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冬青的离体培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第6期,2006年12月 1123
冬青的离体培养与快速繁殖
陈家龙1 王广东1,* 曹福营1 郝日明1 张纪林2
1 南京农业大学园艺学院,南京 210095;2 江苏省林业科学研究院,南京 211153
In vitro Culture and Rapid Propagation of Ilex chinensis Sims
CHEN Jia-Long1, WANG Guang-Dong1,*, CAO Fu-Ying1, HAO Ri-Ming1, ZHANG Ji-Lin2
1College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2Jiangsu Academy of Forestry, Nanjing 211153,
China
收稿 2006-07-17 修定  2006-09-18
资助 国家林业局“948”项目(2001-59-01)。
*通讯作者(E-mail: gdwang@njau.edu.cn, Tel: 025-84396943)。
1 植物名称 冬青(Ilex chinensis Sims),别名四季
冬青。
2 材料类别 顶芽和带腋芽的茎段。
3 培养条件 芽诱导培养基:(1) MS+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.05;增殖培养基:(2)
MS+6-BA 0.5+NAA 0.05;生根培养基:(3) 1/2MS
(MS大量元素减半)+NAA 0.4。以上培养基均添加
0.6% 琼脂粉,蔗糖除生根培养基为 25 g·L-1 外,
其余均为30 g·L-1,pH 5.8。培养温度(25±2)℃,
光强约为40 mmol·m-2·s-1,光照时间为12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 芽的诱导 10 月上旬,剪取冬青生长健壮的
枝条,流水冲洗30 min。置于超净工作台上,用
75% 的乙醇处理30 s,无菌水冲洗2~3 次,再用
0.1% 的 HgCl2 溶液灭菌15 min,无菌水冲洗4~5
次。切成 1.0 cm 左右的带腋芽茎段,接种于培
养基(1)上。培养14 d 后,腋芽开始萌动;20 d
后,腋芽开始伸长,萌发率为 5 3 . 3 %。
4.2 增殖培养 将诱导的腋芽新梢切下,转接到培
养基(2)上。20 d 左右,新梢上的腋芽开始迅速
生长,并形成芽丛。30 d 后接种于相同培养基
上,新形成的芽丛生长迅速,长势旺盛。每30 d
将增殖的腋芽进行转接,增殖系数可达 4.8。
4.3 生根与移栽 切取增殖阶段的无菌苗,接种到
生根培养基(3),30 d后长出白色健壮的根系。生
根率达83.3%,平均每苗根数2.3,根长可达3.5~
4.0 cm。将根系发达、植株健壮的瓶苗移到自然
光下炼苗 1 周,洗净根部培养基,移栽到蛭石和
泥炭土的混合基质中,前期适当遮阴,并保持较
高的湿度,成活率为 8 0 % 。
5 意义与进展 冬青为冬青科冬青属常绿乔木,枝
叶繁茂,葱郁如盖,果熟时红若丹珠,经冬不
落,是优良的庭院观赏和绿化树种;其材质坚韧
致密,可制作工艺品;叶、树皮、种子及根可
供药用,具有抗菌和清热解毒等功效。常规播种
繁殖,种子有隔年发芽的特性,生长缓慢,且
种子繁殖后代性状分离,不能保持母本的优良性
状。采用组织培养技术进行冬青种苗快速繁殖,
对冬青的推广利用具有一定的实践意义。尽管冬
青属其他种植物的组织培养已有报道,如苦丁茶
冬青(I. latifolia,王桂文等1995)、巴拉圭茶(I.
paraguariensis,Sansberro等1998)、金叶日本冬
青(I. crenata,李登中2004)等,但冬青(I. chinensis)
的离体培养与快速繁殖尚未见报道。
参考文献
李登中(2004). 金叶日本冬青的组织培养与快速繁殖. 植物生理
学通讯, 40 (5): 592
王桂文, 周兴, 李海鹰, 范家晔(1995). 苦丁茶冬青茎段离体培养.
植物生理学通讯, (5): 31~32
Sansberro PA, Rey HY, Mroginski LA, Collavino MM (1998). In
vitro culture of rudimentary embryos of Ilex paraguariensis:
responses to exogenous cytokinin. Plant Growth Regul, 17:
101~105
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture