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Behavioral responses of Bemisia tabaci MED to 13 plant volatiles

烟粉虱MED隐种对13种植物挥发性物质的行为反应



全 文 :植物保护学报 Journal of Plant Protection, 2016, 43(1): 105 - 110 DOI: 10􀆰 13802 / j. cnki. zwbhxb. 2016􀆰 01􀆰 015
基金项目:国家自然科学基金(31471773),北京市叶类蔬菜创新团队建设(BLVT⁃13),国家公益性行业(农业)科研专项(2013003019)
∗通讯作者(Author for correspondence), E⁃mail: anthocoridae@ 163. com
收稿日期: 2015 - 10 - 19
烟粉虱MED隐种对 13种植物挥发性物质的行为反应
李  姝1   赵  静1,2   张晓曼1   王文君1   罗  晨1   王  甦1∗
(1.北京市农林科学院植物保护环境保护研究所, 北京 100097; 2.潍坊科技学院, 山东 寿光 262700)
摘要: 为明确烟粉虱 Bemisia tabaci MED隐种对不同植物挥发性物质的行为选择,采用 Y型嗅觉仪
测定了烟粉虱雌、雄成虫对 13 种植物挥发性物质的趋向行为反应。 结果显示,烟粉虱 MED 隐种
雌、雄成虫对不同浓度植物挥发性物质的选择性存在明显差异。 1、0􀆰 01 和 0􀆰 0001 μL / μL 浓度的
芳樟醇、反⁃2⁃己烯醛和桉树脑对烟粉虱 MED隐种雌、雄虫校正反应率均为正值,具显著吸引效果;
而 p⁃伞花烃、月桂烯、3⁃蒈烯、α⁃蒎烯和顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇对雌、雄成虫的校正反应率均为负值,说明其
对烟粉虱 MED隐种雌、雄虫具有不同程度的趋避性。 雌烟粉虱对 0􀆰 0001 μL / μL 浓度桉树脑的选
择率达最大值 70􀆰 30% ,与对照差异显著,具显著吸引作用。 雌、雄烟粉虱对 0􀆰 01 μL / μL 浓度的
顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇的选择率最小,仅为 24􀆰 75%和 27􀆰 03% ,具显著驱避作用。 因此,烟粉虱 MED 隐种
雌、雄成虫对不同浓度植物挥发性物质趋性反应不同,可能是烟粉虱环境适应性的表现。
关键词: 烟粉虱; 挥发性物质; 嗅觉; 趋性行为
Behavioral responses of Bemisia tabaci MED to 13 plant volatiles
Li Shu1   Zhao Jing1,2   Zhang Xiaoman1   Wang Wenjun1   Luo Chen1   Wang Su1∗
(1. Institute of Plant and Environmental Protection, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,
Beijing 100097, China; 2. College of Weifang Science & Technology, Shouguang 262700, Shandong Province, China)
Abstract: In order to evaluate the reactive preference of Bemisia tabaci MED to the volatiles from various
plants, the behavioral response of whitefly adults to volatile odors were observed via a Y⁃type
olfactometer, which was conducted to investigate the repellent effect of 13 volatile odors to B. tabaci. The
results showed that there was significant difference in the orientation rate to different concentrations of
aliphatic compounds between the male and female. The response rates of both B. tabaci females and
males were positive to 1, 0􀆰 01 and 0􀆰 0001 μL / μL of linalool, trans⁃2⁃hexenal, and 1,8⁃cineole, which
showed significant attractive effect. However, the response rates were negative value in all concentrations
of p⁃cymene, myrcene, 3⁃carene, α⁃pinene and cis⁃3⁃hexen⁃1⁃ol, which indicated that they were
repellent to both B. tabaci females and males. It was found that 0􀆰 0001 μL / μL 1,8⁃cineole had the
highest attraction to B. tabaci MED females with the selectivity of 70􀆰 30% . B. tabaci MED females and
males had the lowest selectivity of 24􀆰 75% and 27􀆰 03% to 0􀆰 01 μL / μL cis⁃3⁃hexen⁃1⁃ol, respectively.
