免费文献传递   相关文献

Species Identification of the Sugarcane Germplasm Deyang Dayezi Based on Phenotypic,Karyotypic and Molecular Evidences

基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析



全 文 :书西北植物学报!
"#$
!
%$
"
##
#$
!!"#&!!"
!"#$%&#%&()$*+,""-.)/#0-/
!!
文章编号$
#"""($"!)
"
!"#$
#
#(!!"#("
!!!!!!!!!!!!!!!
!"#
$
#"*+,",
%
-
*.//0*#"""($"!)*!"#$*##*!!"#
收稿日期$
!"#$(")(!#
&修改稿收到日期$
!"#$(",(%"
基金项目$农业部作物种质资源保护项目"
!"#$123"#+
#&云南省应用基础研究计划重点项目"
!"",4""#%5
#&云南省中青年学术技术带头
人后备人才培养项目"
!""4#")
#&国家科技部科技基础条件平台
(
国家农作物种质资源平台项目&国家现代农业产业技术体系
甘蔗产业技术体系开远综合试验站"
4678(!"(,(#%
#&云南省农业科学院基础性超前预研"
!"#$4594""+
#
作者简介$刘洪博"
#:!&
#!男!硕士!助理研究员!主要从事甘蔗种质资源与分子生物学研究
;(<=.>
$
>.?@A0
B
CA#:!
!
#!,*DA<
"
通信作者$蔡
!
青!博士!研究员!主要从事作物种质资源利用研究
;(<=.>
$
D=.
E
.0
BF
/G.
!
#,%*DA<
基于表型和核型及分子证据的
甘蔗德阳大叶子属种分析
刘洪博#!!林秀琴#!!刘新龙#!!陆
!
鑫#!!毛
!
钧#!!
徐超华#!!马
!
丽#!!郭跃祥%!蔡
!
青!!$"
"
#
云南省农业科学院甘蔗研究所!云南开远
,,#,
&
!
云南省甘蔗遗传改良重点实验室!云南开远
,,#,
&
%
红河学院生命科学
系!云南蒙自
,,##
&
$
云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所!昆明
,)"!!%
#

!
要$该研究以甘蔗属热带种(中国种(印度种和杂交品种为参照!对)德阳大叶子*进行表型(核型和
887
分子标
记分析!以明确德阳大叶子的属种关系!为种间杂交利用奠定基础结果表明$"
#
#表型性状和
887
标记聚类结果
都能将)德阳大叶子*(热带种(中国种和杂交品种明显分成
%
个类群&其中)德阳大叶子*与热带种(中国种(印度种
和杂交品种的表型平均相似性系数分别为
"*)#
(
"*+#
(
"*))

"*%#
!表型聚类与中国种最近"
!
#)德阳大叶子*的
核型分析显示!体细胞染色体数为
!0H##,
!核型公式为$
!0H##,H$IJ#"$!核型属于
!3
型!符合中国种
染色体数范围"
%
#利用
#%
对引物进行
887
标记的
KLMI6
聚类结果表明!)德阳大叶子*与热带种(中国种(印度
种和杂交品种间的平均相似性系数分别为
"*+"
(
"*,
(
"*,:

