全 文 :书西北植物学报! M ? ?
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文章编号$
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收稿日期$
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基金项目$现代农业产业技术体系建设专项资金资助"
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#
作者简介$魏翠果"
#6+&(
#!女!硕士研究生!主要从事马铃薯栽培生理研究
7*89.:
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通信作者$蒙美莲!教授!博士生导师!主要从事马铃薯栽培生理研究
7*89.:
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88<.:.90
!
#!),=@8
钙对
$%&
胁迫下马铃薯脱毒苗
碳水化合物代谢的影响
魏翠果#!陈有君!!蒙美莲#"!宋树慧#!肖
!
强#!任少勇#
"
#
内蒙古农业大学 农学院!呼和浩特
"#""#6
&
!
内蒙古农业大学 生命科学学院!呼和浩特
"#""#6
#
摘
!
要$以(克新一号)马铃薯品种为试验材料!采用组织培养方法!研究了
"
*
*
#"
*
#
*
!"88@:
+
A
(#
191:
!
对
"
*
!
*
"
*
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下马铃薯脱毒苗碳水化合物含量及相关酶活性的影响结果表明!"
#
#随着
B91:
胁迫浓度的增加!马铃薯脱毒苗叶片淀粉含量*蔗糖含量*葡萄糖含量*果糖含量以及可溶性总糖含量逐渐下降!蔗
糖合成酶"
44
#和蔗糖磷酸合成酶"
454
#活性明显降低!中性转化酶"
BC
#和酸性转化酶"
2C
#活性先升高后降低
"
!
#在
B91:
胁迫下!添加适量
191:
!
能显著增加淀粉含量*蔗糖含量*葡萄糖含量和可溶性总糖含量!显著降低
BC
和
2C
活性!有效缓解盐胁迫对
44
和
454
的抑制作用"
%
#蔗糖含量与
2C
存在负相关关系*与
BC
存在极显著负相
关关系*与
454
以及
44
存在极显著正相关关系研究表明!外源施钙可调节马铃薯苗的酶活性变化!改善盐胁迫
下马铃薯脱毒苗碳水化合物代谢方向!增强植株碳素合成作用和渗透调节能力!减轻盐害
关键词$马铃薯&钙&
B91:
胁迫&碳水化合物代谢
中图分类号$
D6$,&+
文献标志码$
2
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据统计!中国盐渍土分布十分广泛!约有
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#"
&
K8
!
!其中
&,"Z#"
)
K8
! 为农田,#-近年来!随
着工业的发展!灌溉用水的质量不断下降!土壤盐渍
化有不断加强的趋势,!-!使农业可持续发展受到严
重威胁马铃薯是对盐分较敏感的作物!土壤盐渍
化会严重影响马铃薯的生长发育及其产量和品
质,%*$-据报道!
B91:
胁迫能抑制安第斯马铃薯种
的匍匐茎生长,-
A
等,)-在以色列一个干旱沙
漠地区的沙质土壤上种植
#"
个地中海地区普遍栽
培马铃薯品种!以淡水"
71[!,%T4
+
8
(#
#*当地
含盐井水"
71[,#T4
+
8
(#
#和当地富含
B91:
井
水"
71[+,T4
+
8
(#
#进行浇灌处理!结果发现!中
度盐胁迫下马铃薯(
H@0T.9:
)品种鲜薯产量较对照
降低
!+!高盐度胁迫下马铃薯(
1K9O:@PP<
)鲜薯产
量较对照降低
$#内蒙古是中国马铃薯生产的
主要省区!其
!"##
年马铃薯播种面积达
&,#!&Z
#"
K8
!
!居全国首位但是!内蒙古自治区盐土面
积较大"约为
#,!$Z#"
)
K8
!
#!约占全区土地面积
的
",$!,
&
-
!盐渍化土壤给马铃薯生产发展造成一
定影响
应用外源物质被认为是一种有效调控植物耐盐
性的重要手段对植物而言!
19
!]不仅作为一种必
需的营养元素!更重要的是作为耦联胞外信号与胞
内生理反应的第二信使当植物受到外界环境刺激
时!细胞中
19
!]浓度会出现变化!引起一系列保护性
生理反应!从而减轻环境胁迫对植物体的伤害,+-外
源
19
!]可以增强植物的抗盐性!这已在玉米,6-*水
稻,#"-*番茄,##-等植物上得到证实本实验室之前已
初步研究了
19
!]对马铃薯抗盐性的调控作用!结果
发现在
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下添加
#"88@:
+
A
(#
191:
!
可使马铃薯脱毒苗株高*茎粗*叶片数*茎
叶干重及根干重较对照分别增加
$%,$&*
#),##*
&,!&*
&),&)及
#$,!6,
#!
-
本研究在此基础上!
进一步开展盐胁迫下钙对马铃薯碳水化合物代谢的
影响的研究!探讨
19
!]对马铃薯调控的生理生化基
础!为马铃薯耐盐品种的筛选和耐盐栽培技术的制
定提供理论依据和技术参考
#
!
材料和方法
?,?
!
材料和处理
供试马铃薯品种为(克新一号)!脱毒苗由内蒙
古农业大学马铃薯研究室提供试验设
B91:
和
191:
!
两个因素!
B91:
设
"
*
!
*
"
*
&88@:
+
A
(#
$
个浓度!
191:
!
设
"
*
*
#"
*
#
*
!"88@:
+
A
(#
个浓
度!共组成
!"
个处理组合!每处理重复
%
次按设
计的处理浓度把
B91:
和
191:
!
分别添加到
H4]!
8
?
+
A
(#
^
6
]%蔗糖
]",6琼脂培养基中!制成
不同处理组合的培养基将继代培养的脱毒苗按单
节茎段剪切到培养基中进行培养培养瓶直径
),
=8
!每瓶装
"8A
培养基!接入
%"
个茎段!每个处
理
!"
瓶培养温度为"
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#
`
!光照度为
!"""
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!每天光照
#K
培养
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时取叶片测定各项生
理指标
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!
测定项目与方法
可溶性糖提取液制备采用
H9T@O<
,
#%
-和於新建
等,#$-的方法!蔗糖*果糖*淀粉,#-和可溶性总糖,#)-
的测定采用蒽酮法!葡萄糖含量用试剂盒"葡萄糖氧
化酶
*
过氧化物酶法#测定!蔗糖合成酶*蔗糖磷酸合
成酶*酸性转化酶"
2C
#*中性转化酶"
BC
#活性参照
高俊风,#&-的测定方法葡萄糖试剂盒购自上海荣
盛生物药业有限公司!试验中的尿苷二磷酸葡萄糖
"
Qa5I
#及
)*
磷酸果糖等生化试剂均购自美国
4.
?
*
89
公司
?,A
!
数据处理
采用
7Y=<:!""%
进行数据处理利用
424
统
计软件进行方差分析!用
a>0=90
氏新复极差法对
不同处理间进行差异显著性检验
!
!
结果与分析
@B?
!
外源钙对
$%&
胁迫下马铃薯脱毒苗叶片主
要碳水化合物含量的影响
@B?B?
!
淀粉含量
!
由表
#
可以看出!相同
B91:
胁
迫浓度下!马铃薯脱毒苗叶片淀粉含量随
191:
!
浓
度的增加呈现先升高后降低的趋势其中!在
"
*
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!
#"88@:
+
A
(#
191:
!
处理的淀粉含量最高!较相同
B91:
胁迫浓度
下的对照"未加
191:
!
处理#分别显著增加
%),++*
!),6和
!%,$""
!
#
","
#&在
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!在
191:
!
浓度为
#88@:
+
A
(#时!马
铃薯脱毒苗叶片淀粉含量最高!比相应对照显著增
加
%$,)6同时!同一
191:
!
处理浓度下!随着
$&
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
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%$
卷
B91:
胁迫浓度的增加!马铃薯脱毒苗叶片淀粉含量
逐渐下降&在无
191:
!
时!
!