B. tabaci MED males and females had different orientational behaviors to different concentrations of plant
volatiles, which might reflect their environmental adaptiveness.
Key words: Bemisia tabaci; volatile; olfaction; behavioral response
    植物挥发性物质给昆虫的寄主选择提供了重要
依据,同时在进化过程中,植物也利用一些挥发性物
质来驱避植食性昆虫。 随着植物化学物质分离和提
纯技术的发展,促进了对植食性昆虫嗅觉及其寄主
植物之间识别机理的研究。 近年来,国内外对植物
挥发性物质的组分、基本特性、释放机制以及昆虫对
植物挥发性物质的接收器官、反应机制和植物挥发
性物质对昆虫行为的作用进行了大量研究(Powell
et al. ,2006;陆宴辉等,2008;Michereff et al. ,2011)。
烟粉虱 Bemisia tabaci (Gennadius)作为一种世
界性重要农业害虫,为复合种,包括至少 31 个形态
上不易鉴别,但是遗传上存在差异的隐种(de Barro
et al. ,2011,刘银泉和刘树生,2012)。 烟粉虱 MED
隐种(原称 Q生物型)于 2003 年在我国云南首次发
现,在多个省份大规模发生,给农业生产造成严重的
经济损失。 烟粉虱 MED隐种比 MEAM1 隐种(原称
B生物型)具有更强的生殖力、更短的发育历期及对
新烟碱类药剂更强的耐受性(Horowitz et al. ,2005;
Karunker et al. ,2008;Rao et al. ,2011)。 随着其入
侵定殖种群增加,逐渐取代 MEAM1 隐种而成为优
势种群(Hu et al. ,2011;Rao et al. ,2011)。 因此,密
切关注烟粉虱 MED隐种对寄主植物的选择机制,对
于研究烟粉虱 MED隐种种群扩散入侵机制及烟粉
虱综合防控技术是非常必要的。
烟粉虱通过取食韧皮部汁液、传播植物病毒等
多种方式为害超过 600 种植物 (罗晨和张芝利,
2000;Pan et al. ,2011)。 尽管寄主植物丰富,但烟
粉虱对不同寄主植物上的取食和产卵有明显的选择
性(林克剑等,2008;周福才等,2008;钟苏婷等,
2009),而且在不同寄主植物上的发育适合度、成虫
存活率也显著不同(郭建英等,2011)。 目前,应用
刺吸电波技术已证实了烟粉虱对寄主植物有选择特
异性和适应性(林克剑等,2007;李晓敏等,2013)。
因此,烟粉虱的寄主选择性、适应性与不同寄主植物
挥发物质差异密切相关。 曹凤勤等(2008)利用 Y
型嗅觉仪试验证明了 1,8⁃桉树脑对烟粉虱 MEAM1
隐种有显著吸引作用,而高浓度的 α⁃蒎烯和顺⁃3⁃己
烯⁃1⁃醇对其有明显的趋避行为。 Bleeker et al.
