全 文 ：第 源员 卷摇 第 猿 期
圆园员源 年 远 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 猿
允怎灶藻 摇 圆园员源
摇
基金项目院 国家转基因生物新品种培育重大专项渊圆园员源在载园愿园员员鄄园园圆冤
作者简介院 王英丽袁女袁员怨愿远年生袁硕士研究生袁研究方向为昆虫生理生化与分子生物学袁 耘鄄皂葬蚤造院 憎葬灶早赠蚤灶早造蚤圆园园苑岳 员圆远援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 早皂造蚤葬灶早岳 蚤责责糟葬葬泽援 糟灶
收稿日期院 圆园员猿 原 员圆 原 园源
悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭蛋白对大草蛉
生长发育及酶活力的影响
王英丽摇 魏纪珍摇 张丽丽摇 袁向东摇 梁革梅鄢
渊中国农业科学院植物保护研究所袁 植物病虫害生物学国家重点实验室袁 北京 员园园员怨猿冤
摘要院 为明确转 悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭基因棉花对大草蛉的影响袁运用 月贼蛋白与人工饲料混合的方法袁
以大于转基因棉花叶片中蛋白含量 圆园 倍的剂量饲喂大草蛉初孵幼虫袁初步研究了 悦则赠员粤糟 和
悦则赠圆粤遭对大草蛉生物学参数和消化酶尧解毒酶活性的影响遥 结果表明院取食含 月贼 蛋白饲料的大草
蛉幼虫的发育历期尧体重尧蛹重尧成虫体重尧羽化率等生物学参数与对照相比均没有显著差异曰在大
草蛉幼虫体内可以检测到含量较高的 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 蛋白袁分别为 怨苑源援 怨圆 耀 员 圆愿圆援 猿怨 灶早 辕 早 鲜重
和 缘 缘怨圆援 远圆 耀 远 园愿圆援 怨圆 灶早 辕 早 鲜重袁而在大草蛉成虫体内检测到的 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 蛋白含量非常
低袁分别为 园援 圆怨 耀 园援 猿怨 灶早 辕 早鲜重和 缘园援 猿源 耀 缘远援 苑员 灶早 辕 早 鲜重曰取食含 月贼 蛋白的饲料对大草蛉幼虫
的类胰蛋白酶尧类胰凝乳蛋白酶尧氨肽酶和谷胱甘肽鄄杂鄄转移酶活性有一定的影响袁但对大草蛉成虫
影响与对照差异不显著遥 表明大草蛉取食含 月贼蛋白的人工饲料后袁虽然体内可以检测到一定含量
的 月贼蛋白袁但对大草蛉的生长发育并没有显著的直接不利影响遥
关键词院 大草蛉曰 悦则赠员粤糟 辕 悦则赠圆粤遭蛋白曰 安全性评价曰 生物学曰 酶活性
耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 悦则赠员粤糟 葬灶凿 悦则赠圆粤遭 责则燥贼藻蚤灶泽 燥灶 贼澡藻 早则燥憎贼澡 葬灶凿
藻灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽
宰葬灶早 再蚤灶早造蚤摇 宰藻蚤 允蚤扎澡藻灶摇 在澡葬灶早 蕴蚤造蚤摇 再怎葬灶 载蚤葬灶早凿燥灶早摇 蕴蚤葬灶早 郧藻皂藻蚤鄢
渊杂贼葬贼藻 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻 葬灶凿 陨灶泽藻糟贼 孕藻泽贼泽袁 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁
悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 月藻蚤躁蚤灶早 员园园员怨猿袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽燥 泽贼怎凿赠 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 悦则赠员粤糟 葬灶凿 悦则赠圆粤遭 燥灶 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽袁 贼澡藻 月贼 责则燥贼藻蚤灶 憎蚤贼澡 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造
凿蚤藻贼 憎藻则藻 皂蚤曾藻凿 贼燥 燥遭泽藻则增藻 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 责葬则葬皂藻贼藻则泽袁 凿蚤早藻泽贼蚤增藻 藻灶扎赠皂藻泽袁 葬灶凿 凿藻贼燥曾蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣
悦援 责葬造造藻灶泽 枣则藻泽澡 造葬则增葬藻援 栽澡藻 贼则藻葬贼藻凿 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶泽 皂燥则藻 贼澡葬灶 圆园 贼蚤皂藻泽 燥枣 悦则赠员粤糟 辕 悦则赠圆粤遭 贼澡葬灶 贼澡藻
贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 糟燥贼贼燥灶 造藻葬增藻泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 责葬则葬皂藻贼藻则泽袁 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造
凿怎则葬贼蚤燥灶袁 造葬则增葬造 憎藻蚤早澡贼袁 糟燥糟燥燥灶 憎藻蚤早澡贼袁 葬凿怎造贼 憎藻蚤早澡贼 葬灶凿 葬凿怎造贼 藻皂藻则早藻灶糟藻 则葬贼藻 燥枣 月贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼袁 澡葬凿 灶燥
泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 贼藻泽贼藻凿 早则藻藻灶 造葬糟藻憎蚤灶早 葬灶凿 糟燥灶贼则燥造援 匀蚤早澡 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽
糟燥怎造凿 遭藻 凿藻贼藻糟贼藻凿 蚤灶 贼澡藻 造葬则增葬造 遭燥凿蚤藻泽援 栽澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 悦则赠员粤糟 憎葬泽 怨苑源郾 怨圆 原 员圆愿圆郾 猿怨 灶早 辕 早 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼袁
葬灶凿 悦则赠圆粤遭 憎葬泽 缘 缘怨圆郾 远圆 原 远园愿圆郾 怨圆 灶早 辕 早 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼援 粤 造蚤贼贼造藻 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽 糟燥怎造凿 葬造泽燥 遭藻 凿藻贼藻糟贼藻凿 蚤灶 悦援
责葬造造藻灶泽 葬凿怎造贼 遭燥凿蚤藻泽援 栽澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 悦则赠员粤糟 憎葬泽 园郾 圆怨 原 园郾 猿怨 灶早 辕 早 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼 葬灶凿 悦则赠圆粤遭 憎葬泽 缘园郾 猿源 原
缘远郾 苑员 灶早 辕 早 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼援 栽澡藻则藻 憎藻则藻 泽燥皂藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 贼澡藻 贼则赠责泽蚤灶鄄造蚤噪藻 藻灶扎赠皂藻袁 糟澡赠皂燥贼则赠责泽蚤灶鄄造蚤噪藻 藻灶扎赠皂藻袁
葬皂蚤灶燥责藻责贼蚤凿葬泽藻 晕 葬灶凿 早造怎贼葬贼澡蚤燥灶藻鄄杂鄄贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 蚤灶 贼则藻葬贼藻凿 悦援 责葬造造藻灶泽 造葬则增葬藻 葬枣贼藻则 贼澡藻赠 憎藻则藻 枣藻凿 憎蚤贼澡 月贼
葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼袁 遭怎贼 贼澡藻 则藻造藻增葬灶贼 藻灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 蚤灶 悦援 责葬造造藻灶泽 葬凿怎造贼 遭燥凿蚤藻泽 澡葬凿 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻
糟燥皂责葬则藻凿 贼燥 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造援 粤造贼澡燥怎早澡 贼澡藻则藻 憎藻则藻 葬 糟藻则贼葬蚤灶 葬皂燥怎灶贼 燥枣 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽 蚤灶 悦援 责葬造造藻灶泽 造葬则增葬造 葬灶凿 葬凿怎造贼
遭燥凿蚤藻泽 葬枣贼藻则 枣藻凿 憎蚤贼澡 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 悦则赠员粤糟袁 悦则赠圆粤遭 燥则 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭袁 贼澡藻则藻 憎葬泽 灶燥
泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤则藻糟贼 凿藻贼则蚤皂藻灶贼葬造 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 早则燥憎贼澡援
运藻赠 憎燥则凿泽院 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽曰 悦则赠员粤糟 辕 悦则赠圆粤遭 责则燥贼藻蚤灶曰 则蚤泽噪 葬泽泽藻泽泽皂藻灶贼曰 遭蚤燥造燥早赠曰 藻灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
摇 摇 自从 员怨怨远 年美国开始种植第一例转基因作物袁
全球种植的转基因作物面积每年都在递增袁截至
圆园员圆 年袁圆愿 个转基因作物种植国家种植的总面积达
到 员苑 园园园 万 澡皂圆袁相比于 员怨怨远 年的 员苑园 万 澡皂圆 增长
了 员园园 倍遥 圆园员圆 年发展中国家的转基因作物种植
面积首次超过了发达国家袁实现了前所未有的突
破咱员暂 遥 世界上已经种植的转基因作物品种很多袁主
要有转基因大豆尧棉花和玉米等农作物遥 在中国的
种植主要以转基因棉花为主遥 到 圆园员圆 年中国种植
了 源园园 万 澡皂圆 的 月贼 棉花袁占全国棉花种植面积的
愿园豫 咱员暂 遥 转基因棉花的广泛应用有效地控制了棉
铃虫 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬 匀俟遭灶藻则等鳞翅目靶标害虫
的危害咱圆 原 猿暂 遥 随着苏云金芽胞杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早鄄
蚤藻灶泽蚤泽袁月贼冤制剂的长期应用袁其田间害虫防治效果已
经严重下降袁研究表明很多昆虫品系在实验室用
悦则赠毒素筛选压力下都产生了不同程度的抗性问
题咱源暂 遥 同时袁很多实验室室内也筛选出了高抗
悦则赠员粤糟的棉铃虫品系咱缘 原 远暂 遥 抗性的产生对 月贼 的应
用前景构成了巨大的威胁遥 为了延长 月贼 作物的使
用寿命袁科学家们提出了很多的防治策略袁包括高剂
量 辕庇护所策略尧新毒素策略尧转双价基因策略
等咱苑 原 愿暂 遥 在实际中利用最广泛的是野高剂量 辕庇护
所策略冶袁这个策略一方面要求转基因作物表达很
高的杀虫蛋白剂量袁另一方面要求在 月贼 作物的周围
设置隔离带袁种植一定比例的非转基因植物袁提供抗
性个体与敏感个体交配的机会袁从而达到稀释抗性
基因的目的遥 但野高剂量 辕庇护所策略冶的有效性受
遗传类型尧基因频率和交配随机性的影响遥 这些限
制条件促使进行害虫抗性治理的科学家们寻找更有
效的治理方法遥 目前袁转多价基因策略是害虫抗性
治理的有效方法遥 圆园园猿 年袁孟山都公司通过杂交在
月燥造造早葬则凿渊转基因抗虫保铃棉冤基础上转入一个新的
悦则赠圆粤遭基因袁开发出表达 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 两种不
同杀虫蛋白的 月燥造造早葬则凿域遥 这个转基因棉花品种在
美国尧澳大利亚尧南非尧墨西哥和菲律宾等国家已开
始商业化种植咱怨暂 袁所以研究这个品种对非靶标昆虫
的影响和其在中国的发展具有重要意义遥
自 蕴燥泽藻赠等咱员园暂员怨怨怨 年报道 月贼 玉米的花粉影响
黑脉金斑蝶 阅葬灶葬怎泽 责造藻曾蚤责责怎泽幼虫生长和发育后袁抗
虫转基因作物所产生的非靶标效应已成为转基因作
物生物安全评价的一个焦点问题遥 迄今为止袁通过
对 员远 种捕食性天敌昆虫进行毒性测定的结果表明
以取食转基因植物的植食性昆虫为猎物袁对捕食性
