全 文 ：书西北植物学报!
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文章编号$
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收稿日期$
!"#$*"$*%"
&修改稿收到日期$
!"#$*"1*"&
基金项目$国家自然科学基金"
%#!,"%1(
#&国家科技支撑计划"
!"#"234"#2"!
&
!"##234#%2"&
#&江苏省科技支撑计划"
25!"#!%!,
#&江苏
省农业科技自主创新计划"
67
"
#"
#
"%"
&
67
"
##
#
"!(
#
作者简介$翟丽娜"
#&&")
#!女!在读硕士研究生!主要从事油菜基因功能研究
5*89.:
$
;<9.:.09!"#$
!
/.09+=>8
"
通信作者$管荣展!博士!教授!博士生导师!主要从事油菜遗传育种的研究
5*89.:
$
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@90A;
!
0
-
9@+BC@+=0
甘蓝型油菜
%/12!
基因的克隆及表达分析
翟丽娜!楚
!
璞!管荣展"
"南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室!南京
!#""&
#
摘
!
要$利用同源克隆法从甘蓝型油菜中获得了
#
个类成束阿拉伯半乳聚糖蛋白基因"
!"#
#!命名为
$%!"#

$%!"#
基因开放阅读框长为
#!""D
E
!编码
%&&
个氨基酸!分子量为
$!11+&49
!等电点为
(+%,
预测的
20FG3
蛋白包含
H*
端信号肽(
!
个
3IJ*:.KB
结构域(
!
个
L9/=.=:.0*:.KB
结构域和
6*
端
IJM*90=<>A
序列系统进化分析表
明
20FG3
氨基酸序列与
2AFG3#,
和
3NFG3!
进化关系较近!一致性分别为
&1O
和
1,O

P
QR*J6Q
分析表明!
$%!"#
基因在油菜各组织均有表达!并以下胚轴中表达量最高!其次为子叶!茎秆中表达最少&
$%!"#
基因的表
达受到
I3
%
(
2Q
(
M33
(
323
和
H96:
的诱导!但受
(*23
(蔗糖(低温和
J5I
抑制研究认为!油菜中
$%!"#
基因
可能参与激素信号转导途径和非生物胁迫应答
关键词$油菜&类成束阿拉伯半乳聚糖蛋白基因&克隆&基因表达
中图分类号$
S,1
&
S,1(
文献标志码$
3
$%"&#&

(&!)*
+
,-..#"&/&(%
0
.#."1%/12!2-&-1,"3%($33-"$/$
4
53
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Y
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H90
-
.0
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9:9=N90
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E
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E
B
E
*
N.CB
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N[>3IJ*:.KBC>89.0/
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N[>L9/=.=:.0*:.KBC>89.0/90C9IJM*90=<>A/B
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*
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Y
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E
AB//.>0./.0C@=BCD
Y
I3
%
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2Q
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M33
!
32390C
H96:
!
D@N.0<.D.NBCD
Y
(*23
!
/@=A>/B
!
=>:C90CJ5I+R<.//N@C
Y
/@
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E
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E
9NB.0
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E
9N<[9
Y
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E
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+
,(+
7-
0
8",!.
$
&(()*%
+
,(
&
L9/=.=:.0*:.KB9A9D.0>
?
9:9=N90
E
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?
B0B
&
=:>0.0
?
&
?
B0BB]
E
AB//.>0
!!
阿拉伯半乳聚糖蛋白"
9A9D.0>
?
9:9=N90
E
A>*
NB.0/
!
3IJ/
#是一类重要的植物大分子结构蛋白!
主要由
3IJ
蛋白骨架和糖基磷脂酰肌醇"
?
:
Y
=>*
/
Y
:
E
<>/
E
<9N.C
Y
:.0>/.N>:
!
IJM
#支架以及
"
型阿拉伯
半乳聚糖"
N
YE
B
"
9A9D.0>
?
9:9=N90
!
N
YE
B
"
3I
#侧链
组成!其中蛋白部分含量不到整个分子的
#"O
!属
于富含羟脯氨酸的糖蛋白"
U
YE
*A.=<
?
