全 文 ：第 源员 卷摇 第 猿 期
圆园员源 年 远 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 猿
允怎灶藻 摇 圆园员源
摇
基金项目院 现代农业产业技术体系渊悦粤砸杂鄄圆愿冤袁公益性行业渊农业冤科研专项渊灶赠澡赠扎曾猿鄄圆圆冤袁山东省科技攻关计划渊圆园员园郧晕悦员园怨员愿冤袁国
家自然科学基金渊猿员园园园愿怨员袁猿员圆苑圆园园员冤袁山东省野泰山学者冶建设工程
作者简介院 雍道敬袁女袁员怨愿苑年生袁硕士研究生袁研究方向为果树病理学袁 耘鄄皂葬蚤造院 赠燥灶早凿葬燥躁蚤灶早岳 员圆远援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 遭葬燥澡怎葬造蚤岳 择葬怎援 藻凿怎援 糟灶
收稿日期院 圆园员猿 原 员员 原 员愿
内生放线菌 粤鄄员对苹果果实轮纹病的
防效及防御性酶活性的影响
雍道敬摇 王彩霞摇 李桂舫摇 李保华鄢
渊青岛农业大学农学与植物保护学院袁 山东省植物病虫害综合防控重点实验室袁 青岛 圆远远员园怨冤
摘要院 为揭示内生放线菌 粤鄄员 对苹果果实轮纹病的防效及防病机制袁采用平板法和喷雾处理刺伤
接种法袁测定了其对苹果轮纹病菌的抑制作用及果实内防御性酶活性的影响遥 结果表明院菌株 粤鄄员
能显著抑制轮纹病菌菌丝生长袁员园源 悦云哉 辕 皂蕴菌悬液的抑制率达 怨园豫以上曰喷施 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 粤鄄员 菌
悬液后袁间隔 员圆 澡以上接种的各处理袁猿 凿 和 苑 凿 时防效分别为 怨员援 苑怨豫 耀 怨缘援 远苑豫和 苑苑援 源员豫 耀
怨源郾 园园豫 袁均与对照农药苯醚甲环唑相当遥 喷施 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 粤鄄员 菌悬液后接种或不接种轮纹病菌
的处理袁果实内过氧化物酶尧过氧化氢酶尧多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性显著升高袁且均高于只
接种轮纹病菌的处理曰喷施 粤鄄员 菌悬液后接种病原菌的处理酶活性增加最显著袁其峰值是对照的
圆援 猿园 耀 员员援 园园 倍遥 表明内生放线菌 粤鄄员 可通过产生拮抗物质尧提高寄主防御性酶活性等机制实现
对苹果轮纹病的有效防治遥
关键词院 放线菌 粤鄄员曰 苹果轮纹病菌曰 防效曰 防御性酶曰 生防机制
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 葬糟贼蚤灶燥皂赠糟藻贼藻泽 粤鄄员 葬早葬蚤灶泽贼 葬责责造藻 枣则怎蚤贼
则蚤灶早 则燥贼 葬灶凿 蚤贼泽 蚤灶枣造怎藻灶糟藻 燥灶 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 凿藻枣藻灶泽藻鄄则藻造葬贼藻凿 藻灶扎赠皂藻泽
再燥灶早 阅葬燥躁蚤灶早摇 宰葬灶早 悦葬蚤曾蚤葬摇 蕴蚤 郧怎蚤枣葬灶早摇 蕴蚤 月葬燥澡怎葬鄢
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 陨灶贼藻早则葬贼藻凿 燥枣 悦则燥责 孕藻泽贼 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 燥枣 杂澡葬灶凿燥灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦燥造造藻早藻 燥枣 粤早则燥灶燥皂赠 葬灶凿
孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 匝蚤灶早凿葬燥 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匝蚤灶早凿葬燥 圆远远员园怨袁 杂澡葬灶凿燥灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 则藻增藻葬造 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 葬灶凿 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 葬糟贼蚤灶燥皂赠糟藻贼藻泽
泽贼则葬蚤灶 粤鄄员 葬早葬蚤灶泽贼 葬责责造藻 枣则怎蚤贼 则蚤灶早 则燥贼 糟葬怎泽藻凿 遭赠 月燥贼则赠燥泽责澡葬藻则蚤葬 凿燥贼澡蚤凿藻葬袁 贼澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣 泽贼则葬蚤灶
