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Screening and identification of antagonistic bacteria against Panax ginseng pathogeny fungus

人参病原菌拮抗细菌的分离筛选与鉴定



全 文 :植物保护学报 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 圆园员缘袁 源圆渊员冤院 苑怨 原 愿远 阅韵陨院 员园郾 员猿愿园圆 辕 躁援 糟灶噪蚤援 扎憎遭澡曾遭援 圆园员缘郾 园员郾 园员圆
基金项目院 国家科技支撑计划项目渊圆园员员月粤陨园猿月园员鄄园圆冤袁国家自然科学基金渊猿员圆苑园猿苑员冤袁吉林省科技发展计划重点项目渊圆园员圆缘园远愿冤
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁耘鄄皂葬蚤造院 赠造皂澡苑苑苑岳 员圆远援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员源 原 园猿 原 圆源
人参病原菌拮抗细菌的分离筛选与鉴定
孙摇 卓摇 杨利民鄢
渊吉林农业大学中药材学院袁 省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室袁 长春 员猿园员员愿冤
摘要院 为明确土壤拮抗细菌对人参常见病原菌的生防价值袁从吉林省抚松县人参根际土壤中分离尧
纯化获得 员员猿 株细菌袁采用平板对峙法测定菌株的拮抗能力袁通过温室盆栽试验研究其在土壤及
人参根部的定殖规律袁并通过形态尧培养特征及 员远杂 则阅晕粤序列分析进行分类鉴定遥 对峙试验结果
表明袁圆 株细菌对供试人参病原菌具有良好的拮抗广谱性袁且多次验证其抑菌效果稳定遥 定殖研究
结果表明袁活性菌株 杂在鄄缘远 与 杂在鄄远园 的定殖能力均达到显著水平袁在土壤中的最大定殖菌量分别为
每克土 苑郾 缘员 伊 员园远 悦云哉和 苑郾 圆愿 伊 员园远 悦云哉袁猿园 凿后定殖菌量仍保持在 员园缘 悦云哉曰圆员 凿后在人参根部的
定殖菌量仍保持在每克根 员园缘 悦云哉 水平遥 根据形态尧培养特征尧生理生化指标和 员远杂 则阅晕粤 序列分
析袁确定 杂在鄄缘远为内生芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟怎泽袁杂在鄄远园为解淀粉芽胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥
关键词院 人参曰 拮抗细菌曰 筛选曰 鉴定曰 定殖
杂糟则藻藻灶蚤灶早 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 葬早葬蚤灶泽贼
孕葬灶葬曾 早蚤灶泽藻灶早 责葬贼澡燥早藻灶赠 枣怎灶早怎泽
杂怎灶 在澡怎燥摇 再葬灶早 蕴蚤皂蚤灶鄢
渊月则藻藻凿蚤灶早 月葬泽藻 燥枣 杂贼葬贼藻 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 允蕴孕鄄酝韵杂栽 枣燥则 耘糟燥造燥早蚤糟葬造 砸藻泽贼燥则葬贼蚤燥灶 葬灶凿 耘糟燥泽赠泽贼藻皂 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼袁
悦燥造造藻早藻 燥枣 匀藻则遭葬造 酝藻凿蚤糟蚤灶藻袁 允蚤造蚤灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 悦澡葬灶早糟澡怎灶 员猿园员员愿袁 允蚤造蚤灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 凿藻贼藻则皂蚤灶藻 贼澡藻 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 增葬造怎藻 燥枣 泽燥蚤造 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 糟燥皂皂燥灶
责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 燥枣 早蚤灶泽藻灶早袁 员员猿 泽贼则葬蚤灶泽 燥枣 遭葬糟贼藻则蚤葬 憎藻则藻 藻曾贼则葬糟贼藻凿 葬灶凿 责怎则蚤枣蚤藻凿 枣则燥皂 早蚤灶泽藻灶早
则澡蚤扎燥泽责澡藻则藻 泽燥蚤造泽 蚤灶 云怎泽燥灶早 悦燥怎灶贼赠 燥枣 允蚤造蚤灶 孕则燥增蚤灶糟藻援 栽澡藻 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 葬遭蚤造蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶泽 憎葬泽
凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 怎泽蚤灶早 枣造葬贼 责造葬贼藻 糟燥灶枣则燥灶贼葬贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿袁 葬灶凿 贼澡藻蚤则 糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 蚤灶 泽燥蚤造泽 葬灶凿 早蚤灶泽藻灶早 则燥燥贼泽 憎葬泽
泽贼怎凿蚤藻凿 贼澡则燥怎早澡 早则藻藻灶澡燥怎泽藻 责燥贼 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼援 栽澡藻蚤则 糟造葬泽泽蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 泽贼葬贼怎泽藻泽 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 遭赠 皂燥则责澡燥造燥早赠袁
糟怎造贼怎则葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 员远杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼憎燥 泽贼则葬蚤灶泽 澡葬凿 葬 早燥燥凿 葬灶凿
遭则燥葬凿 泽责藻糟贼则怎皂 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 贼燥憎葬则凿泽 泽藻造藻糟贼藻凿 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 燥枣 早蚤灶泽藻灶早袁 葬灶凿 贼澡藻 皂怎造贼蚤责造藻