:
Y
=>
E
A>NB.0/
!
UQIJ/
#家族)#*!*此类蛋白通常存在于细胞壁(细
胞膜(细胞膜%壁间隙和胞间质等部位!其细胞定位
由
H*
端信号肽和
6*
端疏水
IJM
序列决定)!*%*
类成束阿拉伯半乳聚糖蛋白"
L9/=.=:.0*:.KB9A9*
D.0>
?
9:9=N90
E
A>NB.0/
!
FG3/
#是
3IJ/
中的一类!
其蛋白质结构通常含有
H*
端信号肽!
6*
端
IJM*90*
=<>A
序列!
3IJ*:.KB
区域和
#
#
$
个
L9/=.=:.0*:.KB
的结构域含有
L9/=.=:.0*:.KB
结构域的蛋白在果蝇
"
.&/(/
+
0)1231%/
4
(53&
#中首次被鉴定!其广泛
存在于高等植物)$*(动物)*(*(酵母),*(藻类)1*和地
衣)&*等生物体中目前!在多种植物中已经鉴定出
!"#(
基因!包括拟南芥"
#&6)7/
+
()(501)%
#
)
$
*
(水
稻"
8&
9
:(5);
#
)
#"
*
(小麦"
<&)5)*,23(5);,2
#
)
##
*
(棉
花"
=/((
9+
),20)&(,5,2
#
)
#!
*
(白菜"
$&(()*&
+

#
)
#%
*
(
杨树"
>/
+
,1,(5&32,1^>-16
#
)
#$
*
(番茄"
9
*/
+
3&()?
*/%3(*,13%5,2
#
)
#
*
(火炬松"
>)%,(537
#
)
#(
*和百日菊
"
@)%%)313
4
%(
#
)
#,
*等
!"#(
是一个大的基因家
族!在拟南芥(水稻(小麦(棉花(番茄和白菜中分别
鉴定出
!#
(
!,
(
%$
(
#&
(
!!
和
%%
个
!"#(
成员
已有的研究表明
!"#(
广泛参与植物发育过
程!主要涉及细胞分裂(伸长(膨胀及分化!以及次生
壁成熟(细胞粘连(形态建成等
!"#%*QH3.
拟南
芥转基因植株的研究表明花粉特有的
!"#%
基因
参与小孢子发育!且可能影响花粉内壁形成)#1*&拟
南芥
#5!"###
基因
8QH3
在花序茎和荚果的厚
壁组织中特异表达!表达强度随着果实的成熟不断
增强!推测
#5!"###
可能促进次生细胞壁的木质
化!对次生细胞壁的成熟有重要作用)#&*&拟南芥
A
1##
%
A
1#!
双突变体研究表明
#5!"###
和
#5!?
"##!
基因可能控制植物茎秆强度和弹性系数)!"*&
百日菊
@3!"###
主要在茎的木质部导管和邻近的
薄壁组织中表达!推测该基因可能在网状导管的后
生木质部分化时对次生壁的沉积加厚有作用)#,*
此外!研究表明
!"#(
可能参与植物激素和外
界胁迫的信号传递过程
_><0/>0
等)$*通过微阵列
研究发现与野生型拟南芥相比
!"##
(
!"#!
和
!"#1
的转录积累在
323
不敏感突变体
6)#*#
中
更高!推测
323
抑制
!"##
(
!"#!
和
!"#1
的表
达
U@90
?
等)#!*研究发现
=0!"##
%
$
%
#
的表达
都受
I3
%
的上调!而
=0!"###
%
#$
的表达受
323
促进!受
I3
%
(
M33
和
H96:
的抑制!这些结果暗示
一些
=0!"#(
基因在棉花纤维发育中!可能与植物
激素和非生物胁迫的信号转导途径相关
油菜"
$&(()*%
+
,(G+
#是世界最重要的油料
作物之一!也是中国食用油的主要来源目前油菜
中还没有关于
!"#(
基因的相关研究报道!但已有
一些研究逐渐阐述油菜
3IJ/
的功能)!#*!$*!主要涉
及花和根发育(小孢子胚胎发生等过程本研究首
次从甘蓝型油菜中克隆了
#
个
!"#
基因!并对其进
行了生物信息学和基因表达模式分析!为进一步研
究油菜中
!"#(
基因的功能奠定基础
#
!
材料和方法
9+9
!
材
!
料
材料为南京农业大学农学院油菜课题组的甘蓝
型油菜
H_,&1!
!种植于南京农业大学江浦试验田
表达分析时分别在油菜幼苗期"播种后于
#
%
!` W
固
体培养基上生长
,C
#和开花期取样激素和非生物
胁迫处理所用材料种植于
#
%
!` W
固体培养基上!"
!$
a"+
#
b
(
#!"
$
8>:
+
8
)!
+
/
)#
"
#(<
光照%
1<
黑
暗#下培养
,C
!然后分别将幼苗置
#"
$
8>:
+
G
)#
I3
%
(
#""08>:
+
G
)#
2Q
(
#"
$
8>:
+
G
)#
M33
(
#"
$
8>:
+
G
)#
(*23
(
#"
$
8>:
+
G
)#
323
(
O
蔗糖"
?
+
8G
)#
#(
低温"
$b
#(
#O J5I
"
?
+
8G
)#
#(
!""88>:
+
G
)#
H96:
中"尽量避免损伤幼苗#!以清水为对照"
6X
#
处理
#<
后取样所有样品均取
%
个重复!于液氮
中迅速冷冻后置
)1"b
冰箱保存备用
9:;
!
总
<=/
的提取及
6>=/
第一链的合成
按照
RA.;>:
试剂"
M0Z.NA>
?
B0
#说明书提取油菜
各组织总
QH3
!
=4H3
第一链合成按照反转录酶
"
JA.8B/=A.
E
N
%
QBZBA/BRA90/=A.
E
N9/B
!
R9X9Q9
#操
作说明完成
QH3
提取后经
4H9/B
&
处理去除
4H3
污染!电泳检测完整性!反转录后用内参基因
#*5)%
检测
=4H3
质量!合成的
=4H3
可直接作为
J6Q
反应的模板使用!或者
)!"b
保存
9+?
!
基因序列的扩增及测序
通过对白菜
!"#(
基因序列分析!设计引物
!"#
F
"
c*3RII6RR3R6R66II6I3*%c
#和
!"# Q
"
c*R6363RI3I66333636633336*%c
#!以
油菜叶片
=4H3
为模板进行
J6Q
扩增
J6Q
体系
参照
X\4*
E
:@/
"
R\d\2#说明书
J6Q
反应程
序$
&$b
预变性
!8.0
后进行循环扩增&
$b
变性
#/
!
1b
退火
%"/
!
(1b
延伸
#8.0%"/
!共
$"
个
循环!最后
$b
保存
J6Q
产物经
#O
琼脂糖凝胶
电泳检测!采用琼脂糖凝胶胶回收试剂盒"离心柱
型!
3]
Y?
B0
#进行回收!回收产物连入
E
`4#&*R
载
体"
R9X9Q9
#!转化
4U*

感受态细胞"
R9X9Q9
#
蓝白斑筛选阳性克隆!经菌液
J6Q
检测后!将阳性
重组子送到华大基因公司测序
9+@
!
基因序列分析
采用
5]J3W
Y
网站
JA>NJ9A98
程序分析编码
,&#
#"
期
!!!!!!!!!!!!
翟丽娜!等$甘蓝型油菜
$%!"#
基因的克隆及表达分析
表
9
!
实时荧光定量
A$<
分析用引物
R9D:B#
!
JA.8BA/>LAB9:*N.8BJ6Q
引物名称
JA.8BA
098B
序列
WB
P
@B0=B
"
c
#
%c
#
片段长度
WB
?
