全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第3期,2005年6月 343
滇大头茶的组织培养和微型繁殖
庄承纪* 刘劲科
湛江海洋大学水产学院,广东湛江524025
Tissue Culture and Micro-propagation of Gordonia yunnanensis
ZHUANG Cheng-Ji*, LIU Jin-Ke
Fisheries College, Zhanjiang Ocean University, Zhanjiang, Guangdong 524025, China
收稿 2004-07-30 修定 2004-11-29
*E-mail: liubwg@tom.com;Tel: 0759-2270415
1 植物名称 滇大头茶(Gordonia yunnanensis)。
2 材料类别 嫩梢的尖茎和茎节切段。
3 培养条件 (1)芽萌动和生长培养基:MS+6-BA 1.0
mg·L-1(单位下同)+IAA 0.5;(2)多芽体诱导培养基:
MS+6-BA 3.0+IAA 0.5;(3)壮苗培养基:MS+ZT
1.0~2.0+IAA 0.5或MS+10% 椰子汁(CM)+IAA 0.5;
(4)生根培养基:1/2ER+IBA 0.5;(5)纸桥生根培养
液:1/2ER,用IBA 0.5~1.0 g·L-1浸芽条基部20 min,
将芽条接种滤纸桥上,然后置弱光(200 lx)下培养。
培养基添加3%(生根用2%)蔗糖和0.6% 琼脂,pH
5.6。培养温度25~27℃,夜间18~22℃,光照时间14
h·d-1,光照度1 500 lx。
4 生长与分化情况
4.1 诱导芽萌动和生长 4月份采五年生植株的嫩梢,
除去叶片,自来水冲洗干净,在超净台上浸于70%
乙醇中30~60 s,接着用0.1%氯化汞在减压下消毒
8~10 min,无菌水冲洗4~5 次,然后切取茎尖和
带节茎段接种到培养基(1)。经10 d左右,茎尖明
显伸长,茎基部切口有少许愈伤组织,茎节的腋
芽已见萌动;培养20 d 后,顶芽伸长至1~2 cm,
小叶片展开,腋芽生长较慢。实验表明,较低浓
度激素组合就能诱导离体芽的萌动和伸长,用6-BA
1.0和IAA 0.5组合,芽的萌动和生长较快。
4.2 多芽体诱导和壮苗培养 剪切上述粗壮的无菌
芽条茎尖和腋芽,接种到培养基(2),培养5~6周
后,外植体基部逐渐分化形成多芽体(丛芽)。芽
呈密集簇状,平均每块有 6~8 个不定芽,其长度
为 0.5~1.0 cm,产生多芽体频率 85% 以上。结
果表明,滇大头茶多芽体的分化和生长,明显受
细胞分裂素调控。培养基中6-BA 浓度为 3.0,产
生多芽的数量和芽的长度最好;当 6-BA 达 5.0,
虽然多芽的数量更多,但长度短,生长缓慢,多
数未能长成正常的芽苗。6-BA 与 ZT 比较,6-BA
诱导多芽的能力大于 ZT。除细胞分裂素外,还
需适当浓度的 IAA 或 NAA。为促进多芽伸长和茁
壮生长,宜将其分割成 2~3 个芽的小块,转接到
壮芽培养基(3)上。经 2 周,芽伸长,生长较快,
小叶片随之展开。以 10% CM 代替 ZT,能得到
同样的好结果,而成本较低。芽条长到 3~4 cm,
可供作生根或将其再切割作继代增殖培养。经多
次继代,芽仍保持旺盛的增殖能力。
4.3 生根和移栽 将健壮的增殖芽苗分成单株,接入
培养基(4),3周后开始生根;在滤纸桥上的2周生
根。4周后根长0.5~2.5 cm,根数量5~15条,生根
率95% 以上。经炼苗,移栽入经消毒的腐殖土营
养钵中。在喷雾保湿的条件下,10 d左右恢复生长。
移栽成活率达90%。小植株移植后,生长非常好,
枝多叶茂,株型美观。
5 意义与进展 滇大头茶为山茶科大头茶属植物,
是一种观赏价值很高的珍稀植物和难得的育种材
料。其花黄白色,具香味;叶革质,暗绿光亮,
树形美观。由于资源稀少,常规繁殖率低。用
组织培养技术诱导产生多芽体,进行快速繁殖,
对于保存这种植物的种质资源及其推广利用有一定
的意义。本文中离体微型繁殖程序和方法,对其
他木本植物的组培也可能有一定的参考价值。山
茶科的一些种属的组织培养已有一些报道,但滇
大头茶未见报道。