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Resistance analysis of Lilium Oriental to bulb rot

东方百合对茎腐病的抗性分析



全 文 :第 源员 卷摇 第 源 期
圆园员源 年 愿 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 源
粤怎早援 摇 圆园员源

基金项目院 国家自然科学基金渊猿员员远园员苑远袁猿员圆远园猿员源冤袁江西省自然科学基金渊圆园员园郧在晕园园猿愿冤袁江西省教育厅重点项目渊郧允允员员园员愿冤
作者简介院 郑思乡袁男袁员怨远远年生袁研究员袁研究方向为东方百合种球国产化袁 耘鄄皂葬蚤造院 扎澡藻灶早择蚤葬灶造蚤葬灶岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 泽责远怨苑源岳 员远猿援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员源 原 园员 原 园远
东方百合对茎腐病的抗性分析
郑思乡员 摇 魏志刚圆 摇 毛莎莎员 摇 吴龙云员 摇 胡颂平圆鄢
渊员援株洲市农业科学研究所袁 多用途名贵花卉育种湖南省工程实验室袁 湖南 株洲 源员圆园园苑曰
圆援江西农业大学生物科学与工程学院袁 南昌 猿猿园园源缘冤
摘要院 为探明东方百合茎腐病的发病机制及抗病机理袁以湖南株洲地区的东方百合为材料袁分别采
用升汞消毒尧刺伤浸苗接种尧超声波甲醇浸提尧混液平板等方法对其病原菌进行了分离尧抗病性鉴
定尧皂苷含量及活性测定遥 结果显示院尖孢镰刀菌 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 为湖南株洲地区东方百合茎
腐病病原菌曰猿园 份自主培育的东方百合材料通过聚类分析可划分为 猿 类袁包含抗病材料 猿 份尧中抗
材料 员远 份尧感病材料 员员 份袁其中 赠尧在晕鄄员圆 和 在晕鄄圆苑 的抗病指数都在 远缘援 园园 以上曰抗病材料的总皂
苷含量明显高于感病材料袁且皂苷含量与抗性水平之间极显著相关曰总皂苷含量为 员援 员怨源 皂早 辕 皂蕴的
提取液对茎腐病病原菌菌丝生长的抑制率为 圆怨援 猿怨豫 遥 表明 赠尧在晕鄄员圆 和 在晕鄄圆苑 具有较好的开发潜
力曰总皂苷含量与东方百合抗茎腐病水平密切相关袁可作为大规模筛选抗病材料的一个重要指标遥
关键词院 东方百合曰 茎腐病曰 尖孢镰刀菌曰 抗性鉴定曰 皂苷含量
砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 贼燥 遭怎造遭 则燥贼
在澡藻灶早 杂蚤曾蚤葬灶早员 摇 宰藻蚤 在澡蚤早葬灶早圆 摇 酝葬燥 杂澡葬泽澡葬员 摇 宰怎 蕴燥灶早赠怎灶员 摇 匀怎 杂燥灶早责蚤灶早圆鄢
渊员援 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 在澡怎扎澡燥怎 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀怎灶葬灶 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 酝怎造贼蚤责怎则责燥泽藻 砸葬则藻 云造燥憎藻则泽
月则藻藻凿蚤灶早袁 在澡怎扎澡燥怎 源员圆园园苑袁 匀怎灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰 圆援 悦燥造造藻早藻 燥枣 月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 月蚤燥藻灶早蚤灶藻藻则蚤灶早袁
允蚤葬灶早曾蚤 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶糟澡葬灶早 猿猿园园源缘袁 允蚤葬灶早曾蚤 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶藻泽蚤泽 葬灶凿 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 贼燥 遭怎造遭 则燥贼袁
蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶袁 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻袁 凿藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼 葬灶凿 葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎藻则藻
糟葬则则蚤藻凿 燥怎贼 遭葬泽藻凿 燥灶 皂葬贼藻则蚤葬造泽 枣则燥皂 在澡怎扎澡燥怎袁 匀怎灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 怎泽蚤灶早 贼澡藻 皂藻贼澡燥凿泽 燥枣 匀早悦造圆 凿蚤泽蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶袁泽贼葬遭遭蚤灶早 葬灶凿 泽燥葬噪蚤灶早 泽藻藻凿造蚤灶早泽袁 怎造贼则葬泽燥灶蚤糟 皂藻贼澡葬灶燥造 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 葬灶凿 皂蚤曾藻凿 造蚤择怎蚤凿 责造葬贼藻 糟怎造贼怎则藻袁
则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 憎葬泽 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 憎澡蚤糟澡 糟葬怎泽藻凿 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造