或寄生性天敌的生长发育没有不良影响袁仅发现
悦则赠员粤遭对普通草蛉 悦澡则赠泽燥责葬 糟葬则灶藻葬 幼虫和雪花莲
凝集素对大丽二斑瓢虫 粤凿葬造蚤葬 遭蚤责怎灶糟贼葬贼葬 成虫存活
率产生了不良影响咱员员暂 遥
草蛉是许多作物生态系统中普遍存在的尧资源
丰富的天敌袁其幼虫和成虫都具有捕食性袁可取食蚜
虫尧叶螨尧鳞翅目的卵和低龄幼虫等袁捕食范围广泛遥
早期人们评价转基因植物对草蛉的影响结果表明转
基因植物对草蛉没有不良影响袁如 蕴蚤 等咱员圆暂的研究
发现袁普通草蛉取食表达 悦则赠员粤遭或 悦则赠猿月遭员 的玉米
花粉后袁其存活率尧产卵前期尧生殖力尧产卵量及成虫
干重与取食非转基因玉米花粉的草蛉没有显著差
异曰雒珺瑜等咱员猿暂发现与常规棉花相比袁饲喂取食转
双价抗虫棉渊表达 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 蛋白冤和单价
抗虫棉渊表达 悦则赠员粤糟 蛋白冤的棉铃虫初孵幼虫袁使
中华草蛉 悦澡则赠泽燥责藻则造葬 泽蚤灶蚤糟葬 栽躁藻凿藻则 的生长发育时间
延长袁但差异未达到显著水平遥 匀蚤造遭藻糟噪 等咱员源暂的室
内非选择性生测结果却表明普通草蛉幼虫在捕食
月贼玉米上的欧洲玉米螟 韵泽贼则蚤灶蚤葬 灶怎遭蚤造葬造蚤泽 和埃及棉
贪夜蛾 杂责燥凿燥责贼藻则葬 造蚤贼贼燥则葬造蚤泽 后袁其死亡率高于对照曰
用加入 悦则赠造粤遭蛋白的人工饲料饲喂草蛉幼虫袁其死
亡率仍然高于对照袁但该报道之后的一系列试验证
明 悦则赠员粤遭 对普通草蛉幼虫没有直接毒性咱员缘 原 员苑暂 遥
砸燥皂藻蚤泽等咱员愿暂认为以 月贼敏感的昆虫作为猎物对捕食
性天敌的不利影响是因为 月贼 毒素造成猎物营养质
量下降袁进而间接影响了捕食性天敌的生长发育袁并
不是 月贼 本身对天敌的毒性造成的曰再怎 等咱员怨暂也认为
当前使用的抗虫转基因作物作用范围较窄袁对非靶
标生物没有直接的不利影响袁而且还提高了一些有
益昆虫的丰度和对害虫的自然控制作用遥
在棉田袁草蛉等捕食性天敌捕食取食转基因棉
花的棉铃虫尧棉蚜 粤责澡蚤泽 早燥泽泽赠责蚤蚤 郧造燥增藻则 等袁但是关于
月贼蛋白对草蛉的潜在影响袁尤其是关于转双价抗虫
棉花中表达蛋白 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 的影响研究较
少遥 为了进一步评价 月贼蛋白对草蛉的影响袁本试验
远愿圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
用大于田间转基因棉花中 月贼蛋白表达量 圆园 倍剂量
的人工饲料直接饲喂大草蛉 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽 幼虫袁
测定高浓度 月贼 蛋白对大草蛉的发育历期尧幼虫体
重尧蛹重尧成虫体重尧羽化率等生物学参数和消化酶尧
解毒酶等酶活性的影响袁以期为评价转基因棉花对
天敌的生物安全性提供依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试昆虫院大草蛉成虫由北京市农林科学院提
供袁在室内用豌豆蚜 粤糟赠则贼澡燥泽蚤责澡燥灶 责蚤泽怎皂 饲养袁以初
孵幼虫为试验材料遥 大草蛉人工饲料由中国农业科
学院植物保护研究所害虫天敌组馈赠遥
菌株院悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 菌株由中国农业科学
院植物保护研究所生物技术组提供袁应用 晕蚤糟澡燥造葬泽
杂贼葬责造藻泽法咱圆园暂提取蛋白遥
试剂院耘蕴陨杂粤渊酶联免疫吸附测定 藻灶扎赠皂藻鄄造蚤灶噪藻凿
蚤皂皂怎灶燥泽燥则遭藻灶贼 葬泽泽葬赠冤检测试剂盒购于美国 耘灶增蚤则鄄
燥蕴燥早蚤曾公司遥 酶活性测定主要试剂院胰蛋白酶底物
渊月粤责晕粤冤尧胰凝乳蛋白酶底物渊 杂粤粤孕云责晕粤冤尧氨肽
酶底物渊蕴鄄孕晕粤冤尧还原性谷胱甘肽尧悦阅晕月 均购自美
国 杂蚤早皂葬鄄粤造凿则蚤糟澡 公司袁其它化学试剂均为国产分
析纯遥
仪器院 杂赠灶藻则早赠匀栽 多功能酶标仪袁美国伯腾
渊月蚤燥栽藻噪冤仪器有限公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 悦则赠员粤糟 辕 悦则赠圆粤遭蛋白对大草蛉的直接影响
根据 蕴蚤等咱圆员暂报道袁在酝燥灶泽葬灶贼燥公司的 月燥造造郧葬则凿
域双价抗虫棉叶子中 悦则赠员粤糟 含量为 员援 猿 耀
员援 缘 滋早 辕 早尧悦则赠圆粤遭 含量为 员远援 愿 耀 圆圆援 苑 滋早 辕 早袁根据这
个含量范围设置处理浓度袁分别是院渊员冤正常人工饲
料曰渊圆冤含 源园园 滋早 辕 早 悦则赠员粤糟 的人工饲料曰渊猿冤含 源园园
滋早 辕 早 悦则赠圆粤遭的人工饲料曰渊源冤含 圆园园 滋早 辕 早 悦则赠员粤糟 垣
圆园园 滋早 辕 早 悦则赠圆粤遭的人工饲料遥 每个处理接入 圆源 头
大草蛉初孵幼虫袁饲料每 圆 天换 员 次遥 每天观察并
记录其存活数和发育情况袁直至成虫羽化遥 记录幼
虫第 圆 次脱皮后的重量尧化蛹后 员圆 澡 内的蛹重以及
成虫羽化后 圆源 澡内的鲜重遥 试验重复 猿 次遥
试虫在 圆苑 依 员 益尧砸匀 渊远缘 依 缘冤豫 尧蕴 颐 阅 越 员远 澡 颐
愿 澡人工气候箱中饲养遥 取食饲料 源 凿的大草蛉幼虫
和羽化的成虫样本保存在 原 愿园 益的冰箱里袁用于
耘蕴陨杂粤测定和酶活检测遥
员援 圆援 圆摇 耘蕴陨杂粤测定
通过双抗体夹心酶联免疫吸附法袁用 悦则赠员粤糟 和
悦则赠圆粤遭的检测试剂盒检测大草蛉幼虫尧成虫体内
悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭的含量遥 测试前用缓冲液清洗除
去草蛉体表可能粘附的 月贼 蛋白曰用 员援 缘 皂蕴 的离心
管以 员 颐 员园渊员 皂早 样本︰ 员园 滋蕴 缓冲液冤的比率把缓
冲液加入到样本中袁用玻璃匀浆器把样本捣碎遥 离
心后适当稀释上清袁根据试剂盒说明书进行酶联免
疫吸附试验遥
员援 圆援 猿 酶活性测定
酶提取液的制备院取大草蛉幼虫 愿 头或者成虫
源 头袁置于玻璃匀浆器中袁加入 员皂蕴 园援 员缘 皂燥造 辕 蕴 晕葬悦造
溶液在冰浴上匀浆遥 匀浆液 源 益尧员园 园园园 早 离心
员缘 皂蚤灶袁取上清液作为酶提取液遥 每处理重复 猿 次遥
类胰蛋白酶活性测定院采用专性底物渊月粤责晕粤冤
测定遥 在酶标板点样孔中依次加入 员园园 滋蕴 底物尧
园郾 员 皂燥造 辕 蕴 甘氨酸 原氢氧化钠缓冲液 渊 责匀 员园援 园 冤
源园 滋蕴和 员园 滋蕴酶液后立即置于酶标仪袁于 源园缘 灶皂
