全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 4期，2007年 8月 719
抗生素对尾巨桉愈伤组织诱导和植株再生的影响
韦大器 1,2,*，时群 2，李栒 1
1湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室，长沙 410128；2广西钦州市林业科学研究所，广西钦州 535000
取尾巨桉(Eucalyptus urophylla×Eucalyptus
grandis)无菌苗，除去叶片后剪成 2~3 mm的茎
段，平放于含不同抗生素的愈伤组织诱导培养基
(改良的H培养基 +0.5 mg·L-1 2,4-D+0.1 mg·L-1 6-
BA+3%蔗糖)上，暗培养 10 d后转入自然光下培
养，30 d后观察茎段愈伤组织诱导和生长情况。
所诱导出的愈伤组织接种于含有不同抗生素的愈伤
组织分化培养基(改良H培养基 +1.0 mg·L-1 6-BA+
0.5 mg·L-1 NAA+5%蔗糖)上培养，观察不定芽分
化和生长情况并测量茎径(郑进等 2006)。从中取
生长健壮，高 2.5~3 cm的不定芽转入含有不同抗
生素的生根培养基[改良MS+0.6 mg·L-1生根粉6号
(北京双吉尔生物技术开发中心生产)+0.2 mg·L-1
IBA+1.5%蔗糖]上培养，10 d后观察生根情况。
上述培养基均加入 0.3%琼脂，pH 5.8，培养温
度为(26±1) ℃，光照时间为 12 h·d-1，光照强度
为 7.2~36 µmol·m-2·s-1。每个试验重复 3次，得到
如下结果。
1. 愈伤组织诱导培养基上培养 30 d后的诱导
率均达到 100%，而且生长良好，呈淡黄色或黄
白色，少数呈粉红色，形状呈颗粒状，结构较
致密，表面湿润，质地新鲜，无褐化现象。
2. 茎段对卡那霉素均表现出高度的敏感性，
不加卡那霉素的出愈率为 100%，含有 5 mg·L-1卡
那霉素的出愈率下降到 40%，卡那霉素浓度增至
7 mg·L-1时，则不能诱导出愈伤组织(表 1)，并逐
渐黄化、死亡。
3. 卡那霉素对愈伤组织生长有很强的抑制作
用，加 5 mg·L-1卡那霉素的愈伤组织很快褐化死
亡，不能继代，也不能作不定芽分化培养。
4. 含有氨苄西林钠的培养基上的茎段在 25 d
内可不同程度地形成愈伤组织。愈伤组织多呈黄
表 1 抗生素对尾巨桉外植体愈伤组织诱导和不定芽分化的影响
抗生素 抗生素浓度 /mg·L-1 接种外植体数 /块 长出愈伤组织数 /块 诱导率 /% 不定芽茎径 /mm 分化率 /%
卡那霉素 0 3 0 3 0 100 — —
2 3 0 3 0 100 — —
5 3 0 1 2 4 0 — —
7 3 0 0 0 — —
氨苄西林钠 0 2 0 2 0 100 1.5~1.8 22.2
200 2 0 2 0 100 1.4~1.6 21.0
300 2 0 1 9 9 5 1.0~1.2 20.0
400 2 0 1 6 8 0 0.6~0.8 15.8
500 2 0 1 4 7 0 0.6~0.8 14.3
头孢唑林钠 0 2 0 2 0 100 1.5~1.8 21.3
200 2 0 2 0 100 1.3~1.6 13.3
300 2 0 2 0 100 0.8~1.0 11.1
400 2 0 2 0 100 0.6~0.8 10.0
500 2 0 2 0 100 0.6~0.8 7.1
收稿 2007-03-22 修定 2007-06-06
资助 广西钦州市科学技术局。
* E-ma il：daqiwei@163.com；Tel：07 77-2 8087 30
白色，结构致密，表面有颗粒状突起，转入分
化培养基中培养 10 d后，愈伤组织表面开始出现
绿色颗粒状突起，15 d后愈伤组织四周转为红色
或紫红色，表面湿润，并逐渐分化出不定芽。在
植物生理学通讯 第 43卷 第 4期，2007年 8月720
100~500 mg·L-1氨苄西林钠范围内，出愈率随着
氨苄西林钠浓度的增高而下降，褐化率也升高。
含不同浓度氨苄西林钠的分化培养基上所分化出的
不定芽，其形态特征和分化率有一定的差异(表
1)。氨苄西林钠对不定芽的分化有一定的抑制作
用，其抑制程度随着培养基中氨苄西林钠浓度的
增加而增强。
5. 在加有头孢唑林钠的愈伤组织诱导培养基
上形成的愈伤组织多为白色，呈颗粒状，较疏
松，体积增加较快，体积比不加头孢唑林钠的约
大 2倍。愈伤组织转入分化培养基中 10 d后开始
出现绿色芽点，15 d后以茎段为外植体所诱导出
的愈伤组织四周开始转为红色或紫红色、表面湿
润，以后逐渐长出不定芽。30 d后，含不同浓
度头孢唑林钠的分化培养基上所分化的不定芽形态
和分化率有一定的差异，头孢唑林钠对不定芽有
一定的抑制作用，且随着浓度的增加而增强(表
1 )。
6. 卡那霉素浓度达到 2 mg·L-1时，生根率仅
为 15%；浓度为 4 mg·L-1的不定芽生根即受到严
重抑制，不能生根。低浓度的氨苄西林钠对不定
芽诱导生根的影响不大，头孢唑林钠对不定芽诱
导生根的影响比氨苄西林钠稍大些(表 2)。
参考文献
郑进, 康薇, 洪华珠(2006). 抗生素在农杆菌介导植物转基因中的
应用. 林业科技开发, 20 (3): 8~11
表 2 抗生素对尾巨桉不定芽诱导生根的影响
抗生素 抗生素浓度 /mg·L-1 接种不定芽数 /个 出根不定芽数 /个 出根率 /%
卡那霉素 0 2 0 1 9 95
2 2 0 3 15
4 2 0 0 0
6 2 0 0 0
氨苄西林钠 0 2 0 2 0 100
200 2 0 1 6 80
400 2 0 1 3 65
500 2 0 1 0 50
头孢唑林钠 0 2 0 19.5 97.5
200 2 0 1 2 60
400 2 0 8.7 43.5
500 2 0 5 25