*
"
和
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫处理分别较对照"无
B91:
处理#降低
6,%)*
!#,%#和
!6,)!且
"
和
&88@:
+
A
(#
B91:
处理达到显著水平&各
191:
!
处理浓度
下!叶片淀粉含量随
B91:
胁迫浓度的增加均较对
照显著降低
@,?,@
!
蔗糖含量
!
由表
!
可知!同一
B91:
胁迫浓
度下!添加不同浓度的
191:
!
后马铃薯脱毒苗叶片
中蔗糖含量变化规律与淀粉含量相似!也是随着
191:
!
浓度的增加呈现先升高后降低的趋势其
中!
"
*
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!
#"88@:
+
A
(#
191:
!
处理的马铃薯脱毒苗叶片蔗糖含量最
高!并显著高于无
191:
!
的处理&
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!
#88@:
+
A
(#
191:
!
处理的蔗糖含
量最高!比未加
191:
!
的处理显著提高
!,"6
同时!在相同
191:
!
处理浓度下!各处理马铃薯脱毒
苗叶片蔗糖含量随
B91:
胁迫浓度的增加而降低!
且均显著低于相应无
B91:
的对照&
"
*
*
#"88@:
+
A
(#
191:
!
处理下各
B91:
胁迫处理间差异达显著水
平!而在
#
和
!"88@:
+
A
(#
191:
!
处理下!
"
和
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫处理间差异不显著说明
高浓度的外源钙对高浓度盐胁迫下的蔗糖含量降低
有缓解作用
@,?,A
!
葡萄糖含量
!
从表
%
可以看出!
"
*
!
和
"
88@:
+
A
(#
B91:
胁迫浓度下!随着
191:
!
处理浓
度的增加!马铃薯脱毒苗叶片葡萄糖含量逐渐升高!
且在
#88@:
+
A
(#
191:
!
及以上浓度时达到显著
水平&而在
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫浓度下!随着
191:
!
处理浓度的增加!马铃薯脱毒苗叶片葡萄糖
含量先升高后略有降低!并以
#88@:
+
A
(#
191:
!
处理的葡萄糖含量最高!且各
191:
!
处理均显著高
于无
191:
!
的对照同时!在各
191:
!
处理浓度下!
马铃薯脱毒苗叶片葡萄糖含量随
B91:
胁迫浓度的
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!
钙对
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胁迫下马铃薯脱毒苗叶片淀粉含量的影响
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注$同行括号外不同字母表示钙处理间差异达
","
显著水平!同列括号内不同字母表示
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处理间差异达
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显著水平&下同
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胁迫下马铃薯脱毒苗叶片蔗糖含量的影响
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胁迫下马铃薯脱毒苗叶片葡萄糖含量的影响
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期
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魏翠果!等$钙对
B91:
胁迫下马铃薯脱毒苗碳水化合物代谢的影响
增加而逐渐降低&在未加
191:
!
时!
!
*
"
和
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88@:
+
A
(#
B91:
处理分别较对照"
88@:
+
A
(#
B91:
#降低
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##,$"和
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&
88@:
+
A
(#
B91:
处理差异达显著水平&加钙处理
后!各
B91:
胁迫处理间叶片葡萄糖含量差异不显
著!甚至在
#
和
!"88@:
+
A
(#
191:
!
浓度下它们
与无盐对照也无显著差异说明添加外源钙能够幼
苗缓解盐胁迫对葡萄糖合成的抑制!尤其是高浓度
的钙处理效果更明显
@,?,C
!
果糖含量
!
表
$
显示!
"
*
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫浓度下!随着
191:
!
处理浓度的增
加!马铃薯脱毒苗叶片果糖含量逐渐降低!并分别在
*
#"
*
#88@:
+
A
(#
191:
!
浓度以上达到显著水
平&在
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫浓度下!马铃薯脱
毒苗叶片果糖含量随
191:
!
处理浓度的增加呈现先
增加后减少的趋势!并在
191:
!
浓度为
#88@:
+
A
(#时果糖含量最高!且
#"
"
!"88@:
+
A
(#
191:
!