处开始读取吸光值袁以最小时间间隔读取一个点袁持
续 员缘 皂蚤灶遥
类胰凝乳蛋白酶活性测定院参照王琛柱和钦俊
德咱圆圆暂的方法袁以 杂粤粤孕云责晕粤 作为底物袁将 杂粤粤孕云责鄄
晕粤以 圆 皂早 辕 皂蕴的浓度溶于 园援 员缘 皂燥造 辕 蕴 晕葬悦造 溶液遥
在酶标板点样孔中分别依次加入 源缘 滋蕴 底物尧
园援 员 皂燥造 辕 蕴甘氨酸原氢氧化钠缓冲液渊责匀 员园援 园冤怨园 滋蕴
和 缘 滋蕴酶液后立即置于酶标仪袁于 源园缘 灶皂 处开始
读取吸光值袁以最小时间间隔读取一个点袁持续
猿园 皂蚤灶遥
氨肽酶活性测定院以 蕴鄄孕晕粤 作为底物袁将 蕴鄄
孕晕粤以 圆 皂早 辕 皂蕴 的浓度溶于甲醇遥 在酶标板点样
孔中分别依次加入 圆园园 滋蕴 底物尧园援 员 皂燥造 辕 蕴 栽则蚤泽鄄匀悦造
缓冲液 怨缘 滋蕴 和 缘 滋蕴 酶液后立即置于酶标仪袁于
源员园 灶皂处开始读取吸光值袁以最小时间间隔读取一
个点袁持续 员缘 皂蚤灶遥
谷胱甘肽鄄杂鄄转移酶活性的测定院在 怨远 孔酶标
板点样孔中分别依次加入 员援 圆 皂皂燥造 辕 蕴 悦阅晕月
员园园 滋蕴尧园援 员 皂燥造 辕 蕴磷酸缓冲液渊责匀 苑援 远冤怨园 滋蕴尧酶液
员园 滋蕴和 远 皂皂燥造 辕 蕴的还原型谷胱甘肽 员园园 滋蕴遥 置于
酶标仪 猿源园 灶皂波长下读取吸光值袁以最小时间间隔
读取一个点袁持续 猿园 皂蚤灶遥
提取液总可溶性蛋白含量测定院以牛血清蛋白
月杂粤为标准蛋白袁参照 月则葬凿枣燥则凿咱圆猿暂方法测定袁每处理
重复 猿 次遥
员援 猿 数据分析
利用 杂粤杂 怨援 员 软件进行数据分析袁将百分数经
反正弦转换后采用 粤晕韵灾粤进行方差分析袁用 栽怎噪藻赠
法进行多重比较遥
苑愿圆猿 期 王英丽等院 悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭蛋白对大草蛉生长发育及酶活力的影响
圆 结果与分析
圆援 员 悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭对大草蛉的生物学影响
各个处理中袁缘园豫以上的大草蛉可以发育到蛹
阶段袁且处理间没有显著差异渊云 越 员援 员远袁孕 越 园援 猿愿冤
渊表 员冤遥 与对照相比袁取食含 悦则赠 蛋白人工饲料的
大草蛉的化蛹率尧羽化率尧昆虫体重尧发育历期等生
物学参数差异均不显著遥
表 员 大草蛉取食含不同 月贼饲料后的生物学参数
栽葬遭造藻 员 月蚤燥造燥早蚤糟葬造 责葬则葬皂藻贼藻则泽 燥枣 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽 枣藻凿 憎蚤贼澡 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽
参数
孕葬则葬皂藻贼藻则
含 悦则赠员粤糟饲料
阅蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 悦则赠员粤糟
含 悦则赠圆粤遭饲料
阅蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 悦则赠圆粤遭
含 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭饲料
阅蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早
悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭
正常饲料
悦燥灶贼则燥造
化蛹率 渊豫冤
砸葬贼藻 燥枣 糟燥糟燥燥灶
远猿援 愿怨 依 缘援 园员 葬 缘源援 员苑 依 源援 员苑 葬 缘怨援 苑圆 依 远援 园缘 葬 远远援 远苑 依 源援 愿员 葬
羽化率 渊豫冤
耘糟造燥泽蚤燥灶 则葬贼藻
缘圆援 苑愿 依 苑援 猿缘 葬 猿愿援 愿怨 依 远援 园缘 葬 缘园援 园园 依 源援 愿员 葬 缘缘援 缘远 依 苑援 猿缘 葬
幼虫体重 渊皂早冤
蕴葬则增葬造 憎藻蚤早澡贼
猿援 愿园 依 园援 圆缘 葬 源援 员愿 依 园援 圆苑 葬 猿援 愿愿 依 园援 员猿 葬 猿援 愿员 依 园援 圆愿 葬
蛹重 渊皂早冤
孕怎责葬造 憎藻蚤早澡贼
员远援 猿苑 依 园援 猿猿 遭 员苑援 苑源 依 园援 源员 葬 员苑援 源缘 依 园援 圆远 葬遭 员苑援 圆远 依 园援 园愿 葬遭
雌成虫体重 渊皂早冤
云藻皂葬造藻 葬凿怎造贼 憎藻蚤早澡贼
员圆援 猿愿 依 园援 远员 遭 员源援 员远 依 园援 圆怨 葬遭 员源援 源员 依 园援 圆怨 葬 员猿援 愿源 依 园援 源苑 葬遭
雄成虫体重 渊皂早冤
酝葬造藻 葬凿怎造贼 憎藻蚤早澡贼
员圆援 圆缘 依 员援 园愿 葬 员园援 怨远 依 园援 圆员 葬 员员援 缘猿 依 园援 圆怨 葬 员员援 怨员 依 园援 猿员 葬
圆龄幼虫历期 渊凿冤
圆灶凿 蚤灶泽贼葬则 凿怎则葬贼蚤燥灶
猿援 愿怨 依 园援 园远 葬 源援 员园 依 园援 圆愿 葬 猿援 苑怨 依 园援 员苑 葬 猿援 愿缘 依 园援 员圆 葬
猿龄幼虫历期 渊凿冤
猿则凿 蚤灶泽贼葬则 凿怎则葬贼蚤燥灶
远援 远缘 依 园援 源源 葬 远援 圆缘 依 园援 圆苑 葬 远援 缘园 依 园援 园怨 葬 远援 园猿 依 园援 园缘 葬
蛹历期 渊凿冤
孕怎责葬造 泽贼葬早藻
员猿援 源圆 依 园援 员缘 葬 员猿援 猿圆 依 园援 园圆 葬 员猿援 远园 依 园援 员园 葬 员猿援 猿远 依 园援 圆园 葬
总历期 渊凿冤
栽燥贼葬造 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 贼蚤皂藻
圆远援 愿苑 依 园援 圆源 葬 圆远援 猿远 依 园援 远猿 葬 圆苑援 员猿 依 园援 园苑 葬 圆远援 圆缘 依 园援 圆源 葬
摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 同行不同字母表示处理组间经 栽怎噪藻赠 法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂耘援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 栽怎噪藻赠 皂怎造贼蚤责造藻 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶泽援
圆援 圆 大草蛉体内 月贼蛋白含量检测
大草蛉幼虫取食含 月贼 蛋白饲料 源 凿 后袁在幼虫
体内可以检测到含量较高的 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭袁且
悦则赠圆粤遭蛋白含量明显高于 悦则赠员粤糟 的含量渊图 员冤遥
悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭 蛋白含量范围分别为 怨苑源援 怨圆 耀
员 圆愿圆援 猿怨 灶早 辕 早鲜重和 缘缘怨圆援 远圆 耀 远园愿圆援 怨圆 灶早 辕 早鲜重遥
取食含 悦则赠员粤糟或 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭蛋白饲料的大草
蛉幼虫体内 悦则赠员粤糟 含量约为处理饲料中蛋白含量
的园援 猿圆豫 耀 园援 源怨豫袁取食含 悦则赠圆粤遭 或 悦则赠员粤糟 垣
悦则赠圆粤遭蛋白饲料的大草蛉 悦则赠圆粤遭 含量约为饲料中
蛋白含量的 员援 源园豫 耀猿援 园源豫 遥
取食含 月贼蛋白人工饲料后羽化的大草蛉成虫
体内可检测到少量的 悦则赠员粤糟 或 悦则赠圆粤遭 蛋白袁但含
量非常低袁且 悦则赠圆粤遭 蛋白含量高于 悦则赠员粤糟 的含量
渊图 员冤遥 取食含 悦则赠员粤糟 蛋白饲料的大草蛉成虫体
内 悦则赠员粤糟 含量为 园援 猿怨 依 园援 园圆 灶早 辕 早 鲜重袁取食含
悦则赠圆粤遭蛋白饲料的大草蛉 悦则赠圆粤遭 含量为 缘园援 猿源 依
缘援 愿远 灶早 辕 早 鲜重袁取食含 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭 蛋白饲料
的大草蛉 悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭 蛋白含量分别为 园援 圆怨 依
园郾 园源 灶早 辕 早鲜重和 缘远援 苑员 依 猿援 源圆 灶早 辕 早鲜重遥
圆援 猿 取食不同饲料后大草蛉的酶活性
大草蛉幼虫取食含有 悦则赠 蛋白的人工饲料 源 凿
后袁取食含 悦则赠员粤糟蛋白饲料的大草蛉幼虫体内的类
胰蛋白酶尧谷胱甘肽鄄杂鄄转移酶尧氨肽酶活性与对照
相比没有显著差异袁但取食 悦则赠员粤糟后类胰凝乳蛋白
酶活性是对照大草蛉的圆援 苑源倍曰与对照相比袁取食
愿愿圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
图 员摇 取食含不同 月贼饲料后大草蛉体内的 月贼蛋白含量
云蚤早援 员 月贼 责则燥贼藻蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼泽 燥枣 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽 枣藻凿 憎蚤贼澡 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽
摇 摇 图中数据为平均数 依标准误遥 图中不同字母表示处理组间数据经 栽怎噪藻赠法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂耘援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 燥灶 贼澡藻 遭葬则 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 栽怎噪藻赠 皂怎造贼蚤责造藻 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶泽援
含 悦则赠圆粤遭和 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭蛋白饲料的大草蛉幼
虫体内的类胰蛋白酶尧类胰凝乳蛋白酶尧谷胱甘肽鄄
杂鄄转移酶尧氨肽酶的活性均显著高于对照渊表 圆冤遥
与对照相比袁取食含有 月贼蛋白人工饲料后羽化
的大草蛉成虫体内的类胰蛋白酶渊云 越 猿援 圆圆袁孕 越
园援 园愿冤尧类胰凝乳蛋白酶渊云 越 员援 员苑袁孕 越 园援 猿愿冤尧谷胱
甘肽鄄杂鄄转移酶渊云 越 员援 员源袁孕 越 园援 猿怨冤尧氨肽酶渊云 越
猿援 苑圆袁孕 越园援 园远冤的活性均没有显著差异渊图 圆冤遥
表 圆摇 取食不同饲料的大草蛉幼虫酶活性变化
栽葬遭造藻 圆 悦澡葬灶早藻泽 燥枣 藻灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 蚤灶 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽 造葬则增葬藻 枣藻凿 憎蚤贼澡 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽
皂韵阅窑皂蚤灶 原员窑皂早 原员
处理
栽则藻葬贼皂藻灶贼
类胰蛋白酶
栽则赠责泽蚤灶鄄造蚤噪藻 藻灶扎赠皂藻
类胰凝乳蛋白酶
悦澡赠皂燥贼则赠责泽蚤灶鄄造蚤噪藻 藻灶扎赠皂藻
谷胱甘肽鄄杂鄄转移酶
郧造怎贼葬贼澡蚤燥灶藻鄄杂鄄贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻
氨肽酶
粤皂蚤灶燥责藻责贼蚤凿葬泽藻 晕
含 悦则赠员粤糟饲料
阅蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 悦则赠员粤糟
缘苑援 猿猿 依 源援 愿猿 糟 源园苑援 园远 依 员苑援 圆员 遭 圆园员援 猿猿 依 圆源援 园远 遭 源远远援 愿员 依 猿员援 员苑 糟
含 悦则赠圆粤遭饲料
阅蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 悦则赠圆粤遭
圆源园援 远愿 依 员猿援 源怨 葬 缘愿员援 猿员 依 员圆援 愿愿 葬 缘缘苑援 猿怨 依 苑员援 怨园 葬 员 员怨猿援 怨苑 依 员园圆援 园圆 葬
含 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭饲料
阅蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭
员员怨援 猿苑 依 圆援 愿园 遭 猿员苑援 圆圆 依 猿愿援 怨怨 遭 源员愿援 缘园 依 圆苑援 园怨 葬 愿苑远援 怨苑 依 怨援 苑员 遭
正常饲料 悦燥灶贼则燥造 缘园援 怨苑 依 圆援 员愿 糟 员源愿援 猿苑 依 圆援 员猿 糟 圆圆员援 员远 依 员员援 愿园 遭 源缘怨援 缘圆 依 员愿援 远愿 糟
云值 云 增葬造怎藻 圆苑园援 远猿 缘源援 怨怨 圆源援 园愿 苑员援 猿源