贼藻泽贼泽 糟燥灶枣蚤则皂藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 藻枣枣藻糟贼泽 憎藻则藻 则藻造葬贼蚤增藻造赠 泽贼葬遭造藻援 悦燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻
糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 葬遭蚤造蚤贼蚤藻泽 燥枣 贼澡藻 葬糟贼蚤增藻 泽贼则葬蚤灶泽 杂在鄄缘远 葬灶凿 杂在鄄远园 则藻葬糟澡藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 造藻增藻造泽袁 葬灶凿 贼澡藻 皂葬曾蚤皂怎皂
糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 葬皂燥怎灶贼 燥枣 杂在鄄缘远 葬灶凿 杂在鄄远园 蚤灶 贼澡藻 泽燥蚤造泽 憎藻则藻 苑郾 缘员 伊 员园远 悦云哉 辕 早 泽燥蚤造 葬灶凿 苑郾 圆愿 伊 员园远 悦云哉 辕 早
泽燥蚤造袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 葬皂燥怎灶贼 燥枣 遭葬糟贼藻则蚤葬 蚤灶 早蚤灶泽藻灶早 则燥燥贼泽 则藻皂葬蚤灶藻凿 葬贼 葬 造藻增藻造 燥枣 员园缘 悦云哉 辕 早
则燥燥贼 猿园 凿葬赠泽 造葬贼藻则援 月葬泽藻凿 燥灶 皂燥则责澡燥造燥早赠袁 糟怎造贼怎则葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 蚤灶凿藻曾藻泽
葬灶凿 员远杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽袁 杂在鄄缘远 憎葬泽 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 葬泽 月葬糟蚤造造怎泽 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟怎泽袁 葬灶凿 杂在鄄远园 葬泽
月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 孕葬灶葬曾 早蚤灶泽藻灶早曰 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤怎皂曰 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶曰 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶
摇 摇 人参 孕葬灶葬曾 早蚤灶泽藻灶早 悦援 粤援 酝藻赠 为五加科人参属
多年生宿根阴性药用植物袁在中国尧韩国尧俄罗斯尧朝
鲜等国家有大面积种植遥 中国东北是人参的主产
区袁人参种植已成为当地的支柱产业之一渊何迪袁
圆园员园冤遥 目前袁已发现的人参病害有 源园 余种袁其中锈
腐病是最严重的病害袁发病率高时可达到 苑园豫 渊马
凤茹和邢云章袁员怨愿缘冤曰根腐病的发病率在 猿园豫以
上袁远 年生人参根腐病造成的死亡率可达 缘园豫以上袁
发病率可达 愿园豫以上渊陈金堂等袁员怨愿园冤曰此外还有
菌核病尧疫病尧灰霉病等常见病害袁也对人参生长造
成不利影响渊王崇仁等袁员怨怨圆曰赵日丰等袁员怨怨猿曰王春
伟等袁圆园员员冤遥
长期以来使用化学农药防治病害袁导致人参农
药残留量高袁降低了人参的使用安全性和商品价值袁
因此袁人们把防治重点逐步转向生物防治渊在葬糟澡燥憎
藻贼 葬造援 袁圆园园愿曰杂燥皂藻赠葬袁圆园园愿冤遥 生物防治符合国家中
药材 郧粤孕 标准袁具有广谱尧无毒尧无污染等优点袁是
当今病害防治的一个研究热点遥 近年来袁细菌渊包
括农杆菌属 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂尧芽胞杆菌属 月葬糟蚤造造怎泽 等冤
在国内外生防领域的应用较为普遍 渊杨秀荣等袁
圆园园愿冤遥 有研究报道真菌类木霉菌可用于防治人参
根部病害渊赵阿娜和丁万隆袁圆园园远冤曰而细菌类枯草
芽胞杆菌 月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽 对人参黑斑病可以起到防治作
用渊酝葬贼葬则 藻贼 葬造援 袁圆园园怨曰 吴长宝等袁圆园员园冤袁但不具备
广谱拮抗性遥 筛选拮抗能力较强的生防菌株是开展
生防研究工作的首要任务渊邱德文袁圆园员园冤袁但由于
目前人参病害生防菌源的开发尚不足袁特别是对于
生防细菌方面的相关报道较少袁人参病害生防研究
仍未有突破性进展遥 运造燥藻责责藻则 藻贼 葬造援 渊员怨愿园冤报道根
际土壤中细菌群落分布较广袁根际细菌的代谢与植
物生长密切相关袁且部分细菌菌群对植物生长具有
良性影响遥 因此袁本研究以人参主产区吉林省抚松
县人参规范化种植基地人参根际土壤为研究对象袁
从中分离筛选出对人参病原菌具有较强广谱拮抗能
力的细菌菌株袁通过形态特征尧生理生化特性以及
员远杂 则阅晕粤基因序列分析等手段对菌株进行分类鉴
定袁并开展了盆栽定殖研究袁以期为人参生防菌资源
的深入研究和开发提供科学依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试人参院为吉林省抚松县 猿 年生参栽袁购于吉
林省抚松县参王植保公司遥
供试病原菌院为人参根部常见主要病原真菌袁包
括恶疫霉菌 孕澡赠贼燥责澡贼澡燥则葬 糟葬糟贼燥则怎皂 渊 蕴藻遭援 藻贼 悦燥澡援 冤
杂糟澡则燥藻贼尧毁灭柱孢菌 悦赠造蚤灶凿则燥糟葬则责燥灶 凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽渊在蚤灶泽泽冤
杂糟澡燥造贼藻灶尧腐皮镰孢菌 云怎泽葬则蚤怎皂 泽燥造葬灶蚤渊酝葬则贼援 冤 杂葬糟糟援
枣援 泽责援 早造赠糟蚤灶藻泽 渊月怎则噪援 冤 杂灶赠凿援 驭 匀葬灶泽援 尧灰葡萄孢菌
月燥贼则赠贼蚤泽 糟蚤灶藻则藻葬 孕藻则泽援和人参核盘菌 杂糟造藻则燥贼蚤灶蚤葬 早蚤灶泽藻灶早
宰葬灶早 悦援 砸援 袁悦援 云援 悦澡藻灶 藻贼 允援 悦澡藻灶遥 由吉林农业大学
农学院植物病理教研室提供袁斜面低温保藏法渊源
益冤保藏遥
待筛选细菌院采自吉林省抚松县人参规范化种
植基地人参根际土壤袁编号为 杂在遥 常规液体石蜡低
温保藏法渊源 益冤保藏遥 培养基院马铃薯葡萄糖渊责燥贼葬鄄
贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则 皂藻凿蚤怎皂袁孕阅粤冤 培养基 员 园园园 皂蕴院去皮
马铃薯 圆园园 早尧葡萄糖 圆园 早尧琼脂 圆圆 早袁责匀为 苑援 园曰牛肉
膏蛋白胨培养基 员 园园园 皂蕴院牛肉膏 猿援 园 早尧蛋白胨
员园援 园 早尧晕葬悦造 缘援 园 早袁责匀 苑援 园 耀 苑援 圆曰月孕再渊遭藻藻枣 藻曾贼则葬糟贼鄄
责则责贼燥灶藻鄄赠藻葬泽贼 藻曾贼则葬糟贼 皂藻凿蚤怎皂冤液体培养基院牛肉膏
缘 早尧蛋白胨 员园 早尧酵母浸膏 缘 早尧葡萄糖 缘 早尧晕葬悦造 缘 早尧
蒸馏水 员 园园园 皂蕴袁责匀 远郾 愿遥
试剂和仪器院怨怨豫利福平渊则蚤枣葬皂责蚤糟蚤灶袁砸蚤枣冤袁上海
沪宇生物科技有限公司曰阅晕粤 酝葬则噪藻则 和 孕悦砸 扩增
试剂盒袁日本 栽葬运葬砸葬 公司曰孕悦砸 产物纯化试剂盒袁
生工生物工程渊上海冤股份有限公司曰细菌通用引
物袁长春联星生物技术有限公司合成遥 哉灾鄄员苑园园 型
紫外 辕可见分光光度计袁日本岛津公司曰郧粤孕杂鄄怨苑园园
型 孕悦砸仪袁美国 粤月 应用生物系统公司曰匀孕郧鄄猿圆园匀
型人工气候箱袁哈尔滨东联电子技术开发有限公司曰
阅再悦孕鄄猿员阅晕 水平电泳仪袁北京市六一仪器厂曰郧陨杂鄄
圆园员园 型凝胶成相系统袁上海天能科技有限公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 细菌菌株的分离与纯化
采集吉林省抚松县人参规范化种植基地人参根
际土壤样品袁风干后过 圆园 目筛遥 称取样品 员园 早袁放
入装有玻璃珠和 怨园 皂蕴 无菌水的三角瓶中袁充分振
荡 员园 耀 猿园 皂蚤灶袁使样品与无菌水混合均匀袁制得样品
悬液遥 在无菌条件下取 员 皂蕴 上清液袁加入 怨 皂蕴
园郾 园缘豫 杂阅杂液袁源园 益保温 圆园 皂蚤灶袁取 员 皂蕴袁加入 怨 皂蕴
无菌水袁按梯度依次制成 员园 原猿尧员园 原 源尧员园 原缘的稀释液遥
分别吸取 员园园 滋蕴各稀释液袁在牛肉膏蛋白胨平板上
涂布袁猿 次重复袁猿源 益培养 圆源 澡遥 根据菌落特征渊形
态尧颜色尧透明度尧边缘尧干湿等冤袁挑取性状差异明
显的菌落袁平板划线纯化尧编号袁源 益保藏备用遥
员援 圆援 圆 人参真菌性病原菌拮抗菌株筛选及抑菌谱测定
采用滤纸片法渊单文荣等袁圆园员园冤进行初筛袁用
直径 愿皂皂的打孔器将活化好的病原菌制成菌饼袁无
园愿 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源圆 卷
菌接种至 孕阅粤平板渊直径 怨园 皂皂冤的正中央袁同时将
源 片直径为 员 糟皂 的灭菌滤纸圆片粘于距平板中心
圆缘 皂皂处的 源 个角点上袁其中 猿 片滤纸圆片上各点
接 圆园 滋蕴牛肉膏蛋白胨培养液袁对照为剩余滤纸圆
片点接 圆园滋蕴无菌水袁每组 猿 次重复袁置于 圆愿益培养
箱培养 远 耀 苑 凿遥 待对照组菌落长满平板袁测量处理
菌落直径遥 观察并记录有无抑菌带产生并测量处理
病原菌菌落直径袁计算抑菌率遥 挑选出对人参病原
菌有明显拮抗作用的细菌进行复筛遥
复筛采用牛津杯法渊贾凤安等袁圆园员园冤袁在 源益条
件下袁以接种待复筛菌株 月孕再 液体培养基经 员圆 园园园
则 辕 皂蚤灶离心圆园 皂蚤灶袁收集上清液经 园援 圆圆 滋皂 微孔滤膜
过滤后 源 益保存备用遥 在 孕阅粤 平板中央接种直径
为 愿 皂皂的菌饼袁圆愿 益下培养 圆源 澡 后在将 源 个无菌
牛津杯放于距平板中心约 圆缘 皂皂 的 源 个角点袁每杯
内滴加 员园园滋蕴初筛菌株的 月孕再液体培养基滤液袁以
加入等体积无菌 月孕再液体培养基处理作为对照袁每
组 猿 次重复袁圆愿 益培养 缘 凿 后测量处理菌落直径并
计算其抑菌率遥 用生长速率法渊陶晶等袁圆园园怨冤对活
性菌株进行抑菌谱测定遥 抑菌率 越 咱渊粤 原 月冤 辕 渊粤 原
愿冤暂 伊 员园园豫 袁粤院病原菌正常生长直径袁月院被拮抗后
病原菌直径袁数字为病原菌菌饼直径遥
员援 圆援 猿 拮抗菌株鉴定
形态特征鉴定院参考东秀珠和蔡妙英渊圆园园员冤的
方法进行鉴定遥 观察生长于牛肉膏蛋白胨平板上的
拮抗细菌菌落形态袁鉴定拮抗细菌群体形态特征袁并
通过革兰氏染色观察拮抗细菌个体形态特征遥
生理生化特征测定院参考东秀珠和蔡妙英
渊圆园园员冤的方法进行测定遥 采用硝酸盐还原试验尧耐
盐性培养渊圆豫 尧缘豫 尧苑豫 尧员园豫 冤试验尧运动性试验尧
接触酶反应尧明胶液化尧淀粉水解试验尧柠檬酸钠盐
利用试验尧乙酰甲基甲醇试验渊灾鄄孕 反应冤尧碳水化
合物利用试验渊阅鄄葡萄糖尧蕴鄄阿拉伯糖尧阅鄄木糖尧阅鄄
甘露醇冤等进行拮抗细菌的生理生化测定遥
员远杂 则砸晕粤基因序列分析院细菌基因组的提取应
用 栽葬运葬砸葬 酝蚤灶蚤月耘杂栽 月葬糟贼藻则蚤葬造 郧藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 耘曾贼则葬糟鄄
贼蚤燥灶 运蚤贼 灾藻则援 圆援 园试剂盒渊编号院栽葬运葬砸葬 悦燥凿藻院阅灾愿员园粤冤遥
孕悦砸扩增采用细菌通用引物渊刘玮琦等袁圆园园愿冤袁
员远杂员云院缘忆鄄粤郧粤郧栽栽栽郧粤栽悦悦栽鄄郧郧悦栽悦粤郧鄄猿忆和 员远杂员砸院缘忆鄄
栽粤悦郧郧悦栽粤悦悦栽栽郧栽栽粤悦郧鄄粤悦栽栽鄄猿忆袁由长春联星生物
技术有限公司合成遥 孕悦砸 扩增反应体系 缘园 滋蕴 为院
基因组 阅晕粤 圆 滋蕴尧员园 皂皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕 圆 滋蕴尧员园 伊 月怎枣枣藻则
缘 滋蕴尧员远杂员云 圆 滋蕴尧员远杂员砸 圆 滋蕴尧 圆郾 缘 哉 辕 滋蕴 栽葬择 酶
圆 滋蕴尧双蒸水 猿缘 滋蕴遥 孕悦砸 扩增条件院怨源 益预变性
缘 皂蚤灶曰怨源 益 员 皂蚤灶袁缘愿 益 猿园 泽袁苑园 益 怨园 泽曰猿缘 个循环曰
苑圆 益延伸 员园 皂蚤灶遥 孕悦砸产物经 员郾 缘豫琼脂糖凝胶电
泳检测袁采用 栽陨粤晕郧耘晕 凝胶回收试剂盒纯化后的
孕悦砸产物送交上海生工生物工程技术服务有限公
司测序遥 将测序得到的序列通过 晕悦月陨 数据库中的
月蕴粤杂栽软件和 郧藻灶月葬灶噪 中的核酸序列进行比对分
析袁寻找与目的序列同源性最高的已知分类地位菌
种的 员远杂 则阅晕粤序列遥 从 郧藻灶月葬灶噪 中检索同源性高
的菌株用于系统发育分析袁序列采用 悦造怎泽贼葬蕴 载
渊栽澡燥皂责泽燥灶 藻贼 葬造援 袁 员怨怨苑 冤 进行多重比对后袁利用
酝耘郧粤 缘援 员 月藻贼葬圆 软件以邻接渊灶藻蚤早澡遭燥则鄄躁燥蚤灶蚤灶早袁晕允冤
法构建系统发育树 员 园园园 次随机抽样袁计算自引导