处理均显著高于未加
191:
!
处理同时!在
"
*
*
#"
88@:
+
A
(#
191:
!
处理浓度下!各
B91:
胁迫处理
的马铃薯脱毒苗叶片果糖含量均显著低于无
B91:
对照!且随
B91:
浓度增加表现出逐渐降低的趋势&
而在
#
和
!"88@:
+
A
(#
191:
!
处理浓度下!叶片
果糖含量随
B91:
胁迫浓度的增加而变化不显著
说明外源钙具有缓解盐胁迫下果糖含量降低的作
用!且较高浓度钙处理的效果更明显
@,?,D
!
可溶性总糖含量
!
从表
可知!相同
B91:
胁迫浓度下!马铃薯脱毒苗叶片中可溶性总糖含量
随着
191:
!
处理浓度的增加呈现先升高后降低的趋
势&在
"
*
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!均以
#"
88@:
+
A
(#
191:
!
处理马铃薯脱毒苗叶片可溶性总
糖含量最高!分别较未加
191:
!
处理显著增加
),%&*
##,6#和
#6,6&而在
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!以
#88@:
+
A
(#
191:
!
处理的可溶
性总糖含量最高!此时较无
191:
!
处理显著增加
#%,!6同时!在同一
191:
!
处理浓度下!马铃薯
脱毒苗叶片中可溶性总糖含量随着
B91:
胁迫浓度
的增加而逐渐降低!且各
B91:
胁迫处理均显著低
于对照
@B@
!
外源钙对
$%&
胁迫下马铃薯脱毒苗糖代谢
酶活性的影响
@B@B?
!
中性转化酶活性
!
由表
)
可知!同一
B91:
胁迫浓度下!马铃薯脱毒苗叶片中性转化酶"
BC
#活
性随着
191:
!
处理浓度的增加呈现先减弱后增强的
趋势!其中的
"
*
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫浓
度处理均在
#"88@:
+
A
(#
191:
!
浓度时达到最低
值!而
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫浓度处理则在
#
88@:
+
A
(#
191:
!
浓度时达到最低值!且除
!
88@:
+
A
(#
B91:
处理外!其余各最低值均显著低
于未加
191:
!
对照同时!相同
191:
!
处理浓度下!
随着
B91:
胁迫浓度的增加!各钙处理马铃薯脱毒
苗叶片
BC
活性呈现先升高后降低的趋势!并均在
B91:
胁迫浓度为
"88@:
+
A
(#时
BC
活性最强!且
均显著高于无
B91:
胁迫对照
@,@,@
!
酸性转化酶活性
!
从表
&
可以看出!马铃薯
表
C
!
钙对
$%&
胁迫下马铃薯脱毒苗叶片果糖含量的影响
S9U:<$
!
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W
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+
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#
B91:
浓度
1@0=<0PO9P.@0@NB91:
%"
88@:
+
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(#
#
191:
!
浓度
1@0=<0PO9P.@0@N191:
!
%"
88@:
+
A
(#
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表
D
!
钙对
$%&
胁迫下马铃薯脱毒苗叶片可溶性总糖含量的影响
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#
B91:
浓度
1@0=<0PO9P.@0@NB91:
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#
191:
!
浓度
1@0=<0PO9P.@0@N191:
!
%"
88@:
+
A
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#
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!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
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%$
卷
脱毒苗叶片酸性转化酶"
2C
#活性变化规律与
BC
相
似!相同
B91:
胁迫浓度下!马铃薯脱毒苗叶片
2C
活性随着
191:
!
处理浓度的增加呈先减弱后增强的
趋势!其中的
"
*
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫处
理均在
#"88@:
+
A
(#
191:
!
处理达到最低值!并显
著低于未加
191:
!
处理&而
&88@:
+
A
(#
B91:
胁
迫浓度下!各
191:
!
处理马铃薯脱毒苗叶片
2C
活性
均显著低于无
191:
!
处理!但各
191:
!
处理间无显
著差异同时!同一
191:
!
