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Effects of inoculating nitrogen fixing bacteria Klebsiella sp.120on photosynthetic characteristics and mineral nutrient contents of sugarcane

接种固氮菌 Klebsiella sp.120对甘蔗光合特性和主要矿质营养元素含量的影响



全 文 :植物营养与肥料学报 2015,21(2):467-474 doi牶1011674/zwyf.20150222
JournalofPlantNutritionandFertilizer htp://www.plantnutrifert.org
收稿日期:2013-10-29   接受日期:2014-05-04
基金项目:国家自然科学基金项目(31171504,31101122);广西自然科学基金项目(2011GXNSFF018002,2013GXNSFAA019082);广西八桂学者
和特聘专家专项基金;广西农科院博士后项目(桂农科博2010016)资助。
作者简介:邢永秀(1972—),女,山西代县人,博士,副教授,主要从事甘蔗栽培生理与生物固氮研究.Email:xing20020208@163com
 通信作者 Email:liyr@gxu.edu.cn;liyr@gxaas.net
接种固氮菌 Klebsielasp.120对甘蔗光合
特性和主要矿质营养元素含量的影响
邢永秀1,2,3,莫 遥2,罗丽静2,魏春燕2,杨丽涛1,2,李杨瑞1,2
(1广西农业科学院,中国农业科学院甘蔗研究中心,农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室,
广西甘蔗遗传改良重点实验室,南宁 530007;2广西大学农学院,亚热带农业生物资源保护与利用国家
重点实验室,南宁 530004;3广西作物遗传改良与生物技术重点开放实验室,南宁 530007)
摘要:【目的】甘蔗是最重要的糖料和能源作物,生物量大,产量高,但大量氮肥的使用不仅增加了甘蔗的种植成
本,而且对农田环境造成了污染。发挥与甘蔗联合固氮的生物固氮菌的作用,是降低甘蔗氮肥施用量的方法之一。
Klebsielasp.120是从广西种植的甘蔗体内分离到的具有固氮能力的菌株。为了探讨该菌对甘蔗的促生效应及其
在甘蔗上的应用潜能,本文研究了接种该固氮菌对甘蔗光合特性及矿质元素含量的影响。【方法】采用桶栽方法,
在甘蔗的分蘖期用接种菌株淋浇4个不同甘蔗品种的根际,在处理后的30d和60d取样分析该菌对甘蔗的光合
生理和矿质营养元素含量的影响。【结果】接种菌株对4个甘蔗品种的叶绿素含量和净光合速率有一定的促进作
用,但不同品种之间存在差异。处理30d后,淋浇固氮菌处理的甘蔗品种ROC22的叶绿素含量明显提高,比对照
增加23%。另外3个甘蔗品种(B8、GT21和GT28)处理组的叶绿素含量均有一定的提高,但与对照相比差异不显
著。处理30d后,只有ROC22和B8品种的净光合速率高于对照,且ROC22品种处理与对照间的差异达到了显著
水平。处理60d后,4个甘蔗品种的净光合速率均高于处理30d,而且各品种接种处理均高于对照,其中以对
ROC22和GT21的促进效果最为明显,达到了显著水平。接种处理对不同甘蔗品种的营养元素含量影响不同,接种
处理对4个甘蔗品种叶片中的氮元素含量有促进作用,其中对 ROC22的促进效果最为明显,接种处理比对照增加
598%。接种固氮菌对甘蔗叶片磷和钾元素含量的影响不明显。接种固氮菌对4个甘蔗品种叶片的铁、锰元素含
量的影响不明显;ROC22叶片中的锌含量及 ROC22和 B8叶片中的铜含量接种处理与对照相比显著提高。【结
论】接种 Klebsielasp.120固氮菌对甘蔗光合特性及矿质元素含量的影响与甘蔗品种有关,其中对ROC22品种的促
生效果最为明显。研究结果可为固氮菌株 Klebsielasp.120在甘蔗上的进一步应用提供参考依据。
关键词:甘蔗;联合固氮菌;光合特性;矿质营养
中图分类号:S566101;S1443   文献标识码:A   文章编号:1008-505X(2015)02-0467-08
EfectsofinoculatingnitrogenfixingbacteriaKlebsielasp.120
onphotosyntheticcharacteristicsandmineralnutrientcontentsofsugarcane
XINGYongxiu1,2,3,MOYao2,LUOLijing2,WEIChunyan2,YANGLitao1,2,LIYangrui1,2
(1GuangxiAcademyofAgriculturalSciences/SugarcaneResearchCenterofChineseAcademyofAgriculturalSciences/
KeyLaboratoryofSugarcaneBiotechnologyandGeneticImprovement(Guangxi),MinistryofAgriculture/GuangxiKeyLaboratory
ofSugarcaneGeneticImprovement,Nanning530007,China;2AgriculturalColegeofGuangxiUniversity/
StateKeyLaboratoryofSubtropicalBioresourcesConservationandUtilization,Nanning530004,China;
3GuangxiCropGeneticImprovementandBiotechnologyLaboratory,Nanning530007,China)