8B0N
/.;B
%
D
E
#*5)%*QR*F 3RR63I6666RRIRRRIRI #$,
#*5)%*QR*Q IR33I6IR6RRRRRI36663R
!"#*QR*F 66633IRR6333I666R6 #%(
!"#*QR*Q RIRRIRRI66RR63IR6I
氨基酸的组成(分子量(理论等电点等理化性质&在
线软件
E
$%%
E
L98+]L98+>A
?
%进行
L9/=.=:.0*:.KB
结构域分析&
H*
端信号肽序列和
6*
端
IJM
序列分别
利用
W.
?
09:J$+#
和
D.
?
*JMJ:90NJABC.=N>A
程序预
测&
\*
链和
H*
链的糖基化位点分别利用
HBN\I:
Y
=
$+"
程序和
HBNHI:
Y
=#+"
预测蛋白质的二级结
构通过
I\Q
方法)!*在线分析获得
JW\QR
预测
蛋白的亚细胞定位
L9/=.=:.0*:.KB
结构域序列的多
重比对采用
6:@/N9:]
和
I5H4\6
等软件完成用
5`I3+"
软件进行同源性分析!并用邻接法
"
HB.
?
A*_>.0.0
?
!
H_
#重复
#""""
次构建系统进
化树!所用蛋白序列来自
H62M
或
2Q34
"
E
$%%
DA9//.=9CD+>A
?
%
DA9C
%#数据库
9+B
!
基因表达分析
以油菜
#*5)%
"
3F###1#!
#基因为内参!使用
JA.8BA
设计特异性引物"表
#
#实时荧光定量
J6Q
体系共
!"
$
G
!按试剂盒"
Wd2Q
%
IABB0QB9:*
N.8BJ6Q 9`/NBA .`]
!
R\d\2#说明书进行反
应在
2.>*Q9C.S
仪器上完成!采用两步法扩增
反应程序为
&b
预变性
%"/
&
b
变性
#"/
!
1b
退火
!"/
!
$"
个循环目的基因的相对表达量采用
该
J6Q
仪自带的
2.>*Q9C.S!+"
软件中的
CC6N
算法进行计算
!
!
结果与分析
;:9
!
%/12!
基因的克隆及编码氨基酸特性分析
根据白菜
!"#(
基因设计的引物
!"# F
和
!"#Q
进行同源克隆!以油菜
H_,&1!
叶片
=4H3
为模板进行
QR*J6Q
扩增"图
#
#测序结果表明该
序列包含完整开放阅读框!长
#!""D
E
!共编码
%&&
个氨基酸残基和
#
个终止密码子
RI3
该基因编
码氨基酸大小
$!11+&49
!预测等电点为
(+%,

20FG3
的氨基酸组成分析显示其具有
3IJ/
蛋白
典型的氨基酸组成特征!富含脯氨酸
JA>
"
%+O
#(
丙氨酸
3:9
"
#"+1O
#(丝氨酸
WBA
"
&+%O
#和苏氨酸
R"
,+O
#
图
#
!
$%!"#
基因
=4H3
序列扩增
`+4G"""
&
#+$%!"#
基因
J6Q
产物
F.
?
+#
!
38
E
:.L.=9N.>0>L=4H3/B
P
@B0=B>L$%!"#
?
B0B
`+4G"""
&
#+J6Q
E
A>C@=N/>L$%!"#
图
!
!
20FG3
蛋白预测的一级结构图
3+
预测的一级结构示意图&
2+
预测的结构域其中绿色
代表
H*
端信号肽!紫色代表
6*
端
IJM
序列!黄色代表
L9/=.=:.0
结构域!红色代表
3IJ*:.KB
结构域!红色斜体代表
H*
糖基化位点!
蓝色斜体代表
3/0*799*WBA
%
R序列!绿色斜体代表
\*
糖基化位点
F.
?
+!
!
W=E
AB/B0N9N.>0>L
E
@N9N.ZB
20FG3
E
A.89A
Y
/NA@=N@AB
3+J@N9N.ZB/KBN=<89
E
>L20FG3
E
A.89A
Y
/NA@=N@AB
&
2+J@N9N.ZB
C>89.0/>L20FG3+6>:>ABC/B
P
@B0=B/9NN.0C.=9NBNE
ABC.=NBC/.