处理浓度下!马铃薯脱毒
苗叶片
2C
活性随着
B91:
胁迫浓度的增加呈现先
升高后降低的趋势!同样是在
B91:
胁迫浓度为
"
88@:
+
A
(#时
2C
活性最强!且显著高于
"
*
!
和
&
88@:
+
A
(#的
B91:
胁迫处理
@,@,A
!
蔗糖合成酶活性
!
表
+
显示!相同
B91:
胁
迫浓度下!马铃薯脱毒苗叶片蔗糖合成酶"
44
#活性
随着
191:
!
处理浓度的增加呈先升高后降低的趋
势其中!无
B91:
胁迫时!
#"88@:
+
A
(#
191:
!
处
理
44
活性最高!并显著高于对照与其它各
191:
!
处
理&
!
和
"88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!同样是
#"
88@:
+
A
(#
191:
!
处理
44
活性最高!与同一
B91:
胁迫浓度下的对照差异达显著水平&
88@:
+
A
(#
B91:
胁迫下!各
191:
!
处理
44
活性均显著高于未
加
191:
!
处理!但其余
191:
!
处理之间无显著差异
另外!相同
191:
!
处理浓度下!随
B91:
胁迫浓度的
增加!马铃薯脱毒苗叶片
44
活性受到强烈抑制
其中!无
191:
!
时!
*
"
和
&88@:
+
A
(#
B91:
处
理分别较对照"无
B91:
#降低
),%%*
#,+!和
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"
和
&88@:
+
A
(#
B91:
处理差异达显
著水平!且二者之间差异也显著&而添加
"
!"
88@:
+
A
(#
191:
!
处理后!各
B91:
胁迫处理叶片
44
活性大多比对照显著降低!且各处理间差异大多
不显著说明高钙处理能够有效缓解盐胁迫对
44
活性的抑制作用
@,@,C
!
蔗糖磷酸合成酶活性
!
如表
6
所示!相同
B91:
胁迫浓度下!马铃薯脱毒苗叶片蔗糖磷酸合成
酶"
454
#活性变化规律与
44
活性相似即随着
191:
!
处理浓度的增加呈先升高后降低的趋势!在
B91:
胁迫浓度为
"
*
!
*
"88@:
+
A
(#时以
#"
88@:
+
A
(#
191:
!
处理
454
活性最高!并显著高于
对照!甚至高于其他浓度的
191:
!
处理&
B91:
胁迫
表
E
!
钙对
$%&
胁迫下马铃薯脱毒苗叶片
$F
活性的影响
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B91:
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191:
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浓度
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胁迫下马铃薯脱毒苗叶片
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期
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魏翠果!等$钙对
B91:
胁迫下马铃薯脱毒苗碳水化合物代谢的影响
表
I
!
钙对
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胁迫下马铃薯脱毒苗叶片
:6:
活性的影响
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表
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马铃薯脱毒苗叶片碳水化合物含量与其糖代谢酶活性的相关性分析
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酸性转化酶活性
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蔗糖合成酶活性
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果糖含量
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191:
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处理
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活性最高!并显著高于
"
*
*
!"88@:
+
A
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191:
!
处理同时!在各
191:
!
处理浓度下!
随着
B91:
胁迫浓度的增加!马铃薯脱毒苗叶片
454
活性逐渐降低!且在
"
*
*
#"88@:
+
A
(#
191:
!
处理下!
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫处理与其他
B91:
胁迫浓度间
454
活性差异达显著水平&在
#
和
!"
88@:
+
A
(#
191:
!
处理浓度下!
"
和
&88@:
+
A
(#
B91:
胁迫处理的
454
活性显著低于
"
*
!
88@:
+
A
(#
B91:
胁迫处理!但两者间差异不显著
说明高钙处理能够有效缓解高盐胁迫对
454
活性
的抑制作用
@,A
!
