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Effect of cultivated measures on the output of gentian and content of geitiopicroside and swertiamarin

栽培措施对龙胆产量及龙胆苦苷类成分含量的影响



全 文 :第 24 卷 第 3 期             植   物   研   究 2004 年 7 月
Vol.24 No.3            BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH July  2004
攻关项目:国家科技部 ,国家中药现代化研究及产业化开发项目(99-929-01-17)
第一作者简介:孙海峰(1964—),男 ,博士 ,副教授 ,从事植物药学研究工作。
*通迅作者 E-mail:xi junw @sina.com
收稿日期:2004-02-23
栽培措施对龙胆产量及龙胆苦苷类成分含量的影响
孙海峰1  王喜军1* 吴修红1  孟祥才1  周 磊1  曲向前2
(1.黑龙江中医药大学药学院 , 哈尔滨 150040)
(2.黑龙江北安农垦北方药材公司 , 北安 164000)
摘 要 为给龙胆药材生产提供栽培技术 ,在不同时间 、以不同密度 、分不同种苗等级以及在不同
的前茬作物地块上移栽粗糙龙胆 ,秋季采用五点取样法测定产量 ,采用 HPLC测定龙胆苦苷类成
分含量。结果表明秋栽 、一级种苗移栽 、前茬作物为玉米 ,密度为125 株/m2龙胆产量高 ,且龙胆苦
苷含量都超过10.8%,但密度低龙胆有效成分含量高。秋栽 、采用一级种苗移栽 、轮作 、移栽密度
为125株/m2可达到优质高产的目标 。
关键词 龙胆;栽培;质量
Effect of cultivated measures on the output of gentian and content
of geitiopicroside and swertiamarin
SUN Hai-Feng1 WANG Xi-Jun1* WU Xiu-Hong1 MENG Xiang-Cai1 ZHOU Lei1 QU Xiang-Qian2
(1.Collcge of Pharmacy , Heilongjiang University of T raditional Chinese Medicine , Harbin 150040)
(2.Heilongjiang Beifang Medicinal Materials Company Pertain to Bei an Agricultural cultivation Administration , Bei an 164000)
Abstract Supply cultivated techniques to the production of gentian of fine quali ty.T ransplant gen-
tian separately according to the following factors:different transplanting time , density , g rade seedling
and preceding crop.Five plots sampling method w as applied to determine the output of gentian and
HPLC was applied to determine the contents of gentiopicroside and sw ertiamarin.The resul ts showed
that the output of gentian was higher and the content of gentiopicroside w as over 10.8% as the fol-
lowing measures:cultivated at autumn;t ransplanted the first grade seedling ;rotat ion;the t rans-
plant ing density was 125 plant/m2 , but the content of gentiopicroside w as higher as the t ransplanting
densi ty w as low er.The bet ter cultivation measures of gentian wi th high yield and fine quality were:
cultivated at autumn;t ransplanted the first g rade seedling;ro tation;the t ransplanting density w as
125 plant/m2.
Key words gentian;cultivation;quality
龙胆为黑龙江省地道药材 ,目前主要栽培品种
为粗糙龙胆(Gent iana scabra Bunge)。经过对龙
胆栽培技术的系统研究 ,使龙胆栽培技术逐渐成熟
和规范 。以往人们对龙胆的栽培技术研究仅限于
提高产量[ 1~ 3] 。不同的栽培措施是否对龙胆成分
含量产生影响 ,通过栽培措施与龙胆有效成分变化
规律的研究 ,找出有利于龙胆有效成分积累及高产
的栽培技术 ,用于指导生产 ,对生产具有优良的内