?
09:
E
B
E
N.CB
"
?
ABB0
#
90CIJM*90=<>A
/B
P
@B0=B
"
E
@A
E
:B
#!
AB/
E
B=N.ZB:
Y
+R89.0/90C
3IJ*:.KBAB
?
.>0/9AB/<>[0.0
Y
B:>[90CABC
!
AB/
E
B=N.ZB:
Y
+RABC.N9:.=/9AB
E
ABC.=NBCN>H*:.0KBC
?
:
Y
=>/
Y
:9N.>0/.NB/
!
90CN3/0*799*WBA
%
RP
@.0/9AB<.
?
<:.
?
!
[<.:B
\*:.0KBC
?
:
Y
=>/
Y
:9N.>0/.NB/9AB.0C.=9NBCD
Y
N?
ABB0.N9:.=/
;:;
!
C&DE/
蛋白预测的结构域分析
生物信息学分析表明!预测的
20FG3
蛋白具
有
!
个
L9/=.=:.0*:.KB
结构域"
%
#
#,$
!
#&1
#
%!(
#!
属于
L9/=.=:.0
超家族
W.
?
09:J$+#
分析显示其
H*
端有
#
个信号肽
WJ
!且
6WJ
"
6:B9Z9
?
B/.NB
E
>/.*
N.>0
#位点在第
!$
和
!
个氨基酸的位置使用
D.
?
*
JMJ:90NJABC.=N>A
预测
6*
端
IJM*9CC.N.>0
信号!发
现可能的
IJM
修饰位点即第
%,!
个氨基酸的位置
HBNHI:
Y
=#+"
预测表明该蛋白中具有
$
个
H*
糖基
化位点"
3/0!(
(
#!1
(
#(!
(
!$(
#!
HBN\I:
Y
=$+"
预测
显示它具有
##
个
\*
糖基化位点"
WBA#",
(
#"&
(
##(
(
#,$
(
#1%
(
!(,
(
%$!
(
%$%
(
%(
&
R(
#1#
#"图
!
#
JW\QR
对
20FG3
的亚细胞定位预测表明该蛋白
很可能定位于细胞质膜
1&#
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$
卷
采用
I\Q
方法)!*对
20FG3
蛋白的二级结构
进行预测!结果显示该蛋白中

*
螺旋"
9:
E
<9#
占
%$+%$O
!延伸主链"
B]NB0CBC/NA90C
#占
#,+,&O
!
无规卷曲"
A90C>8=>.:
#占
$,+1,O


*
螺旋和无规
卷曲是组成
20FG3
蛋白二级结构的主要成分
图
%
表明!
20FG3
的
!
个
L9/=.=:.0*:.KB
结构域
长度分别为
#$"D
E
和
#!&D
E
!与其他物种的序列间
同源性较低!却也具有
%
个长约
#"
个氨基酸的保守
序列
U#
(
U!
和)
dF
*
U
其中
U!
区域富含亮氨
酸(异亮氨酸和缬氨酸等疏水氨基酸!这些疏水残基
可能对维持
L9/=.=:.0*:.KB
结构域的功能如细胞粘连
不可缺少)!(*且
U#
和)
dF
*
U
中分别含有保守的
苏氨酸和组氨酸残基"图
%
#
;+?
!
系统进化树分析
利用
5`I3+"
软件!将预测的
20FG3
氨基
酸序列与不同植物中已知的
3IJ/
和
FG3/
蛋白构
建系统进化树结果"图
$
#表明!
20FG3
蛋白与同
属十字花科的白菜
FG3#,
和拟南芥
FG3!
的进化
关系较近!与
3NFG3#
和
3NFG3%
次之!与它们的
氨基酸序列一致性分别为
&1O
(
1,O
(
,O
和
$"O
!
与
3N3IJ%#
及
I<3IJ%#
的亲缘关系较远因此
将其命名为
$%!"#

;:@
!
%/12!
基因的表达分析
图

显示!