马铃薯脱毒苗碳水化合物含量与其糖代谢酶
活性的相关性分析
对马铃薯脱毒苗叶片中碳水化合物含量与其糖
代谢酶
BC
*
2C
*
454
*
44
所做相关分析表明!淀粉含
量*蔗糖含量与
2C
活性间存在负相关关系!与
BC
活性间存在极显著负相关关系!与
454
*
44
活性间
存在极显著正相关关系&葡萄糖含量与
$
种糖代谢
酶活性相关性均不显著&果糖含量与
44
活性间呈
显著正相关关系!而与另外
%
种酶活性相关性不显
著"表
#"
#
%
!
讨
!
论
在低温*盐胁迫*干旱胁迫等逆境条件下!植物
代谢反应的总趋势是合成作用减弱!分解作用增强
碳水化合物亦称糖类化合物!在植物的代谢*生长*
发育上扮演着一个重要的*多重的角色糖是光合
作用的产物!又是呼吸作用的底物!它为植物的生长
发育提供碳骨架和能量!并能增强植物抗逆性,#+-
植物受到盐胁迫时!正常生长所需的钙量变得不足!
即植物体内发生
19
!]亏缺,#6-!导致由
19
!]参与的
各种生理过程都会受到影响!植物体内一些大分子
物质趋向于水解本研究发现
B91:
胁迫下马铃薯
叶片淀粉含量下降!这与许兴等,!"-报道一致&添加
适量钙后!叶片淀粉含量增加!暗示钙对
B91:
胁迫
下马铃薯叶片淀粉的合成具有促进作用!从而减轻
了盐的伤害作用
在许多植物中!盐胁迫增加了还原性糖"葡萄
糖*果糖#*蔗糖和果聚糖等可溶性糖的含量,!#*!%-!不
仅提高了细胞渗透调节能力和原生质保护能
力,!$*!-!更重要的原因可能在于许多可溶性碳水化
合物是植物适应环境的信号物质,!)-!这是植物耐盐
的一种适应能力本研究中!马铃薯脱毒苗叶片中
可溶性总糖*蔗糖*果糖*葡萄糖含量均随着
B91:
胁迫浓度的增加而降低!说明盐胁迫下马铃薯糖合
成作用减弱!对盐胁迫的适应能力降低而盐胁迫
使植物糖含量发生明显变化!其直接原因是相关酶
的活性发生了变化蔗糖是光合作用形成的一种非
常重要的碳水化合物!在植物生长发育的生命过程
中有着举足轻重的作用与蔗糖代谢和积累密切相
关的酶主要有转化酶*
454
和
44
,
!&
-
本试验发现!
+&
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$
卷
B91:
胁迫提高了马铃薯脱毒苗叶片
BC
和
2C
活
性!降低了
454
和
44
活性!使蔗糖含量降低!这与
李伟等,!+-研究结果相似&添加适量的外源钙后!叶
片蔗糖含量增加!
454
和
44
活性增强!转化酶活性
减弱!表明钙能通过相关酶活性的调节促进叶片蔗
糖合成!增强
B91:
胁迫下马铃薯脱毒苗对碳素的
利用本研究结果表明!在低盐胁迫下!添加
191:
!
后马铃薯脱毒苗叶片果糖含量降低!这可能与钙能
够增强蔗糖磷酸合成酶活性有关!从而使果糖向蔗
糖合成方向转化,!6-另外!本试验还观察到盐胁迫
下添加适量钙后!能使马铃薯脱毒苗叶片中可溶性
总糖*葡萄糖含量增加!这与
E<.
等,%"-报道一致
说明外源钙具有提高盐胁迫下马铃薯的渗透调节能
力的作用!从而有效缓解盐胁迫对马铃薯的伤害
综上所述!在
B91:
胁迫条件下!马铃薯脱毒苗
叶片碳水化合物含量降低以及相关酶活性发生剧烈
变化!合成作用减弱!碳水化合物代谢失衡&马铃薯
幼苗叶片
44
*
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和
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等糖代谢活性的变化!
与植物碳水化合物含量的变化存在一定的相关性
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!均能够有效缓解盐胁迫引
起的马铃薯各碳水化合物含量及酶活性的不利变
化!使植物形成新的碳水化合物代谢平衡!进而适应
盐胁迫环境
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