"*,
!种间相似性系数相差不明显研究认为!)德
阳大叶子*属于中国种或是中国种杂交后代的低世代材料
关键词$甘蔗&)德阳大叶子*&属种鉴定
中图分类号$
N%$%*!
J
!
&
N+:
&
N$$*#
文献标志码$
6
$
%
&#&()!&*+#,#-+#"*",+.&$/
0
-1-*&2&13
%
4-(35&
6
-*
0
5-
6
&7#
8-(&!"*9.&*"+
6%
#
!
:-1
6
"+
6%
#-*!;"4&/4-1<=#!&*&(
OPKQA0
B
CA
#
!
!
OP1R.?
E
.0
#
!
!
OPKR.0>A0
B
#
!
!
OKR.0
#
!
!
I6S9?0
#
!
!
RK4@=A@?=
#
!
!
I6O.
#
!
!
MKST?UV.=0
B
%
!
46PN.0
B
!
!
$
"
"
#8?
B
=GD=0U7U/U=GD@P0/W.W?WU
!
T?00=06D=XU<
F
AY6
B
G.D?>W?G=>8D.U0DU/
!
Z=.
F
?=0
!
T?00=0,,#,
!
4@.0=
&
!T?00=0ZU
F
O=(
CAG=WAG
F
AY8?
B
=GD=0UMU0UW.DP<
[
GA!
Z=.
F
?=0
!
T?00=0,,#,
!
4@.0=
&
%\U
[
=GW!
QA0
B
QUK0.]UG/.W
F
!
IU0
B
.^
!
T?00=0,,##
!
4@.0=
&
$3.AWUD@0A>A
BF
_MU0UW.D7U/A?GDU/P0/W.W?WU
!
T?00=06D=XU<
F
AY6
B
G.D?>W?G=>8D.U0DU/
!
Z?0(
<.0
B
,)"!!%
!
4@.0=
#
>?(+1-+
$
P0W@.//W?X
F
!
W@UW=VA0A<.D/W=W?/AY=0U>.WU/?
B
=GD=0U
B
UG<
[
>=/<
!)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
.0W@U!"#$
#%"&(O*`=/=/DUGW=.0UXC
F
DA<
[
=G.0
B
W@U
[
@U0AW
F[
.D=>
!
a=G
F
AW
F[
.D=>=0X887<=GaUG/X=W=WAW@=WAY!)
*
++
,#,-"&(O*
!
).,-/-./7*
!
)0"&0/&,9*=0X@
F
CG.X]=G.UW.U/
!
WA
[
GA].XU=C=/UYAGW@U?W.>.^=W.A0AYW@./
B
UG<
[
>=/<.0.0WUG/
[
UD.Y.D@
F
CG.X.^=W.A0*b@UGU/?>W//@A` UXW@=W
$"
#
#
3AW@
[
@U0AW
F[
.DWG=.W=0=>
F
/./=0X
887<=GaUG=0=>
F
/.//@A` UXW@=W!)*
++
,#,-"&(
!
!).,-/-./=0XW@U@
F
CG.X]=G.UW.U/ U`GUD>?/WUGUX.0WA
W@GUU
B
GA?
[
/
!
=0XW@U=]UG=
B
U
[
@U0AW
F[
.D/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W/CUW`UU0
)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
=0X!)*
++
,#,-"$
&(
!
).,-/-./
!
)0"&0/&,=0XW@U@
F
CG.X]=G.UW.U/ U`GU"*)#
!
"*+#
!
"*))=0X"*%#
!
GU/
[
UDW.]U>
F
!
/?
BB
U/W.0
B
W@UD>A/U/WGU>=W.]U0U//CUW`UU0
)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
=0X!).,-/-./
&"
!
#
b@Ua=G
F
AW
F[
U=0=>
F
/.//@A` UXW@=W
W@Ua=G
F
AW
F[
UAY
)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
=`/!0H##,H$IJ#"$!
@`.D@CU>A0
B
.0
B
WAW@U!3a=G
F
AW
F[
U
!
=0XYU>.0WA .`W@W@UD@GAB
UAY!).,-/-./
&"
%
#
b@UKLMI6D>?/WUG=0=>
F
/./AY887
<=GaUG/XUG.]UXYGA[
G.[
=.G//@A` UXW@=WW@U=]UG=
B
U/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W/CUW`UU0
)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
=0X!)*
++
,#,-"&(
!
).,-/-./
!
)0"&0/&,=0XW@U@
F
CG.X]=G.UW.U/ U`GU"*+"
!
"*,
!
"*,:=0X"*,
!
GU/
[
UDW.]U>
F
!
=0XW@UGU =`/0AW/.
B
0.Y.D=0WX.YYUGU0DU.0W@U/U/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W/*b@U/U/GU/?>W//?
BB
U/(
WUXW@=W
)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
DA?>XCU.0D>?XUX.0W@U/
[
UD.U/AY!).,-/-./AGCUDA0/.XUGUX=/=>A`
[
UX.
B
GUU
<=WUG.=>AY!).,-/-./@
F
CG.X/*
:&
6
@"1!(
$
/?
B
=GD=0U
&)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*&
/
[
UD.U/.XU0W.Y.D=W.A0
!!
)德阳大叶子*是国家甘蔗种质资源圃收集自四
川的
#
份甘蔗资源!通过多年观测!该种质宿根蔗的
平均分蘖率(平均有效茎(锤度和蔗糖糖分分别为
!"*%c
(
#+*:#
条%
<
!
(
!!*+%c