粤鄄员 贼燥 月援 凿燥贼澡蚤凿藻葬 葬灶凿 蚤贼泽 藻枣枣藻糟贼 燥灶 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 凿藻枣藻灶泽藻鄄则藻造葬贼藻凿 藻灶扎赠皂藻泽 蚤灶 葬责责造藻 枣则怎蚤贼泽 憎藻则藻
凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 怎泽蚤灶早 贼澡藻 葬早葬则 责造葬贼藻 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 泽责则葬赠蚤灶早 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员 糟燥皂遭蚤灶藻凿 憎蚤贼澡 憎燥怎灶凿 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶援 栽澡藻
泽贼葬蚤灶 粤鄄员 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 蚤灶澡蚤遭蚤贼藻凿 贼澡藻 早则燥憎贼澡 燥枣 月援 凿燥贼澡蚤凿藻葬 葬灶凿 贼澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 则葬贼藻 憎葬泽 皂燥则藻 贼澡葬灶 怨园豫
憎澡藻灶 员园源 悦云哉 辕 皂蕴 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻 憎葬泽 怎泽藻凿援 宰澡藻灶 葬责责造赠蚤灶早 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员 枣燥则 皂燥则藻
贼澡葬灶 员圆 澡袁 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 月援 凿燥贼澡蚤凿藻葬 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶袁 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 憎葬泽 怨员援 苑怨豫 原 怨缘援 远苑豫 燥则
苑苑郾 源员豫 原 怨源援 园园豫 葬贼 猿 燥则 苑 凿 责燥泽贼 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁 憎澡蚤糟澡 憎葬泽 糟燥皂责葬则葬遭造藻 贼燥 贼澡葬贼 燥枣
凿蚤枣藻灶燥糟燥灶葬扎燥造藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼援 栽澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 责藻则燥则蚤凿葬泽藻 渊 孕韵阅冤袁 糟葬贼葬造葬泽藻 渊 悦粤栽冤袁 责燥造赠责澡藻灶燥造 燥曾蚤凿葬泽藻
渊孕孕韵冤袁 葬灶凿 责澡藻灶赠造葬造葬灶蚤灶藻 葬皂皂燥灶蚤葬造赠葬泽藻 渊孕粤蕴冤 憎藻则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 藻灶澡葬灶糟藻凿 蚤灶 葬责责造藻 枣则怎蚤贼泽 责则藻鄄贼则藻葬贼藻凿
憎蚤贼澡 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员 葬造燥灶藻 燥则 蚤灶 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 月援 凿燥贼澡蚤凿藻葬 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶援 栽澡藻 藻灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 蚤灶糟则藻葬泽藻凿
泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 蚤灶 枣则怎蚤贼泽 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员袁 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 月援 凿燥贼澡蚤凿藻葬
蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶援 栽澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 责藻葬噪泽 燥枣 孕孕韵袁 悦粤栽袁 孕韵阅 葬灶凿 孕粤蕴 蚤灶 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 憎藻则藻 圆援 猿园 贼燥 员员援 园园 贼蚤皂藻泽
澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡燥泽藻 燥枣 糟燥灶贼则燥造泽援 栽澡藻 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 葬糟贼蚤灶燥皂赠糟藻贼藻泽 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员 憎葬泽 藻枣枣藻糟贼蚤增藻 蚤灶 责则燥贼藻糟贼蚤灶早 葬责责造藻
枣则怎蚤贼 葬早葬蚤灶泽贼 月援 凿燥贼澡蚤凿藻葬 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 增蚤葬 责则燥凿怎糟蚤灶早 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 泽怎遭泽贼葬灶糟藻泽 葬灶凿 蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣
凿藻枣藻灶泽藻鄄则藻造葬贼藻凿 藻灶扎赠皂藻泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 葬糟贼蚤灶燥皂赠糟藻贼藻泽 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员曰 月燥贼则赠燥泽责澡葬藻则蚤葬 凿燥贼澡蚤凿藻葬曰 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠曰 凿藻枣藻灶泽藻鄄则藻造葬贼藻凿
藻灶扎赠皂藻曰 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂
摇 摇 由葡萄座腔菌 月燥贼则赠燥泽责澡葬藻则蚤葬 凿燥贼澡蚤凿藻葬 引起的苹
果轮纹病是我国苹果生产上的三大病害之一袁主要
为害苹果枝干和果实袁不仅严重削弱树势袁造成枝干
枯死袁甚至可导致大量烂果袁造成巨大的经济损
失咱员 原 圆暂 遥 轮纹病菌从果实幼果期即可侵入袁近成熟
期大量发生袁由于其潜伏期长袁也是苹果储藏期的重
要病害咱猿 原 源暂 遥 目前袁我国主栽的富士尧元帅尧金冠等
苹果品种均对轮纹病菌非常敏感咱缘暂 遥 圆园员猿 年对山
东苹果产区调查发现袁部分果园套袋苹果轮纹烂果
率为 圆园豫 耀 猿园豫 袁重病果园烂果率高达 苑园豫以上
渊未发表资料冤遥
生产中苹果枝干轮纹病的控制主要以化学防治
为主袁果实轮纹病以套袋保护为主袁由于苹果套袋成
本逐年上涨袁苹果的无袋栽培已成为必然趋势袁但果
实轮纹病是苹果无袋栽培首先要解决的关键问
题咱远 原 愿暂 遥 苹果储藏期轮纹病的防治也主要采取化学
药剂浸泡果实的方法袁但频繁地使用化学农药不仅
造成果园生态环境恶化袁抗药性菌株出现袁而且会导
致果实农药残留超标袁严重威胁着我国的果品质量
安全咱怨 原 员园暂 遥 因此袁寻找安全高效的防治方法对提高
果品产量和质量具有重要意义遥
目前袁利用生防菌防治苹果轮纹病的研究备受
关注袁赵白鸽等咱员员暂报道枯草芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤鄄
造蚤泽对苹果轮纹病菌有明显的抑制作用曰纪兆林等咱员园暂
从土壤中分离到一株地衣芽胞杆菌 月援 造蚤糟澡藻灶蚤枣燥则皂蚤泽袁
其分泌的抗菌蛋白可抑制轮纹病菌产孢和分生孢子
萌发袁并对果实轮纹病具有明显防效遥 此外袁何其瑞
和黄丽丽咱员圆暂 尧王彩霞等咱员猿暂和张清明等咱员源暂研究发现
淡紫灰链霉菌 杂贼则藻责贼燥皂赠糟藻泽 造葬增藻灶凿怎葬造尧微嗜酸寡氧单
胞菌 杂贼藻灶燥贼则燥责澡燥皂燥灶葬泽 葬糟蚤凿葬皂蚤灶蚤责澡蚤造葬 和卡伍尔链霉
菌杂援 糟葬增燥怎则藻灶泽蚤泽对苹果轮纹病菌具有显著的拮抗作
用袁但有关生防菌对苹果轮纹病的防病机制研究尚
未见报道袁而明确其作用机制对于生防菌株的应用
具有重要意义遥
本课题组从富士苹果果实内分离获得一株对轮
纹病菌具有显著拮抗作用的内生放线菌菌株 粤鄄员袁
在对其进行鉴定和发酵条件优化的基础上咱员缘暂 袁本研
究采用平板法和喷雾处理刺伤接种法袁对菌株 粤鄄员
防治果实轮纹病的效果尧喷施该菌株及接种轮纹病
菌后果实内防御性酶活性的时序变化等进行了测
定袁以期明确放线菌 粤鄄员 的防病机制袁为其开发利用
提供参考遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试菌株院供试苹果为健康成熟富士袁采集自山
东莱阳商品苹果园遥 苹果内生放线菌菌株 粤鄄员 为本
