全 文 :植物病理学报
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA 44(4): 443 ̄448(2014)
收稿日期: 2013 ̄06 ̄06ꎻ 修回日期: 2013 ̄11 ̄23
基金项目: 国家科技支撑计划课题(2012BAD20B05)资助
通讯作者: 朱利群ꎬ副教授ꎬ主要从事农田生态与耕作制度研究ꎻE ̄mail: zhulq@njau.edu.cnꎮ
doi:10.13926 / j.cnki.apps.2014.04.015
研究简报
麦秸掩埋还田对赤霉菌(Fusarium graminearum
Sehw.)存活率和水稻带菌的影响
张政文ꎬ 孙秀娟ꎬ 胡乃娟ꎬ 黄 卉ꎬ 朱利群∗ꎬ 卞新民
(南京农业大学农学院ꎬ南京 210095)
Effect of straw ditch ̄buried return depth on Fusarium graminearum survival rate
and carrier rate of rice ZHANG Zheng ̄wenꎬ SUN Xiu ̄juanꎬ HU Nai ̄juanꎬ HUANG Huiꎬ ZHU
Li ̄qunꎬ BIAN Xin ̄min (College of Agricultureꎬ Nanjing Agriculture UniversityꎬNanjing 210095ꎬ China)
Abstract: In order to determine the influence of different straw concentrated buried depth to survival rate of
Fusarium graminearum and carrier rate of riceꎬ six treatments including four buried depths (5 cmꎬ 20 cmꎬ 35
cmꎬ 50 cm) and ck (straw mulched and rotary tillage returned)ꎬ were set up from July to November in 2011.
The research turned out that the flooded time and returning depths significantly affected the survival days and
survival rate of F. graminearum. In flooded conditionꎬ straw with F. graminearum were centralize-buried. The
survival time of the F. graminearum was 18 days at the most. The straw with Gibberella return into soil could
cause the soil contaminated. Straw mulchingꎬ rotary tillage returning and 5 cm buried will increased the cross-in ̄
fection phenomenon of F. graminearum in wheat and riceꎬ while buried over 20cmꎬ the colonies were reduced
and the rice won’t be infected with F. graminearum
Key words: straw concentrated buried returnꎻ Fusarium graminearumꎻ survival rateꎻ carrier rate of rice
中图分类号: S432.44 文献标识码: A 文章编号: 0412 ̄0914(2014)04 ̄0443 ̄06
小麦赤霉病( Fusarium head blight)是世界性的
麦类病害之一ꎮ 该病害属于气传病害ꎬ流行情况比
较复杂ꎬ它的发生流行受田间菌源量、品种抗性、生
育期、农业生态环境及栽培管理措施等多种因素的
影响ꎮ 禾谷镰刀菌的寄主范围十分广泛ꎬ它能够侵
染大麦、小麦、燕麦、水稻、玉米等多种植物的根部和
穗茎部ꎬ引起根腐、茎腐、穗腐及霉变等ꎬ并在寄主的
根、茎等病残体上越冬ꎬ产生子囊壳构成来年病害的
初侵染源[1~2]ꎬ进而侵染下茬水稻ꎬ使水稻感染恶苗
病[3]ꎬ严重威胁整个稻麦轮作系统、粮食生产和人畜
安全ꎮ 有实验表明ꎬ采用集中掩埋的还田方式ꎬ禾谷
镰刀菌的存活率则会明显降低[4]ꎬ有效抑制稻麦交
叉侵染的现象ꎮ 但麦秸掩埋的深度对于赤禾谷镰刀
菌存活率的影响尚缺乏定量研究ꎮ 本文针对这一问
题ꎬ从农田生态系统角度出发ꎬ以禾谷镰刀菌株
F0902为研究对象ꎬ在盆栽条件下ꎬ将人工接种禾谷
镰刀菌的麦壳、麦秆和麦粒集中ꎬ分别掩埋到不同深
度的土壤中ꎬ研究麦秸掩埋还田技术对该菌存活率
及水稻植株带菌的影响ꎬ以期更加具体地揭示不同
的还田深度对病菌存活率的影响ꎮ
1 材料与方法
1.1 供试材料
试验材料为人工培养的带菌麦秸ꎮ 采用高压
植物病理学报 44卷
灭菌锅在 121℃下ꎬ将麦秆(人工剪成 5 cm左右的
小段)、麦壳、麦粒灭菌 30 minꎬ并用禾谷镰刀菌株
F0902分别接种ꎬ28℃恒温条件下培养 5 ~ 7 dꎬ制
成成粉红色禾谷镰刀菌菌料ꎮ
试验土壤为轻壤土ꎬ统一经直径为 5 mm的铁筛
过筛ꎬ土壤经过自来水浸泡 20 d 后再通过日光暴晒
7 dꎮ 秸秆常规还田量为 0.5 kg / m2ꎬ集中掩埋还田量
5 kg / m2ꎮ
1.2 试验设计
试验于 2011 年 7 ~ 11 月进行ꎬ实验设置土表
不种水稻和种植水稻两部分ꎮ 每部分设置 5 cm
(h1)、20 cm(h2)、35 cm(h3)、50 cm(h4)4 个还田
深度处理ꎬ秸秆覆盖( ck1)和旋耕还田( ck2)作为
本试验对照ꎮ 试验选用高 56 cm、桶口直径 36 cm
的塑料桶ꎬ将事先称好的病菌菌料放入桶中ꎬ均匀
铺平ꎬ再按照桶上标志依次填入供试土壤ꎮ
不种植水稻各处理为破坏性取样ꎮ 每处理设
置 10个重复ꎬ共 60 桶ꎮ 目的是明确与常规覆盖、
旋耕还田相比ꎬ秸秆集中沟埋还田不同埋深对病菌
存活率及其存活时间的影响ꎮ
种植水稻处理为非破坏性取样ꎬ其中ꎬ每处理
设 6个重复ꎬ每重复种植 4穴水稻ꎬ共 36桶ꎮ 目的
是验证秸秆集中沟埋还田不同埋深对水稻植株带
菌状况的影响ꎮ
不种水稻各处理在南京农业大学进行ꎬ试验区未
种植任何作物ꎮ 种植水稻各处理在南京农业大学牌
楼实验基地进行ꎬ并将每处理中的 3个重复放在室外
自然环境中(Non-isolated environmentꎬ NIE)ꎬ另外 3
个重复放入控温室分别进行隔离(Isolated environ ̄
mentꎬ IE)ꎬ每处理一间温室ꎬ共 6间温室ꎮ
1.3 测定项目及方法
1.3.1 赤霉菌存活率检测 采用 PSA培养基分离
培养赤霉菌ꎮ 自 2011年 8月 5 日起ꎬ每隔 24 h 取
1次样ꎮ 先将供分离菌料的样品ꎬ先用自来水冲洗
干净后ꎬ在无菌超净台上用 75% 酒精溶液进行表
面消毒 2~3 s后ꎬ立即放入无菌水中洗 1~ 2 次ꎬ然
后在超净工作台上接种于无菌的 PSA 培养皿内ꎬ
每培养皿 4~ 6 块ꎬ在平板上呈四方形或梅花形摆
放ꎬ置于 28℃恒温箱中培养ꎬ每隔 24 h观察一次其
萌发情况ꎬ记录萌发数ꎬ每处理重复 9次ꎬ每重复为
一培养皿ꎮ
1.3.2 土壤带菌检测 采用 PSA培养基(同 1.3.1)
检测还田菌料周围土壤带赤霉菌率ꎮ 自 2011年 8月
5日起ꎬ每隔24 h取一次样ꎬ即与1.3.1同步ꎬ取菌料的
同时取其周围土壤ꎮ 采用烘干法检测每份土样的含
水量ꎮ 依据稀释分离法原理ꎬ参照 Wang 等[5]方法ꎬ
称取 1 g鲜土ꎬ用无菌水配成 10-2倍土壤悬浊液ꎬ按每
培养皿 0.1 mL的用量用无菌移液枪添加土壤悬液到
PSA培养基平板上ꎬ然后用无菌三角玻璃刮铲均匀涂
布ꎬ置于 28℃恒温箱中培养ꎬ每隔 24 h观察其萌发情
况ꎬ并记录萌发数ꎬ每处理重复 9次ꎬ每重复为一培养
皿ꎮ 按如下公式计算每克土壤菌落数:
菌落数(cfu / gꎬ 干土)=
同一稀释度的菌落平均数
稀释倍数×(1-土壤含水量)
1.3.3 水稻植株带菌检测 水稻插秧 10 d 后开始
取样ꎬ以后每 7~10 d取 1次样ꎬ每次每穴随机取1~3
株水稻分蘖ꎬ齐土表剪下ꎮ 分蘖期取植株样的叶片和
茎基部(12 cm)两部分ꎻ抽穗后取叶片、茎基部(12
cm)和籽粒 3部分ꎬ并将叶片和稻秆基部剪成 3 cm左
右的小段ꎬ抽穗后每株水稻随机取籽粒 6~8粒ꎮ 先用
自来水冲洗干净后ꎬ在无菌条件下用75%酒精溶液进
行表面消毒2~3 sꎬ立即放入无菌水中洗1~2次ꎬ然后
在超净工作台上接种于无菌的 PSA培养皿内ꎬ在平板
上呈川字型或梅花型排列ꎬ置于 28℃恒温箱中培养ꎬ
每隔 24 h观察禾谷镰刀菌培养情况ꎬ记录带菌段数ꎬ
每处理重复 9次ꎬ每重复为一培养皿ꎮ
1.4 数据处理
用 Microsoft Excel 2003 软件进行数据处理和
作图ꎬ采用 SPSS11.5 软件对试验数据进行差异及
显著性分析ꎮ
2 结果与分析
2.1 麦秸还田不同埋深对赤霉菌存活率及存活天
数的影响
2.1.1 麦秸还田不同深度行啊麦粒上病菌存活率
及存活天数 麦粒带菌率的检测结果表明ꎬ麦秸覆
盖还田、旋耕还田和集中掩埋都会导致赤霉菌的存活
率降低ꎻ随着掩埋深度的增加ꎬ存活时间随之减少(表
1)ꎮ ck1的存活时间最长ꎬ为 6 dꎬh4的存活时间最短ꎬ
为 4 dꎮ 试验表明:还田深度能够显著降低麦粒上赤
霉菌的存活率ꎬ并且随着还田深度的加深ꎬ降低效果
444
4期 张政文ꎬ等:麦秸掩埋还田对赤霉菌(Fusarium graminearum Sehw.)存活率和水稻带菌的影响
越明显ꎻ麦粒上赤霉菌的存活时间为 4~6 dꎮ
2.1.2 麦秸还田不同深度对麦秆上病菌存活率及
存活天数的影响 麦秆带菌率的检测结果表明ꎬ带
菌麦秆集中掩埋还田后ꎬ随着还田时间及还田深度
的增加ꎬ降低幅度逐渐增大(表 2)ꎮ 在 ck1处理中ꎬ
还田 7 d 后(8 月 12 号)ꎬ麦秆上赤霉菌的存活率
降至 10%以下ꎬ而其余各处理在还田 6 d 后ꎬ麦秆
上赤霉菌的存活率降至 10%以下ꎬ掩埋 12 d 后ꎬ麦
秆上赤霉菌的存活率降为 0ꎮ 试验表明:麦秸上的
赤霉菌有着很强的存活能力ꎮ 麦秆上禾谷镰刀菌
的存活时间为 7~12 dꎮ
2.1.3 麦秸还田不同深度下麦壳上病菌存活率及
存活天数 麦壳带菌率的检测结果表明ꎬ随着还田
时间的延长ꎬ各处理禾谷镰刀菌的存活率显著降
低ꎮ 所有处理淹水还田 18 d 后ꎬ存活率均为 0ꎻ在
所有处理中ꎬ病菌的存活率均有一个相对稳定的时
期(表 3)ꎮ 这说明:第一ꎬ在以带菌麦壳为菌料进
行还田时ꎬ还田深度对于麦壳上病菌的存活时间并
没有明显的作用ꎻ第二ꎬ还田时间对于降低麦秸上
病菌的存活率有着重要的作用ꎮ
Table 1 Grain of the wheat Fusarium graminearum survival rate and days in
different straw return depths
Sampling date
Straw return depths / %
ck1 ck2 h1 h2 h3 h4
Aug.05 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA
Aug.06 100aA 100aA 100aA 96.3aA 61.1bAB 74abB
Aug.07 100aA 81.5bAB 85.2bAB 70.3bAB 20.6cBC 51.8bC
Aug.08 63.7bA 38.9cB 40.8cB 31.4cBC 29.7cdBC 11.1cC
Aug.09 20.3cA 11.1dAB 5.60dAB 5.60dAB 11.1deAB 0cB
Aug.10 5.60dA 0dA 0dA 0dA 0eA 0cA
Aug.11 0dA 0dA 0dA 0dA 0eA 0cA
Aug.12 0dA 0dA 0dA 0dA 0eA 0cA
ck1: simulated straw mulch. ck2: Simulated straw rotary return. h1ꎬ h2ꎬ h3ꎬ h4: 5cmꎬ 20cmꎬ 35cmꎬ 50cm straw ditch ̄buried
depths. Different small letters in the same column meant significant difference at 0.05 levels among one variety. Different cap ̄
ital letters in the same line meant significant difference at 0.05 levels among one variety.
Table 2 Fusarium graminearum in straw of the wheats survival rate and days in
different return depths
Sampling date
Straw return depths / %
ck1 ck2 h1 h2 h3 h4