在质量和外观质量的中药材具有重要的理论和实
践意义。为此 ,从 2001年起 ,笔者就龙胆栽培技术
对龙胆产量 、质量影响进行了研究 。
1 仪器设备及实验材料
1.1 仪器设备
岛津高效液相色谱仪(SPD—10Avp);Shim-
pack VP —ODS C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm);
Shim-pack GVP—ODS C18(10 mm×4.6 mm)保护
柱;80-2型离心机;H66MC 型超声振荡仪 ,电热恒
温干燥箱 。
1.2 药品及试剂:甲醇为色谱醇 ,水为重蒸水 ,其
余试剂为分析纯 。
对照品:龙胆苦苷(Gentiopicroside)及獐牙菜
苦苷(Sw ertiamarin)均由中国药品生物制品检定所
提供 。
1.3 材料
粗糙龙胆(Gentiana scabra Bunge)由黑龙江
北安农垦北方药材公司采用大棚育苗 ,在该公司生
产基地(北安市赵光)按不同栽培措施生产的二年
生龙胆。
2 方法
2.1 田间试验方法
试验均采用畦栽方式 , 畦高 20 cm , 畦面宽
1.1 m ,采用随机区组设计。
对粗糙龙胆种苗进行分级 ,根据苗的大小等指
标分为三个等级 ,于春季移栽 ,移栽密度均为20 cm
×6 cm ,每个处理为26 m2 ,重复三次。于 10 月 5
日采集样品 ,测定产量及龙胆苦苷类成分含量 。
在同一地块移栽同一批种苗 ,移栽密度分别为
125 、85 、63 、50 、42 株/m2 ,每种处理移栽26 m2 ,重
复三次。于当年 10月 5日采集样品 ,测定产量及
龙胆苦苷类成分含量 。
于秋季(2001 年 10月 2日)、春季(2002 年 4
月 20日)把同一批种苗移栽在同一地块 ,每个处理
60 m2 ,重复三次 。于 2002年 10月 5日采集样品 ,
测定产量及龙胆苦苷类成分含量。
于 2002年 5月同一批种苗移栽在前茬作物为
玉米的地块和上一年种过龙胆的地块 ,于 10 月 5
日采样品 ,测定产量及龙胆苦苷类成分含量。
2.2 产量测定
采用五点取样法测定产量 ,取样后洗净泥土 ,
称鲜重 ,室内阴干后 ,称干重。
2.3 含量的测定方法[ 4~ 8]
2.3.1 色谱条件
流动相:甲醇:水(3:7);流速:龙胆苦苷为
1.2× 10-3 L /min;獐 芽 菜 苦 苷 为 1.0 ×
10-3 L /min;柱温:室温;检测波长:龙胆苦苷为
270 nm ,獐牙菜苦苷为236 nm(以二级管振裂检测
器检测确定其最大检测波长);进样量:10×10-6 L ,
重复三次 。
2.3.2 供试品溶液的制备及测定
取干燥至恒重过 80 目筛的龙胆药材粉末约
30 mg ,精密称定 ,置具塞的锥形瓶中 ,精密量取甲
醇 15 ×10-3 L 加 入 , 密 封 , 放置 12 h , 取出 ,
3 000 r/min离心20 min ,取上清液 ,过预柱及滤膜
图 1 龙胆苦苷标准品色谱图
Fig.1 HPLC profile of the standard o f g entiopicroside
图 2 獐牙菜苦苷标准品色谱图
Fig.2 HPLC profile of the standard of swertiamarin
图 3 龙胆样品色谱图
Fig.3 HPLC profile of the gentiopicroside(Rt=7.032)
and swertiamarin(Rt=5.548)in the roo t
of cultivated Gentians scabra
336       植  物  研  究                  24 卷
图 4 龙胆种苗等级对龙胆苦苷类成分含量的影响
Fig.4 Effect of different grade seedling on the
content of gentiopicroside and sw ertiamarin
表 1 不同种苗等级对龙胆产量及龙胆苦苷
类成分含量影响
Table 1 Effect of different g rade seedling on the output of
g entian and content o f g entiopicroside and swertiamarin
种苗等级 Seedling grade
一级
Grade 1
二级
Grade 2
三级
Grade 3
龙胆苦苷含量(%)
Content of gent iopicroside
11.588 10.758 9.544
RSD(%) 0.34 0.64 0.51
獐牙菜苦苷含量(%)
Content of sw ertiamarin
1.762 2.114 1.181
RSD(%) 2.31 0.75 2.46
产量 Ou tput(kg/ hm2) 2 142.0 1 314.9 743.7
(0.45 μm ),即得 。每一处理平行制备三份供试
液 ,测定每个苦苷成分进样 9次 , 按上述色谱条件
测定各样品的龙胆苦苷类成分含量。对照品色谱
图见图 1 、2 ,样品色谱图见图 3。
3 结果与讨论
3.1 种苗等级对龙胆产量和质量的影响
结果(表 1 、图 4)表明 ,不同等级种苗 ,移栽后
生产的龙胆其龙胆苦苷含量存在明显差异 ,龙胆种
苗等级越高 ,其龙胆苦苷含量越高 ,以一级种苗移
栽后的龙胆苦苷含量最高 ,一级 、二级种苗移栽后
图 5 移栽密度对龙胆苦苷类成分含量的影响
Fig.5 Effect of different transplanting density on the