实验室从富士果实内分离获得袁对多种果树病原真
菌表现出明显的拮抗作用曰经形态学观察结合生理
生化特性尧员远杂 则阅晕粤 序列分析袁将其鉴定为娄彻氏
链霉菌 杂贼则藻责贼燥皂赠糟藻泽 则燥糟澡藻蚤咱员缘暂 遥 苹果轮纹病菌菌株
蕴载杂园猿园员园员 采集自山东莱阳商品富士苹果园袁单孢
分离后于本实验室保存咱员远暂 遥
药剂院员园豫苯醚甲环唑渊凿蚤枣藻灶燥糟燥灶葬扎燥造藻冤可湿性
粉剂购自先正达渊苏州冤作物保护有限公司遥
培养基院放线菌 粤鄄员 液体发酵使用黄豆粉培养
基渊黄豆粉 员园援 园 早尧葡萄糖 员园援 园 早尧晕葬悦造 圆援 缘 早尧悦葬悦韵猿圆援 园 早尧蛋白胨 猿援 园 早袁责匀 值 苑援 园 耀 苑援 圆袁蒸馏水定容至
员 园园园 皂蕴冤曰放线菌 粤鄄员 和轮纹病菌 蕴载杂园猿园员园员 的培
养分别采用高氏一号渊可溶性淀粉 圆园援 园 早尧运晕韵猿员援 园 早尧运圆匀孕韵源 园援 缘 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 缘 早尧晕葬悦造 园援 缘 早尧云藻杂韵源窑苑匀圆韵 园援 园员 早尧琼脂 圆园援 园 早袁责匀 值 苑援 源 耀 苑援 远冤
和 孕阅粤培养基渊马铃薯 圆园园援 园 早尧葡萄糖 圆园援 园 早尧琼脂
圆园援 园 早袁蒸馏水定容至 员 园园园 皂蕴冤遥
仪器院紫外可见分光光度计 栽远袁北京普析通用
仪器公司曰台式冷冻离心机 缘愿员园砸袁德国 耘责责藻灶凿燥则枣
公司曰恒温振荡器 匀在匝鄄载猿园园悦袁上海一恒科学仪器
公司曰光照培养箱 蕴砸匀鄄圆缘园鄄郧袁广东医疗器械厂遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 放线菌菌株 粤鄄员 的液体发酵
取实验室保存的放线菌菌株 粤鄄员袁在高氏一号
培养基上活化培养 苑 凿 后袁接种于黄豆粉培养基中袁
于 圆愿 益尧员愿园 则 辕 皂蚤灶 振荡培养 苑圆 澡袁得到菌株 粤鄄员 种
子液遥 按 员园豫的初始接种量接种于 愿园皂蕴新鲜黄豆
远猿猿 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
粉培养基中袁按上述条件继续培养 苑圆 澡袁即为 粤鄄员 菌
悬液袁调节含菌量约为 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴遥
员援 圆援 圆 菌株 粤鄄员 对苹果轮纹病菌的抑制作用
在 孕阅粤平板上测定菌株 粤鄄员 对苹果轮纹病菌
菌丝生长的抑制效果袁参考张清明等咱员源暂方法遥 菌株
粤鄄员 在高氏一号培养基上活化培养 苑 凿袁轮纹病菌
蕴载杂园猿园员园员 在 孕阅粤培养基上活化培养 圆 凿袁分别在
菌落边缘打取直径 远 皂皂 的菌饼遥 在直径 怨园 皂皂 的
平皿一侧接种 粤鄄员 菌饼袁恒温暗培养 圆 凿 后袁在平板
另一侧对峙接种 蕴载杂园猿园员园员 菌饼袁以单独接种轮纹
病菌的平皿作对照遥 将 员援 圆援 员 中的 粤鄄员 菌悬液稀
释后加入 孕阅粤培养基中并制备平板袁最终含菌量约
为 员园源 悦云哉 辕 皂蕴袁轮纹病菌菌饼接种于平板中央袁以
未加入 粤鄄员 菌悬液的平皿作对照遥 于 圆缘 益恒温暗
培养袁待对照平皿菌落长满平板袁观察并记录抑菌
效果袁每处理设置 猿 个重复遥 抑菌率 越 渊对照组菌
落直径 原 处理组菌落直径冤 辕对照组菌落直径 伊
员园园豫 遥
员援 圆援 猿 菌株 粤鄄员 对果实轮纹病的防治效果
选择直径 苑园 耀 苑缘 皂皂 的健康果实袁流水洗净后
苑缘豫酒精表面消毒袁晾干备用遥 在苹果赤道处刺伤袁
每伤口直径约 园援 猿 皂皂袁深约 员援 园 皂皂袁每果实 猿 耀 源 处
伤口遥 将上述 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 粤鄄员 菌悬液均匀喷雾到
果实上袁直到有水滴滴下袁无菌操作台上吹干后再次
喷雾袁直至每果实接种 员缘 皂蕴 菌悬液袁分别于 圆尧远尧
员圆尧圆源尧源愿 澡 后在刺伤处接种 蕴载杂园猿园员园员 菌饼曰对
照组和农药处理组果实分别喷雾 员缘 皂蕴无菌黄豆粉
培养基和苯醚甲环唑后 圆源 澡 在刺伤处接种
蕴载杂园猿园员园员遥 接种后果实置于 圆缘 益尧相对湿度
员园园豫下培养袁定期观察病斑扩展情况袁测定病斑面
积并计算防治效果遥 每处理接种 怨 个果实袁猿 次重
复遥 防治效果 越 渊对照组病斑面积 原处理组病斑面
积冤 辕对照组病斑面积 伊员园园豫 遥
员援 圆援 源 菌株 粤鄄员 处理后果实内防御性酶活性测定
果实接种与取样方法院怨远 个富士果实经消毒处
理后袁按 员援 圆援 猿 中方法进行刺伤袁分别进行如下处