(2009)通过电生理学和嗅觉行为测定发现野生番
茄中的某些倍半萜烯和单萜类,如姜烯、姜黄烯、
p⁃伞花烃和 α⁃松油烯对烟粉虱 MED 隐种有趋避行
为。 近年来,杜文晓和秦玉川(2014)进一步明确了
烟粉虱 MED隐种头部感器结构;吴帆等(2015)也
深入研究了烟粉虱 MED隐种相关化学感受蛋白,因
此,为进一步深入解析烟粉虱 MED隐种化学感受系
统与入侵地寄主植物挥发性物质的识别结合机制,
本试验应用 Y 型嗅觉仪测定了烟粉虱 MED 隐种
雌、雄成虫对 13 种植物挥发性物质或虫害诱导后气
体的趋性行为反应,以期为明确烟粉虱 MED隐种选
择寄主植物的机理提供基础行为学证据。
1 材料与方法
1􀆰 1 材料
供试昆虫:烟粉虱来自北京农林科学院植物保
护环境保护研究所养虫室,经分子标记(罗晨等,
2002)鉴定为 MED隐种,并在温室内温度 25 ± 3℃、
RH 60% ~80% 、光照 L ∶ D = 15 h ∶ 8 h的条件下,以
普通烟草 Nicotiana tabacum L. (品种为云烟 117)为
寄主进行连代饲养。
试剂: 芳 樟 醇 ( linalool )、 β⁃紫 罗 兰 酮 ( β⁃
lonone)、月桂烯(myrcene)、丁香酚( eugenol)、p⁃伞
花烃 ( p⁃cymene)、壬醛 (1⁃nonanal)、柠檬烯 ( limo⁃
nene )、 3⁃蒈 烯 ( 3⁃carene )、 β⁃石 竹 烯 ( β⁃caryo⁃
phyllene)、α⁃蒎烯(α⁃pinene)、顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇(cis⁃3⁃
hexen⁃1⁃ol)、反⁃2⁃己烯醛( trans⁃2⁃hexenal)、桉树脑
(1,8⁃cineole),纯度 > 97% ,上海百灵威化学技术有
限公司。
仪器:Y 型嗅觉仪由 Y 型无色透明玻璃管构
成,内径 1􀆰 5 cm,两臂各长 10 cm,外加 2 cm 磨口套
管,两臂夹角 60°,Y 型管上方 25 cm 处放有 40 W
日光灯,室内温度保持 25 ± 3℃,管中气体流速 100
mL / min。 每个玻璃臂分别与流量计、味源玻璃容器
和活性碳管等相连。
1􀆰 2 方法
1􀆰 2􀆰 1 挥发性气味物质样品制备
分别将 13 种植物挥发性物质的标准品以石蜡
油稀释至 0􀆰 01、0􀆰 0001 μL / μL 浓度,充分混匀后密
封,放置于 4℃冰箱内储存。 在滤纸上分别滴加
1 μL的纯品、0􀆰 01、0􀆰 0001 μL / μL浓度溶液,以石蜡
油为对照,测定 3 个梯度浓度下烟粉虱 MED 隐种
雌、雄成虫的趋性反应。
1􀆰 2􀆰 2 烟粉虱对植物挥发物质的行为反应测定
Y型嗅觉仪测试前,按照试验设置要求,将味源
置于味源瓶中,然后通气 10 min,使气味充满管道,
以保证测试结果。 分别采集烟粉虱 MED隐种雌、雄
成虫,并饥饿 4 h 后备用。 每次测定接入 1 头成虫
于嗅觉仪 Y型管基部,观察其 3 min内(即从释放口
开始计时到进入两臂的时间)的行为选择反应,当
雌虫越过某臂 1 / 3 处则视为选择,3 min 内不作选
择,则记无反应。 每头烟粉虱只测试 1 次,每测试
10 头后,用 95%乙醇擦洗管的内、外壁,烘干后调换
对称的两臂与味源瓶联接的位置,以消除误差。 具
601 植  物  保  护  学  报 43 卷
有行为选择的有效重复为 60 头。 选择率 =选择臂
虫口数 /总头数 × 100% ,校正反应率 = (处理臂虫
口数 -对照臂虫口数) /总头数 × 100% ,若值为正,
为诱集率,若值为负,则为驱避率。
1􀆰 3 数据分析
试验数据用 SPSS 17􀆰 0 进行统计分析。 采用 χ2
分析法检验烟粉虱 MED隐种雌、雄虫于不同浓度下
在 2 个处理气味源间的趋性选择是否呈假设 H0为
50 ∶ 50 的理论分布,并计算 χ2 值。
图 1 雌、雄烟粉虱MED隐种对 1 μL / μL浓度下不同植物挥发性物质的选择性
Fig. 1 Taxis response of Bemisia tabaci females and males to 1 μL / μL of aliphatic compounds
∗和∗∗表示处理间经 χ2 检验分别在 P < 0􀆰 05 和 P < 0􀆰 01 水平差异显著。 ∗ or ∗∗ indicates significant difference
among different treatments at P < 0􀆰 05 or P < 0􀆰 01 level by χ2 test.  