遭怎造遭 则燥贼 蚤灶 贼澡藻 葬则藻葬 燥枣 在澡怎扎澡燥怎援 粤糟糟燥则凿蚤灶早 贼燥 贼澡藻 糟造怎泽贼藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽袁 猿园 泽藻造枣鄄糟怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶 皂葬贼藻则蚤葬造泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂
韵则蚤藻灶贼葬造 糟燥怎造凿 遭藻 凿蚤增蚤凿藻凿 蚤灶贼燥 贼澡则藻藻 早则燥怎责泽袁 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 贼澡则藻藻 则藻泽蚤泽贼葬灶贼袁 员远 皂燥凿藻则葬贼藻造赠 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 葬灶凿 员员
泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 皂葬贼藻则蚤葬造泽曰 贼澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶凿藻曾 燥枣 赠袁 在晕鄄员圆 葬灶凿 在晕鄄圆苑 藻曾糟藻藻凿藻凿 远缘援 园园援 栽澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 贼燥贼葬造
泽葬责燥灶蚤灶袁 憎澡蚤糟澡 泽澡燥憎藻凿 葬 澡蚤早澡造赠 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 造藻增藻造袁 憎葬泽 燥遭增蚤燥怎泽造赠 澡蚤早澡藻则 蚤灶
则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂葬贼藻则蚤葬造泽 贼澡葬灶 贼澡葬贼 蚤灶 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 皂葬贼藻则蚤葬造泽援 栽澡藻 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 燥枣 贼燥贼葬造 泽葬责燥灶蚤灶 糟燥怎造凿 蚤灶澡蚤遭蚤贼
贼澡藻 皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶曰 贼澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 则藻葬糟澡藻凿 圆怨援 猿怨豫 葬贼 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 员援 员怨源 皂早 辕
皂蕴援 栽澡藻 赠袁 在晕鄄员圆 葬灶凿 在晕鄄圆苑 澡葬凿 早燥燥凿 责燥贼藻灶贼蚤葬造 枣燥则 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 葬灶凿 贼燥贼葬造 泽葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼 憎葬泽 糟造燥泽藻造赠
则藻造葬贼藻凿 贼燥 贼澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 造藻增藻造 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 贼燥 遭怎造遭 则燥贼袁 憎澡蚤糟澡 糟燥怎造凿 遭藻 怎泽藻凿 葬泽 葬灶 蚤皂责燥则贼葬灶贼
蚤灶凿蚤糟葬贼燥则 枣燥则 造葬则早藻鄄泽糟葬造藻 泽糟则藻藻灶蚤灶早 燥枣 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂葬贼藻则蚤葬造泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造曰 遭怎造遭 则燥贼曰 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂曰 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 泽葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼
摇 摇 百合鳞茎腐烂病袁简称茎腐病袁又称根腐病尧枯
萎病袁是多年生草本植物百合在生产栽培中最为严
重的病害之一袁发病率一般为 缘豫 耀 猿园豫 咱员暂 袁个别地
区为 源园豫 耀缘园豫 袁多年连茬种植而未能有效预防控
制的田地更是高达 苑园豫以上袁造成较大的经济损
失咱圆暂 遥 近年来袁作为观赏百合常见栽培类型的东方
百合 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 澡赠遭则蚤凿泽袁因其花艳尧味香和色美
等突出特点而倍受欢迎袁市场需求量也日益急
增咱猿暂 遥 然而袁国内外调查研究一致表明东方百合抗
茎腐病的能力普遍较差袁远远低于亚洲百合 蕴援 粤泽蚤葬贼蚤糟
澡赠遭则蚤凿泽和铁炮百合 蕴援 造燥灶早蚤枣造燥则怎皂 澡赠遭则蚤凿泽咱源 原 缘暂 遥 当前
国内外市场上销售的东方百合系列种球也多为中抗
和感病品种咱远暂 遥 目前袁我国正在进行东方百合种球
国产化的全面研究袁以期通过自主研发的方式尽快
摆脱百合种球严重依赖进口的不利局面咱苑暂 袁而茎腐
病的控制与防治是东方百合种球国产化研究中的关
键问题袁也是产业发展中的重大技术瓶颈咱圆暂 遥
学术界普遍认为解决病害问题的最佳方法是选
育抗病品种袁而抗病育种的基础正是病原物研究和
抗病性鉴定咱愿 原 怨暂 遥 李诚和李俊杰咱员园暂研究证明甘肃
省兰州尧平凉等地百合枯萎病系尖孢镰刀菌 云怎泽葬则蚤鄄
怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 杂糟澡造藻糟澡贼尧串珠镰刀菌 云援 皂燥灶蚤造蚤枣燥则皂藻
杂澡藻造凿燥灶和茄病镰刀菌 云援 泽燥造葬灶蚤 渊酝葬则贼援 冤杂葬糟糟援侵染所
致曰尚巧霞等咱员员暂发现圆弧青霉 孕藻灶蚤糟蚤造造蚤怎皂 糟赠糟造燥责蚤怎皂
和匍枝根霉 砸澡蚤扎燥责怎泽 泽贼燥造燥灶蚤枣藻则 是引起北京地区百合
贮藏期鳞茎发生腐烂的主要致病菌曰孕则葬凿燥泽鄄蕴蚤早藻则燥
等咱员圆暂报道引起西班牙百合枯萎病的病原菌为尖孢
镰刀菌和层出镰刀菌 云援 责则燥造蚤枣藻则葬贼怎皂曰杨秀梅等咱员猿暂研