理院淤喷雾 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 粤鄄员 菌悬液 员缘皂蕴曰于喷雾无
菌黄豆粉培养基 员缘 皂蕴袁刺伤处接种 蕴载杂园猿园员园员 菌
饼曰盂喷雾 员园苑 悦云哉 辕 皂蕴 粤鄄员 菌悬液 员缘皂蕴袁刺伤处接
种 蕴载杂园猿园员园员 菌饼曰榆喷雾无菌黄豆粉培养基
员缘 皂蕴作为对照遥 接种后果实置于 圆缘 益尧相对湿度
员园园豫下袁定期观察发病情况并以接种点为中心袁取
病健交界处组织袁于 原 愿园 益冰箱保存备用遥 每处理
随机选取 圆 个果实作为 员 次重复袁设 猿 次重复遥
酶液的提取及活性测定院酶液提取参照 酝燥藻则鄄
泽糟澡遭葬糟澡藻则等咱员苑暂方法袁略作改进遥 取 缘援 园 早 果实组织
加入 缘 皂蕴含 员豫 孕灾孕的 园援 员 皂燥造 辕 蕴磷酸缓冲液渊责匀
缘援 缘 耀 愿援 愿冤袁冰浴充分研磨后袁于 源 益尧员园 园园园 则 辕 皂蚤灶
离心 圆园 皂蚤灶袁所得上清液即为酶粗提液遥 过氧化物
酶渊责藻则燥曾蚤凿葬泽藻袁 孕韵阅冤的活性测定参照乔富廉咱员愿暂方
法袁以每分钟 韵阅源苑园变化 园援 园员 的酶量定义为 员 个酶
活性单位遥 过氧化氢酶渊糟葬贼葬造葬泽藻袁 悦粤栽冤和多酚氧化
酶渊责燥造赠责澡藻灶燥造 燥曾蚤凿葬泽藻袁 孕孕韵冤活性的测定参考高勇
等咱员怨暂方法袁分别以 韵阅圆源园和 韵阅源员园每分钟内变化 园援 园员
的酶量作为 员 个酶活性单位遥 苯丙氨酸解氨酶
渊责澡藻灶赠造葬造葬灶蚤灶藻 葬皂皂燥灶蚤葬造赠葬泽藻袁 孕粤蕴冤活性测定参考
匝蚤灶 驭 栽蚤葬灶咱圆园暂和李琳琳等咱圆员暂方法袁以 韵阅圆怨园每小时
变化 园援 园园员 所需酶量作为 员 个酶活单位遥
员援 猿 数据分析
采用 杂孕杂杂 员苑援 园 进行数据统计袁用 阅怎灶糟葬灶 氏新
复极差法进行差异显著性分析遥
圆 结果与分析
圆援 员 菌株 粤鄄员 对苹果轮纹病菌菌丝生长的影响
对苹果轮纹病菌 蕴载杂园猿园员园员 菌丝生长的测定
结果表明袁菌株 粤鄄员 可明显抑制 蕴载杂园猿园员园员 菌丝的
生长袁对峙培养 苑 凿 后袁轮纹病菌菌丝颜色明显加
深袁抑菌率达 缘圆援 圆圆豫 渊图 员鄄葬冤曰粤鄄员 菌悬液稀释至
员园源 悦云哉 辕 皂蕴时袁仍对轮纹病菌表现出显著的抑制作
用袁平均抑菌率高达 怨园豫以上渊图 员鄄遭冤遥
圆援 圆 菌株 粤鄄员 对果实轮纹病的防效
菌株 粤鄄员 对果实轮纹病有明显的抑制效果袁但
不同施用时间对轮纹病的防治效果存在显著差异
渊孕 约园援 园缘冤遥 喷施 粤鄄员 菌悬液后袁间隔 圆 澡 和 远 澡 接
种 蕴载杂园猿园员园员 其防效无显著差异袁但随发病时间的
延长抑制效果有所降低袁从接种 猿 凿后的 苑缘援 圆愿豫和
苑怨援 怨苑豫下降至 苑 凿后的 源猿援 猿员豫和 猿怨援 缘怨豫 渊图 圆冤遥
喷施 粤鄄员 菌悬液后间隔 员圆 澡以上接种的各处理袁猿 凿
后防效为 怨员援 苑怨豫 耀 怨缘援 远苑豫 曰随发病时间的延长袁
各处理病斑面积略有增加袁但其防效并未降低袁仍高
达 苑苑援 源员豫 耀 怨源援 园园豫 袁均与对照农药苯醚甲环唑
相当遥
圆援 猿 菌株 粤鄄员 对防御性酶活性的影响
圆援 猿援 员 孕韵阅活性
相比仅喷施液体培养基的对照袁各处理均显著
提高了果实内 孕韵阅活性水平袁但不同处理诱导的酶
活性变化趋势存在显著差异渊图 猿鄄葬冤遥 单独接种轮
纹病菌后 猿 凿内袁孕韵阅活性变化不明显袁均与对照相当袁
苑猿猿猿 期 雍道敬等院 内生放线菌 粤鄄员 对苹果果实轮纹病的防效及防御性酶活性的影响
图 员 菌株 粤鄄员 对苹果轮纹病菌菌丝生长的影响
云蚤早援 员 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员 燥灶 皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 燥枣 月燥贼则赠燥泽责澡葬藻则蚤葬 凿燥贼澡蚤凿藻葬
摇 摇 葬院菌株 粤鄄员菌体曰遭院员园源 悦云哉 辕 皂蕴菌株 粤鄄员菌悬液遥 葬院 粤糟贼蚤灶燥皂赠糟藻贼藻泽 泽贼则葬蚤灶 粤鄄员曰 遭院 员园源 悦云哉 辕 皂蕴 泽贼葬蚤灶 粤鄄员 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻援
图 圆 菌株 粤鄄员 不同处理时间对苹果轮纹病的防治效果
云蚤早援 圆 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣 泽贼葬蚤灶 粤鄄员 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻 燥灶 葬责责造藻