Abstract:【Objectives】Sugarcane(SaccharumoficinarumL.)isanimportantsugarandenergycropwithhigh
biomassandhighproductivity.However,applicationoflargeamountchemicalnitrogenfertilizerinsugarcaneis
植 物 营 养 与 肥 料 学 报 21卷
verycommoninChina,whichnotonlyincreasestheproductioncost,butalsocausesenvironmentalpolution.A
possiblemethodofreducingsugarcanenitrogenfertilizationisinoculationofnitrogenfixationbacteria.Thenitrogen
fixingbacteria(NFB)strainKlebsielasp.120wasisolatedfromsurfacesterilizedrootsofsugarcanecultivar
ROC22Itsefectonphotosyntheticcharacteristicsandmineralnutrientaccumulationinsugarcanewas
investigated.【Methods】Foursugarcanecultivarswereplantedinpots.ThestrainKlebsielasp.120wasinoculated
totheplantsbyrootwateringatthetileringstage.Efectsoftheinoculationonphotosyntheticcharacteristicsand
mineralnutrientaccumulationofthefourcultivarswerestudiedafterthetreatmentof30and60days,respectively.
【Results】Theresultsshowthatthephotosyntheticratesandchlorophylcontentsofdiferentcultivarsareafected
diferentlybytheinoculationwithKlebsielasp.120After30daysinoculationincreasessigniticantlythe
chlorophylcontentsinleavesofsugarcanecultivarROC22(increasedby23%),slightlyintheotherthree
sugarcanecultivarsB8,GT21andGT28,comparedtotheuninoculatedcontrols.Thenetphotosyntheticratesof
sugarcanecultivarROC22andB8arehigherthanthecontrolsafter30days,andtherearesignificantdiferences.
Thenetphotosyntheticratesofthefoursugarcanecultivarsinoculatedthestrainafter60daysarehigherthanthose
after30days.Thenetphotosyntheticratesofthefoursugarcanecultivarsaresignificantlyhigherthancontrolsafter
thetreatment60days.TheefectsofinoculationonthenetphotosyntheticratesarebeterinthecultivarsROC22
andGT21Theefectsoftheinoculationtreatmentsonthenutrientelementcontentsarediferent.Thecontentsof
NintheNFBinoculationtreatmentgrouparealhigherthancontrolgroupforthefoursugarcanecultivars,
especialyincultivarROC22(increasedby598%).TherearenodiferencesinthecontentsofPandKinalthe
cultivarsbetweentheinoculationtreatmentgroupandthecontrolgroup.Amongthefourcultivars,theZncontentin
leavesofROC22andtheCucontentsinleavesofROC22andB8areimprovedsignificantlybyinoculating,
comparedwiththecontrol.【Conclusions】TheefectsofinoculatingKlebsielasp.120onthephotosynthetic
characteristicsandmineralcontentsdependonsugarcanecultivars.Theefectismostobviousinthesugarcane
cultivarROC22amongtheselectedfoursugarcanecultivars.Therefore,experimentshouldbecariedoutfor
diferentsugarcanecultivarsfortheefectiveperformanceofthestrainKlebsielasp.120.