值渊遭燥燥贼泽贼则葬责冤袁以评估系统发育树的置信度遥
员援 圆援 源 抗利福平渊砸蚤枣冤突变菌株定殖能力的测定
筛选院取培养 源愿 澡的拮抗细菌种子液 员园 皂蕴 接
种在含 圆园 滋早 辕 皂蕴 砸蚤枣 的培养液中渊装液量 员园园 皂蕴 辕
圆缘园 皂蕴冤遥 猿园 益尧员愿园 则 辕 皂蚤灶振荡培养 源 耀 缘 凿后袁如果
培养液变浑浊袁则吸取 员园 皂蕴接入 砸蚤枣浓度为 圆园 滋早 辕
皂蕴的 员园园 皂蕴牛肉膏蛋白胨培养基中袁之后每次培
养液中 砸蚤枣 的浓度均增加 圆园 滋早 辕 皂蕴袁使其浓度分别
为 源园尧远园尧愿园尧员园园尧员缘园尧圆园园尧猿园园 滋早 辕 皂蕴遥 然后用含
猿园园 滋早 辕 皂蕴 砸蚤枣的牛肉膏蛋白胨培养基平板检测并
挑取能稳定生长袁且拮抗活性尧菌落形态变化不大的
突变菌株遥 为检测其遗传稳定性袁将其在牛肉膏蛋
白胨培养基渊不含 砸蚤枣冤中连续培养 员园 代后涂布含
猿园园 滋早 辕 皂蕴 砸蚤枣的牛肉膏蛋白胨培养基平板袁观察是
否能正常生长遥
在土壤中的定殖院采样灌根接种法袁将上述突
变菌株接入 月孕再 液体培养基袁置于 猿圆 益的摇床中
员愿园 则 辕 皂蚤灶振荡培养 圆 凿 后袁所得菌株菌悬液含菌量
调制约为 员园愿 悦云哉 辕 皂蕴遥 将新林土渊取自长白山抚松
地区冤装于花盆中袁每盆 员 噪早 土袁向土壤中注入
员园园 皂蕴突变菌株培养液拌土遥 室温下放置袁之后分
别于第 源尧苑尧员园尧员缘尧圆园尧猿园 天分离 员 次土壤内的细菌
渊土壤细菌分离方法同 员援 圆援 员袁取 员园 原猿尧员园 原源尧员园 原缘的
土壤匀浆稀释液 员园园 滋蕴 注入含 猿园园 滋早 辕 皂蕴 的利福
平牛肉膏蛋白胨培养基平板中均匀涂布袁设不接菌
处理为对照袁猿 凿后计数冤袁计算含菌量遥
在人参根部的定殖院采用灌根接种法袁突变菌株
菌悬液配制同上遥 将人参新林土 颐 蛭石按照圆 颐 员比
例配制自然土基质置于 员圆 糟皂 伊 员缘 糟皂 盆钵中备用遥
取于抚松根系较为发达的 猿 年生人参苗袁小心抖落
附着于根部的土壤袁缘园 益水中浸泡 缘 皂蚤灶 消毒洗净
其根部表面袁将其浸泡于预先配置好的突变菌悬液
中袁圆缘 耀 猿园 皂蚤灶后取出移栽于装有自然土的花盆中袁
浇足水遥 苗高 员园 糟皂 定苗袁定苗后每株人参苗沿茎
员愿员 期 孙摇 卓等院 人参病原菌拮抗细菌的分离筛选与鉴定
基部浇灌菌悬液 猿园 皂蕴袁每隔 猿 凿浇适量无菌水遥 每
盆 猿 株袁每组 猿 次重复袁以无菌液体培养基为 悦运 对
照袁试验温度约 圆缘 耀 猿缘 益遥 分别于接菌后 苑尧员源尧
圆员 凿时随机取 圆 株人参苗进行根部目标菌株的分
离尧回收遥 取样时袁将人参苗用清水洗净放入 苑缘豫
乙醇中 缘皂蚤灶袁取出后在 圆园豫的次氯酸钠溶液中消毒
员园 皂蚤灶袁再用含 圆园园 滋早 辕 皂蕴的链霉素溶液浸泡 圆园 皂蚤灶袁
用灭菌水冲洗 源 次袁经表面消毒的组织在培养基上
进行印迹培养袁检查表面消毒是否彻底袁如果表面印
迹培养后长菌的相应处理为无效试验袁每处理保留
猿 次有效重复曰用无菌滤纸吸干人参苗水分袁取根若
干置于无菌研钵中袁注入 员园 皂蕴无菌水袁用灭菌玻棒
研磨至匀浆袁放置 圆缘 耀 猿园 皂蚤灶袁使根内细菌释放出
来袁取上清液以 员园 倍梯度稀释袁取 员园园 滋蕴上清液均
匀涂布于回收平板上渊含 猿园园 滋早 辕 皂蕴利福平的牛肉膏
蛋白胨培养基平板冤袁每处理 猿次重复曰设不接菌处理
为对照袁平板倒置于猿圆益恒温箱中培养猿 凿袁检测是否
有待测菌生长袁计数袁同时检测回收菌的抑菌效果遥
含菌量 越菌落数 伊稀释倍数 伊分离用水量 辕涂板用水
量 伊分离组织质量遥
员援 猿 数据分析
应用 阅孕杂 怨援 缘园 软件处理原始数据袁阅怎灶糟葬灶 氏
新复极差法进行处理间差异显著性检验遥
圆 结果与分析
圆援 员 人参病原菌拮抗细菌菌株的筛选
供试人参根际土壤样品中共分离到 员员猿 株细
菌遥 初筛共获得拮抗细菌 圆苑 株袁从中挑选抑菌率达
到 缘园豫以上的菌株进行复筛遥 结果显示渊表 员冤袁菌
株 杂在鄄缘远 对供试各人参病原菌均有明显的抑制作
用袁广谱拮抗性强曰菌株 杂在鄄缘圆 和 杂在鄄远园 广谱拮抗能
力次之遥 菌株 杂在鄄缘圆尧杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 经多次验证后
抑菌效果较为稳定袁可用于进一步研究遥
表 员 拮抗细菌对人参病原菌的抑菌率
栽葬遭造藻 员 栽澡藻 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 则葬贼藻 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 葬早葬蚤灶泽贼 早蚤灶泽藻灶早 枣怎灶早葬造 责葬贼澡燥早藻灶泽 豫
菌株编号
杂贼则葬蚤灶 灶燥援
恶疫霉菌
孕援 糟葬糟贼燥则怎皂
毁灭柱孢菌
悦援 凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽
腐皮镰孢菌
云援 泽燥造葬灶蚤
灰葡萄孢菌
月燥贼则赠贼蚤泽 泽责责援
核盘菌
杂援 泽糟澡蚤灶泽藻灶早
杂在鄄圆 要 愿愿援 愿园 依 园援 远远 葬 要 要 要
杂在鄄猿 要 要 苑苑援 源园 依 员援 园缘 遭 要 苑怨援 远苑 依 圆援 员缘 葬
杂在鄄源 要 要 远猿援 员园 依 园援 远园 糟 愿怨援 缘园 依 员援 员猿 葬 愿远援 员猿 依 员援 远愿 遭
杂在鄄圆园 缘愿援 员苑 依 员援 员源 葬 要 要 要 要
杂在鄄圆圆 要 愿圆援 远猿 依 园援 源圆 葬 要 要 要
杂在鄄猿源 要 愿缘援 缘苑 依 员援 猿员 葬 要 苑员援 猿猿 依 员援 员员 遭 要
杂在鄄猿缘 远猿援 猿猿 依 圆援 园远 糟 要 苑猿援 苑园 依 圆援 远远 遭 愿远援 缘猿 依 园援 圆员 葬 要
杂在鄄源远 要 怨缘援 苑猿 依 员援 圆猿 葬 要 要 怨远援 猿猿 依 员援 猿苑 葬
杂在鄄缘圆 愿愿援 员园 依 园援 猿远 遭 怨源援 员猿 依 园援 猿缘 葬 缘猿援 园园 依 员援 源员 凿 苑怨援 苑猿 依 园援 缘怨 糟 要
杂在鄄缘远 怨源援 园猿 依 园援 愿园 遭 愿苑援 苑园 依 园援 苑园 糟 愿园援 园猿 依 园援 猿愿 凿 怨远援 员猿 依 员援 源猿 葬 怨缘援 苑猿 依 园援 猿愿 葬
杂在鄄远园 愿怨援 猿苑 依 园援 苑缘 遭 怨圆援 苑苑 依 园援 怨缘 葬 苑员援 源猿 依 圆援 员源 凿 要 苑苑援 园猿 依 园援 源怨 糟