Aug.05 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA
Aug.06 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA 75bA
Aug.07 94.4abA 69.4bA 66.7bAB 63.9bABC 30.6bBC 27.8cC
Aug.08 77.8bA 52.8cAB 41.7cABC 22.2cBC 19.4cBC 5.60cdC
Aug.09 30.5cA 19.4dAB 13.9dAB 11.1dB 11.1dB 5.60cdB
Aug.10 16.7cdA 11.1deAB 8.33dAB 5.50deAB 5.60deAB 2.80cdB
Aug.11 11.1dA 8.30deA 2.80dA 2.80deA 2.80eA 2.80cdA
Aug.12 8.30dA 0eB 0 dB 0eB 0eB 0dB
Aug.17 0dA 0eA 0dA 0eA 0eA 0dA
Aug.20 0dA 0eA 0dA 0eA 0eA 0dA
ck1: Simulated straw mulch. ck2: Simulated straw rotary return. h1ꎬ h2ꎬ h3ꎬ h4: 5cmꎬ 20cmꎬ 35cmꎬ 50cm straw ditch ̄
buried depths. Different small letters in the same column meant significant difference at 0. 05 levels among one variety.
Different capital letters in the same line meant significant difference at 0.05 levels among one variety.
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植物病理学报 44卷
Table 3 Fusarium graminearum in wheat hust survival rate and days in
different straw return depths
Sampling date
Straw return depths / %
ck1 ck2 h1 h2 h3 h4
Aug.05 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA 100aA
Aug.06 97.9aA 100aA 100aA 100aA 97.2aA 91.7aA
Aug.07 84.7aA 80.6bAB 69.4bB 41.7bcC 27.8bC 38.9bC
Aug.08 27.8bA 33.3cB 30.6cB 13.9cdB 11.1cB 27.8cB
Aug.09 19.4bA 16.7dAB 11.1dB 8.30deB 8.30cdB 8.30dB
Aug.10 16.7bcA 8.30dB 8.30deB 5.60deB 5.60cdB 5.60dB
Aug.11 11.1bcdA 5.60dB 2.80deB 5.60deB 5.60cdB 5.60dB
Aug.12 5.60cdeA 2.80dA 2.80deA 2.80deA 5.60cdA 2.80dA
Aug.17 2.80cdeA 2.80dA 2.80deA 2.80deA 2.80cdA 2.80dA
Aug.20 2.80deA 2.80dA 2.80deA 2.80deA 2.80cdA 2.80dA
Aug.23 0eA 0dA 0eA 0eA 0dA 0dA
ck1: Simulated straw mulch. ck2: Simulated straw rotary return. h1ꎬ h2ꎬ h3ꎬ h4: 5cmꎬ 20cmꎬ 35cmꎬ 50cm straw ditch-bu ̄
ried depths. Different small letters in the same column meant significant difference at 0.05 levels among one variety. Different
capital letters in the same line meant significant difference at 0.05 levels among one variety.
