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洋常春藤的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月466
洋常春藤的组织培养与快速繁殖
王桂兰 陈超* 石洪凌 李小六
唐山师范学院生物科学技术系, 唐山 063000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Hedera helix
WANG Gui-Lan, CHEN Chao*, SHI Hong-Ling, LI Xiao-Liu
Department of Biological Science and Technology, Tangshan Teacher’s College, Tangshan 063000
收稿 2003-11-27 修定   2004-03-22
资助  唐山市科技局重点科技项目。
* 通讯作者(E-mail:wang651217@sina.com,Tel:0315-3863160)。
1 植物名称 洋常春藤(Hedera helix cv. aureovarie-
gata)。
2 材料类别 带芽茎段。
3 培养条件 (1)诱导休眠芽萌动培养基:MS+6-
BA 0.5 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.2;(2)芽增殖培
养基:MS+6-BA 1.0+IBA 0.2;(3)生根培养基:
1/2MS+IBA 0.5。上述培养基中均加入30 g·L-1蔗
糖、6.0 g·L-1琼脂,pH 5.8。培养温度为25~27℃,
光照度2 000~2 500 lx,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选取生长健壮、无病虫害的
母株,剪取4~5 cm 茎段,去掉叶片,保留叶柄。
将其放在自来水下冲洗30 min,然后在超净工作
台无菌环境下,将茎段剪成带 1 个芽的小段,放
于消毒瓶中。先用70%酒精浸润30 s,再用0.1%
升汞消毒 6 min,无菌水冲洗 5 次。在装有滤纸
的培养皿中切去伤口部分约0.2 cm,接种于诱导
培养基(1)上,每瓶接 1 个带芽茎段。
4.2 芽的诱导 接种10 d后,腋芽萌动,开始生
长缓慢。30 d后将萌发的新芽切下转接到新配制
的培养基(1)上,新芽开始慢慢长大。再经过2次
继代(每次继代时间为45 d)后,长成1株有2~3节
的幼苗。幼苗长势正常,茎基部略有膨大,愈
伤组织较少,但是节间较长,约 2~3 cm。
4.3 试管苗的增殖培养 将诱导出的小苗分割成带
1个芽的茎段,接种于增殖培养基(2)上,每瓶接
种 5 个。30 d 左右继代 1 次,繁殖倍数 4~5 倍。
节间缩短为1 cm以下,幼苗长势健壮(图 1)。从
芽的诱导到能正常增殖生长的驯化时间大约需半年。
4.4 生根培养 将经增殖高度为3 cm左右的健壮小
苗取出,切去基部约0.3 cm后接种在生根培养基
(3)上,20 d 后长出乳白色粗壮根系。生根率在
90% 以上。在生根过程中进行了糖对生根影响的
试验,结果表明30 g·L-1蔗糖比15 g·L-1蔗糖生根
率高,平均根数多 1~2 条。说明降低蔗糖浓度不
利于常春藤试管苗生根。
4.5 试管苗的移栽 移栽前在温室内对瓶苗进行增
光(5 000~10 000 lx)锻炼。出瓶前2~3 d,打开瓶
盖降湿。移栽时,取出小苗,洗去培养基,将
小苗栽入以蛭石为基质的穴盘中。基质在栽苗前
用0.1%甲基托布津喷淋消毒。移栽后湿度保持在
90% 以上,逐步降低湿度至温室正常湿度。温度
控制在25℃左右,7 d 后叶面喷施1/2MS 大量元
素营养液,每周1次。30 d 后进入小苗的常规管
理。生根的洋常春藤试管苗移栽成活率很高,达
9 5 % 以上。
5 意义与进展 洋常春藤属于五加科常春藤属,原
产欧洲,有很高的观赏价值,是厅堂居室装饰的
佳品。本文所用的洋常春藤品种,株形紧凑,叶
具金边,观赏价值更高。按常规的扦插方法繁
殖,可供取材的插穗少,繁殖倍数及生根率均较
低,不能满足市场需要。组织培养可以加快繁殖
速度,有一定的潜在应用前景。洋常春藤组织培
养未见报道。
图1 洋常春藤试管苗的增殖