究确定云南省嵩明地区百合枯萎病的病原菌为尖孢
镰刀菌遥 可见袁国内外不同地区有关百合茎腐病病
原菌的报道并不完全一致袁表明不同地区不同类别的
材料之间病原菌有所差异袁因此有地域针对性地开展
病原菌研究是奠定某一地区抗病育种工作的基础遥
目前袁百合茎腐病抗性鉴定尚无统一的接种方
法和评价标准遥 而不同的接种方法产生的效果不一
样袁因此确立一种高效尧简便和可行的接种方法对于
开展抗病性鉴定十分重要袁尤其是在进行大批量鉴
定时具有明显优势咱员源暂 遥 杨秀梅等咱缘 原 远暂采用包埋鳞
片接种法对 源员 份不同的百合种质资源进行了抗性
鉴定曰彭绿春等咱员缘暂首次开展了应用百合尖孢镰刀菌
培养滤液室内鉴定组培苗抗病性的研究曰马璐琳
等咱愿暂采用根部切伤接孢法对 圆园 份百合资源进行了
抗性鉴定曰张丽丽等咱员远暂也以鳞片接种法进行了 怨 种
百合的抗性鉴定袁并对影响发病的一些因素进行了
初步研究遥 但这些抗性鉴定的材料都是商业品种或
者野生种质资源袁未涉及自主培育的材料袁更没有关
于新材料抗病性的报道遥 此外袁目前关于植物体内
皂苷有抑菌活性的报道较多袁但多集中在药用价值
开发和生物防治方面咱员苑 原 员怨暂 袁真正应用到宿主植物抗
病育种等实践中的较少袁有关宿主体内皂苷和具体
抗病性关联的报道更少遥
本研究利用从湖南株洲地区东方百合茎腐病组
织材料中分离得到的病原菌菌株袁对自主培育的 猿园
份东方百合材料进行抗病性鉴定袁同时分析其总皂
苷含量与抗性水平的相关性袁初步测定总皂苷提取
液的抑菌活性袁以期筛选出不同抗性水平的种质资
源袁为抗病育种开发和抗病机理探究奠定基础遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试植株院病原分离材料为东方百合茎腐病种
球袁抗性鉴定材料为实验室通过倍性育种及远缘杂
交等技术自主培育的 猿园 份东方百合材料袁均由株洲
市农业科学研究所植物组织培养实验室提供遥
试剂院薯蓣皂苷对照品渊纯度逸怨愿豫冤袁南京春
秋生物工程有限公司曰二甲基亚砜渊凿蚤皂藻贼澡赠造 泽怎造枣燥曾鄄
蚤凿藻袁 阅酝杂韵冤袁美国 杂蚤早皂葬鄄粤造凿则蚤糟澡 公司曰其余试剂均
为国产分析纯遥
培养基院马铃薯蔗糖琼脂培养基渊责燥贼葬贼燥 泽怎糟则燥泽藻
葬早葬则袁 孕杂粤冤院圆园园 早马铃薯尧圆园 早 蔗糖尧圆园 早 琼脂粉袁蒸
馏水定容至 员 蕴曰马铃薯蔗糖培养基渊责燥贼葬贼燥 泽怎糟则燥泽藻袁
孕杂冤院不加琼脂粉袁其它操作同 孕杂粤曰土豆泥培养基院
将去皮马铃薯切块后加适量蒸馏水袁员圆员 益下高压
灭菌 圆缘 皂蚤灶曰米饭培养基院将常规煮熟的米饭混入少
量蒸馏水袁员圆员 益下高压灭菌 圆缘 皂蚤灶遥
仪器院哉月员园园蚤 生物显微镜袁重庆澳浦光电技术
有限公司曰栽哉鄄员怨园园 紫外可见分光光度计袁北京普析
仪器有限责任公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 病原菌分离鉴定
对湖南株洲地区东方百合茎腐病进行观察描
述袁并采集发病症状典型的材料带回实验室以备病
原菌分离遥
分离纯化院采用 苑缘豫酒精 猿园 泽尧无菌水洗 员 次尧
园援 员豫升汞 员缘 皂蚤灶尧无菌水洗 猿 次的方案进行表面消
毒处理袁分离转接得其菌株遥 将获得的菌株制成一
定浓度的孢子悬浮液袁采用稀释涂布法咱圆园暂获取单孢
子培养物袁后转接至 孕杂粤 培养基上袁圆缘 益恒温光照
园猿源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
培养遥
特征描述院于 圆缘 益恒温光照培养袁观察菌株在
不同培养基上的菌落形状尧表面湿度尧正反颜色尧边
缘形态尧有无渗出物等袁记录菌落生长速率尧菌液浑
浊度和培养基颜色变化等曰取菌丝制片袁在光学显微
镜下观察菌丝形态尧孢子形状尧产孢细胞及其它特殊
结构等遥
致病性测定院用无菌水洗刷已经培养了 员园 凿 左
右的菌株制成浓度约为 员援 缘 伊 员园远 个 辕 皂蕴 的孢子悬
浮液遥 取百合幼苗和已生长 圆 年的球苗若干袁各分
为试验组和对照组袁分别接种孢子悬浮液和无菌水袁
栽种在细砂土中袁前 源 凿 薄膜覆盖保湿袁之后进行日
常管理并观察记录遥 以发病率为指标进行比较袁发
病率 越发病苗数 辕总苗数 伊 员园园豫 遥 最后袁将致病性
试验中发病的材料按照之前分离病原菌时的操作进
行表面消毒袁再次分离出病原菌袁并将其与之前分离
获得的菌株进行比对鉴定遥
陨栽杂序列分析院应用真菌通用引物 陨栽杂员渊缘忆鄄栽悦鄄
悦郧栽粤郧郧栽郧粤粤悦悦栽郧悦郧郧鄄猿忆冤和 陨栽杂源 渊缘忆鄄栽悦悦栽悦悦郧鄄
悦栽栽粤栽栽郧粤栽粤栽郧悦鄄猿忆冤对病原菌 云员 进行 则阅晕粤鄄陨栽杂
的 孕悦砸扩增袁测定其 陨栽杂序列遥 在 月蕴粤杂栽中搜索比
对袁选取数据库中 员园 株病原菌在 酝藻早葬 远援 园 软件里
以 灶藻蚤早澡遭燥则 躁燥蚤灶蚤灶早法重抽样渊遭燥燥贼泽贼则葬责 贼藻泽贼冤员 园园园 次
计算遗传距离袁并构建系统发育树遥 根据各项试验
指标袁参照魏景超咱圆员暂和 月燥燥贼澡咱圆圆暂的方法进行分类
鉴定遥
员援 圆援 圆 不同接种方法比较
共设 苑 种方法进行接种袁分别为带菌料栽培接
种院菌丝块拌接到栽培料中作接种曰孢棉直接接种院
浸湿孢子悬浮液的棉花直接包裹在幼苗鳞茎周围作
接种曰刺伤注射接种院刺伤幼苗基部再注入少许孢子
悬浮液作接种曰刺伤浸苗接种院刺伤幼苗基部再浸入
孢子悬浮液中 猿园 皂蚤灶 作接种曰离体鳞片刺浸接种院
刺伤离体鳞片再浸入孢子悬浮液中 圆园 皂蚤灶 作接种曰
刺伤注射接种渊小球苗冤院以生长 员 年的小球苗作接
种材料袁其它操作同刺伤注射接种法曰带菌料栽培 垣
刺伤注射接种院圆 种方法联合处理遥 除刺伤注射接
种渊小球苗冤处理外袁其余各接种法都采用同一类型
组培苗作接种材料袁各设相应对照组遥 除离体鳞片
刺浸接种的材料放入铺有湿润滤纸的平皿中 圆缘 益
恒温培养外袁其它接种材料都统一置于玻璃温室中
按常规栽培进行管理遥 最终以发病率和发病程度为
指标进行观察统计遥 发病程度按发病腐烂情况进行
直观定义院幼苗大面积严重腐烂或鳞片散裂时为
愿园豫以上曰大多数腐烂时为 远园豫 耀 愿园豫 曰半数腐烂
时为 源园豫 耀 远园豫 曰少数腐烂时为 圆园豫 耀 源园豫 曰略微
或不明显腐烂时为 圆园豫以下遥