枣则怎蚤贼泽 蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 憎蚤贼澡 月燥贼则赠燥泽责澡葬藻则蚤葬 凿燥贼澡蚤凿藻葬
摇 摇 图中数据为平均数 依标准差遥 不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则鄄
藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 葬遭燥增藻 贼澡藻 遭葬则 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
源 凿后活性开始显著高于对照渊孕 约 园援 园缘冤袁苑 凿 后达
到高峰为 员援 缘远 哉窑早 原员 云宰窑皂蚤灶 原员遥 喷施 粤鄄员 菌悬液
后 圆 凿袁孕韵阅活性达到高峰为 圆援 圆缘 哉窑早 原员云宰窑皂蚤灶 原员袁
随后下降袁但在 远 凿 后又出现一个小高峰曰喷施 粤鄄员
菌悬液后接种轮纹病菌的处理袁孕韵阅 活性于接种后
员 凿即达到高峰袁是对照酶活性的 员员援 园园 倍袁但随后
活性急剧下降袁圆 凿后仅为对照的 员援 愿愿 倍袁之后活性
缓慢上升袁于 苑 凿后达到另一活性高峰为 员援 愿园 哉窑早 原员
云宰窑皂蚤灶 原员遥
圆援 猿援 圆 悦粤栽活性
喷施 粤鄄员 菌悬液后接种或不接种轮纹病菌的处
理袁果实内 悦粤栽 活性变化趋势一致渊图 猿鄄遭冤袁均于
圆 凿出现一个小波动袁源 凿达到活性高峰袁分别为 缘猿园援 园园
哉窑皂早 原员云宰窑皂蚤灶 原员和 源苑员援 源猿 哉窑皂早 原员 云宰窑皂蚤灶 原员袁二
愿猿猿 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
者之间差异不显著遥 随后接种轮纹病菌的处理酶活
性急剧下降至对照水平袁而未接种处理酶活性缓慢
降低且始终显著高于对照渊孕 约 园援 园缘冤遥 单独接种轮
纹病菌的处理袁果实内 悦粤栽 活性于 猿 凿 后达到高峰
为 猿缘园援 园愿 哉窑皂早 原员 云宰窑皂蚤灶 原员袁随后缓慢降低袁苑 凿 后
与对照相当遥
图 猿 不同处理对苹果果实防御性酶活性的影响
云蚤早援 猿 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 燥灶 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 凿藻枣藻灶泽藻 藻灶扎赠皂藻泽 蚤灶 葬责责造藻 枣则怎蚤贼泽
圆援 猿援 猿 孕孕韵活性
苹果果实喷施发酵培养基后 孕孕韵 活性没有明
显变化袁但喷施 粤鄄员 菌悬液后接种或不接种轮纹病
菌及单独接种轮纹病菌的处理袁其果实内 孕孕韵 活性
均显著升高袁且于 猿 耀 源 凿后达到活性高峰渊图 猿鄄糟冤遥
喷施 粤鄄员 菌悬液后接种或单独接种轮纹病菌的处
理袁果实内 孕孕韵 最大活性分别是对照的 圆援 猿园 和
员郾 源苑 倍袁但之后活性迅速降低袁接种后 远 耀 苑 凿 的活
性甚至显著低于对照渊孕 约 园援 园缘冤曰而喷施 粤鄄员 菌悬
液后不接种轮纹病菌的处理活性缓慢下降袁苑 凿 后的
活性仍为对照的 员援 源愿 倍遥
圆援 猿援 源 孕粤蕴活性
各处理果实内 孕粤蕴活性相比对照均明显升高袁
活性变化趋势与 孕孕韵 类似渊图 猿鄄凿冤遥 喷施 粤鄄员 菌
悬液后接种或不接种轮纹病菌的处理袁猿 凿 后 孕粤蕴
活性达到高峰袁分别为 员园远援 园猿 哉窑早 原员 云宰窑澡 原员和
怨缘郾 园圆 哉窑早 原员云宰窑澡 原员袁是对照的 源援 愿圆 和 源援 猿圆 倍袁均
高于单独接种轮纹病菌的处理袁其在 源 凿 后活性达
到高峰为 远愿援 远苑 哉窑早 原员云宰窑澡 原员遥 喷施 粤鄄员 菌悬液后
接种轮纹病菌的处理 孕粤蕴 活性急剧下降袁苑 凿 后与
对照活性相当袁而单独喷施 粤鄄员 菌悬液的处理其活
性始终显著高于对照渊孕 约 园援 园缘冤遥
猿 讨论
本研究表明苹果内生放线菌 粤鄄员 对果实轮纹病
具有显著的防治效果袁喷施 粤鄄员 菌悬液间隔 员圆 澡 以
上接种的各处理袁苑 凿 后防效仍高达 苑苑援 源员豫 耀
怨源郾 园园豫 袁均与对照农药苯醚甲环唑相当袁说明该菌
株具有极高的开发应用潜能遥 有研究表明放线菌的
防病机制主要包括产生拮抗物质尧诱导寄主植物产
生抗病性尧与病原菌的竞争作用等咱圆圆 原 圆猿暂 袁但很多情
况下袁同一生防菌株对植物病害可能同时具有 圆 种
或 圆 种以上的生防机制咱圆源 原 圆缘暂 遥 这一现象在本研究
中也得到了证实袁平板对峙培养试验结果表明菌株
怨猿猿猿 期 雍道敬等院 内生放线菌 粤鄄员 对苹果果实轮纹病的防效及防御性酶活性的影响
粤鄄员 能分泌拮抗物质抑制轮纹病菌菌丝的生长曰喷