2 结果与分析
2􀆰 1 1 μL / μL浓度下MED隐种的选择性
烟粉虱 MED隐种雌、雄成虫对不同浓度的挥发
性气味物质选择显著不同(图 1),供试的 13 种物质
在 1 μL / μL浓度时,与对照相比,仅有丁香酚对烟
粉虱 MED隐种雌虫吸引极显著,壬醛对雌虫和月桂
烯对雄虫驱避性极显著(P < 0􀆰 01)。 桉树脑、β⁃石
竹烯对雌虫和 β⁃紫罗兰酮对雄虫吸引性显著,顺⁃3⁃
己烯⁃1⁃醇对雌虫的驱避性显著(P < 0􀆰 05)。 雌、雄
烟粉虱对其余物质选择性差异不显著。
2􀆰 2 0􀆰 01 μL / μL浓度下MED隐种的选择性
烟粉虱 MED 隐种雌、雄成虫对浓度为 0􀆰 01
μL / μL植物挥发性物质的反应相似(图 2)。 桉树
脑、反⁃2⁃己烯醛和芳樟醇对雌、雄烟粉虱 MED 隐种
具有极显著吸引性(P < 0􀆰 01),其中对 0􀆰 01 μL / μL
浓度芳樟醇的选择率达到了 67􀆰 13% 和 60􀆰 89% 。
α⁃蒎烯对雌、雄烟粉虱有强烈的驱避作用,与对照差
异极显著(P < 0􀆰 01),p⁃伞花烃和 3⁃蒈烯对雌虫表
现有强烈的驱避作用,与对照差异极显著 ( P <
0􀆰 01);3⁃蒈烯对雄虫和丁香酚对雌虫表现一定的驱
避作用,与对照差异显著(P < 0􀆰 05)。 雌、雄烟粉虱
对 0􀆰 01 μL / μL 浓度的顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇选择率最小,
仅为 24􀆰 75%和 27􀆰 03% ,具有显著驱避反应。
2􀆰 3 0􀆰 0001 μL / μL浓度下MED隐种的选择性
雌烟粉虱对 0􀆰 0001 μL / μL 浓度桉树脑的选择
率达到最大值,为 70􀆰 30% ,对反⁃2⁃己烯醛的选择率
次之,为 68􀆰 80% ,均与对照差异极显著(P < 0􀆰 01,
图 3)。 烟粉虱 MED 隐种雌、雄成虫对芳樟醇表现
强烈的选择性,与对照差异显著(雌虫:P < 0􀆰 01;雄
虫:P < 0􀆰 05)。 α⁃蒎烯和 p⁃伞花烃对烟粉虱 MED
隐种雌、雄成虫表现强烈的驱避作用,与对照差异极
显著(P < 0􀆰 01);而顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇和 3⁃蒈烯对雌虫
表现出极显著的驱避作用(P < 0􀆰 01),对雄虫的驱
避性显著(P < 0􀆰 05)。
2􀆰 4 烟粉虱MED隐种对 13 种化学成分的反应率
烟粉虱 MED隐种雌、雄成虫对不同浓度的芳樟
醇、反⁃2⁃己烯醛和1,8⁃桉树脑的校正反应率始终为正
值(表 1),说明其在不同浓度下都具有一定的吸引作
用。 而雌、雄成虫对 3 种浓度下p⁃伞花烃、月桂烯、3⁃
蒈烯、α⁃蒎烯和顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇的校正反应率都为负
值,说明其具有不同程度的驱避作用。 其余挥发性物
质只有在特定浓度时对烟粉虱有作用(表 1)。
7011 期 李  姝等: 烟粉虱 MED隐种对 13 种植物挥发性物质的行为反应
图 2 雌、雄烟粉虱MED隐种对 0􀆰 01 μL / μL浓度植物挥发性物质的选择性
Fig. 2 Taxis response of Bemisia tabaci females and males to 0􀆰 01 μL / μL of aliphatic compounds
∗和∗∗表示处理间经 χ2 检验分别在 P < 0􀆰 05 和 P < 0􀆰 01 水平差异显著。 ∗ or ∗∗ indicates significant difference
among different treatments at P < 0􀆰 05 or P < 0􀆰 01 level by χ2 test.
