial, 181 (1): 186~196
Liu YG, Shirano Y, Fukaki H, Yanai Y, Tasaka M, Tabata S, Shibata
D (1999). Complementation of mutants with large genomic
DNA fragments by a transformation-competent artificial
chromosome vector accelerates positional cloning. Proc Natl
Acad Sci USA, 96: 6535~6540
Liu YH, Yu JJ, Ao GM, Zhao Q (2007). Factors influencing
Agrobacterium-mediated transformation of foxtail millet
(Setaria italica). Chin J Biochem Mol Biol, 23 (7): 531~536
Márton L, Wullems GJ, Molendijk L, Schilperoort RA (1979). In
vitro transformation of cultured cells from Nicotiana tabacum
by Agrobacterium tumefaciens. Nature, 277: 129~131
Mooney PA, Goodwin PB, Dennis ES, Llewellyn DJ (1991).
Agrobacterium tumefaciens-gene transfer into wheat tissues.
Plant Cell Tiss Org Cult, 25: 209~218
Nam J, Mysore KS, Zhang C, Knue MK, Matthysse AG, Gelvin SB
(1999). Identification of T-DNA tagged Arabidopsis mu-
tants that are resistant to transformation by Agrobacterium.
Mol Gen Genet, 26 (3): 429~438
Park SH, Pinson SR, Smith RH (1996). T-DNA integration into
genomic DNA of rice following Agrobacterium inoculation
of isolated shoot apices. Plant Mol Bio1, 32 (6): 1135~
1148
Pawlowski WP, Somers DA (1998). Transfer DNA integrated into
the oat genome is frequently interspersed by host DNA.
Proc Natl Acad Sci USA, 95: 12106~12110
Ra iner i DM, Bot tin i P, G ordon MP, Nester EW (19 90 ).
Agrobacterium-mediated transformation of rice (Oryza sa-
tiva L.). Bio/Technology, 8: 33~38
Rashid H, Yokoi S, Toriyama K, Hinata K (1996). Transgenic
plant production mediated by Agrobacterium in Indica rice.
Plant Cell Rep, 15 (10): 727~730
Shen WH, Escudero J, Hohn B (1999). T-DNA transfer to maize
plants. Mol Biotechnol, 13: 165~170
Shrawat AK, Becker D, Lörz H (2 00 7) . Agr ob ac ter iu m
tumefaciens-mediated genetic transformation of barley
(Hordeum vulgare L.). Plant Sci, 172 (2): 281~290
Sidorov V, G ilber t son L , Adda e P , D u nca n D (2 0 0 6 ) .
Agrobacterium-mediated transformation of seedling-derived
maize callus. Plant Cell Rep, 25 (4): 320~328
Sun H, Huang QM, Su J (2005). Highly effective expression of
glutamine synthetase genes GS1 and GS2 in transgenic rice
plants increases nitrogen-deficiency tolerance. J Plant
Physiol Mol Biol, 31 (5): 492~498
Tingay S, Mcelroy D, Kalla R, Fieg S, Wang M, Thomton S, Brettel
R (1997). Agrobacterium tumefaciens-mediated barley
transformation. Plant J, 11 (6): 1369~1376
Weir B, Wang M, Upadhyaya N, Elliott AR, Brettell R (2001).
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of
wheat using suspension cells as a model system and green
fluorescent protein as a visual marker. Aust J Plant Physiol,
28: 807~818
Wu H, Sparks C, Amoah B, Jones HD (2003). Factors influencing
successful Agrobacterium-mediated genetic transformation
of wheat. Plant Cell Rep, 21: 659~668
Xia GM, Li ZY, He CX, Chen HM, Richard B (1999). Transgenic
plant regeneration from wheat (Triticum aestivum L.) medi-
ated by Agrobacterium tumefaciens. Acta Phytophysiol Sin,
25 (1): 22~28
Yan F, Zheng YY, Zhang WW, Xiao H, Li SF, Cheng ZM (2006).
Obtained transgenic wheat expressing pac1 mediated by
Agrobacterium is resistant against Barley yellow dwarf virus-
GPV. Chin Sci Bull, 51 (19): 2362~2368
Zaghmout OM, Trolinder NL (1993). Simple and efficient method
for directly electroporating Agrobacterium plasmid DNA
into wheat callus cells. Nucleic Acids Res, 21 (4): 1048
Zambryski P, Joos H, Genetello C, Leemans J, van Montagu M,
Schell J (1983). Ti plasmid vector for the introduction of
DNA into plant cells without alteration of their normal re-
generation capacity. EMBO J, 2 (12): 2143~2150
Zeng LH, Chen ZG, Lu LX, Zhou P, Zheng XQ (2001). In vitro
transformation mediated by Ri plasmid of Agrobacterium
rhizogenes and transgenic plant regeneration of longan. Acta
Hortic, 558 (1): 149~154
Zhao ZY, Cai T, Tagliani L, Miller M, Wang N, Pang H, Rudert
M, Schroeder S, Hondred D, Seltzer J, Pierce D (2000).
Agrobacterium-mediated sorghum transformation. Plant Mol
Biol, 44: 789~798