#$*:$c
!与其它
中国种"
!).,-/-./7*
#如竹蔗和芦蔗等具有较明显
的优异性+#,根据早期记录!该种质为中国种!但并
没有进行过深入的种间鉴定!不利于种间的杂交利
用!只是依据表型特征认为该种质属于甘蔗属中国
种为了更科学地划分该资源在甘蔗属中的种间关
系!有必要进行深入的分子系统学分析近几年!甘
蔗种质资源的表型遗传多样性研究已经报道很多!
并能够很好地反映甘蔗资源的表型差异(遗传多样
性和地理类群分布规律+!($,利用
887
等分子标记
来研究甘蔗种质资源的遗传多样性和种群聚类分
析!更能从分子水平准确区分种质的亲缘关系+)(,,
由于甘蔗属中国种的染色体在
##,
"
##:
条之间+,!
通过)德阳大叶子*染色体的核型分析!对区分该种
质的种间关系也具有重要作用目前!甘蔗染色体
的鉴定和核型分析已经在甘蔗
d
斑茅"
1)"&-2,$
-"#/(9*
#
+
:(
,
(甘蔗
d
蔗茅"
1)&
+
,
3
,4.M*
#
+
#"
,和
甘蔗
d
滇蔗茅"
1)&*#5,,Z*
#
+
##
,
e
#
代染色体鉴定和
遗传分析中得到应用
鉴于此!本实验选取甘蔗属中具有代表性的热
带种"
!)*
++
,#,-"&(O*
#(中国种"
!).,-/-./7*
#(
印度种"
!)0"&0/&,9*
#和杂交品种作为参照!对)德
阳大叶子*进行表型性状(核型和
887
标记等层次
的分析!以探明该材料的属种归类!弄清该种质的遗
传背景和种间关系!为下一步具有针对性的种间杂
交利用奠定基础
#
!
材料和方法
A*A
!
研究材料
研究材料选自国家甘蔗种质资源圃!共计
!$

"表
#
#!包括热带种
)
份!中国种
+
份!印度种
)
份!
杂交品种
,
份及)德阳大叶子*
表型性状观察以保存在圃内相同条件下种植的
植株为调查材料&染色体核型分析!取)德阳大叶子*
的种芽!种植于底部含有珍珠岩的桶内!上层盖上有
机土壤!以根尖材料进行染色体核型分析实验&分子
标记分析!取国家甘蔗资源圃内种植材料的新鲜叶
片进行
\16
的提取和
887
标记研究

A
!
参试材料名称
b=C>U#
!
b@U<=WUG.=>/WU/WUX
序号
8U
E
?U0DU
0?材料名称
I=WUG.=>0=学名
8D.U0W.Y.D0=#
拔地拉
3=X.>=
热带种
!)*
++
,#,-"&(O*
!
黑车里本
3>=Da4@UG.CA0
热带种
!)*
++
,#,-"&(O*
%
克林斯它林那
4@G./W=>.0=
热带种
!)*
++
,#,-"&(O*
$
路打士
OAUW@UG
热带种
!)*
++
,#,-"&(O*
)
越南牛蔗
f.UW0=热带种
!)*
++
,#,-"&(O*
,
四川芦蔗
8.D@?=07UUXD=0U
中国种
!).,-/-./7*
+
德阳大叶子
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
待定
?0aA` 0
:
广西竹蔗
M?=0
B
V.C=中国种
!).,-/-./7*

潭州竹蔗
b=0^@A?C=中国种
!).,-/-./7*
#"
南丰竹蔗
1=0YU0
B
C=中国种
!).,-/-./7*
##
桂林竹蔗
M?.>.0C=中国种
!).,-/-./7*
#!
永胜蔗
TA0
B
/@U0
B
D=0U
中国种
!).,-/-./7*
#%
友巴
KC=
中国种
!).,-/-./7*
#$ 1=
B
=0/
印度种
!)0"&0/&,9*
#) L=0/=@.
印度种
!)0"&0/&,9*
#, 1=
B
AG.
印度种
!)0"&0/&,9*
#+ Z=W@=
印度种
!)0"&0/&,9*
#: Q6bK1P
印度种
!)0"&0/&,9*
# 7S4#"
杂交种
!"##%"&(/
[[
*
!" 7S4!!
杂交种
!"##%"&(/
[[
*
!# 7S4#,
杂交种
!"##%"&(/
[[
*
!!
桂糖
##

M?.W=0
B
##
杂交种
!"##%"&(/
[[
*
!%
粤糖
%(#)T?UW=0
B
%(#)
杂交种
!"##%"&(/
[[
*
!$ 7)+"
杂交种
!"##%"&(/
[[
*
!"!!
西
!

!

!

!

!

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$

A*B
!

!