杂在鄄愿员 苑缘援 源园 依 园援 怨圆 糟 怨员援 圆苑 依 员援 圆远 葬 要 要 要
摇 摇 要表示抑制率小于 缘园豫 遥 表中数据为平均数 依 标准差遥 不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶 氏新复极差法检验差异显著渊孕 约
园郾 园缘冤遥 要 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 造燥憎藻则 贼澡葬灶 缘园豫 援 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼
凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约园郾 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 圆 拮抗菌株对人参病原真菌的抑制作用
以抑菌带宽大于 缘 皂皂 为标准袁菌株 杂在鄄缘远 和
杂在鄄远园 可抑制 源 类人参病原菌袁较 杂在鄄缘圆 的广谱拮抗
性强遥 菌株 杂在鄄缘远 的抑菌带宽区间在 缘郾 园苑 耀 员圆郾 园苑
皂皂之间袁较 杂在鄄远园 广谱抑制效果明显渊孕 约 园郾 园缘冤
渊表 圆冤遥 表明菌株 杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 对人参病原菌具
有较强的广谱拮抗性遥
圆援 猿 形态学和生理生化特性
圆援 猿援 员 形态学特性
形态学观察结果显示袁在牛肉膏蛋白胨培养
基上菌株 杂在鄄缘远 菌落不规则尧乳白色袁菌落表面干
燥尧有褶皱尧表面不透明袁镜检呈杆状袁细胞大小为
园郾 猿 耀 园郾 源 滋皂 伊 猿郾 圆 耀 猿郾 猿 滋皂袁郧 垣 袁有芽孢袁具圆
端袁表现了芽胞杆菌的特征曰菌株 杂在鄄远园 在牛肉膏
蛋白胨培养基上的菌落呈乳白色袁中心无隆起袁边
摇 摇 摇
圆愿 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源圆 卷
表 圆 拮抗细菌对人参病原真菌的抑菌带测定
栽葬遭造藻 圆 栽澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 扎燥灶藻 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 葬早葬蚤灶泽贼 早蚤灶泽藻灶早 枣怎灶早葬造 责葬贼澡燥早藻灶泽 皂皂
菌株编号
杂贼则葬蚤灶 灶燥援
恶疫霉菌
孕援 糟葬糟贼燥则怎皂
毁灭柱孢菌
悦援 凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽
腐皮镰孢菌
云援 泽燥造葬灶蚤
灰葡萄孢菌
月燥贼则赠贼蚤泽 泽责责援
核盘菌
杂援 泽糟澡蚤灶泽藻灶早
杂在鄄缘圆 愿援 缘苑 依 园援 猿缘 葬 源援 怨园 依 园援 圆远 遭 圆援 圆园 依 园援 圆远 糟 圆援 怨猿 依 园援 圆员 糟 要
杂在鄄缘远 员园援 圆园 依 园援 员园 遭 怨援 怨苑 依 园援 源缘 糟 缘援 园苑 依 园援 园远 凿 圆援 园猿 依 园援 圆猿 藻 员圆援 园苑 依 园援 园远 葬
杂在鄄远园 远援 苑园 依 园援 猿园 糟 愿援 园苑 依 园援 源缘 遭 缘援 缘猿 依 园援 圆员 凿 要 员员援 源园 依 园援 猿园 葬
摇 摇 要表示 约 圆 皂皂遥 表中数据为平均数 依标准差遥 不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验差异显著渊孕 约 园郾 园缘冤遥 要 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽
蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 扎燥灶藻 造燥憎藻则 贼澡葬灶 圆 皂皂援 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘
造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
缘不整齐袁菌落圆形且紧贴培养基袁湿润尧半透明袁镜
检呈杆状袁细胞大小为 园郾 怨 耀 员郾 园 滋皂 伊 猿郾 愿 耀 猿郾 怨
滋皂袁郧 原 袁产芽孢遥 表明菌株 杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 具有典
型的芽胞杆菌特征遥
圆援 猿援 圆 生理生化特性
菌株 杂在鄄缘远 的最适生长温度为 猿园 益遥 其生长
责匀范围为 远郾 苑 耀 苑郾 缘袁最适生长 责匀 为 苑援 园遥 菌株
晕阅鄄缘远 属需氧生长曰硝酸盐还原反应生成红色化合
物曰接触酶测定为阳性曰脂肪酶尧酪氨酸反应为阴性曰
酪蛋白反应呈阴性曰可利用 阅鄄葡萄糖尧阅鄄木糖曰淀粉
水解试验镜检有糊精生成曰明胶液化呈阳性曰柠檬酸
盐利用培养基呈碱性渊深蓝色冤曰灾孕渊 责匀 苑援 园冤测
定生成红色化合物曰蕴鄄阿拉伯糖尧甘露醇呈阴性曰在
加入 员园豫 晕葬悦造 的牛肉膏蛋白胨培养基上不能
生长遥
菌株 杂在鄄远园 能在 圆缘 耀 源园 益温度下生长袁其最适
生长温度为 猿圆 益遥 其生长 责匀范围为 远郾 缘 耀 愿郾 园袁最
适生长 责匀为 苑援 圆遥 菌株 晕阅鄄远园 属需氧生长曰硝酸盐
还原反应生成红色化合物曰接触酶测定为阳性曰脂肪
酶反应为阴性曰酪蛋白尧酪氨酸反应呈阴性曰不能利
用 阅鄄葡萄糖尧阅鄄木糖曰淀粉水解试验镜检有糊精生
成曰明胶液化呈阳性曰柠檬酸盐利用培养基呈酸性
渊绿色冤曰灾孕渊责匀 苑援 园冤测定生成红色化合物曰蕴鄄阿拉
伯糖尧甘露醇呈阳性曰在加入 圆豫 耀 缘豫 晕葬悦造 的牛肉
膏蛋白胨培养基上均能生长遥 表明菌株 杂在鄄缘远 和
杂在鄄远园 的生理生化特征与芽胞杆属菌相接近遥
圆援 源 员远杂 则阅晕粤基因序列分析
经测序拼接后袁菌株 杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 的 员远杂 则阅鄄
晕粤序列长度分别为 员猿苑愿 和 员源猿远 遭责袁提交 郧藻灶月葬灶噪
注册渊注册号院运悦缘员员员员远 和 运悦缘员员员员苑冤并进行比
对袁结果显示与 杂在鄄缘远 同源性最高的为芽胞杆菌亚
种渊月葬糟蚤造造怎泽 泽责援 袁登录号院运云愿苑园源猿员冤袁其序列同源性
为 员园园豫 曰与 杂在鄄远园 同源性最高的为解淀粉芽胞杆菌
渊月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽袁登录号院允匝猿园愿缘苑源冤袁其序列同