Table 4 The number of colonies in soil in different straw return depths
Sampling date
Straw return depths / %
8.6 8.7 8.8 8.9 8.10 8.11 8.12 8.17 8.20 8.23
ck1
ck2
h1
h2
h3
h
max 2812 1845 966 615 527 351 263 288 175 175
min 2285 1142 761 439 263 263 175 120 87 87
aver 2519 1406 878 556 380 322 205 176 146 117
max 1968 1031 749 656 468 374 281 187 187 93
min 1497 937 562 374 281 281 93 93 93 93
aver 1593 999 656 531 406 343 187 156 125 93
max 3800 1074 644 429 322 322 214 214 0 0
min 1157 859 537 322 214 214 214 107 0 0
aver 1719 967 609 394 286 250 214 179 0 0
max 1622 873 624 374 320 249 249 249 0 0
min 1373 748 499 374 153 124 124 124 0 0
aver 1497 832 540 374 251 208 208 166 0 0
max 1341 804 536 402 268 268 0 0 0 0
min 1073 670 402 402 134 134 0 0 0 0
aver 1162 715 447 402 223 223 0 0 0 0
max 893 637 510 382 255 0 0 0 0 0
min 765 510 255 255 127 0 0 0 0 0
aver 808 552 382 340 170 0 0 0 0 0
ANOVA
Factor Significance
Sampling time ∗∗
Return depth ∗∗
Sampling date×return depth ∗∗
ck1: simulated straw mulch. ck2: Simulated straw rotary return. h1ꎬ h2ꎬ h3ꎬ h4: 5cmꎬ 20cmꎬ 35cmꎬ 50cm straw ditch-bu ̄
ried depths. ∗∗: treatments significantly affect the number of bacterial colonies at 0.01 levels.
644
4期 张政文ꎬ等:麦秸掩埋还田对赤霉菌(Fusarium graminearum Sehw.)存活率和水稻带菌的影响
综上所述ꎬ在本试验中ꎬ在还田前期ꎬ还田深度
和还田时间能够显著降低麦壳上禾谷镰刀菌的存
活率ꎬ而还田时间对于麦壳上病菌的存活时间起主
要作用ꎮ
2.2 麦秸还田不同掩埋深度对土壤带菌率的影响
由于试验方法本身的限制ꎬ本实验采用最高菌
落数 、最低菌落数、平均菌落数来表示每处理土壤
的带菌状况ꎮ 土壤带菌率结果表明ꎬ带禾谷镰刀菌
的麦秸还田会引起麦秸周围的土壤带菌(表 4)ꎮ
ck1处理检测出禾谷镰刀菌菌落数最多ꎮ ck1、ck2处
理秸秆还田 18 d 后ꎬ麦秸层周边土壤仍能分离出
较多的病菌菌落ꎮ 说明覆盖还田和旋耕还田无法
有效消灭土壤中的病菌ꎮ 在 h1、h2、h3、h4处理中ꎬ
土壤中检测出的病菌菌落较 ck1和 ck2均有显著降
低ꎬ其中 h4处理折算每克干土含菌量仅为 893 个ꎮ
试验表明:淹水条件下ꎬ麦秸集中深埋还田能更有
效地降低病菌存活率和存活时间ꎮ
2.3 麦秸还田不同掩埋深度对水稻植株带菌的影响
水稻植株带菌率检测结果表明ꎬ隔离环境下
(IS)ꎬ ck1、ck2、h1浅埋还田处理水稻植株均具有较高
的带菌率ꎬh2、h3、h4深埋还田处理水稻植株带菌率均