施 粤鄄员 菌悬液后袁果实内多种防御性酶活性显著升
高袁表明其能诱导植物的防御反应袁以抵抗病原菌的
侵染遥 此外袁放线菌 粤鄄员 在果实伤口处具有良好的
定殖能力渊未发表资料冤袁推测该菌株与轮纹病菌存
在一定的竞争作用袁尚需进一步研究证实遥
生防菌诱导寄主植物的抗病反应是一个多种因
素互作的过程袁伴随着一系列物质的代谢袁而酶类在
催化这些代谢反应中起着关键作用袁测定生防菌诱
导后相关酶类活性的时序变化有助于揭示其防病机
制咱圆远暂 遥 大量研究显示植物体内的防御性酶如 孕韵阅尧
悦粤栽和 孕粤蕴 等在抵抗病原菌侵染方面发挥着重要
作用袁其中 孕韵阅 和 悦粤栽 是植物机体内源活性氧清
除剂袁能有效抑制活性氧对植物细胞的伤害袁且
孕韵阅参与木质素合成袁其活性升高有利于细胞壁木
质化从而限制病原菌的侵入和扩展咱圆苑 原 圆怨暂 遥 孕孕韵 可
催化植物体内的酚类化合物氧化为醌类袁直接杀死
或抑制病原菌的生长和繁殖袁而 孕粤蕴 在木质素的积
累尧酚类及黄酮类植保素的合成中起着重要作用遥
李广旭等咱圆怨暂研究发现袁不同抗性苹果品种接种轮纹
病菌后袁防御性酶活性呈现先升后降的趋势袁但抗病
品种内 孕粤蕴和 孕韵阅的活性峰值显著高于感病品种曰
刘志等咱猿园暂用激发子物质处理苹果果实后袁明显降低
了轮纹病菌的侵染和扩展袁而果实内的防御性酶活
性均有不同程度的升高袁表明该类物质通过激活植
物的防御反应而提高了其抗病性遥 本研究发现喷施
放线菌 粤鄄员 和接种轮纹病菌袁均可诱导苹果果实内
上述防御性酶活性的显著升高袁但各处理中酶活性
峰值和时序变化规律有所不同袁其中 孕孕韵和 孕粤蕴呈
单峰曲线袁而其它酶出现了 圆 耀 猿 个活性高峰袁与前
人的研究结果一致咱圆怨 原 猿园暂 遥 喷施 粤鄄员 菌悬液后接种
轮纹病菌的处理酶活性增加最显著袁而单独接种轮
纹病菌的处理酶活性增幅最小袁一个重要原因可能
是菌株 粤鄄员 诱导苹果果实对轮纹病菌的抗性与木质
素尧酚类及植保素等抗菌物质的合成密切相关遥 喷
施 粤鄄员 菌悬液后接种轮纹病菌的处理袁苹果果实内
孕韵阅最先达到活性高峰渊员 凿 后冤袁表明该酶主要在
侵染早期起作用曰而其它酶在 猿 耀 源 凿 后达到高峰袁
推测其主要在病斑扩展过程中起作用遥
综上所述袁放线菌 粤鄄员 对果实轮纹病的防病机
制与菌株产生拮抗物质尧诱导防御性酶活性的时序
变化等密切相关袁该菌株产生拮抗物质的分离鉴定尧
诱导果实抗病的分子机制及各防病机制如何协同作
用有待进一步深入研究遥
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 国立耘袁 李金云袁 李保华袁 等援 中国苹果枝干轮纹病发生和
防治情况援 植物保护袁 圆园园怨袁 猿缘渊源冤院 员圆园 原 员圆猿
咱圆暂 王彦荣袁 胡同乐袁 曹克强援 缘种杀菌剂对苹果轮纹病病菌的
室内毒力测定及田间药效试验援 中国果树袁 圆园员猿 渊猿冤院
缘缘 原 缘愿
咱猿暂 栽葬灶早 宰袁 阅蚤灶早 在袁 在澡燥怎 在 匝袁 藻贼 葬造援 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶凿 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟
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咱源暂 赵旭袁 王彩霞袁 董向丽袁 等援 苹果轮纹病菌在果实和枝条上
的侵染动态研究援 辕 辕郭泽建袁 李宝笃援 中国植物病理学会
圆园员圆年学术年会论文集援 北京院 中国农业科学技术出版社袁
圆园员圆院 源员圆
咱缘暂 杨丽丽袁 庄艳袁 王忆袁 等援 不同抗性苹果果实受轮纹病菌侵
染后亚显微结构的变化援 园艺学报袁 圆园员圆袁 猿怨渊缘冤院 怨远猿 原
怨远怨
咱远暂 月则燥憎灶鄄砸赠贼造藻憎泽噪蚤 阅 耘袁 酝糟酝葬灶怎泽 孕 杂援 灾蚤则怎造藻灶糟藻 燥枣 月燥贼则赠燥泽责澡葬鄄
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渊怨冤院 员园猿员 原 员园猿苑
咱苑暂 李保华袁王彩霞袁董向丽援 我国苹果主要病害研究进展与病
害防治中的问题援 植物保护袁 圆园员猿袁 猿怨渊缘冤院 源远 原 缘源
咱愿暂 张高雷袁 李保华袁 王彩霞袁 等援 远 种内吸性杀菌剂对苹果枝
干轮纹病的治疗效果援 果树学报袁 圆园员园袁 圆苑渊远冤院 员园圆怨 原
员园猿员
咱怨暂 耘糟躁藻则贼 允 宰袁 韵早葬憎葬 允 酝援 栽澡藻 糟澡藻皂蚤糟葬造 糟燥灶贼则燥造 燥枣 责燥泽贼澡葬则增藻泽贼
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贼燥责葬贼澡燥造燥早赠袁 员怨愿缘袁 圆猿院 源圆员 原 源缘源