 
图 3 雌、雄烟粉虱MED隐种对 0􀆰 0001 μL / μL浓度植物挥发性物质的选择性
Fig. 3 Taxis response of Bemisia tabaci female and male to 0􀆰 0001 μL / μL of aliphatic compounds
∗和∗∗表示处理间经 χ2 检验分别在 P < 0􀆰 05 和 P < 0􀆰 01 水平差异显著。 ∗ or ∗∗ indicates significant difference
among different treatments at P < 0􀆰 05 or P < 0􀆰 01 level by χ2 test.
 
3 讨论
寄主植物挥发性物质对植食性昆虫在寄主选
择、定向中起着重要作用(钦俊德,1995;安新城和
任顺祥,2007;林克剑等,2007)。 番茄、棉花健康时
释放单萜类和倍半萜类化合物等(如 α⁃蒎烯、月桂
烯、顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇),而受害虫为害时会迅速大量释
放这些化合物及其诱导产生的开环类萜化合物(如
芳樟醇等)、反⁃2⁃己烯醛等(Loughrin et al. ,1994;娄
永根和程家安,2000)。 烟粉虱作为多食性害虫对
寄主植物的选择存在差异,与植物挥发性物质不同
有密切联系(赵艳群等,2012)。 曹凤勤等(2008)认
为番茄植株特有的挥发性香味物质,如 1,8⁃桉树
脑、柠檬烯、月桂烯对烟粉虱 MEAM1 隐种有吸引作
用,但涂洪涛(2014)认为 β⁃月桂烯和柠檬烯对烟粉
虱 MED隐种有驱避效果,驱避率和浓度呈正相关。
801 植  物  保  护  学  报 43 卷
      表 1 烟粉虱MED隐种对不同浓度的 13 种挥发性物质的校正反应率
Table 1 The response rates of Bemisia tabaci females and males to different concentrations of aliphatic compounds %
化学成分
Aliphatic compound
1 μL / μL 0􀆰 01 μL / μL 0􀆰 0001 μL / μL

Female

Male

Female

Male

Female

Male
芳樟醇 Linalool 17. 0 ± 2. 6 10. 4 ± 3. 7 34. 6 ± 3. 2 20. 8 ± 4. 7 25. 7 ± 3. 3 24. 5 ± 8. 3
β⁃紫罗兰酮 β⁃lonone 11. 3 ± 1. 2 27. 1 ± 6. 3 - 9. 1 ± 2. 3 11. 7 ± 2. 4 - 11. 5 ± 6. 2 - 4. 2 ± 0. 9
月桂烯 Myrcene - 7. 1 ± 0. 8 - 30. 0 ± 1. 9 - 8. 5 ± 3. 2 - 32. 7 ± 23. 5 - 21. 4 ± 9. 3 - 15. 0 ± 6. 0
丁香酚 Eugenol 40. 2 ± 2. 6 20. 6 ± 2. 8 - 14. 8 ± 12. 9 9. 7 ± 4. 5 13. 2 ± 10. 3 2. 6 ± 8. 6
p⁃伞花烃 p⁃cymene - 11. 6 ± 1. 8 - 18. 3 ± 1. 6 - 41. 0 ± 3. 3 - 21. 9 ± 4. 2 - 32. 2 ± 2. 4 - 30. 1 ± 6. 4
壬醛 1⁃nonanal - 37. 3 ± 2. 0 - 13. 9 ± 2. 0 9. 9 ± 6. 8 15. 9 ± 5. 2 - 13. 5 ± 1. 6 18. 7 ± 7. 4