Keywords牶sugarcane牷associativenitrogenfixingbacteria牷photosyntheticcharacteristics牷mineralnutrient
  氮素是植物生长的三要素之一,世界主要糖料
作物和能源作物甘蔗,因其生物量大,产量高,需氮
量较大。大量氮肥的使用在提高甘蔗产量的同时也
增加了甘蔗的种植成本,也造成农田和周边环境的
污染。发掘甘蔗的生物固氮潜力是降低甘蔗生产成
本的有效手段之一。已有研究表明,甘蔗联合固氮
菌可以通过生物固氮提高根际矿质营养的可利用
性、提高根系的吸收面积和提高寄主的生化过程等
机制来提高植物对矿质营养的吸收[1-2]。据报道,
甘蔗内生固氮菌可以提供甘蔗生长所需氮素的
30% 80%[2-3],还可以促进甘蔗生长,增加其生物
量,促进根系发育和提高氮素含量[4-5],提高甘蔗的
根系活力[6]。Munusamy等[7]用菌株 Burkholderia
vietnamiensis、 Gluconacetobacter diazotrophicus、
Herbaspirilumseropedicae单个或混合处理甘蔗,在不
使用氮肥的情况下,叶片氮含量增加约40%,总的
生物量增加约42%。
Klebsielasp.120是本课题组从甘蔗体内分离
到的具有固氮能力的内生固氮菌,且具有溶磷和溶
铁的特性,对甘蔗组培苗具有促进生长的作用[8],
但其在甘蔗不同生育期的效果如何还未有报道。本
试验采用淋根接种的方法,研究接种该固氮菌对甘
蔗光合特性和矿质元素积累的影响,以期为该菌在
甘蔗上的应用提供科学依据和参考。
1 材料与方法
11 供试材料
本试验于2012年7月在广西大学甘蔗研究所
进行。采用桶栽试验,桶直径50cm,高45cm,每桶
装土壤30kg。土壤基本性状为:有机质含量2147
g/kg,全氮 217g/kg,全磷 071g/kg,全钾 1669
g/kg,速效氮 8167mg/kg,有效磷 743mg/kg,速
效钾7100mg/kg。
供试甘蔗品种为 ROC22、B8、GT21和 GT28的
健康种苗。试验所用菌株为 Klebsielasp.120,菌株
活化后用LB培养基培养过夜,然后用无菌蒸馏水
864
2期    邢永秀,等:接种固氮菌 Klebsielasp.120对甘蔗光合特性和主要矿质营养元素含量的影响
稀释至109cfu/mL备用。
12 试验设计
当甘蔗品种炼苗成活后,每个品种移栽大小、长
势较一致的植株10株,每桶1株,共40桶。在甘蔗
分蘖初期,每个甘蔗品种的其中5桶作为处理组,围
绕根系周围浇淋上述培养好的 Klebsielasp.120菌
液400mL,另外5桶浇淋400mL无菌蒸馏水作为
对照组,每处理5次重复,10d后再按上述方法接种
一次。在整个试验过程中,除了在移栽时每桶添加
2g复合肥外(N∶P∶K比例为18∶7∶16),相当于每
公顷施纯N17kg,P2O5105kg,K2O17kg),甘蔗生
长期间只进行水分和虫害管理。
13 测定项目与方法
131叶绿素含量 在接种处理后的30d和60d,
分别选取各处理3株生长良好、无病虫害、叶面积相
近的甘蔗+1叶叶片中上部,用 SPAD-520型叶绿
素仪(柯尼卡美能达公司生产)测定其叶绿素相对
含量。
132光合气体交换参数 在晴天上午9:00 11:
00,各处理选取3株生长良好的甘蔗,用美国 LI-
COR公司生产的LI-6400XT光合作用系统测定其
+1叶片的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、细胞
间隙二氧化碳浓度(Ci)和气孔导度(Gs)。测定时
设置控制叶片温度30℃,用人工光源6400-02B,光
照2000μmol/(m2·s),测定叶面积6cm2。
133甘蔗叶片氮、磷、钾元素含量 在接种处理后
60d,取每个处理健康的甘蔗 +1叶剪下带回实验
室清洗擦干后,放入烘箱于105℃杀青30min,65℃