员援 圆援 猿 材料抗病性鉴定
试验于 圆园员圆 年 员园 月要圆园员猿 年 缘 月在株洲市农
业科学研究所玻璃温室进行袁供试材料 猿园 份袁每份
取 猿园 株作鉴定遥 取长出 圆 耀 猿 叶的百合幼苗袁接
种病原菌后栽种到细砂基质中袁保温保湿遥 员 个月
后取出袁观察记录其发病情况遥 依据病况确定发病
等级袁计算病情指数和抗病指数遥 病情指数 越
咱 移 渊病级苗数 伊病级数值冤 辕 渊接种苗数 伊最高病
级数值冤暂 伊 员园园曰抗病指数 越 员园园 原病情指数遥 使用
阅孕杂 苑援 园缘 软件进行聚类分析袁将测定出的各材料抗
性指数作标准化转换袁聚类距离采用欧氏距离袁聚类
方法采用离差平方和法袁构建聚类分析图遥 最终选
用合适的分割距离将 猿园 份材料划分为不同抗病
类型咱圆猿暂 遥
幼苗病情分级采用 远 级标准遥 园 级院不发病袁无
任何病迹曰员 级院叶尖枯化或叶片失绿袁鳞茎未见明
显腐烂曰圆 级院叶片枯化或者失绿袁鳞茎轻微腐烂曰猿
级院叶片枯化袁鳞茎明显腐烂曰源 级院叶片枯死袁鳞茎
严重腐烂曰缘 级院叶片枯死袁鳞茎完全腐烂袁全株
死亡遥
员援 圆援 源 总皂苷含量测定
称取薯蓣皂苷对照品 缘援 园 皂早袁用甲醇溶解并定
容至 缘园 皂蕴袁即为 员园园 皂早 辕 蕴 的标准对照品溶液遥 剥
取百合小鳞片袁清洗干净后于 愿园 益烘干袁然后研磨
成粉状袁称取 员 早袁加 圆园 皂蕴甲醇超声波浸提 员 澡袁过滤
除去沉淀遥 所得滤液 愿园 益烘干甲醇袁再加入 员园 皂蕴
蒸馏水溶解袁并用等体积石油醚萃取袁萃至醚层无
色袁弃醚层遥 水层继续用等体积水饱和正丁醇萃取袁
萃至醇层无色为止袁弃水层遥 水饱和正丁醇层液用
旋转蒸发仪 愿园 益旋干袁最终加 圆园 皂蕴甲醇溶解即为
样品总皂苷提取液咱圆源 原 圆缘暂 遥
各吸取 园援 源尧园援 远尧园援 愿尧员援 园尧员援 圆尧员援 远尧圆援 园 皂蕴 标
准品溶液到试管中袁愿园 益烘干甲醇袁冷却后先加入
缘豫香草醛 原冰醋酸溶液 园援 圆 皂蕴袁再加入高氯酸
园援 愿 皂蕴袁混匀后盖塞袁于 远园益恒温水浴 圆园皂蚤灶遥 取出
后立即放入冰箱中冷却 缘 皂蚤灶袁再精确加入冰醋酸
缘 皂蕴袁摇匀袁静置 员园 皂蚤灶遥 以试剂空白作对照袁缘源园 灶皂
下测定各标准品溶液的吸光度咱圆缘 原 圆远暂 遥 以皂苷质量
为横坐标袁吸光度为纵坐标袁绘制标准曲线遥 量取一
定量的样品提取液袁按上述操作测定其吸光度袁并依
据标准曲线计算其皂苷含量遥
员猿源源 期 郑思乡等院 东方百合对茎腐病的抗性分析
员援 圆援 缘 总皂苷提取液活性测定
取总皂苷提取液袁于 愿园 益烘干甲醇袁加一定量
园郾 员豫 阅酝杂韵 溶液溶解后袁混合到 孕杂粤 培养基中遥
经高温灭菌后倒平板制成含皂苷液平板袁其总皂苷
含量为 员援 员怨源 皂早 辕 皂蕴袁平板中央接种病原菌菌块遥
混合同等量 园援 员豫 阅酝杂韵溶液的 孕杂粤平板做对照处
理接菌袁圆愿 益恒温培养 猿 凿后袁用十字交叉法测量菌
落直径遥
员援 猿 数据分析
采用 阅孕杂 苑援 园缘 软件进行 猿园 份材料的抗病性聚
类分析袁应用最小显著差异法渊蕴杂阅冤进行不同材料皂
苷含量的差异显著性检验袁使用 杂孕杂杂 员怨援 园 软件对材
料抗病指数和皂苷含量进行皮尔逊相关性分析遥
圆 结果与分析
圆援 员 鳞茎腐烂病症状
百合在其生长的任一阶段都有可能感染鳞茎腐
烂病遥 该病病原菌从百合的根部或者鳞茎基部通过
伤口或者无伤口侵入袁而后沿植株维管束逐渐向上
端侵染发展袁最终导致植株根部和鳞茎部变褐腐烂袁
茎杆内部维管束充菌褐变渊图 员鄄粤冤袁叶部逐渐黄尖尧
枯萎或变紫渊图 员鄄月冤遥 病症严重时袁植株叶片完全
枯萎袁茎杆由基部枯断袁根系腐烂脱离鳞茎袁鳞茎部
内外层鳞片的基盘处严重腐烂遥 空气湿度较大时袁
鳞茎近地病部可见明显的白色至粉红色菌丝团
渊图 员鄄悦冤遥
图 员 湖南株洲地区东方百合茎腐病病症
云蚤早援 员 杂赠皂责贼燥皂泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 遭怎造遭 则燥贼 蚤灶 在澡怎扎澡燥怎袁 匀怎灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻
摇 摇 粤院 矮化变紫曰 月曰 叶尖枯黄曰 悦院 基部菌丝遥 粤院 阅憎葬则枣蚤灶早 葬灶凿 贼怎则灶蚤灶早 责怎则责造藻曰 月院 造藻葬枣 赠藻造造燥憎蚤灶早曰 悦院 遭葬泽葬造 皂赠糟藻造蚤怎皂援
圆援 圆 病原菌分离鉴定
圆援 圆援 员 培养特征
单孢分离后袁最终获得一株丝状真菌的纯培养
物袁命名为 云员遥 在 孕杂粤平板上菌落圆整袁边缘平齐袁
绒毛状袁洁白丰厚袁气生菌丝发达袁正面颜色白里偏
粉红袁反面粉红至紫红色袁偶见同心环曰土豆泥培养
基上培养初期菌丝较白袁后期边缘菌丝生长处出现
粉红色曰米饭培养基上培养初期菌丝纯白袁后逐渐粉
红化袁最终菌丝在培养基上全部长满袁整体呈白中透
粉红色曰孕杂液体培养基上菌液初期浊白色袁后逐渐
粉红化袁最终呈现为明亮粉红色袁整体浑浊袁瓶底见
大量的絮状沉淀遥
菌株 云员 在 孕杂粤平板上培养 猿 凿 后菌落直径可
达 圆援 怨园 耀 猿援 猿园 糟皂袁平均约 猿援 员猿 糟皂曰至 怨 凿 时菌落直
径为 愿援 源园 耀 怨援 园缘 糟皂袁平均约 愿援 远圆 糟皂遥 将连续观察
的菌落生长结果做成线性方程袁发现该菌菌丝的平
均生长速度约为 怨援 员 糟皂 辕 凿遥
圆援 圆援 圆 形态特征
菌丝有隔膜袁光滑平整袁多见分枝曰小型分生孢
子椭圆形或卵圆形袁数目极多袁多数无隔袁少数有 员
隔袁大小为 缘援 园愿 耀 怨援 愿远 滋皂 伊 员援 缘苑 耀 源援 圆源 滋皂曰大型
分生孢子弯刀型袁多数两头较尖袁数目相对较少袁一
般猿 耀缘隔袁大小为 员园援 园源 耀源愿援 苑苑 滋皂 伊圆援 猿圆 耀源援 圆愿 滋皂曰
产孢结构为单瓶梗袁顶生孢子袁培养初期见大量小型
分生孢子假头状着生曰厚垣孢子圆球形袁顶生或间
生袁偶见 圆 耀 猿 个并列串生袁边缘较为光滑曰未见该菌
有性阶段渊图 圆冤遥
圆援 圆援 猿 致病性结果
以百合幼苗和球苗为接种材料袁采用刺伤注入
孢子悬浮液的方法接种后袁幼苗组于第 苑 天袁球苗组
于第 员缘 天发现接孢组发病率皆为 员园园豫 袁而对照组
均未明显发病遥 将致病性试验中的发病材料进行再