content of gentiopicroside and swertiamarin
的龙胆其獐牙菜苦苷含量均较三级种苗的高 。可
见龙胆种苗质量对生产的龙胆的内在质量影响很
大。优质种苗移栽后龙胆生长健壮 ,生产出的药材
长度 、根的直径都较大 ,龙胆的内在质量和外观质
量均优良 ,同时优质种苗龙胆产量高。因此 ,生产
中应培育和使用一 、二级种苗作为移栽苗 ,三级苗
不能作为龙胆生产的种苗 ,对于达不到等级的种苗
可留在苗床上继续生长一年 ,待达到二级以上方可
作为生产用种苗。
3.2 移栽密度对龙胆产量和质量的影响
结果(表 2 、图 5)表明 ,不同密度龙胆苦苷含量
及獐牙菜苦苷含量不同 ,其中龙胆苦苷含量随龙胆
移栽培密度降低而提高 ,但升高幅度较小 ,獐牙菜
苦苷含量变化无规律性 。龙胆移栽培密度低 ,其个
体能获得较多的营养 、水分等 ,因此 ,个体发育好 ,
根较粗长 ,龙胆苦苷含量也较高 ,从龙胆苦苷含量
考虑 ,龙胆密度越低越好 ,但较低密度 ,单位面积的
龙胆保苗株数较少 ,这样又使单位面积产量大大减
少 ,因此 ,综合考虑产量和内在质量指标 ,龙胆种植
密度以 125 株/m2为佳 ,这样即有较高的产量 ,同
时龙胆又有较优质量。
3.3 移栽时间对龙胆产量和质量的影响
结果(表 3)表明 ,在相同的栽培条件下 ,秋栽
表 2 不同移栽培密度龙胆产量及龙胆苦苷类成分含量
Table 2 Effect o f different transplanting density on the output of gentian and content of gentiopicroside and sw er tiamarin
密度(plant/m2)
Density
龙胆苦苷含量(%)
Content of gentiopicroside
RSD(%) 獐牙菜苦苷含量(%)
Con tent of sw ert iamarin
RSD(%) 产量 Output(kg/ hm2)
125 10.837 1.35 1.268 2.43 2 456.2
85 11.756 0.22 1.405 1.38 1 708.5
63 11.587 0.92 1.351 2.07 1 266.3
50 12.115 1.40 1.528 2.27 1 072.5
42 12.625 1.05 1.479 3.13 945.0
3373 期           孙海峰等:栽培措施对龙胆产量及龙胆苦苷类成分含量的影响
表 3 不同移栽时间的龙胆产量及龙胆苦苷类成分含量
Table 3 Effcet of different transplanting time on the output
of gentian and content of gentiopicroside and swer tiamarin
移栽时间 T ransplanting time
秋栽 Au tumn 春栽 Spring
龙胆苦苷含量(%)
Content of gentiopicroside
12.201 11.257
RSD(%) 1.43 0.89
獐牙菜苦苷含量(%)
Conten t of sw ert iamarin
1.580 1.443
RSD(%) 3.27 3.48
产量 Output(kg/ hm2) 1 761.6 1 647.7
的龙胆其苦苷 、獐牙菜苦苷含量比春栽的高 ,质量
佳。春栽要翻耕土壤 ,使土壤失水 ,土壤保墒不好 ,
春栽要等到土壤化冻 ,此时龙胆苗多已萌发 ,这些
都不利于龙胆定植生长。秋栽 ,土壤墒情好 ,龙胆
可早定苗 ,生长期延长 ,生长健壮 ,生产出龙胆根较
粗长 ,其龙胆苦苷含量高 ,具有较优良的内在质量
和外观质量 。同时秋栽龙胆产量比春栽高 ,因此龙
胆移栽以秋栽为佳。
3.4 前茬作物对龙胆产量和质量的影响
结果(表 4)表明 ,龙胆移栽地的前茬作物不同 ,
生产的龙胆其龙胆苦苷含量 、獐牙菜苦苷含量均有
差异。以前茬作物为玉米地生产的龙胆其龙胆苦
苷含量 、獐牙菜苦苷含量较高 ,质量较佳 ,产量较
高。前茬作物为龙胆地块再栽培龙胆属连作 ,这样
的地块积累了大量病原菌 ,移栽龙胆后 ,龙胆斑枯
病发病较重 ,龙胆生长不良 ,影响其有效成分积累
和药材产量 。因此龙胆栽培不能连作 ,选前茬为玉
米的地块为佳。
表 4 前茬作物不同对龙胆产量及龙胆苦苷
类成分含量的影响
Table 4 Effect of different preceding crop on the output o f
g entian and content o f g entiopicroside and swertiamarin
前茬作物 Preceding crop
龙胆 玉米
龙胆苦苷含量(%)
Content of gent iopicroside
11.187 11.588
RSD(%) 0.41 0.34
獐牙菜苦苷含量(%)
Content of sw ertiamarin
1.363 1.762
RSD(%) 0.75 2.31
产量 Ou tput(kg/ hm2) 2 295 3 009
综上所述 ,不同的栽培措施对龙胆成分含量均
有影响 ,这些因素均通过影响龙胆的生长发育 ,体
内的生物合成 ,间接影响龙胆有效成分积累;同时
不同栽培措施影响龙胆产量 ,以秋栽 、选用一级种
苗 、轮作 、移栽密度为125株/m2可达到优质高产
的目标 。
参 考 文 献
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