咱员园暂 纪兆林袁 凌筝袁 张清霞袁 等援 地衣芽孢杆菌对苹果轮纹病
菌和炭疽病菌的抑制及其对贮藏期苹果轮纹病的防治作
用援 果树学报袁 圆园园愿袁 圆缘渊圆冤院 圆园怨 原 圆员源
咱员员暂 赵白鸽袁 孔建袁 王文夕袁 等援 枯草芽孢杆菌 月鄄怨园猿 对苹果
轮纹菌的抑菌作用及其对病害的控制效果援 植物病理学
报袁 员怨怨远袁 圆苑渊猿冤院 圆员猿 原 圆员源
咱员圆暂 何其瑞袁 黄丽丽援 一株淡紫灰链霉菌对采后苹果果实轮纹
病的防治效果援 辕 辕彭友良袁 朱有勇援 中国植物病理学会
圆园园怨年学术年会论文集援 北京院 中国农业科学技术出版
社袁 圆园园怨院 缘园圆
咱员猿暂 王彩霞袁 张清明袁 李桂舫袁 等援 苹果树腐烂病拮抗细菌菌
株 月允员 的鉴定及其抑菌作用援 植物保护学报袁 圆园员圆袁 猿怨
渊缘冤院 源猿员 原 源猿苑
咱员源暂 张清明袁 王彩霞袁 王海艳袁 等援 苹果树腐烂病内生拮抗放
线菌 粤鄄圆 的鉴定及其活性评价援 农药学学报袁 圆园员猿袁 员缘
渊猿冤院 圆愿远 原 圆怨圆
咱员缘暂 王彩霞袁 董向丽袁 李保华袁 等援 植物内生放线菌 粤鄄员 的鉴
定及其防病潜力和防病机制研究援 辕 辕彭友良袁 朱有勇援 中
国植物病理学会 圆园园怨 年学术年会论文集援 北京院 中国农
业科学技术出版社袁 圆园园怨院 远园圆
园源猿 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
咱员远暂 程自振袁 赵旭袁 董向丽袁 等援 不同龄期枝条对苹果轮纹病
菌的抗病性研究援 植物保护袁 圆园员猿袁 猿怨渊员冤院 员猿苑 原 员源园
咱员苑暂 酝燥藻则泽糟澡遭葬糟澡藻则 月袁 匀藻糟噪 月袁 运燥早藻造 运 匀袁 藻贼 葬造援 粤灶 藻造蚤糟蚤贼燥则 燥枣
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咱员愿暂 乔富廉援 植物生理学实验分析测定技术援 北京院 中国农业
科学技术出版社袁 圆园园圆
咱员怨暂 高勇袁 门兴元袁 于毅袁 等援 绿盲蝽危害对枣树叶片生化指
标的影响援 生态学报袁 圆园员圆袁 猿圆渊员苑冤院 缘猿猿园 原 缘猿猿缘
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咱圆员暂 李琳琳袁 李天来袁 余朝阁袁 等援 钙素对 杂粤诱导番茄幼苗抗
灰霉病的调控作用援 园艺学报袁 圆园员圆袁 猿怨渊圆冤院 圆苑猿 原 圆愿园
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咱圆源暂 布婷婷袁 周国英袁 刘君昂袁 等援 油茶内生细菌 再员猿 对油茶
抗性相关酶的诱导作用援 植物保护学报袁 圆园员圆袁 猿怨渊猿冤院
圆愿缘 原 圆愿远
咱圆缘暂 王美琴袁 马林袁 韩巨才袁 等援 番茄内生菌 杂贼圆源 的鉴定及其
对灰霉病的生防作用援 应用生态学报袁 圆园员圆袁 圆猿 渊怨冤院
圆缘圆怨 原 圆远猿缘
咱圆远暂 蕴葬贼澡葬 孕袁 粤灶葬灶凿 栽袁 砸葬早怎责葬贼澡蚤 晕袁 藻贼 葬造援 粤灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠
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责造葬灶贼泽 遭赠 皂蚤曾贼怎则藻泽 燥枣 孕郧孕砸 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶凿 在蚤皂皂怎 造藻葬枣 藻曾贼则葬糟贼
葬早葬蚤灶泽贼 粤造贼藻则灶葬则蚤葬 泽燥造葬灶蚤援 月蚤燥造燥早蚤糟葬造 悦燥灶贼则燥造袁 圆园园怨袁 缘园 渊圆冤院
愿缘 原 怨猿
咱圆苑暂 沈小英袁 宋双袁 罗晶袁 等援 抗烟草黄瓜花叶病毒多糖筛选
及其对烟草防御酶活性的影响援 微生物学报袁 圆园员猿袁 缘猿
渊愿冤院 愿愿圆 原 愿愿愿
咱圆愿暂 孙溶溶袁 彭真袁 程琳袁 等援 月栽匀 诱导花椰菜对菌核病的抗
性研究援 植物病理学报袁 圆园员圆袁 源圆渊猿冤院 圆愿员 原 圆愿怨
咱圆怨暂 李广旭袁 杨华袁 高圣华袁 等援 轮纹病菌侵染对不同抗性苹
果品种膜透性及防御酶的影响援 植物保护学报袁 圆园园远袁 猿猿
渊圆冤院 员圆苑 原 员猿园
咱猿园暂 刘志袁 张华磊袁 谢兴斌袁 等援 激发子物质处理富士苹果果
实后抗轮纹病病菌侵染的研究援 果树学报袁 圆园园怨袁 圆远渊缘冤院
远远远 原 远苑园
渊责任编辑院李美娟冤
员源猿猿 期 雍道敬等院 内生放线菌 粤鄄员 对苹果果实轮纹病的防效及防御性酶活性的影响