为 0(表 5)ꎮ 自然环境下(NIS)ꎬ在水稻整个生育期内
对水稻植株进行检测表明ꎬ各处理水稻植株均带菌ꎬ
但是 ck1、ck2、h1浅埋还田处理下水稻植株带菌率明显
比隔离条件下的相应处理低ꎮ 说明自然条件下ꎬ带菌
秸秆覆盖还田、旋耕还田可增加田间菌源量ꎬ并能引
起一定区域的水稻植株带菌ꎮ 试验表明:常规秸秆覆
盖还田、旋耕还田及 5 cm浅埋还田ꎬ麦秸上病菌会寄
居在水稻植株上ꎻ麦秸掩埋还田深度≥20 cm时ꎬ可有
效消灭麦秸上的赤霉菌ꎮ
3 讨论与结论
由于禾谷镰刀菌菌主要寄居在小麦穗茎部ꎬ为
了更明确的研究淹水条件下ꎬ麦秸掩埋还田对禾谷
镰刀菌存活率的影响ꎬ本试验对麦粒、麦秆、麦壳分
别接种禾谷镰刀菌 F0902ꎮ 综合 3 个检测结果可
知:一、18 d 后ꎬ麦粒、麦秆、麦壳上病菌的存活率
为 0ꎻ二、还田时间对于赤霉菌的存活时间起到了
重要作用ꎻ三、因为还田时间对于赤霉菌没有直接
的抑制作用ꎬ故ꎬ还田时间很可能通过作用于其他
因素ꎬ间接影响病菌存活率ꎬ这一间接因素的存在
与否有待实验进一步验证ꎮ
麦秸还田下土壤带菌率检测结果说明:带赤霉
菌秸秆还田会使土壤带菌ꎬ且淹水天数和还田深度
显著影响土壤带菌量ꎮ 与常规秸秆覆盖还田、旋耕
还田相比ꎬ秸秆集中掩埋还田能有效地消灭麦秸上
的赤霉菌ꎬ从根本上减少田间菌源量ꎮ
Table 5 The carrier rate of rice in different straw return depths
Treatment
Stem Leaf Seed
Testing
segment
number
Bacterial
segment
number
Bacterial
rate / %
Testing
segment
number
Bacterial
segment
number
Bacterial
rate / %
Testing
segment
number
Bacterial
segment
number
Bacterial
rate / %
IS
NIS
ck1 60 18 30 60 7 11.7 - - -
ck2 60 16 26.7 60 3 5 - - -
h1 60 11 18.3 60 0 0 - - -
h2 60 0 0 60 0 0 - - -
h3 60 0 0 60 0 0 - - -
h4 60 0 0 60 0 0 - - -
ck1 132 20 15.2 132 7 5.3 72 10 13.9
ck2 132 13 9.9 132 2 1.5 72 9 12.5
h1 132 12 9.1 132 0 0 72 2 2.8
h2 132 2 1.5 132 0 0 72 6 8.3
h3 132 7 5.3 132 1 0.8 72 4 5.6
h4 132 13 9.9 132 0 0 72 5 6.9
IS:Isolated environmentꎻNIS:Non ̄isolated environment.
744
植物病理学报 44卷
麦秸还田下水稻带菌率检测结果说明:隔离条
件下ꎬ秸秆覆盖还田、旋耕还田及 5 cm浅埋还田处
理中ꎬ水稻茎基部均具有较高的带菌率ꎬ深埋还田
水稻植株带菌率均为 0ꎬ而自然条件下ꎬ盆栽试验
中各处理水稻植株上均带菌ꎮ 结合前面土壤带菌
检测结果ꎬ水稻带菌率实验结论进一步证明秸秆还
田埋深 20 cm为有效还田深度ꎮ
本试验在淹水条件下ꎬ通过对接种有赤霉菌的
麦秸进行还田ꎬ探究麦秸还田深度对于赤霉菌存活
率和水稻带菌的影响ꎮ 综合 3个检测结果ꎬ本试验
的结论为:第一ꎬ麦秸还田后的赤霉菌ꎬ存活期限为
4~18 dꎻ第二ꎬ秸秆淹水集中掩埋的深度控制在 20
cm以上时能有效地消灭病残体ꎬ减少土壤中菌源
量ꎬ有效抑制稻麦交叉侵染的现象ꎬ很好地抑制赤
霉病的大发生、大流行ꎮ
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责任编辑:张宗英 曾晓葳
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