次分离病原菌袁发现培养 猿 凿 后袁个别外植体上有菌
丝生出袁缘 凿后基本上都可见菌遥 经分离纯化后袁发
现其菌落特征尧菌丝形态尧孢子形状尧培养色泽等与
初次分离获得的菌株十分相符袁从形态学上认为二
者属于同一菌种遥
圆援 圆援 源 分子鉴定结果
病原菌 云员 进行 则阅晕粤鄄陨栽杂 的 孕悦砸扩增后袁最终
获得一条 缘猿猿 遭责的序列片段遥在月蕴粤杂栽中搜索比
圆猿源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
图 圆 东方百合茎腐病病原菌 云员 的形态特征
云蚤早援 圆 栽澡藻 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 云员 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 遭怎造遭 则燥贼
摇 摇 粤院 小型分生孢子曰 月院 大型分生孢子曰 悦院 厚垣孢子遥 粤院 酝蚤糟则燥糟燥灶蚤凿蚤怎皂曰 月院 皂葬糟则燥糟燥灶蚤凿蚤怎皂曰 悦院 糟澡造葬皂赠凿燥泽责燥则藻援
对发现袁该菌株与 圆 株尖孢镰刀菌渊 允晕源园园苑员缘援 员 和
运云苑缘员愿苑猿援 员冤同源性达 怨怨豫 遥 系统发育树分析结果
表明袁分离得到的菌株与尖孢镰刀菌亲缘关系最近
渊图 猿冤遥 综合上述各种分析结果袁判断从东方百合
茎腐鳞片上分离得到的菌株为尖孢镰刀菌 云怎泽葬则蚤怎皂
燥曾赠泽责燥则怎皂袁同时依据科赫法则的 源 步流程袁判定该菌
株为东方百合茎腐病病原菌遥
图 猿 基于 陨栽杂序列构建的东方百合茎腐病病原菌菌株 云员 与相关真菌的系统发育树
云蚤早援 猿 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 遭葬泽藻凿 燥灶 陨栽杂 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 云员 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 遭怎造遭 则燥贼 葬灶凿 则藻造葬贼藻凿 枣怎灶早蚤
圆援 猿 不同接种方法比较结果
不同接种方法产生的接种效果不同袁刺伤注射
法接种的效果最好袁发病率达 员园园豫 袁发病程度为
怨园豫 曰其次是带菌料和刺伤注射联合接种法袁发病率
达 员园园豫 袁发病程度为 愿园豫 曰再次是刺伤浸苗接种
法袁发病率达 员园园豫 袁发病程度为 苑园豫 曰其余 源 种方
法效果较差袁孢棉直接接种法和刺伤注射接种法
渊小球苗冤发病程度仅为 员缘豫和 缘园豫 袁带菌料栽培
接种未发现发病株袁离体鳞片刺浸接种法无法识别
发病情况袁均不能满足抗性鉴定的要求遥 综合比较
后确定使用刺伤浸苗法进行 猿园 份自主培育材料的
抗病性鉴定遥
圆援 源 材料抗性鉴定结果
猿园 份自主培育材料抗镰刀菌茎腐病能力不同袁
最高抗病指数为 苑远援 园园袁最低抗病指数为 圆愿援 远苑
渊表 员冤遥 聚类分析中以欧氏距离 缘援 园园 作聚类分
割点可划分为 猿 类渊图 源冤遥 第 员 类包含 猿 份材料院
赠尧在晕鄄员圆 和 在晕鄄圆苑袁鉴定为抗病材料曰第 圆 类包含 员远
份材料院 在晕鄄员愿尧 在晕鄄圆圆尧 在晕鄄猿尧 在晕鄄圆缘尧 在晕鄄缘尧 在晕鄄员员尧
在晕鄄员猿尧在晕鄄猿园尧在晕鄄圆源尧在晕鄄圆远尧在晕鄄源尧在晕鄄圆愿尧在晕鄄怨尧在晕鄄
员苑尧在晕鄄员源 和 在晕鄄圆员袁鉴定为中抗材料曰第 猿 类包含
员员 份材料院在晕鄄苑尧在晕鄄员园尧在晕鄄员缘尧在晕鄄员怨尧在晕鄄圆园尧在晕鄄
圆怨尧在晕鄄员远尧在晕鄄远尧在晕鄄圆猿尧在晕鄄圆 和 在晕鄄愿袁鉴定为感病
材料遥
圆援 缘 总皂苷含量测定结果
以皂苷质量为横坐标袁吸光度为纵坐标袁所得标
准曲线为 赠 越 园援 园园员愿曾 垣 园援 园缘员远袁砸圆 越 园援 怨怨远圆遥 依据
抗性鉴定结果袁从中挑选了抗病指数在 远缘援 园园 以上
猿猿源源 期 郑思乡等院 东方百合对茎腐病的抗性分析
表 员 猿园 份自主培育东方百合材料对茎腐病抗性鉴定结果
栽葬遭造藻 员 栽澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻泽怎造贼泽 燥枣 猿园 泽藻造枣鄄糟怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶 皂葬贼藻则蚤葬造泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 贼燥 遭怎造遭 则燥贼
材料编号
酝葬贼藻则蚤葬造 灶怎皂遭藻则
病级苗数 晕怎皂遭藻则 燥枣 凿蚤泽藻葬泽藻凿 泽藻藻凿造蚤灶早
园级 砸葬灶噪 园 员级 砸葬灶噪 员 圆级 砸葬灶噪 圆 猿级 砸葬灶噪 猿 源级 砸葬灶噪 源 缘级 砸葬灶噪 缘
抗病指数
砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶凿藻曾
在晕鄄圆 猿 员 员 员员 园 员源 圆怨援 猿猿
在晕鄄猿 猿 愿 愿 猿 猿 缘 缘猿援 猿猿
在晕鄄源 猿 猿 员圆 园 员 员员 源圆援 远苑
在晕鄄缘 愿 源 远 园 园 员圆 源怨援 猿猿
在晕鄄远 员 圆 员园 源 员 员圆 猿源援 远苑
在晕鄄苑 员 圆 员猿 猿 园 员员 猿愿援 远苑
在晕鄄愿 员 猿 苑 圆 员 员远 圆愿援 远苑
在晕鄄怨 愿 员 猿 源 圆 员圆 源圆援 园园
在晕鄄员园 猿 远 猿 猿 猿 员圆 猿愿援 园园
在晕鄄员员 远 远 源 圆 园 员圆 源远援 远苑
在晕鄄员圆 苑 员员 远 员 园 缘 远远援 园园
在晕鄄员猿 圆 怨 苑 员 员 员园 源远援 远苑
在晕鄄员源 圆 缘 员园 园 圆 员员 源员援 猿猿
在晕鄄员缘 圆 苑 远 园 员 员源 猿愿援 园园
在晕鄄员远 园 圆 员员 远 园 员员 猿缘援 猿猿
在晕鄄员苑 远 远 猿 园 园 员缘 源圆援 园园
在晕鄄员愿 员园 源 远 圆 员 苑 缘怨援 猿猿
在晕鄄员怨 园 远 员园 园 员 员猿 猿远援 远苑
在晕鄄圆园 员 愿 远 园 园 员缘 猿远援 远苑
在晕鄄圆员 圆 愿 猿 猿 源 员园 源园援 远苑
在晕鄄圆圆 员 员源 缘 源 园 远 缘远援 园园