柠檬烯 Limonene - 7. 0 ± 5. 0 13. 0 ± 1. 9 - 5. 5 ± 3. 1 - 12. 7 ± 4. 4 - 11. 8 ± 2. 9 - 12. 2 ± 5. 9
3⁃蒈烯 3⁃carene - 13. 1 ± 1. 0 - 10. 6 ± 3. 6 - 30. 9 ± 4. 6 - 27. 2 ± 2. 5 - 29. 5 ± 1. 6 - 16. 0 ± 5. 8
β⁃石竹烯 β⁃caryophyllene 28. 0 ± 4. 0 - 14. 8 ± 0. 7 - 10. 2 ± 3. 7 - 15. 4 ± 4. 9 - 10. 5 ± 14. 1 7. 3 ± 2. 5
α⁃蒎烯 α⁃pinene - 10. 5 ± 4. 7 - 14. 0 ± 0. 8 - 47. 2 ± 3. 8 - 35. 3 ± 8. 8 - 28. 2 ± 1. 8 - 37. 0 ± 5. 1
顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇 Cis⁃3⁃hexen⁃1⁃ol - 28. 8 ± 4. 0 - 20. 4 ± 3. 0 - 50. 9 ± 3. 8 - 45. 8 ± 3. 8 - 46. 0 ± 6. 1 - 28. 5 ± 0. 5
反⁃2⁃己烯醛 Trans⁃2⁃hexenal 18. 1 ± 6. 4 13. 0 ± 1. 0 32. 3 ± 3. 0 30. 8 ± 4. 8 36. 0 ± 4. 4 17. 3 ± 8. 4
1,8⁃桉树脑 1,8⁃cineole 19. 9 ± 3. 0 17. 5 ± 1. 1 26. 0 ± 4. 3 34. 3 ± 3. 7 40. 6 ± 12. 8 19. 0 ± 12. 5
    表中数据为平均数 ±标准差。 正值代表诱集率;负值代表驱避率。 Data in the table are mean ± SD. Positive value indicates
trapping index, and negative value indicates avoidance index.
本试验也证实月桂烯对烟粉虱 MED 隐种有一定驱
避作用,而柠檬烯与对照表现不显著,但从校正反应
率来看,其对雄虫在高浓度时略有引诱作用,而随浓
度降低,对雌、雄虫略有驱避效果。
曹凤勤等(2008)研究发现顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇、α⁃蒎
烯与烷烃类化合物十二烷在高浓度(0􀆰 1 和 0􀆰 01
μL / μL)时,对烟粉虱 MEAM1 隐种雌成虫有较强的
排斥作用,在低浓度下则没有任何作用。 而本研究
中,顺⁃3⁃己烯⁃1⁃醇对 MED隐种始终具有排斥作用。
赵艳群等(2012)认为 3⁃蒈烯和 β⁃石竹烯对 MEAM1
隐种的驱避性较其它萜类强,这与本试验结果一致。
吴帆等(2015)报道 3⁃蒈烯与 1⁃NPN 竞争结合 MED
隐种 BtCSP1 重组蛋白具有较强的竞争作用,证明了
烟粉虱对该物质的驱避行为机制。
本研究中 β⁃紫罗兰酮、丁香酚、壬醛、石竹烯不
同浓度下对雌、雄烟粉虱趋性反应不同,这可能与昆
虫通过不同浓度区别不同植物或者植物生理状态有
关(赵艳群等,2012)。 如不同植物品种、植物健康
或受损害状态所释放的挥发性物质浓度不同,昆虫
可以通过浓度高低来判断,并用于选择寄主,这可能
也是烟粉虱的选择特异性和环境适应性的表现。
值得注意的是,大多数利用嗅觉仪研究昆虫对
植物气味或其它挥发性物质的趋性反应,仅测试雌
虫的选择性。 在本研究中,雌、雄烟粉虱对植物挥发
性气体的选择性存在明显差异,具体作用机制还需
要进一步探讨。
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