A*B*A
!
表型性状的测定
!
试验于
!"#!
年在国家甘
蔗种质资源圃进行!每个材料选出
)
株正常生长的
植株进行表型性状的调查!具体调查的性状包括叶
片长度"
D<
#(叶片宽度"
D<
#(节间长度"
D<
#(气生
根(茎形(节间形状(曝光前节间颜色(曝光后节间颜
色(蜡粉带(木栓(生长裂缝(生长带形状(蒲心(根点
排列(芽形(芽沟(叶姿(叶色(脱叶性(
)+
号毛群(内
叶耳和外叶耳!其中叶片长度(叶片宽度和节间长度
取其平均值!其它性状取其众数作为最终结果具
体调查方法和数据均按照-甘蔗种质资源描述规范
和数据标准.+#!,和-农作物种质资源鉴定技术规
程/甘蔗.+#%,进行
A*B*B
!
核型鉴定
!
依据李懋学等+#$,的标准选取
!"
个分散性好的细胞作染色体计数!其中
:)c
以上的
细胞具有恒定一致的染色体"众数#即可作为该材料
的染色体数目待材料生长到
!)D<
后!开始取根
尖材料!每个根尖取
"*!
"
"*)D<
!用对二氯苯酚饱
和溶液与
"*""!

%
O:(
羟基喹啉等体积混合液预
处理
$@
!然后再用
"*"+)

%
OZ4>
低渗
#@
!取现
配的卡诺氏固定液于
$g
冰箱固定
!$@
!用蒸馏水
清洗
#"<.0
!置于
+"c
乙醇溶液中
$g
保存备用
压片前!用
$)c
冰乙酸和
#

%
OQ4>
等体积混合
液于
,"g
水浴锅中解离
#"<.0
!进行常规压片
利用德国蔡司显微镜"
6V.A/aA
[
!
[
>?/
#进行镜检观
察!将观察较好的图片通过
44传输至电脑上!进
行核型分析
染色体核型分析选取
!
个分散较好的中期细
胞!用
Pa=GA/Z=G
F
AW
F[
.0
B
8
F
/WU<
图像软件分析系
统对采集的中期细胞图片进行染色体分割和染色体
长度的测量!并依照染色体形状(大小和臂比等进行
同源配对!排成核型图!具体的染色体分类和核型分
析方法按照
OU]=0
+
#)
,和李懋学等+#$,建议的统一标
准进行!核型类型分析参照
8WUCC.0/
+
#,
,方法!核型
不对称系数按
6G=00A
+
#+
,的方法!比值越大!核型越
不对称具体计算公式如下$
相对长度"
c
#
H
"某号染色体长度%全部染色体
长度#
d#""
臂比
H
长臂%短臂
染色体长度比
H
最长染色体%最短染色体
核型不对称系数
6/
0
Z
"
c
#
H
全部染色体长
臂总和%全组染色体总长
ACBCD
!
$$E
分子标记
!
将新鲜叶片剪成小块!并迅
速用液氮研磨成细粉末!采用改良的
4b63
方法+#:,
进行
\16
的提取!
887
实验所需
L47
试剂和聚丙
烯酰胺凝胶等均购自上海生工生物工程有限公司

B
!
引物序列及退火温度
b=C>U!
!
b@U/U
E
?U0DU=0X=00U=>.0
B
WU<
[
UG=W?GUAYW@U
[
G.序号
1A*
引物名称
LG.序列
8U
E
?U0DU
"
)h(%h
#
碱基数
3=/U0?%
C
[
退火温度
600U=>.0
B
WU<
[
UG=W?GU
%
g
#
8I4%%,
1
e
8I4%%,
1
7
6bb4b6MbM4466b446b4b46
46bM44664bb4466646M64
!!
!#
,!
!
8I4!!
1
e
8I4!!
1
7
446bb4M64M666M4Mb44b
466M4MbbMbM4bM44M6Mb
!"
!"
,!
%
8I4#,
1
e
8I4#,
1
7
M46644M4Mb44b46b64
M6M4bb4bM6b4MM44bb4
#:
#
):
$
8I4#:!)
1
e
8I4#:!)
1
7
464Mb44bb44M44bbM6
b46b4Mbb4Mb4M464bM
#:
#:
),
)
8I4!+:
1
e
8I4!+:
1
7
bb4b6MbM4466b446b4b46M6
46bM44664bb4466646M64b
!%
!!
,$
,
8I4:)#
1
e
8I4:)#
1
7
64b6666bMM466MMMbMMb
4MbM6M444646b6b46bM4
!"
!"
):
+
8I4%#
1
e
8I4%#
1
7
46bM44664bb4466b646M64b
6MbM4466b446b4b46M6M6
!%
!#
,!
:
<884P7$%
1
e
<884P7$%
1
7
6bb4664M6bbbb464M6M
6644b6M466bbb6466M6M
#
!"
)$

<884P7#
1
e
<884P7#
1
7
MMbb446666b6464666
466b4bb6b4b64M464bb
#:
#
$:
#"
8I4#"$+
1
e
8I4#"$+
1
7
bM6M44b66M446M666M66M
MM664b66bbb44b64M6M66464
!#
!$
):
##
8I4#!%+
1
e
8I4#!%+
1
7
bb464M66464444644b6
M4M446MMb6644b64bM66
#
!"
)"
#!
<884P7%,
1
e
<884P7%,
1
7
466466b664bb664bMMb6
4bMb44bbbbb6bb4b4bbb
!"
!"
)$
#%
8I4+!"
1
e
8I4+!"
1
7
4M4644M64M464Mb4b
M4466bMM664MMMb4b6
#+
#:
),
%"!!
##

!!!!!!!!!!
刘洪博!等$基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析
"8=0
B
A0
#!引物合成来自大连宝生物公司"
b=Z=(
7=
#引物序列和退火温度如表
!
所示!具体的
887
实验步骤参照刘洪博等+#,的方法进行!聚丙烯
酰胺凝胶电泳的时间可根据不同引物扩增片段的大
小酌情处理
A*D
!
数据分析
利用
;VDU>

1b8T8
[
D!*#
软件计算表型性状

8I
"
/.<
[
>U<=WD@.0
B
DAUY.D.U0W
#遗传相似性系数和
887
标记的
9=DD=GX
相似性系数!并构建
KLMI6

类图!表型性状按照-甘蔗种质资源描述规范和数据
标准.+#!,以数字形式统一代替"表
%
#!
887
数据以
"
(
#
的方式计带&构建的
KLMI6
聚类图以相似性
系数的远近进行种间划分!以)德阳大叶子*与各种
间最大相似性系数和平均相似性系数进行比较!并
结合)德阳大叶子*核型分析结果进行分析
!
!
结果与分析
B*A
!
表型聚类分析
通过对
!$
份材料的表型性状进行数据统计"表
%
#!利用
1b8T8
[
D!*#
软件进行聚类分析结果"图
#
#表明$大部分热带种(中国种和杂交品种能够得到
很好的区分!在相似性系数
"*)"
左右!可将种质大
体分为
%
个类群!即热带种"
#
类#(中国种"
$
类#和
杂交品种"
%
类#!只有印度种较为分散!不能单独归
为一类这说明利用表型性状聚类的方式能够有效
区分甘蔗属中的热带种和中国种!而)德阳大叶子*
与中国种聚在一起!并与中国种)南丰竹蔗*和)桂林
竹蔗*的亲缘关系最近!相似性系数分别为
"*:!

"*++
用种间平均相似性系数来衡量!)德阳大叶
子*与热带种(中国种(印度种和杂交品种间的平均
相似性系数分别为
"*)#
(
"*+#
(
"*))

"*%#
!同样
与中国种最近!与其它种的相似性系数差异显著!说
明)德阳大叶子*应划分于中国种中
B*B
!
细胞学鉴定分析
选取
!"
个有丝分裂中期染色体分散较好的细
胞进行观察和计数分析!每个细胞计数
#"
次!根据
众数计算的原则计算染色体数目结果"图
!
#表
明$)德阳大叶子*的染色体分布较为清晰!染色体间

#
!
表型性状
KLMI6
聚类图
#
"
!$
为材料编号&同表
#
e.
B
*#
!
KLMI6XU0XGA
B
G=[
>U
<=WD@.0
B
DAUYY.D.U0WAY
[
@U0AW
F[
.DWG=.W/
b@U<=WUG.=>DAXU0?"
!$DAU#

!
!
德阳大叶子根尖染色体及核型图
6*
根尖中期染色体&
3*
染色体核型
e.
B
*!
!
4@GA
F
AW
F[
UAY\U
F
=0
B
\=
F
U^.
6*4@GA
[
@=/U
&
3*Z=G
F
AW
F[
U
$"!!
西
!

!

!

!

!

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$

书书书

!
!






!
"
#
$
%
&
!
!

%
(

%
)
*
+
,
(
-
.
+
/
"
-
+
0
"
+
"




1

%
)
*
+
,
(
-
.
.

"
/
"
.
+
%
/




2
"
+
%
/
-
"
$
.
*
0
%
)
3
4
#
%
/
5
6
&
7
8
9
:
;
<
5
=
5
5
5
6
5
&
5
7
5
8
5
9
5
:
5
;
5
<
6
=
6
5
6
6
6
&
6
7



>
%
/
-
"
$
/
*
*
+
=
=
=
=
=
5
5
=
5
5
5
5
=
5
5
5
=
=
=
=
=
=
=
5


?
+
"
$
@
A

"
(
%
5
6
6
5
5
5
5
5
6
6
5
5
6
5
6
5
5
5
5
5
5
5
5
6




B
)
+
%
/
)
*
0
%
A

"
(
%
5
5
5
5
5
7
7
7
7
7
7
5
7
7
5
7
7
&
5
5
5
5
5
5







B
)
+
%
/
)
*
0
%
.
*
$
*
3
/
3
)
%
C
(
*
A
%
0
&
9
9
9
&
9
9
8
8
9
9
9
9
9
9
8
7
7
6
6
5
6
6
8







B
)
+
%
/
)
*
0
%
.
*
$
*
3
/
%
C
(
*
A
%
0
&
&
6
9
6
&
6
5
:
6
5
&
&
6
6
6
7
8
7
8
&
7
&
9






>
D
%
/
"
E
%
-
)
+
%
/
)
*
0
%
$
%
)
E
+

5
&
6
6
5
6
6
5
6
6
5
5
5
5
6
5
5
5
6
&
6
6
6
6



F
"
C
#
"
)
0
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
6
6
6
5
5


G
*
/
@
,
(
"
+
.

=
=
6
6
=
=
6
6
6
6
6
6
=
=
6
6
=
=
5
=
=
5
=
6




H
/
*
I
+

.
/
"
.
@
=
6
6
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
6
=
=
=
=





H
/
*
I
+

/
-
)
E
A

"
(
%
6
6
6
6
6
5
6
5
6
6
6
6
6
5
5
6
6
6
5
5
5
5
5
6


1
-
+

5
5
6
6
6
6
6
6
5
6
5
6
5
5
5
5
5
5
=
=
=
5
=
=




J
*
*
+
(
/
-
4
*
/
0
-
"
6
5
6
5
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
5
6
6
6
6
6
6
6


K
3
0
A

"
(
%
7
7
7
9
9
5
6
5
5
5
5
9
5
5
5
6
5
5
:
:
:
:
9
9


K
3
0
L
3
/
/
*
I
5
6
6
5
5
6
6
6
6
6
6
5
5
6
6
6
5
5
=
=
5
5
=
=

姿
>
)
E
$
%
*
L
$
"
4
-
)
"
+
*
.
3
$
4
5
5
6
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
6
5
5
5
5
5
&
5
5
6


M
"
4
-
)
"
.
*
$
*
3
/
6
6
5
5
6
5
6
6
5
5
6
5
6
6
5
5
6
6
&
5
5
&
&
&






>
D
%
/
"
E
%
$
"
4
-
)
"
$
%
)
E
+

!
.
4
5
&
6
5
&
9
5
=
7
5
7
8
5
5
7
<
5
<
9
5
=
:
<
7
;
6
<
6
:
<
5
5
5
5
5
9
5
5
:
7
8
:
&
9
8
5
8
=
5
&
7
5
8
;
5
8
6
5
&
=
5
&
;






>
D
%
/
"
E
%
$
"
4
-
)
"
I
-
0
+

!
.
4
:
N
=
8
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
&
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
7
N
=
&
N
=
5
N
6
6
N
6
9
N
=
8
N
=
8
N
=
9
N
=
7
N
<
7
N
:



?

%
"
+

0
%
+
"
.

%
0
L
/
*
4
.
3
$
4
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
&
&
6
6
6
6
6
&
8
:



O
"
-
/
E
/
*
3
(
8
:
6
5
5
&
6
5
5
5
5
5
5
5
5
5
6
5
5
6
=
6
5
6
5
&



?

"
(
%
*
L
-
)
)
%
/
"
3
/
-
.
$
%
6
5
5
5
8
5
5
5
5
5
5
5
5
5
8
5
5
5
5
7
7
5
5
5



?

"
(
%
*
L
*
3
+
%
/
"
3
/
-
.
$
%
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
=
5
5
=
=
5
!
!