烘干48h后用微型粉碎机粉碎相应样品,过筛后装
入封口袋中备用。样品的消化按文献[9]的方法。
叶片氮含量的测定参照孔祥生等[10]的方法;磷含量
用钼蓝比色法;钾含量用火焰分光法测定[11]。
134甘蔗叶片Fe、Mn、Cu、Zn、Mg元素含量 准确
称取样品02000g,放入干燥的消煮管底部,加浓
HNO35mL,在管口放上弯颈小漏斗,在远红外消煮
炉中加热,待溶液蒸发到约2mL左右时,再加入2
mL高氯酸,消煮至冒白烟,消化到液体变为无色透
明为止,然后转到 50mL容量瓶中并定容。利用
ZEEnit700P原子吸收分光光度计测定 Fe、Mn、Cu、
Zn、Mg的含量。
135产量 收获时将每个处理的蔗茎放在一起,
称重、计算各处理的蔗茎产量。
14 数据处理
试验数据采用 MicrosoftExcel2003软件整理、
作图,SPSS170软件进行统计分析,采用 DUNCAN
法进行多重比较。
2 结果与分析
21 接种固氮菌对叶绿素含量的影响
叶绿素直接参与光能的吸收和能量转化,叶绿
素含量的高低会影响甘蔗的光合能力。由表 1可
知,接种固氮菌 Klebsielasp.120对4个甘蔗品种叶
片叶绿素含量均有不同程度的影响。接种30d后,
甘蔗品种ROC22的叶绿素含量比对照提高了23%,
差异显著;甘蔗品种B8、GT21和GT28的叶绿素含量
均有一定的提高,但3个品种的接种处理与对照的差
异均不显著,4个甘蔗品种中接种固氮菌 Klebsiela
sp.120对 ROC22和B8的效果较好。接种60d后,4
个甘蔗品种叶片的叶绿素含量都有一定的提高,但接
种处理与对照间均未达到差异显著水平。
22 接种固氮菌对不同甘蔗品种叶片气体交换的
影响
从图 1A可以看出,接种固氮菌 Klebsielasp.
12030d后,ROC22、B8两品种叶片的净光合速率
(Pn)高于对照,且 ROC22的接种处理与对照的差
异达到了显著水平。GT28叶片的净光合速率与对
照差异不明显,而 GT21的接种处理却低于对照。
接种60d后,4个甘蔗品种叶片的净光合速率比接
种30d时高,各品种接种处理的净光合速率均高于
对照,以GT21的提高幅度最大,ROC22和 GT21品
种的接种处理与对照间叶片净光合速率也达到了显
著差异水平。图1B显示,接种固氮菌对4个甘蔗品
种的蒸腾速率有不同的效应。在接种处理30d后,
ROC22、B8、GT283个品种叶片的蒸腾速率(Tr)均
高于对照,其中 ROC22的效果最为明显,接种处理
与对照间的差异达到了显著水平。在接种60d后,
除ROC22外,其他3个品种叶片的蒸腾速率(Tr)均
高于对照,但各处理间的差异不显著。接种
Klebsielasp120固氮菌对各甘蔗品种细胞间CO2浓
度的影响如图1C,处理30d后,B8、GT21、GT28的
接种处理的胞间CO2浓度均高于各对照,或与对照
相近,但差异均不显著。接种 60d后,B8、GT21、
GT28品种接种处理叶片胞间 CO2浓度明显高于对
照,差异达到了显著水平。接种固氮菌对不同甘蔗
品种气孔导度(Gs)的影响如图1D所示。从图中可
以看出,在接种30d后,ROC22、B8、GT283个品种
接种处理的 +1叶叶片气孔导度高于对照,但只有
ROC22的接种处理与对照间的差异达到了显著水
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植 物 营 养 与 肥 料 学 报 21卷
图1 接种 Klebsielasp.120固氮菌对不同甘蔗品种气体交换参数的影响
Fig.1 GasexchangeinfoursugarcanecultivarsinoculatedwithKlebsielasp.120
[注(Note):柱上不同字母表示处理间差异达5% Diferentletersabovethebarsmeansignificantamongtreatmentsatthe5% levels.]