$%!"#
基因在油菜各组织均有表
达!不具有组织特异性!苗期下胚轴中表达量最高!
其次为苗期子叶(开花期叶片和苗期根!角果中表达
图
$
!
不同植物
3IJ/
和
FG3/
的系统进化树分析
分支上的数值表示
2>>N/NA9
E
验证中基于
#""""
次重复该节点的
可信度&标尺表示遗传距离&
ID+
海岛棉&
I<+
棉花&
3N+
拟南芥&
TB+
百日菊&
20+
油菜&
2A+
白菜&
J
E
+
小立碗藓&
GB+
番茄&
6/+
黄瓜&括号内为
IB0290K
或
2Q34
登录号
F.
?
+$
!
J<
Y
:>
?
B0BN.=909:
Y
/./>L3IJ/90C
FG3/.0C.LLBAB0N
E
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E
:.=9N.>0/
&
RAB
E
AB/B0N/
?
B0BN.=C./N90=B
&
ID+=/((
9+
),26&673%(3
&
I<+=-0)&(,5,2
&
3N+#-501)%
&
TB+@-313
4
%(
&
20+$-%
+
,(
&
2A+$&(()*&
+

&
J
E
+>0
9
(*/2)5&311
+
53%(
&
GB+"
9
*/
+
3&()*/%3(*,13%5,2
&
6/+B,*,2)((5);,(
&
IB0290K>A2Q349==B//.>00@8DBA/9AB.0
E
9AB0N图
%
!
20FG3
与其他植物
FG3/
的
L9/=.=:.0*:.KB
结构域的多重比对
TB+
百日菊&
3N+
拟南芥&
I<+
棉花&
20+
油菜若同一蛋白包含超过
#
个
L9/=.=:.0*:.KB
结构域!则根据它们在蛋白中的
位置"从
H*
端起#!依次用,
)#
-和,
)!
-来注释该结构域灰色线分别表示保守序列
U#
(
U!
和)
dF
*
U
F.
?
+%
!
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E
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08B0N>LL9/=.=:.0*:.KBC>89.0/DBN[BB020FG390CFG3/.0>NE
:90N/
TB+@)%%)313
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+
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&
I<+=/((
9+
),20)&(,5,2
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D
Y
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.
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A9
Y
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!
AB/
E
B=N.ZB:
Y
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#"
期
!!!!!!!!!!!!
翟丽娜!等$甘蓝型油菜
$%!"#
基因的克隆及表达分析
图

!
油菜不同组织中
$%!"#
的表达
F.
?
+
!
5]
E
AB//.>0>L$%!"#.0C.LLBAB0N
N.//@B/>L$-%
+
,(
图
(
!
激素和非生物胁迫处理下油菜下
胚轴中
$%!"#
的表达
6X+
对照&
I3
%
+
赤霉素&
2Q+
油菜素内酯&
M33+
吲哚
*%*
乙酸&
(*23+(*
苄氨基腺嘌呤&
323+
脱落酸&
WV6+
蔗糖&
$b+
低温&
J5I+
聚乙二醇&
H96:+
氯化钠
"
和
""
分别表示处理
与对照间在
"+"
和
"+"#
水平存在显著性差异
F.
?
+(
!
5]
E
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6X+6>0NA>:
&
I3
%
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9=.C
&
(*23+(*DB0;
Y
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&
323+3D/=./.=9=.C
&
WV6+W@=A>/B
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!
AB/
E
B=N.ZB:
Y
较少!但高于花蕾和花!茎秆中表达最少!表明该基
因与油菜生长发育密切相关
由图
(
可知!
$%!"#
基因表达受到
I3
%
(
2Q
(
M33
(
323
和
H96:
的诱导!而受到
(*23
(蔗糖(低
温和
J5I
抑制其中!
I3
%
和
M33
都极显著地上
调其表达!且
I3
%
上调作用更为明显!
H96:
也使得
其表达量显著升高!然而低温处理却极显著降低其
表达这些结果暗示了
$%!"#
基因在油菜生长发
育中可能与激素和非生物胁迫应答有关
%
!