"



"
=
N

#
5
N

#


"
5
N


#
6
N


#




"
5
N



#
6
N



#
&
N



#
7
N



#








"
5
N


#
6
N


#
&
N


#
7
N

#
8
N

绿
#
9
N

绿
#
:
N

绿


#
;
N




#




"
5
N
"
;
.
4
#
6
N
;
!
5
8
.
4
#
&
N
#
5
8
.
4
#



"
5
N

#
6
N

#
&
N

#


"
=
N

#
5
N


#
6
N


#




"
=
N

#
5
N

#
6
N

#





"
5
N


#
6
N



#


"
=
N

#
5
N


#
6
N


#




"
5
N


#
6
N



#


"
5
N



#
6
N



#
&
N



#
7
N



#
8
N


#
9
N


#
:
N



#


"
=
N

#
5
N

#
6
N

#

姿
"
5
N


#
6
N






#
&
N


#


"
5
N
绿
#
6
N

绿
#
&
N

绿
#
7
N


#



"
5
N




#
6
N

#
&
N

#
8
:



"
=
N

#
5
N

#
6
N


#
&
N

#




"
=
N
退

#
5
N



#
6
N



#
&
N



#
7
N



#
8
N


$






5
$
P
*
+
%
"
>
%
/
-
"
$
/
*
*
+
"
=
N
>
#
A
%
)
+
#
5
N
M
-
+
+
$
%
#
?
+
"
$
@
A

"
(
%
"
5
N
?
+
/
"
-
E

+
#
6
N
K
%
)
+
#
B
)
+
%
/
)
*
0
%
A

"
(
%
"
5
N
G
,
$
-
)
0
/
-
.
"
$
#
6
N
K
"
/
/
%
$
#
&
N
K
*
#
#
-
)
Q
A

"
(
%
0
#
7
N
G
*
)
*
-
0
"
$
#
B
)
+
%
/
)
*
0
%
.
*
$
*
3
/
3
)
%
C
(
*
A
%
0
"
)
0
%
C
(
*
A
%
0
"
5
N
1
-
)
@
#
6
N
1
3
/
(
$
-
A

/
%
0
#
&
N
R
"
/
@
(
3
/
(
$
%
#
7
N
S
%
$
$
*
I
#
8
S
%
$
$
*
I
-
A

E
/
%
%
)
#
9
N
R
"
/
@
E
/
%
%
)
#
:
N
1
3
/
(
$
%
"
)
0
E
/
%
%
)
A
+
/
-
(
%
#
;
N
1
3
/
(
$
%
"
)
0
,
%
$
$
*
I
A
+
/
-
(
%
#
B
)
+
%
/
)
*
0
%
$
%
)
E
+

"
5
N
"
;
.
4
#
6
N
;
!
5
8
.
4
#
&
N
#
5
8
.
4
#
F
"
C
#
"
)
0
"
5
N
P
-
$
#
6
N
!

-
)
#
&
N
F
"
C
,
#
G
*
/
@
,
(
"
+
.

"
=
N
>
#
A
%
)
+
#
5
N
G
/
"
.
@
A
#
6
N
1
"
+
.

#
H
/
*
I
+

.
/
"
.
@
"
=
N
>
#
A
%
)
+
#
5
N
?

"
$
$
*
I
#
6
N
R
%
%
(
#
H
/
*
I
+

/
-
)
E
A

"
(
%
"
5
N
1
/
*
+
/
3
0
%
#
6
N
T
$
3
A

#
1
-
+

"
=
N
?
*
$
-
0
#
5
N
?
$
-
E

+
$
,
#
6
N
1
-
+

,
#
J
*
*
+
(
/
-
4
*
/
0
-
"
$
"
5
N
J
*
I
#
6
N
>
#
)
*
/
4
-
+
,
#
K
3
0
A

"
(
%
"
5
N
!
/
-
"
)
E
3
$
"
/
#
6
N
U
D
"
$
#
&
N
U
#
*
D
"
+
%
#
7
N
1
%
)
+
"
E
*
)
"
$
#
8
N
J

*
4
#
*
-
0
#
9
N
J
*
3
)
0
#
:
N
U
D
"
+
%
/
*
+
3
)
0
-
+
,
#
K
3
0
L
3
/
/
*
I
"
=
N
P
*
)
%
#
5
N
?

"
$
$
*
I
#
6
N
R
%
%
(
#
>
)
E
$
%
*
L
$
"
4
-
)
"
+
*
.
3
$
4
"
5
N
R
/
*
*
(
-
)
E
#
6
N
V
/
%
.
+
I
-
+

.
"
/
D
%
)
%
"
/
+
-
(
#
&
N
V
/
%
.
+
#
M
"
4
-
)
"
.
*
$
*
3
/
"
5
N
H
/
%
%
)
#
6
N
S
%
$
$
*
I
E
/
%
%
)
#
&
N
R
"
/
@
E
/
%
%
)
#
7
N
1
3
/
(
$
%
/
%
0
#
?

%
"
+

0
%
+
"
.

%
0
L
/
*
4
.
3
$
4
"
5
N
R
%
+
"
.

%
0
#
6
N
V
"
A
,
0
%
+
"
.