孕值 孕 增葬造怎藻 约 园援 园园园员 园援 园园园员 园援 园员 约 园援 园园园员
摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 同列不同字母表示处理组间经 栽怎噪藻赠 法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂耘援 阅葬贼葬 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 栽怎噪藻赠 皂怎造贼蚤责造藻 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶泽援
猿 讨论
为评价转基因作物中 月贼 蛋白对草蛉的直接影
响袁砸燥皂藻蚤泽等咱员缘暂通过给普通草蛉直接饲喂高浓度
月贼蛋白 渊该浓度是一般初级消费者害虫体内的
员园 园园园 倍袁达到 员 皂早 辕 皂蕴冤的方法研究其对田间天敌
的影响袁结果发现 员 龄草蛉幼虫取食 悦则赠员粤遭 后袁圆
龄和 猿 龄幼虫对 悦则赠员粤遭 的敏感度和捕食能力都不
受影响遥 杂皂蚤泽咱圆源暂把 圆园 滋早 辕 皂蕴 的 悦则赠员粤糟 纯蛋白掺
入饲料中进行生物测定袁认为 悦则赠员粤糟对草蛉的影响
可以忽略遥 本试验中袁采用高于棉花叶子中 月贼蛋白
表达量 圆园 倍的浓度来研究幼虫取食含 月贼蛋白饲料
后对大草蛉的影响袁利用高浓度蛋白来增加危险评
估结论的准确性咱圆缘暂 遥 结果发现与对照相比袁大草蛉
取食含 悦则赠员粤糟尧悦则赠圆粤遭 或 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭 蛋白的
人工饲料后袁各项生命表参数之间均没有显著差异袁
证明转基因抗虫棉花中表达的 月贼 蛋白对大草蛉生
物学指标没有直接的不利影响遥
大草蛉取食含 月贼的人工饲料后袁利用 耘蕴陨杂粤检
测了大草蛉幼虫和成虫体内的 月贼蛋白含量袁发现大
怨愿圆猿 期 王英丽等院 悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭蛋白对大草蛉生长发育及酶活力的影响
图 圆 取食含不同 月贼饲料后的大草蛉成虫酶活性
云蚤早援 圆 耘灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 悦澡则赠泽燥责葬 责葬造造藻灶泽 葬凿怎造贼 葬枣贼藻则 造葬则增葬藻 憎藻则藻 枣藻凿 憎蚤贼澡
葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 凿蚤藻贼 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 月贼 责则燥贼藻蚤灶泽
摇 摇 图中数据为平均数 依标准误遥 鄢表示处理组间数据经 栽怎噪藻赠法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂耘援
鄢燥灶 贼澡藻 遭葬则 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 栽怎噪藻赠 皂怎造贼蚤责造藻 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶泽援
草蛉幼虫取食 月贼蛋白后袁在幼虫体内可以检测到的
悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭蛋白含量分别是饲料中蛋白含量
的 园援 猿圆豫 耀园援 源怨豫和 员援 源园豫 耀猿援 园源豫 袁大草蛉羽化
后体内残存的 月贼蛋白含量已经非常低袁大约是处理
饲料中蛋白含量的 园援 园园园员豫 耀 园援 园员猿豫 袁基本可以
忽略不计遥 因此袁虽然幼虫一直取食含有 月贼 的人工
饲料袁但大部分很快被代谢掉袁幼虫体内检测到 月贼
蛋白含量低于处理剂量的 缘豫 遥 这与 韵遭则蚤泽贼等咱圆远暂的
研究结果类似袁取食转基因玉米的禾蓟马 云则葬灶鄄
噪造蚤灶蚤藻造造葬 贼藻灶怎蚤糟燥则灶蚤泽成虫体内 月贼 的残留时间很短袁在
圆源 澡之内 悦则赠员粤遭毒素含量减少了 怨苑豫 袁愿 凿 之后检
测不到 月贼蛋白的存在遥 砸燥凿则蚤早燥鄄杂蚤皂佼灶 等咱员苑暂发现草
蛉幼虫中肠没有特异的 悦则赠圆粤遭 或 悦则赠员粤糟 受体袁因
此当以高浓度的 月贼 直接注射或间接注射草蛉时袁
悦则赠蛋白不会对草蛉的生长发育产生影响袁这也从
机理上说明草蛉中肠不存在 悦则赠员粤糟或 悦则赠圆粤遭的受
体袁因此取食的 月贼蛋白很快被分解代谢出体外遥
胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶在 月贼 蛋白活化过程
中起到了重要作用咱圆苑暂 袁而且蛋白酶活性的改变与昆
虫对 月贼 产生抗性有关袁氨肽酶是 月贼 蛋白的重要受
体蛋白袁谷胱甘肽鄄杂鄄转移酶在外源化合物的代谢中
起到解毒作用遥 已有研究证明袁靶标害虫取食转基
因作物或 月贼蛋白后袁体内的消化酶尧解毒酶尧氨肽酶
等会发生变化袁如取食含有 悦则赠圆粤遭蛋白人工饲料的
小地老虎 粤早则燥贼蚤泽 赠责泽蚤造燥灶渊砸燥贼贼藻皂遭藻则早冤幼虫体内的类
胰凝乳蛋白酶尧谷胱甘肽鄄杂鄄转移酶活性显著高于对
照袁当人工饲料中 悦则赠圆粤遭杀虫蛋白含量达到 员圆 滋早 辕
早时袁小地老虎幼虫中肠氨肽酶活性也显著升
高咱圆愿暂 遥 本试验发现与对照相比袁取食含 悦则赠员粤糟 蛋
白饲料的大草蛉幼虫类胰凝乳蛋白酶活性显著升
高袁取食含 悦则赠圆粤遭 和 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭 蛋白饲料的
大草蛉幼虫体内的类胰蛋白酶尧类胰凝乳蛋白酶尧谷
胱甘肽尧氨肽酶活性均明显升高遥 因此推测袁虽然大
草蛉中肠不结合 月贼蛋白袁但需要快速地将取食的 月贼
蛋白降解袁从而引起蛋白酶尧解毒酶的明显升高曰本
试验还发现取食含 悦则赠员粤糟 仅引起 员 种酶活性发生
变化袁而 悦则赠圆粤遭 和 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭 引起 源 种酶的
活性均发生变化袁这可能与 悦则赠圆粤遭 和 悦则赠员粤糟 浓度
高低差异及降解的过程存在差异有关袁有待进一步
证实遥
本试验应用直接取食生物测定和酶活力比较袁
测定 悦则赠员粤糟和 悦则赠圆粤遭 对大草蛉的直接潜在影响袁
又通过 耘蕴陨杂粤 检测确认大草蛉取食到了具有生物
活性的 悦则赠 蛋白袁证实 悦则赠员粤糟 和 悦则赠圆粤遭 对大草蛉
的生长发育没有显著的直接不利影响袁试验结果为
评估转基因棉花中的 月贼 蛋白对非靶标天敌的影响
提供了依据遥
园怨圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 允葬皂藻泽 悦援 郧造燥遭葬造 泽贼葬贼怎泽 燥枣 糟燥皂皂藻则糟蚤葬造蚤扎藻凿 遭蚤燥贼藻糟澡 辕 郧酝 糟则燥责泽院
圆园员圆援 陨杂粤粤粤 月则蚤藻枣泽袁 圆园员猿袁 猿猿院 员 原 愿
咱圆暂 运造藻贼藻则 郧 粤袁 月澡怎造葬 砸袁 月燥凿灶葬则怎噪 运袁 藻贼 葬造援 粤造贼藻则藻凿 责藻泽贼蚤糟蚤凿藻 怎泽藻
燥灶 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 糟则燥责泽 葬灶凿 贼澡藻 葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 早藻灶藻则葬造 蚤皂责葬糟贼 枣则燥皂 葬灶
藻灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造 责藻则泽责藻糟贼蚤增藻援 孕藻泽贼 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园苑袁
远猿渊员员冤院 员员园苑 原 员员员缘
咱猿暂 宰怎 运 酝袁 蕴怎 再 匀袁 云藻灶早 匀 匝袁 藻贼 葬造援 杂怎责责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 糟燥贼贼燥灶
遭燥造造憎燥则皂 蚤灶 皂怎造贼蚤责造藻 糟则燥责泽 蚤灶 悦澡蚤灶葬 蚤灶 葬则藻葬泽 憎蚤贼澡 月贼 贼燥曾蚤灶鄄糟燥灶鄄
贼葬蚤灶蚤灶早 糟燥贼贼燥灶援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园愿袁 猿圆员渊缘愿怨远冤院 员远苑远 原 员远苑愿
咱源暂 云藻则则佴 允袁 增葬灶 砸蚤藻 允援 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟泽 燥枣 蚤灶泽藻糟贼 则藻泽蚤泽贼鄄
葬灶糟藻 贼燥 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽援 粤灶灶怎葬造 砸藻增蚤藻憎 燥枣 耘灶贼燥皂燥造燥早赠袁
圆园园圆袁 源苑渊员冤院 缘园员 原 缘猿猿
咱缘暂 运则葬灶贼澡蚤 运 砸袁 运则葬灶贼澡蚤 杂袁 粤造蚤 杂袁 藻贼 葬造援 砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥 耶悦则赠陨粤糟 啄鄄
藻灶凿燥贼燥曾蚤灶 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 爷 蚤灶 葬 造葬遭燥则葬贼燥则赠 泽藻造藻糟贼藻凿
泽贼则葬蚤灶 燥枣 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 葬则皂蚤早藻则葬 渊 匀俟遭灶藻则冤援 悦怎则则藻灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻袁
圆园园园袁 苑愿渊愿冤院 员园园员 原 员园园源
咱远暂 梁革梅袁 谭维嘉袁 郭予元援 棉铃虫对 月贼 的抗性筛选及交互
抗性研究援 中国农业科学袁 圆园园园袁 猿猿渊源冤院 源远 原 缘猿
咱苑暂 在澡葬燥 允 在袁 悦葬燥 允袁 蕴蚤 再 载袁 藻贼 葬造援 栽则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽 藻曾责则藻泽泽蚤灶早
贼憎燥 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 贼燥曾蚤灶泽 凿藻造葬赠 蚤灶泽藻糟贼 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 藻增燥造怎鄄
贼蚤燥灶援 晕葬贼怎则藻 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园猿袁 圆员渊员圆冤院 员源怨猿 原 员源怨苑
咱愿暂 月葬贼藻泽 杂 蕴袁 在澡葬燥 允 在袁 砸燥怎泽澡 砸 栽袁 藻贼 葬造援 陨灶泽藻糟贼 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 皂葬灶鄄
葬早藻皂藻灶贼 蚤灶 郧酝 糟则燥责泽院 责葬泽贼袁 责则藻泽藻灶贼 葬灶凿 枣怎贼怎则藻援 晕葬贼怎则藻 月蚤燥鄄
贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园缘袁 圆猿渊员冤院 缘苑 原 远圆
咱怨暂 云藻则则佴 允袁 增葬灶 砸蚤藻 允袁 酝葬糟陨灶贼燥泽澡 杂 悦援 陨灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 早藻灶藻贼蚤糟葬造造赠
皂燥凿蚤枣蚤藻凿 糟则燥责泽 葬灶凿 蚤灶泽藻糟贼 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 皂葬灶葬早藻皂藻灶贼 渊 陨砸酝冤援 辕 辕
砸燥皂藻蚤泽 允袁 杂澡藻造贼燥灶 粤 酝袁 运藻灶灶藻凿赠 郧 郧援 陨灶贼藻早则葬贼蚤燥灶 燥枣 蚤灶泽藻糟贼鄄则藻鄄
泽蚤泽贼葬灶贼 早藻灶藻贼蚤糟葬造造赠 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 糟则燥责泽 憎蚤贼澡蚤灶 陨孕酝 责则燥早则葬皂泽援 杂责则蚤灶早藻则
晕藻贼澡藻则造葬灶凿泽袁 圆园园愿院 源员 原 愿缘
咱员园暂 蕴燥泽藻赠 允 耘袁 砸葬赠燥则 蕴 杂袁 悦葬则贼藻则 酝 耘援 栽则葬灶泽早藻灶蚤糟 责燥造造藻灶 澡葬则皂泽
皂燥灶葬则糟澡 造葬则增葬藻援 晕葬贼怎则藻袁 员怨怨怨袁 猿怨怨渊远苑猿猿冤院 圆员源
咱员员暂 李保平袁 孟玲袁 万方浩援 转基因抗虫植物对天敌昆虫的影
响援 中国生物防治袁 圆园园圆袁 员愿渊猿冤院 怨苑 原 员园缘
咱员圆暂 蕴蚤 再袁 酝藻蚤泽泽造藻 酝袁 砸燥皂藻蚤泽 允援 悦燥灶泽怎皂责贼蚤燥灶 燥枣 月贼 皂葬蚤扎藻 责燥造造藻灶
藻曾责则藻泽泽蚤灶早 悦则赠员粤遭 燥则 悦则赠猿月遭员 凿燥藻泽 灶燥贼 澡葬则皂 葬凿怎造贼 早则藻藻灶 造葬鄄
糟藻憎蚤灶早泽袁 悦澡则赠泽燥责藻则造葬 糟葬则灶藻葬 渊 晕藻怎则燥责贼藻则葬院 悦澡则赠泽燥责蚤凿葬藻 冤援
孕蕴燥杂 韵晕耘袁 圆园园愿袁 猿渊愿冤院 藻圆怨园怨
咱员猿暂 雒珺瑜袁崔金杰袁辛惠江援 转 悦则赠员粤糟 垣 悦则赠圆粤遭 基因棉花对