平。接种60d后,4个甘蔗品种接种处理的叶片气
孔导度均高于对照,其中以GT28和GT21的效果最
为明显,但均与对照的差异不显著。
23 接种固氮菌对甘蔗氮、磷、钾含量的影响
从表2可以看出,不同甘蔗品种 +1叶片的氮
含量接种处理均高于对照,4个甘蔗品种叶片的含
氮量均以ROC22最高,各品种接种处理叶片的氮含
量表现为 ROC22>B8>GT21>GT28,但只有
ROC22品种的接种处理与对照的差异达到了显著
水平,ROC22品种的接种处理与 GT28接种处理和
对照间的差异也达到了显著水平。接种固氮菌对各
品种磷含量的影响以B8和GT28较明显,但与对照
的差异均不显著。4个甘蔗品种 +1叶的钾含量为
110 182mg/g之间,接种处理对4个甘蔗品种
叶片钾含量的影响均不明显,只有ROC22品种的接
种处理与GT28品种的对照显著差异。以上结果说
明,用固氮菌 Klebsielasp.120淋根处理后对ROC22
品种叶片的氮含量有较明显的促进效果,对4个品
种叶片的磷含量和钾含量的影响不明显。
24 接种固氮菌对甘蔗叶片铁、锰、铜、锌和镁含量
的影响
固氮菌对4个甘蔗品种叶片铁、锰、铜、锌和镁
含量的影响如表3所示。4个品种相比较,GT21叶
片中的铁含量较低,接种固氮菌对4个甘蔗品种叶
片铁含量的影响不太明显,各处理间差异均未达显
著水平。4个甘蔗品种叶片中锰含量以 GT28的对
照最低,接种处理对4个品种叶片的锰含量的影响
均不显著,各处理间只有 ROC22T与 GT21CK、
GT28T和GT28CK的差异达到了显著差异水平。铜
是植物体内的极微量元素,过多会造成中毒,缺乏会
影响植物生长发育。接种固氮菌处理提高了
ROC22和B8叶片的铜含量,且这两个品种接种处
理与对照间的差异达到显著水平;接种固氮菌降低
了GT21和GT28叶片的铜含量,但与对照的差异不
显著。各处理间相比,ROC22T与其他各处理间的
差异都达到了显著水平,B8T与 GT21T和 GT21CK
间也有显著差异。锌元素在植物体内有重要的功
能,尤其对生长素的合成。不同甘蔗品种 +1叶锌
含量以GT21品种最高,接种处理只提高了 ROC22
品种叶片中的锌含量,且与对照有显著差异,但降低
了B8、GT21和 GT28叶片中的锌含量,B8和 GT21
的接种处理与对照有显著差异,4个甘蔗品种+1叶
镁含量的相差不大,接种处理各品种叶片镁的含量
有所降低,但与对照的差异不显著。
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2期    邢永秀,等:接种固氮菌 Klebsielasp.120对甘蔗光合特性和主要矿质营养元素含量的影响
表1 接种固氮菌 Klebsielasp.120后不同甘蔗品种叶绿素的相对含量
Table1 Changesofchlorophylcontentsinleavesofdiferentsugarcanecultivarswithorwithoutinoculatingof
Klebsielasp.120
处理
Treatment
接种后30天 30daysafterinoculation
含量(SPAD)
Content
增加(%)
Increased
接种后60天 60daysafterinoculation
含量(SPAD)
Content
增加(%)
Increased
ROC22T 3007±134a 23 3073±129a 115
ROC22CK 2444±065b 2756±076a
B8T 2638±077b 773 3035±089a 083
B8CK 2434±072b 3010±095a
GT21T 2106±066c 380 3145±068a 647
GT21CK 202±0779c 2954±074a
GT28T 2496±140b 330 3298±142a 457
GT28CK 2419±128b 3154±102a
  注(Note):T—固氮菌接种处理Treatmentswithinoculation;CK—无菌蒸馏水处理Treatmentswithsterilizeddistiledwater.同列数据后不同
字母表示同一品种不同处理间差异达5%显著水平 Valuesfolowedbydiferentletersinacolumnaresignificantlydiferentinthesamecultivar
amongtreatmentsatthe5% level.
表2 接种 Klebsielasp.120固氮菌后不同甘蔗品种的氮、磷、钾含量(mg/g)
Table2 TheN,PandKcontentsofleavesofdiferentsugarcanecultivarswithorwithoutinoculating
ofKlebsielasp.120
处理
Treatment

含量(mg/g)
Content
增加(%)
Increased

含量(mg/g)
Content
增加(%)
Increased

含量(mg/g)
Content
增加(%)
Increased
ROC22T 155±04a 598 033±000a 30 182±002a 98
ROC22CK 97±02bc 030±001a 167±003a
B8T 108±02ab 210 038±000a 130 161±001a 23
B8CK 90±03abc 031±006a 158±009a
GT21T 98±01ab 88 029±004ab -30 159±005a 142
GT21CK 90±01abc 03±003ab 140±002a
GT28T 83±01bc 143 029±003ab 260 130±0015ab 85
GT28CK 73±01c 026±001b 110±008b
  注(Note):T—固氮菌接种处理Treatmentswithinoculation;CK—无菌蒸馏水处理Treatmentswithsterilizeddistiledwater.同列数据后不同
字母表示同一品种不同处理间差异达5%显著水平 Valuesfolowedbydiferentletersinacolumnaresignificantlydiferentinthesamecultivar
amongtreatmentsatthe5% level.