在晕鄄圆猿 园 苑 远 员 圆 员源 猿猿援 猿猿
在晕鄄圆源 员 缘 员圆 猿 园 怨 源源援 远苑
在晕鄄圆缘 源 苑 怨 员 园 怨 缘员援 猿猿
在晕鄄圆远 员 员园 远 员 园 员圆 源猿援 猿猿
在晕鄄圆苑 员 员缘 员员 园 园 猿 远缘援 猿猿
在晕鄄圆愿 猿 猿 员园 猿 员 员园 源圆援 远苑
在晕鄄圆怨 园 圆 员圆 源 圆 员园 猿远援 园园
运源缘 员 怨 远 缘 员 愿 源远援 远苑
赠 员猿 员圆 园 园 员 源 苑远援 园园
的抗病材料 员 份尧在 源园援 园园 耀 远园援 园园 之间的中抗材料
苑 份尧在 源园援 园园 以下的感病材料 猿 份共 员员 份材料袁
分别测定了其正常幼苗鳞茎中总皂苷的含量袁发现
不同抗性水平材料的皂苷含量差异明显袁抗性较高
的 在晕鄄员圆袁其皂苷含量也较高袁达 源援 远怨 依 园援 园猿 皂早 辕 早
渊占干重比冤袁显著高于其余材料曰而抗性较低的 在晕鄄
愿袁其皂苷含量仅为 圆援 员怨 依 园援 园远 皂早 辕 早渊表 圆冤遥 抗病
指数和皂苷含量之间极显著相关袁其皮尔逊相关系
数达 园援 愿员怨园渊孕 约园援 园员冤遥
圆援 远 总皂苷提取液活性测定结果
接种病原菌菌块培养 猿 凿 后袁发现总皂苷处理
组对病原菌菌丝生长的抑制率达 圆怨援 猿怨豫 袁其中处
理组菌落平均直径为 圆圆援 源怨 依 员援 员圆 皂皂袁显著小于对
照组菌落平均直径 猿员援 愿缘 依 园援 苑愿 皂皂渊图 缘冤遥
猿 讨论
近年来袁关于不同地区百合茎腐病病原菌的研
究报道逐渐增多遥 张丽丽等咱员远暂对河北承德地区切
花百合尧朱茂山等咱圆苑暂对辽宁凌源地区温室百合尧刘
妍等咱圆愿暂对云南省百合主产区东方百合尧朱海燕
等咱圆怨暂对湖南隆回地区龙牙百合的研究都表明袁尖孢
镰刀菌为其地区内百合茎腐病病原菌遥 本研究也表
明袁该菌是引起湖南株洲地区东方百合茎腐病的病
原菌遥
目前袁百合茎腐病抗性鉴定方法大致有 猿 类院室
内组培苗或愈伤组织或离体鳞片鉴定咱员缘袁圆怨 原 猿园暂 尧温室
源猿源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
图 源 猿园 份自主培育东方百合材料对茎腐病抗性的聚类分析
云蚤早援 源 砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 糟造怎泽贼藻则蚤灶早 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 猿园 泽藻造枣鄄糟怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶 皂葬贼藻则蚤葬造泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 贼燥 遭怎造遭 则燥贼
表 圆 不同抗性东方百合材料的总皂苷含量测定
栽葬遭造藻 圆 阅藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 燥枣 贼燥贼葬造 泽葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂葬贼藻则蚤葬造泽 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造
材料编号
酝葬贼藻则蚤葬造 灶怎皂遭藻则
抗性水平
砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 造藻增藻造
皂苷含量
杂葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼 渊皂早 辕 早冤
在晕鄄员圆 抗病 砸藻泽蚤泽贼葬灶贼 源援 远怨 依 园援 园猿 葬
在晕鄄猿 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 源援 圆愿 依 园援 园苑 遭
在晕鄄员猿 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 源援 圆猿 依 园援 园愿 遭
在晕鄄圆源 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 猿援 苑缘 依 园援 园怨 糟
在晕鄄圆圆 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 猿援 远猿 依 园援 员员 糟凿
在晕鄄员远 感病 杂怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 猿援 远圆 依 园援 员园 糟凿
在晕鄄圆远 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 猿援 源愿 依 园援 圆园 凿藻
在晕鄄苑 感病 杂怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 猿援 源圆 依 园援 员怨 凿藻
在晕鄄员源 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 猿援 猿远 依 园援 员猿 藻
在晕鄄圆员 中抗 酝藻凿蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 圆援 愿远 依 园援 园怨 枣
在晕鄄愿 感病 杂怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 圆援 员怨 依 园援 园远 早
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差遥 不同字母表示经 蕴杂阅法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼
造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 蕴杂阅 贼藻泽贼援
鳞片或幼苗鉴定咱缘 原 远袁猿员暂 尧大田幼苗或成苗或种球鉴
定咱圆愿暂 遥 其中袁室内鉴定法简便易行袁所需材料数量
少袁不受时间和季节限制袁大批量鉴定时尤为快