天敌生长发育的影响援 中国棉花袁 圆园员员袁 猿愿渊员圆冤院 员员 原 猿远
咱员源暂 匀蚤造遭藻糟噪 粤袁 月葬怎皂早葬则贼灶藻则 酝袁 云则蚤藻凿 孕 酝袁 藻贼 葬造援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣
贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 糟燥则灶鄄枣藻凿 责则藻赠 燥灶 皂燥则贼葬造蚤贼赠 葬灶凿
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 贼蚤皂藻 燥枣 蚤皂皂葬贼怎则藻 悦澡则赠泽燥责藻则造葬 糟葬则灶藻葬 渊 晕藻怎则燥责鄄
贼藻则葬院 悦澡则赠泽燥责蚤凿葬藻 冤援 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造 耘灶贼燥皂燥造燥早赠袁 员怨怨愿袁 圆苑
渊圆冤院 源愿园 原 源愿苑
咱员缘暂 砸燥皂藻蚤泽 允袁 阅怎贼贼燥灶 粤袁 月蚤早造藻则 云援 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 贼燥曾蚤灶
渊悦则赠员粤遭冤 澡葬泽 灶燥 凿蚤则藻糟贼 藻枣枣藻糟贼 燥灶 造葬则增葬藻 燥枣 贼澡藻 早则藻藻灶 造葬糟藻憎蚤灶早
悦澡则赠泽燥责藻则造葬 糟葬则灶藻葬 渊 杂贼藻责澡藻灶泽冤 渊晕藻怎则燥责贼藻则葬院 悦澡则赠泽燥责蚤凿葬藻冤援
允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶泽藻糟贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园源袁 缘园渊圆冤院 员苑缘 原 员愿猿
咱员远暂 阅怎贼贼燥灶 粤袁 运造藻蚤灶 匀袁 砸燥皂藻蚤泽 允袁 藻贼 葬造援 哉责贼葬噪藻 燥枣 月贼鄄贼燥曾蚤灶 遭赠
澡藻则遭蚤增燥则藻泽 枣藻藻凿蚤灶早 燥灶 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 皂葬蚤扎藻 葬灶凿 糟燥灶泽藻择怎藻灶糟藻泽 枣燥则
贼澡藻 责则藻凿葬贼燥则 悦澡则赠泽燥责藻则造葬 糟葬则灶藻葬援 耘糟燥造燥早蚤糟葬造 耘灶贼燥皂燥造燥早赠袁
圆园园圆袁 圆苑渊源冤院 源源员 原 源源苑
咱员苑暂 砸燥凿则蚤早燥鄄杂蚤皂佼灶 粤袁 酝葬葬早凿 砸 粤袁 凿藻 粤增蚤造造葬 悦袁 藻贼 葬造援 蕴葬糟噪 燥枣
凿藻贼则蚤皂藻灶贼葬造 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 悦则赠 贼燥曾蚤灶泽 燥灶 贼澡藻
蚤灶泽藻糟贼 责则藻凿葬贼燥则 悦澡则赠泽燥责藻则造葬 糟葬则灶藻葬院 葬 贼燥曾蚤糟燥造燥早蚤糟葬造袁 澡蚤泽贼燥责葬贼澡燥鄄
造燥早蚤糟葬造袁 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 葬灶葬造赠泽蚤泽援 粤责责造蚤藻凿 葬灶凿 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造
酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠袁 圆园园远袁 苑圆渊圆冤院 员缘怨缘 原 员远园猿
咱员愿暂 砸燥皂藻蚤泽 允袁 酝藻蚤泽泽造藻 酝袁 月蚤早造藻则 云援 栽则葬灶泽早藻灶蚤糟 糟则燥责泽 藻曾责则藻泽泽蚤灶早
月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 贼燥曾蚤灶泽 葬灶凿 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟燥灶贼则燥造援 晕葬贼怎则藻 月蚤燥鄄
贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园远袁 圆源渊员冤院 远猿 原 苑员
咱员怨暂 再怎 匀 蕴袁 蕴蚤 再 匀袁 宰怎 运 酝援 砸蚤泽噪 葬泽泽藻泽泽皂藻灶贼 葬灶凿 藻糟燥造燥早蚤糟葬造
藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 糟则燥责泽 燥灶 灶燥灶鄄贼葬则早藻贼
燥则早葬灶蚤泽皂泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶贼藻早则葬贼蚤增藻 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员员袁 缘猿
渊苑冤院 缘圆园 原 缘猿愿
咱圆园暂 杂贼葬责造藻泽 晕袁 耘造造葬则 阅袁 悦则蚤糟噪皂燥则藻 晕援 悦藻造造怎造葬则 造燥糟葬造蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 月葬糟蚤造造怎泽 贼澡怎则蚤灶早蚤藻灶泽蚤泽 韵则枣圆 糟则赠泽贼葬造造蚤扎葬贼蚤燥灶
枣葬糟贼燥则援 悦怎则则藻灶贼 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠袁 圆园园员袁 源圆渊远冤院 猿愿愿 原 猿怨圆
咱圆员暂 蕴蚤 再袁 砸燥皂藻蚤泽 允袁 宰葬灶早 孕袁 藻贼 葬造援 粤 糟燥皂责则藻澡藻灶泽蚤增藻 葬泽泽藻泽泽皂藻灶贼
燥枣 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 月贼 糟燥贼贼燥灶 燥灶 悦燥造藻燥皂藻早蚤造造葬 皂葬糟怎造葬贼葬 凿藻皂燥灶鄄
泽贼则葬贼藻泽 灶燥 凿藻贼则蚤皂藻灶贼葬造 藻枣枣藻糟贼泽 遭赠 悦则赠员粤糟 葬灶凿 悦则赠圆粤遭援 孕蕴燥杂
韵晕耘袁 圆园员员袁 远渊苑冤院 藻圆圆员愿缘
咱圆圆暂 王琛柱袁 钦俊德援 棉铃虫幼虫中肠主要蛋白酶活性的鉴
定援 昆虫学报袁 员怨怨远袁 猿怨渊员冤院 苑 原 员源
咱圆猿暂 月则葬凿枣燥则凿 酝 酝援 粤 则葬责蚤凿 葬灶凿 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 皂藻贼澡燥凿 枣燥则 贼澡藻 择怎葬灶贼蚤贼葬鄄
贼蚤燥灶 燥枣 皂蚤糟则燥早则葬皂 择怎葬灶贼蚤贼蚤藻泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶 怎贼蚤造蚤扎蚤灶早 贼澡藻 责则蚤灶糟蚤责造藻 燥枣
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