25 接种固氮菌对甘蔗生物量的影响
从表4可以看出,接种 Klebsielasp.120对4个
甘蔗品种的产量和锤度(蔗汁中固溶物的百分含
量,与甘蔗蔗糖分有高度正相关)有一定影响,对
ROC22和B8品种的产量有一定的促进作用,但对4
个品种的锤度的影响不明显。
3 讨论与结论
光合作用是植物产量形成的基础,叶绿素在植
物光合作用过程中具有重要作用。吴凯朝等[12]将
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植 物 营 养 与 肥 料 学 报 21卷
内生固氮菌 Yantoeaagglomeras接种到不同品种的
甘蔗中,在伸长期叶绿素 a含量和净光合速率均高
于对照,但不同品种间有较大差异。宋亚娜等[13]报
道,接种固氮醋酸杆菌可以显著提高甘薯组培苗的
生物量和叶片叶绿素含量。在本试验条件下,采用
浇淋土壤的方法将固氮菌 Klebsielasp.120接种到
甘蔗,结果发现接种处理对4个参试甘蔗品种的叶
绿素含量都有不同程度的提高,其中对ROC22的叶
绿素含量提高效果较明显,比对照增加379%,接
种处理与对照间差异达到了显著水平。接种固氮菌
对甘蔗叶片的净光合速率和蒸腾速率有一定的提
高,但对不同的品种影响效果不同,以对 ROC22的
效果最为明显,这与其对甘蔗收获后的生物量的影
响的效果最好相一致。接种固氮菌 Klebsielasp.
120对不同甘蔗品种的光合特性影响的效果不同,
除了不同品种间的光合生理效应存在差异外,还可
能与内生固氮菌和甘蔗之间的联合共生关系有关。
因此,需进一步研究该固氮菌株与甘蔗的联合共生
效果,以充分发挥其生物固氮作用。
表3 接种 Klebsielasp.120固氮菌后不同甘蔗品种叶片中的铁、锰、铜、锌、镁含量(mg/kg)
Table3 TheFe,Mn,Cu,Zn,Mgcontentsofleavesofdiferentsugarcanecultivarswithorwithoutinoculating
Klebsielasp.120
处理
Treatment
铁 Fe 锰 Mn 铜 Cu 锌 Zn 镁 Mg
ROC22T 2185±0954a 1834±0214a 287±0126a 2265±047c 19252±0337ab
ROC22CK 2071±01539a 1525±0192abc 119±01b 1565±046d 21650±0974a
B8T 2651±05249a 1581±0065abc 124±004b 2154±0105c 17674±0954b
B8CK 2627±07337a 1970±0224a 067±015c 3370±0121b 20633±0422a
GT21T 1835±01652a 1685±0183ab 044±006c 3477±0133b 21653±0538a
GT21CK 1937±01708a 1194±0143bcd 059±006c 3785±054a 20467±0286a
GT28T 2169±00541a 1102±0144cd 081±008bc 2153±047c 19453±0125ab
GT28CK 2484±02062a 993±005d 102±002b 2242±031c 21076±0416a
  注(Note):T—固氮菌接种处理Treatmentswithinoculation;CK—无菌蒸馏水处理Treatmentswithsterilizeddistiledwater.同列数据后不同
字母表示同一品种不同处理间差异达5%显著水平 Valuesfolowedbydiferentletersinacolumnaresignificantlydiferentinthesamecultivar
amongtreatmentsatthe5% level.
表4 接种 Klebsielasp.120固氮菌后不同甘蔗品种的产量和锤度
Table4 TheyieldsandbrixofdiferentsugarcanecultivarswithorwithoutinoculatingKlebsielasp.120
项目
Item
处理
Treatment
甘蔗品种Sugarcanecultivar
ROC22 B8 GT21 GT28
产量Yield
(kg/plant)
T 155 116 103 112
CK 120 097 101 100
锤度Brix
(%)
T 2333 2353 2232 2530
CK 2267 2346 2330 2470
  注(Note):T—固氮菌接种处理Treatmentswithinoculation;CK—无菌蒸馏水处理Treatmentswithsterilizeddistiledwater.