讨
!
论
类成束阿拉伯半乳聚糖蛋白基因"
!"#(
#在植
物发育过程中起到重要作用!显著影响植物形态!对
株型建成调控研究具有重要价值本研究首次从甘
蓝型油菜中克隆了
#
个
!"#
基因!结构域的预测显
示其编码氨基酸中具有
H*
端信号肽!
6*
端
IJM*90*
=<>A
序列! 个
3IJ*:.KB
区域和
!
个
L9/=.=:.0*:.KB
结构域
G.
等)#%*通过系统进化树分析把
%%
个
2AFG3/
蛋白分成
$
大类"
=:9CB
&
*=:9CB
(
#!依据
所含
3IJ*:.KB
和
L9/=.=:.0*:.KB
结构域数目不同分
为
$
类"
?
A>@
E &
*
?
A>@
E (
#!与
20FG3
同源的
2AFG3#,
分别属于
=:9CB
&
和
?
A>@
E)
!与
3NF*
G3!
亲缘关系最近!本研究分析结果与之相一致
因
FG3/
具有
L9/=.=:.0*:.KB
结构域!所以
FG3/
与
3IJ/
聚成两大类!这与
3IJ/
按结构域的分类也
一致以上分析结果表明本研究克隆的基因编码的
蛋白属于
FG3/
蛋白家族
基因的表达模式与其在植物中的功能有重要的
联系!研究
!"#(
的表达可为阐释该基因的功能提
供线索
P
QR*J6Q
的结果表明
$%!"#
的表达广
泛分布于各个组织器官中!推测该基因可能参与了
油菜各个组织的生长发育过程
G.
等)#%*通过查找
IB0290K
中的白菜
#""""
条
5WR/
序列!对根(
叶(花(花蕾(角果和种子中的
$&!"#(
表达进行分
析发现
$&!"##,
基因在根和种子中的表达量较其
他
$
个器官中更高!在花中不表达
$%!"#
在油菜
花器官中有少量表达!表明
$%!"#
与其同源基因
$&!"##,
的表达有差异
植物
!"#(
基因可能涉及多种激素和非生物胁
迫信号转导过程拟南芥
!"##
E
eIVW
转基因植
株的
6M`
"
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?
8BC.@8
#和
WM`
"
/<>>N
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?
8BC.@8
#处理结果显示
!"##
基因对生长
素依赖!而细胞分裂素对其有抑制效应)!,*
9`
等)#"*研究表明
8(!"#,
(
8(!"###
和
#5!"#!#
的
表达都受到赤霉素
I3/
的诱导!暗示
I3/
在调控
!"#(
基因功能上具有重要作用激素变化与形态
发育密不可分!影响植物形态建成其中赤霉素涉
及植物生长发育的各个方面!包括种子发芽(茎秆伸
长(叶片伸展(花粉成熟和花的诱导等激素处理后
$%!"#
基因表达量的变化显示其对
I3
%
最为敏
感!推测该基因可能通过参与
I3/
的信号网络调节
油菜的生长发育外界环境也极大地影响植物生长
情况!耐寒耐高温!耐盐碱以及耐旱等品种的选育一
"(&#
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$
卷
直以来都是育种工作的重点有研究表明
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"#!%
表达在盐胁迫下升高!低温处理下
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(
#5!"#!"
(
8(!"##
和
8(!"#$
表达量降低!
8(!?
"#!
(
8(!"#
(
8(!"##
(
8(!"##1
和
8(!"##&
的表达都受到干旱胁迫的抑制)#"*
$%!"#
的表达
受
H96:
上调和低温(
J5I
下调表明它也可能参与
不同的逆境胁迫调控过程但是!油菜
$%!"#
基
因在激素应答和逆境胁迫响应中的作用及其分子机
制还有待进一步研究目前已构建该基因的过表达
载体和
QH3.
载体!将通过转化油菜植株对该基因
功能进行研究!为阐释其具体的发育调控机制和生
物学功能奠定基础
参考文献!
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