源性为 怨怨豫 遥 系统发育树显示拮抗菌 杂在鄄缘远 和 杂在鄄
远园 分别与内生芽胞杆菌渊月援 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟怎泽袁登录号院
粤云圆怨缘猿园圆援 员冤和解淀粉芽胞杆菌渊月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽袁
登录号院云晕缘怨苑远源源援 员冤聚为一簇渊图 员冤遥 结合形态
学尧生理生化特性结果鉴定拮抗菌 杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园
分别为内生芽胞杆菌 月援 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟怎泽 和解淀粉芽胞
杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥
圆援 缘 抗利福平突变菌株在人参根部与土壤的定殖
分别挑取抗 猿园园 滋早 辕 皂蕴 利福平的突变菌株袁在
不含利福平的 月孕再 液体培养基上连续培养 员园 代
后袁仍能在含 猿园园 滋早 辕 皂蕴 利福平的牛肉膏蛋白胨固
体培养基上生长袁表明筛选出的突变菌株具有遗传
的稳定性袁杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 的抗利福平突变菌株可用
于定殖研究遥
随着时间的延长袁杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 的抗利福平突
变菌株在土壤中定殖数量的消长动态一致袁呈现先
降后升再降的趋势渊表 猿冤遥 杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 菌株的
菌量峰值分别出现在第 员园尧员缘 天袁定殖菌量分别为
苑郾 缘员 伊 员园远尧苑郾 圆愿 伊 员园远 悦云哉 辕 早曰这 圆 个菌株在第 源 耀
猿园 天群体数量稳定在 员园缘 悦云哉 辕 早水平以上遥
菌株在人参根部的定殖力弱于土壤中的定殖
力袁随着时间延长袁人参根部菌量均呈现先升后降趋
势袁第 员源 天菌株 杂在鄄远园 群体数量最大袁达到 源郾 圆员 伊
员园远 悦云哉 辕 早根渊表 源冤遥 通过原始菌株与回收定殖菌
株的抑菌效果对比袁发现二者的抑菌率差异不显著袁
表明回收菌株具有拮抗的稳定性遥 可见所筛选的 圆
株拮抗细菌具备较好的定殖能力遥
猿 讨论
拮抗细菌筛选研究报道多数针对单一病害袁而
获得新类型具有广谱抑菌的菌株较少渊吴长宝等袁
圆园员园冤遥 菌株 杂在鄄缘远 和 杂在鄄远园 是通过平板对峙方法
从人参根际土壤中筛选到的微生物菌株袁本研究证
实这 圆 菌株对人参病原菌均具有良好的广谱拮抗效
猿愿员 期 孙摇 卓等院 人参病原菌拮抗细菌的分离筛选与鉴定
摇 摇 摇
图 员 拮抗菌和相关菌株的系统发育树
云蚤早援 员 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶凿 蚤贼泽 则藻造葬贼蚤增藻泽
表 猿 灌根处理后标记菌株在土壤中的定殖能力
栽葬遭造藻 猿 悦燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 葬遭蚤造蚤贼赠 燥枣 遭葬糟贼藻则蚤葬 蚤灶 泽燥蚤造泽 葬枣贼藻则 则燥燥贼 憎葬贼藻则蚤灶早
菌株
杂贼则葬蚤灶
定殖菌量 粤皂燥怎灶贼 燥枣 糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 渊员园缘 悦云哉 辕 早冤
园 凿 源 凿 苑 凿 员园 凿 员缘 凿 圆园 凿 猿园 凿
杂在鄄缘远 员 园园园 源缘援 猿 依 圆援 缘远 凿 缘远援 愿 依 员援 圆缘 遭 苑缘援 苑 依 园援 怨猿 葬 源愿援 远 依 员援 缘猿 糟 圆缘援 猿 依 园援 源源 藻 远援 远缘 依 园援 苑员 枣
杂在鄄远园 员 园园园 缘员援 源 依 远援 缘园 糟 猿苑援 猿 依 园援 怨缘 凿 缘员援 苑 依 园援 愿缘 糟 苑猿援 圆 依 园援 源园 葬 远园援 远 依 园援 愿园 遭 圆苑援 愿园 依 员援 员苑 藻
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差遥 不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验差异显著渊孕 约 园援 园缘冤遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依
杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
表 源 灌根处理后标记菌株在人参根部的定殖能力
栽葬遭造藻 源 悦燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 葬遭蚤造蚤贼赠 燥枣 遭葬糟贼藻则蚤葬 蚤灶 早蚤灶泽藻灶早 则燥燥贼 葬枣贼藻则 则燥燥贼 憎葬贼藻则蚤灶早
菌株
杂贼则葬蚤灶
定殖菌量 粤皂燥怎灶贼 燥枣 糟燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 渊员园缘 悦云哉 辕 早冤
苑 凿 员源 凿 圆员 凿
杂在鄄缘远 圆援 苑怨 依 园援 圆 糟 猿愿援 远猿 依 圆援 缘圆 葬 源援 园圆 依 园援 员圆 遭
杂在鄄远园 员援 愿苑 依 园援 圆缘 糟 源圆援 员苑 依 源援 园源 葬 圆员援 圆苑 依 圆援 源远 遭
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差遥 不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验差异显著渊孕 约 园援 园缘冤遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依
杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
果袁预示其在人参病害防治上具有应用潜力遥
摇 摇 通过形态尧生理生化和 员远杂 则阅晕粤 等技术手段
综合鉴别袁这 圆 个菌株均为 月葬糟蚤造造怎泽 属袁确定 杂在鄄缘远
为内生芽胞杆菌 月援 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟怎泽袁杂在鄄远园 为解淀粉芽
胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥 目前枯草芽胞杆菌是
芽胞杆属菌最常见的一类袁其作为防治多种作物病
害的生防菌源袁已被开发成多种生物菌剂而广泛应
用渊陈中义等袁圆园园猿曰曹凤明等袁圆园园愿曰酝葬贼葬则 藻贼 葬造援 袁
圆园园怨冤曰而内生芽胞杆菌与解淀粉酶芽胞杆菌在现
今人参病害生防领域均属未报道菌种遥
理想生防菌不仅要求拮抗能力强袁而且要求生
存能力强袁能在土壤和寄主植株根部定殖遥 目前国
源愿 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源圆 卷
内外对于生防菌的定殖能力做了相关的研究袁植物
根际微生物的定殖检测方法一般有抗生素抗性的标
记尧外来基因标记尧阅晕粤 和 砸晕粤 探针以及免疫学方
法渊张炳欣和张平袁圆园园园冤遥 当菌株无选择标记时袁
抗生素抗性就较为实用袁目前也被广泛应用渊杨威
等袁圆园员园冤遥 谯天敏等渊圆园员员冤尧允葬造藻藻凿 藻贼 葬造援 渊员怨愿苑冤采
用抗生素标记拮抗菌株袁通过种群密度比较法来确
定其在植物根际的定殖能力遥 本试验选用抗生素标
记法研究了样品中的拮抗细菌在土壤及人参根部的
生长状况尧定殖时间的长短及定殖菌量的变化袁直观
地反映了菌株定殖能力强弱袁证实了菌株 杂在鄄缘远 和
杂在鄄远园 具备良好的定殖能力袁此外袁这 圆 个菌株可在
根内定殖袁表明其具有内生性袁作为生防菌源可在根
部占据有利生态位点而抑制人参病原菌的繁殖袁有
利于吸收营养物质和避免外界不良环境因素的伤害袁
从而提高对人参病害的防治效果遥 有关菌株 杂在鄄缘远
和 杂在鄄远园 的室内及其大田防效等问题有待进一步
研究遥
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
悦葬燥 云酝袁 杂澡藻灶 阅蕴袁 蕴蚤 允袁 载蚤藻 月再援 圆园园愿援 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 泽燥蚤造 遭葬糟贼藻则蚤葬造
凿蚤增藻则泽蚤贼赠 遭赠 怎泽蚤灶早 贼澡藻 员远杂 则砸晕粤 早藻灶藻 造蚤遭则葬则赠援 粤糟贼葬 酝蚤糟则燥遭蚤燥鄄
造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 源愿渊缘冤院 远缘员 原 远缘远 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱曹凤明袁沈德
龙袁 李俊袁谢丙炎援 圆园园愿援 应用多重 孕悦砸鉴定微生物肥料常
用芽孢杆菌援 微生物学报袁 源愿渊缘冤院 远缘员 原 远缘远暂
悦澡藻灶 允栽袁 在澡怎 匀在袁 蕴蚤 月宰援 员怨愿园援 悦澡藻皂蚤糟葬造 糟燥灶贼则燥造 枣燥则 早蚤灶泽藻灶早 则燥燥贼
则燥贼援 允燥则怎灶葬造 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 酝藻凿蚤糟蚤灶葬造 酝葬贼藻则蚤葬造泽 葬灶凿 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 渊员冤院
圆远 原 圆愿 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱陈金堂袁 朱慧贞袁 李柏文援 员怨愿园援 人
参根腐病的药剂防治援 中药材科技袁 渊员冤院 圆远 原 圆愿暂
悦澡藻灶 在再袁 在澡葬灶早 允袁 匀怎葬灶早 阅云援 圆园园猿援 砸藻泽藻葬则糟澡 责则燥早则藻泽泽 燥灶 葬灶贼蚤皂蚤鄄
糟则燥遭蚤葬造 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟 藻灶早蚤灶藻藻则蚤灶早 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 枣燥则 责造葬灶贼
凿蚤泽藻葬泽藻泽 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造援 粤糟贼葬 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 猿猿 渊 圆 冤院
怨苑 原 员园猿 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱陈中义袁 张杰袁 黄大昉援 圆园园猿援 植物
病害生防芽孢杆菌抗菌机制与遗传改良研究援 植物病理学
报袁 猿猿渊圆冤院 怨苑 原 员园猿暂
阅燥灶早 载在袁 悦葬蚤 酝再援 圆园园员援 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 皂葬灶怎葬造 燥枣 糟燥皂皂燥灶 遭葬糟贼藻则蚤葬造
泽赠泽贼藻皂援 月藻蚤躁蚤灶早院 杂糟蚤藻灶糟藻 孕则藻泽泽 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱东秀珠袁 蔡妙
英援 圆园园员援 常见细菌系统鉴定手册援 北京院 科学出版社暂
匀藻 阅援 圆园员园援 酝葬则噪藻贼蚤灶早 泽贼则葬贼藻早蚤藻泽 燥枣 灶燥则贼澡藻葬泽贼 早蚤灶泽藻灶早援 允燥怎则灶葬造 燥枣
栽燥灶早澡怎葬 晕燥则皂葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 猿员渊缘冤院 员愿 原 员怨 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱何
迪援 圆园员园援 东北人参的营销策略研究援 通化师范学院学报袁
猿员渊缘冤院 员愿 原 员怨暂
允葬造藻藻凿 杂袁 粤澡皂葬凿 允杂袁 月葬噪藻则 砸援 员怨愿苑援 砸澡蚤扎燥泽责澡藻则 糟燥皂责藻贼藻灶糟藻 燥枣
栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 澡葬灶蚤葬灶怎皂援 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早赠袁 苑苑渊圆冤院 员愿圆 原 员愿怨
允蚤葬 云粤袁 悦澡藻灶 蕴袁 悦澡藻灶 蕴袁 悦澡藻灶 宰蕴援 陨泽燥造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶
燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡则藻藻 皂葬躁燥则 枣怎灶早葬造 责葬贼澡燥早藻灶泽 燥枣