  固氮菌对提高植物体内营养元素的含量有积极
作用。联合固氮菌可以通过生物固氮、提高根际矿
质营养的可利用性、提高根系的吸收面积和提高寄
主的生化过程等机制来提高植物对矿质营养的吸
收[1]。在温室条件下,Klebsielavaricola处理甘蔗
GT21组培苗,可促进植株对氮、磷和钾的吸收[13]。
接种固氮菌株UPMB10和SP7可提高香蕉叶片和茎
中氮、磷和钙的含量[14]。Munusamy等[7]用几个菌
274
2期    邢永秀,等:接种固氮菌 Klebsielasp.120对甘蔗光合特性和主要矿质营养元素含量的影响
株单独或混合接种甘蔗发现,在无氮肥的情况下,甘
蔗叶片氮含量增加约40%。在本试验中,采用根部
淋浇固氮菌液的方法将固氮菌接种到甘蔗后,4个
甘蔗品种都表现出接种处理组叶片的氮含量高于对
照,尤其对ROC22的效果最为明显,处理组叶片氮
素含量增加了598%。氮含量的增加是甘蔗生物
固氮的结果,还是接种的固氮菌与甘蔗的互作过程
中通过影响甘蔗的氮代谢,进而对氮素的合成与运
输起到了积极作用,还是接种菌株提高了甘蔗从土
壤中吸收氮素的能力,均有待进一步深入研究。磷
是植物生长很重要的一个营养元素,而土壤中的可
溶性磷非常低,溶磷细菌可能降低了根际土壤的
pH,使得根际土壤中的一些低分子量的有机酸如苹
果酸、草酸和柠檬酸等分解[15]。Bastian等[16]证明
A.diazotrophicus和 H.seropedicae都能在给定的培
养条件下产生IAA和赤霉素GA1、GA3组分,增强植
物对氮、磷和其他矿质元素的吸收。Estrada等[17]
的研究表明,植物内生固氮菌还具有促进植物根系
生理变化的作用,固氮菌的一些分泌物有助于植物
吸收同化土壤中的磷素。接种固氮菌有利于植物的
生长发育,可能是促进了根系的发育,增加了根系对
矿质营养和水分的吸收[18-19]。生物固氮效率的大
小与水分、磷、钾和微量元素含量有关[20]。本试验
所用的 Klebsielasp.120是一个可溶磷和溶铁的固
氮细菌[7],在本试验条件下,接种固氮菌对甘蔗叶
片的磷含量有一定提高,但处理与对照间磷素含量
差异都未达到显著水平。接种固氮菌株 Klebsiela
sp.120对不同甘蔗品种叶片铜含量的影响不同,接
种提高了 ROC22和 B8叶片的铜含量,而另外两个
甘蔗品种叶片中的铜含量却有降低趋势。接种处理
只显著提高了 ROC22叶片中的锌含量。对于固氮
菌对植物微量元素含量的影响前人研究较少,固氮
菌对微量元素的影响机制如何,还需要开展深入的
研究。本研究结果表明,接种 Klebsielasp.120对甘
蔗品种的光合特性及矿质元素含量的影响与甘蔗品
种有关,以对ROC22的促生作用比较明显,但对另
外3个品种的影响结果不一致。
本试验是在土壤未灭菌的情况下进行的接种试
验,接种效果可能不能很好地反映固氮菌的促生性
能,但试验条件更接近甘蔗生长的自然条件,所得结
果对应用该固氮菌制作甘蔗专用微生物菌肥有一定
的参考价值。但也应该指出,本试验所得结果是在
桶栽低氮的条件下获得的,氮肥施用量远低于实际
生产中的氮肥用量。有研究表明,生长在低氮条件
下的甘蔗比种植在高氮肥和中氮肥投入的甘蔗的生
物固氮量大,在低氮土壤上种植的甘蔗品种,固氮菌
接种更容易成功[21]。因此在实际生产中,进一步研
究不同氮肥配比和固氮菌处理对甘蔗产量和经济效
益的影响,具有重要的实践意义。由于该试验采用
的是将固氮菌培养液淋浇到土壤中的方法,处理后
只对甘蔗的光合作用和叶片矿质元素含量进行了分
析,而该菌对甘蔗根系以及对土壤中矿质营养元素
的影响如何,还待进一步深入研究。
参 考 文 献:
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