捷咱缘暂 袁但难以模拟自然环境袁因而说服力最差曰大田
鉴定法最符合植物自然生长和随机发病状态袁管理
简单袁说服力强袁但操作复杂袁试验周期长袁且受气候
和场地限制较多袁大规模鉴定时较为繁琐咱愿暂 曰本研
究所采用的温室鉴定法效果良好袁操作相对简单袁环
境条件较接近自然状态袁既克服了室内鉴定法说服
力差的缺点袁又避免了大田鉴定法中受气候和环境
等因素限制的缺陷袁尤其适合中上规模的鉴定袁但该
法中玻璃温室等硬件设施的投入成本相对较高遥 本
缘猿源源 期 郑思乡等院 东方百合对茎腐病的抗性分析
图 缘 总皂苷提取液对东方百合茎腐病病原菌菌丝生长的抑制作用
云蚤早援 缘 陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣 贼燥贼葬造 泽葬责燥灶蚤灶 藻曾贼则葬糟贼泽 贼燥 皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造 贼燥 遭怎造遭 则燥贼
研究从接种方式入手袁对 苑 种新接种方法的效果进
行了比较袁发现刺伤注射法的接种效果最好袁但是大
规模抗性鉴定时操作复杂袁费时费力袁注入的孢子液
体积也难以有效定量和控制曰带菌料栽培接种中未
见发病株袁推测可能是因为菌丝在基质中生长存活
不佳袁未产生有效致病力曰离体鳞片刺浸接种法中试
验组材料都长出了病原菌丝袁但生长茂盛而覆盖了
大部分鳞片袁无法有效辨识发病具体情况曰而刺伤浸
苗法的发病率和发病程度都较高袁相对操作简单袁快
捷可行袁正适合抗性鉴定时大规模接种遥 同时袁试验
结果表明幼苗比小球苗更容易发病袁也更适合作为
抗病性鉴定时的接种材料遥
不同品种或者材料对病害的抗性往往不是固定
不变的袁一定程度上受到自身生长和气候环境等的
影响咱员远暂 遥 此外袁由于目前百合抗病性鉴定并无统一
和规范的操作袁所以常用的根据病情指数实测数值
直接区段划分抗病性类别的方法并不准确遥 不同研
究者在不同条件不同方法下咱远袁愿袁猿园暂 袁甚至同一研究者
在不同时间下对同一品种的抗性类别划分也有所不
同咱缘 原 远暂 遥 聚类分析则是一种从数量方面分析植物抗
病性类别的统计方法袁灵活简便袁科学客观袁较好地
避免了人为依据病情指数实测数值划分抗性类别产
生的误差袁使得类别分类在定量和定性上合理统一遥
因此袁本研究在抗病性鉴定中采用聚类分析法进行
大量材料抗性水平的划分是较为适用的遥 本研究中
猿园 份自主培育的东方百合材料经鉴定后发现袁茎腐
病抗性大多都处于中抗和感病水平袁这和以往关于
东方百合系列材料抗病性普遍不高的报道较为一
致咱缘暂 遥 但其中 赠尧在晕鄄员圆 和 在晕鄄圆苑 的抗病指数都在
远缘援 园园 以上袁明显高于国内外市场上正畅销的东方百
合品种索邦渊杂燥则遭燥灶灶葬冤咱员缘 原 员远暂 尧西伯利亚渊杂蚤遭藻则蚤葬冤咱缘 原 远暂
和元帅渊粤糟葬责怎造糟燥冤 咱远袁愿袁猿园暂等袁有开发成为商业新品种
的巨大优势遥
当前袁有关百合皂苷含量和抗病性关联的报道
并不多遥 悦怎则蚤则等咱猿圆暂通过检测百合体内总皂苷含量
时发现袁百合种球总皂苷含量与其对尖孢镰刀菌的
抗性呈正相关性遥 刘妍等咱圆愿暂 尧宰怎等咱猿猿暂和 蕴蚤怎 等咱猿员暂
也认为总皂苷含量与东方百合茎腐病抗性存在关
联袁但其是在 源园愿 灶皂下用高氯酸法进行皂苷元含量
的测定袁而本研究则是采用香草醛原高氯酸法在
缘源园 灶皂下进行皂苷含量的测定袁所得结果更为准确
和可靠遥 本研究发现袁抗病性较强的东方百合材料袁
其鳞茎内所含总皂苷含量一般也较高袁且总皂苷含
量和抗病指数之间极显著相关遥 东方百合材料对茎
腐病的抗性可能正是其体内皂苷抑菌的一种表现袁
而皂苷含量的多少直接影响了抗性水平的高低遥 因
此袁总皂苷含量可以在一定程度上代表材料的抗性
水平袁这可能会为今后大规模筛选高抗材料提供一
个快捷方法遥 植物染病和抗病都是一个复杂的变化
过程袁其内部具体的机制机理更是个微妙的系统工
程遥 因而袁探究植物病理和抗理等要进行全方位的
研究遥 本研究中有关皂苷的初步分析也只是其中之
一袁皂苷抗菌的具体结构尧机制等尚不清楚袁有待进
一步研究遥
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 朱茂山袁 关天舒袁 吕振环援 员猿 种杀菌剂对百合枯萎病菌的
室内毒力测定援 农药袁 圆园员园袁 源怨渊员园冤院 苑远园 原 苑远员袁 苑远源
咱圆暂 田丽丽袁 梁巧兰袁 徐秉良袁 等援 切花百合枯萎病菌室内药剂
筛选及田间防治效果援 甘肃农业大学学报袁 圆园园愿袁 源猿渊缘冤院
员员猿 原 员员远
咱猿暂 蓝炎阳袁 吴士彬袁 陈志言袁 等援 东方百合组织培养研究现
状援 福建热作科技袁 圆园员圆袁 猿苑渊圆冤院 源缘 原 源苑
咱源暂 杂贼则葬葬贼澡燥枣 栽 孕袁 增葬灶 栽怎赠造 允 酝援 郧藻灶藻贼蚤糟 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 蚤灶 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥
云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 造蚤造蚤蚤 蚤灶 贼澡藻 早藻灶怎泽 蕴蚤造蚤怎皂援 粤灶灶葬造泽 燥枣
粤责责造蚤藻凿 月蚤燥造燥早赠袁 员怨怨源袁 员圆缘渊员冤院 远员 原 苑圆
远猿源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
咱缘暂 杨秀梅袁 瞿素萍袁 吴学尉袁 等援 百合种质资源对枯萎病的抗
性鉴定援 西南大学学报 渊自然科学版冤袁 圆园员园袁 猿圆 渊远冤院
猿员 原 猿源
咱远暂 杨秀梅袁 王继华袁 王丽花袁 等援 百合品种抗病基因同源序列
分析及抗枯萎病的鉴定援 园艺学报袁 圆园员圆袁 猿怨渊员圆冤院 圆源园源 原
圆源员圆
咱苑暂 熊丽袁 王祥宁袁 张艺萍袁 等援 百合种球国产化的回顾及发展
商榷援 西南农业学报袁 圆园园愿袁 圆员渊猿冤院 愿缘怨 原 愿远圆
咱愿暂 马璐琳袁 张艺萍袁 丁鲲袁 等援 百合抗镰刀菌资源鉴定及抗病
相关基因筛选援 园艺学报袁 圆园员圆袁 猿怨渊远冤院 员员源员 原 员员缘园
咱怨暂 黄立飞袁 罗忠霞袁 房伯平袁 等援 甘薯茎腐病的研究进展援 植