早则藻藻灶澡燥怎泽藻 皂藻造燥灶援 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 猿苑渊远冤院 缘园缘 原
缘员园 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱贾凤安袁 陈亮袁 陈立袁 陈五岭援 圆园员园援 大
棚甜瓜三种主要真菌病害拮抗细菌的筛选与鉴定援 植物保
护学报袁 猿苑渊远冤院 缘园缘 原 缘员园暂
运造燥藻责责藻则 允宰袁 蕴藻燥灶早 允袁 栽藻蚤灶贼扎藻 酝袁 杂糟澡则燥贼澡 酝晕援 员怨愿园援 耘灶澡葬灶糟藻凿
责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 遭赠 泽蚤凿藻则燥责澡燥则藻泽 责则燥凿怎糟藻凿 遭赠 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 责则燥皂燥鄄
贼蚤灶早 则澡蚤扎燥遭葬糟贼藻则蚤葬援 晕葬贼怎则藻袁 圆愿远院 愿愿缘 原 愿愿远
蕴蚤怎 宰匝袁 酝葬燥 在悦袁 再葬灶早 再匀袁 载蚤藻 月再援 圆园园愿援 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 泽燥蚤造 遭葬糟贼藻鄄
则蚤葬造 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 遭赠 怎泽蚤灶早 贼澡藻 员远杂 则砸晕粤 早藻灶藻 造蚤遭则葬则赠援 粤糟贼葬 酝蚤糟则燥鄄
遭蚤燥造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 源愿渊员园冤院 员猿源源 原 员猿缘园 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱刘玮
琦袁 茆振川袁 杨宇红袁 谢丙炎援 圆园园愿援 应用 员远杂 则砸晕粤 基因
文库技术分析土壤细菌群落的多样性援 微生物学报袁 源愿
渊员园冤院 员猿源源 原 员猿缘园暂
酝葬 云砸袁 载蚤灶早 再在援 员怨愿缘援 杂贼怎凿蚤藻泽 燥灶 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 燥枣 悦赠造蚤灶凿则燥糟葬则责燥灶
凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽 燥枣 早蚤灶泽藻灶早 遭赠 凿葬扎燥皂藻贼援 允燥则怎灶葬造 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 酝藻凿蚤糟蚤灶葬造
酝葬贼藻则蚤葬造泽袁 渊圆冤院 愿 原 员园 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱马凤茹袁 邢云章援
员怨愿缘援 棉隆防治人参锈腐病试验初报援 中药材袁 渊圆冤院 愿 原
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酝葬贼葬则 杂酝袁 耘造鄄运葬扎扎葬扎 杂粤袁 宰葬早蚤澡 耘耘袁 耘造鄄阅蚤憎葬灶赠 粤陨袁 酝燥怎泽贼葬枣葬 匀耘袁
粤遭燥鄄在葬蚤凿 郧粤袁 粤遭凿鄄耘造泽葬造葬皂 匀耘袁 耘造泽葬赠藻凿 耘匀援 圆园园怨援 粤灶贼葬早燥鄄
灶蚤泽贼蚤糟 葬灶凿 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 藻枣枣藻糟贼 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 葬早葬蚤灶泽贼 糟藻则贼葬蚤灶
责造葬灶贼 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早蚤 陨援 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 愿渊员冤院 缘猿 原 远员
匝蚤葬燥 栽酝袁 在澡怎 栽匀袁 蕴蚤 杂允援 圆园员员援 悦燥造燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽
葬藻则怎早蚤灶燥泽葬 在月圆苑 葬灶凿 蚤贼泽 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥灶 澡赠遭则蚤凿 遭葬皂遭燥燥 遭造蚤早澡贼援
允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 猿愿渊圆冤院 员猿猿 原 员猿愿 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤
咱谯天敏袁 朱天辉袁 李姝江援 圆园员员援 铜绿假单胞菌 在月圆苑的定
殖能力及对杂交竹梢枯病的防控作用援 植物保护学报袁 猿愿
渊圆冤院 员猿猿 原 员猿愿暂
匝蚤怎 阅宰援 圆园员园援 悦怎则则藻灶贼 泽贼葬贼怎泽 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 泽贼则葬贼藻早赠 枣燥则 遭蚤燥造燥早蚤鄄
糟葬造 糟燥灶贼则燥造 燥枣 责造葬灶贼 凿蚤泽藻葬泽藻泽 蚤灶 悦澡蚤灶葬援 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 猿远渊源冤院
员缘 原 员愿 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱邱德文援 圆园员园援 我国植物病害生物防
治的现状及发展策略援 植物保护袁 猿远渊源冤院 员缘 原 员愿暂
杂澡葬灶 宰砸袁 蕴蚤 允载袁 蕴蚤怎 匀云援 圆园员园援 杂贼怎凿赠 燥灶 贼澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬糟贼蚤增藻 皂葬贼藻则蚤葬造泽 泽糟则藻藻灶藻凿 遭赠 贼澡藻 枣蚤造贼藻则 责葬责藻则 燥灶 糟燥贼贼燥灶
增藻则贼蚤糟蚤造造蚤怎皂 憎蚤造贼援 悦澡蚤灶藻泽藻 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻 月怎造造藻贼蚤灶袁 圆远
渊员怨冤院 圆愿缘 原 圆愿怨 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱单文荣袁 李俊霞袁 刘花粉援
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