物保护学报袁 圆园员源袁 源员渊员冤院 员员愿 原 员圆圆
咱员园暂 李诚袁 李俊杰援 百合枯萎病病原菌鉴定援 植物病理学报袁
员怨怨远袁 圆远渊圆冤院 员怨圆
咱员员暂 尚巧霞袁 周丽丽袁 刘素花袁 等援 百合鳞茎腐烂病病原菌分
离鉴定援 北京农学院学报袁 圆园园缘袁 圆园渊员冤院 圆苑 原 圆怨
咱员圆暂 孕则葬凿燥泽鄄蕴蚤早藻则燥 粤 酝袁 月葬泽葬造造燥贼藻鄄哉则藻遭葬 酝 允袁 酝藻造藻则燥鄄灾葬则葬 允 酝援
云蚤则泽贼 则藻责燥则贼 燥枣 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 造蚤造蚤蚤 葬灶凿 云援 责则燥造蚤枣藻则葬鄄
贼怎皂 葬枣枣藻糟贼蚤灶早 蕴蚤造蚤怎皂 糟则燥责泽 蚤灶 杂责葬蚤灶援 栽则燥责蚤糟葬造 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁
圆园园愿袁 猿猿渊猿冤院 圆猿缘 原 圆猿远
咱员猿暂 杨秀梅袁 王继华袁 王丽花袁 等援 百合枯萎病病原鉴定与 陨栽杂
序列分析援 西南农业学报袁 圆园员园袁 圆猿渊远冤院 员怨员源 原 员怨员远
咱员源暂 冉毅袁 文成敬袁 牛应泽援 油菜菌核病抗性鉴定方法的比较
及抗源的筛选援 植物保护学报袁 圆园园苑袁 猿源渊远冤院 远园员 原 远园远
咱员缘暂 彭绿春袁 杨秀梅袁 苏艳袁 等援 应用尖孢镰刀菌培养滤液室
内鉴定百合品种抗病性研究援 江西农业大学学报袁 圆园员员袁
猿猿渊圆冤院 圆苑缘 原 圆苑苑
咱员远暂 张丽丽袁 刘冬云袁 赵婵璞援 百合枯萎病抗性鉴定及发病因
素的研究援 河北农业大学学报袁 圆园员圆袁 猿缘渊远冤院 圆苑 原 猿圆
咱员苑暂 易磊袁 霍光华袁 韩启灿袁 等援 木荷皂甙对稻瘟病菌细胞形
态及生理生化指标的影响援 植物保护学报袁 圆园员猿袁 源园渊缘冤院
源缘园 原 源缘远
咱员愿暂 侯娟袁 何文辉袁 王明霞袁 等援 薯蓣皂苷的药理作用援 河北
医药袁 圆园园源袁 圆远渊员冤院 苑员
咱员怨暂 何纯莲袁 陈腊生袁 任凤莲援 药用百合皂苷对羟自由基清除
作用的研究援 湖南师范大学学报渊医学版冤袁 圆园园源袁 员渊员冤院
缘远 原 缘愿
咱圆园暂 胡亚娟袁 贺运春袁 郭明霞援 山西晋中地区植物病原镰刀菌
渊云怎泽葬则蚤怎皂冤种类鉴定援 山西农业大学学报渊自然科学版冤袁
圆园园苑袁 圆苑渊猿冤院 圆苑远 原 圆愿园
咱圆员暂 魏景超援 真菌鉴定手册援 上海院 上海科学技术出版
社袁 员怨苑怨
咱圆圆暂 月燥燥贼澡 悦援 镰刀菌属援 陈其瑛袁译援 北京院农业出版社袁 员怨愿愿
咱圆猿暂 陈红梅袁 李金花袁 柴兆祥袁 等援 猿缘 个马铃薯品种对镰刀菌
干腐病优势病原的抗病性评价援 植物保护学报袁 圆园员圆袁 猿怨
渊源冤院 猿园愿 原 猿员源
咱圆源暂 吉宏武袁 丁霄霖援 百合总皂苷定量测定方法的研究援 林产
化学与工业袁 圆园园猿袁 圆猿渊源冤院 缘源 原 缘愿
咱圆缘暂 任凤莲袁 邱昌桂袁 连琰援 百合总皂甙的提取工艺援 中南大
学学报渊自然科学版冤袁 圆园园缘袁 猿远渊员冤院 远怨 原 苑圆
咱圆远暂 傅春燕袁 刘永辉袁 李明娟袁 等援 紫外可见分光光度法测定
不同产地龙牙百合中皂苷含量援 广东微量元素科学袁
圆园员员袁 员愿渊缘冤院 缘缘 原 缘愿
咱圆苑暂 朱茂山袁 杨贺袁 关天舒袁 等援 百合枯萎病菌生物学特性研
究援 辽宁农业科学袁 圆园园愿渊猿冤院 怨 原 员员
咱圆愿暂 刘妍袁 郑思乡袁 吴红芝袁 等援 东方百合对镰刀菌鳞茎腐烂
病的抗性援 贵州农业科学袁 圆园园怨袁 猿苑渊员冤院 源 原 苑
咱圆怨暂 朱海燕袁 夏花袁 高必达援 湖南省食用百合生长期鳞茎腐烂
病的病原鉴定援 植物病理学报袁 圆园员圆袁 源圆渊缘冤院 缘圆缘 原 缘圆苑
咱猿园暂 丁丁袁 吕长平袁 王继华袁 等援 百合抗尖孢镰刀菌无性系的
离体筛选援 湖南农业大学学报渊自然科学版冤袁 圆园员员袁 猿苑
渊员冤院 猿源 原 猿愿
咱猿员暂 蕴蚤怎 宰袁 宰怎 蕴袁 宰怎 匀袁 藻贼 葬造援 悦燥则则藻造葬贼蚤燥灶 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼
葬灶凿 云怎泽葬则蚤怎皂 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶 澡赠遭则蚤凿泽 枣则燥皂 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责造燥蚤凿赠 造藻增藻造泽
燥枣 蕴蚤造蚤怎皂 韵则蚤藻灶贼葬造援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁 圆园员员袁 员圆怨 渊源冤院
愿源怨 原 愿缘猿
咱猿圆暂 悦怎则蚤则 孕袁 阅燥造糟蚤 酝袁 孕葬泽蚤灶蚤 悦袁 藻贼 葬造援 杂葬责燥灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼 蚤灶 造蚤造赠
渊蕴蚤造蚤怎皂 澡赠遭则援 冤 葬泽 葬灶 蚤灶凿蚤糟葬贼燥则 燥枣 贼澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 凿藻早则藻藻 葬早葬蚤灶泽贼
云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 造蚤造蚤蚤援 陨贼葬造怎泽 匀燥则贼怎泽袁 圆园园猿袁 员园渊源冤院
圆怨员 原 圆怨猿
咱猿猿暂 宰怎 匀袁 在澡藻灶早 杂袁 月蚤 再袁 藻贼 葬造援 杂葬责燥灶蚤灶泽院 葬 责燥泽泽蚤遭造藻 则藻造葬贼蚤燥灶
憎蚤贼澡 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂 枣援 泽责援 造蚤造蚤蚤 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶 造蚤造蚤藻泽 渊蕴蚤造蚤怎皂
蕴援 冤援 粤糟贼葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁 圆园员园袁 愿缘缘院 圆怨缘 原 圆怨愿
渊责任编辑院李美娟冤
苑猿源源 期 郑思乡等院 东方百合对茎腐病的抗性分析