#
&
N
O
"
/
0
+
*
0
%
+
"
.

#
O
"
-
/
E
/
*
3
(
8
:
"
=
N
P
-
$
#
5
N
?
(
"
/
A
%
#
6
N
2
%
0
-
"
+
%
#
&
N
1
/
*
L
3
A
%
#
?

"
(
%
*
L
-
)
)
%
/
"
)
0
*
3
+
%
/
"
3
/
-
.
$
%
"
=
N
>
#
A
%
)
+
#
5
N
R
%
$
+
*
-
0
#
6
N
G
"
$
.
"
/
-
L
*
/
4
#
&
N
T
"
$
.
"
+
%
#
7
N
M
"
)
.
%
*
$
"
+
%
#
8
N
W
)
.
-
L
*
/
4
N
!

%
4
"
+
%
/
-
"
$
.
*
0
%
)
3
4
#
%
/
5
!
6
7
.
*
4
%
L
/
*
4
!
"
#
$
%
5
N
)"!!
##

!!!!!!!!!!
刘洪博!等$基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析
没有重叠和挤压在一起的现象!说明选择分裂中期
的细胞较好!染色体分散性好!染色体分辨清晰!易
于观察和计数!能够进行核型分析从计数结果来
看!)德阳大叶子*染色体数目
!0H##,
所占比例最
高!在
)
个分辨率最高的细胞中染色体数目最为一
致!结果较为准确
)德阳大叶子*体细胞染色体测量结果如表
$

示!染色体核型公式为
!0H##,H $IJ#"$:/<
其中第
#
和第
:
对染色体为正中部着丝点染
色体!第
)!
(
))
(
),

):
对染色体为近中部着丝点
染色体!其余为中部着丝点染色体染色体绝对长
度范围为
#*##
"
!*+,
&
<
!臂比介于
#*""
"
!*"$

间!平均臂比为
#*%%
!其中臂比大于
!
的染色体比
例为
"*"#+
!最长与最短染色体的比值为
%*+%
!核型
不对称系数为
),*$:c
!核型属于
!3
型!与中国种
报道的染色体数目相比!)德阳大叶子*的染色体数

F
!
)德阳大叶子*染色体核型分析参数
b=C>U$
!
4@GA
F
AW
F[
U
[
=G=)
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
*
编号
1?相对长度
7U>=W.]U>U0
B
W@
%
c
短臂
8@AGW=G<
长臂
OA0
B
=G<
总长
bAW=>>U0
B
W@
臂比
6G类型
b
F[
U
# #*%: #*%: !*+, #*"" I
! #*!% #*%+ !*,# #*## <
% #*#) #*!, !*$# #*#" <
$ #*#$ #*!% !*%+ #*": <
) #*", #*!% !*! #*#) <
, #*"! #*# !*!# #*#, <
+ #*"! #*# !*!# #*#+ <
: #*"+ #*"+ !*#% #*"" I
"*: #*#, !*#% #*#: <
#" "*+ #*#, !*#% #*!" <
## "*) #*## !*") #*#+ <
#! "*$ #*## !*") #*#: <
#% "*% #*#! !*") #*!" <
#$ "*# #*", #*+ #*#+ <
#) "*# #*"+ #*+ #*#: <
#, "*" #*"+ #*+ #*# <
#+ "*: #*" #*+ #*!% <
#: "*:) #*"$ #*" #*!! <
# "*:! #*"$ #*:, #*!, <
!" "*:# #*"# #*:! #*!$ <
!# "*:" #*"! #*:! #*!+ <
!! "*+ "*) #*+$ #*!# <
!% "*++ "*+ #*+$ #*!) <
!$ "*++ "*+ #*+$ #*!, <
!) "*++ "*+ #*+$ #*!+ <
!, "*+, "*: #*+$ #*! <
!+ "*+) "* #*+$ #*%! <
!: "*+$ #*"" #*+$ #*%$ <
! "*+$ "*! #*,, #*!) <
%" "*+% "*% #*,, #*! <
%# "*,: "*$ #*,! #*% <
%! "*, "*: #*): #*%" <
%% "*, "*: #*): #*%" <
%$ "*,: "*" #*): #*%! <
%) "*,, "*! #*): #*$" <
%, "*,+ "*:+ #*)$ #*%# <
%+ "*,% "*# #*)$ #*$$ <
,"!!
西
!

!

!

!

!

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$

续表
$
!
4A0W.0?UXb=C>U$
%: "*,% "*:+ #*)" #*%, <
% "*,% "*:+ #*)" #*%+ <
$" "*,# "*: #*)" #*$$ <
$# "*,# "*: #*)" #*$) <
$! "*,# "*: #*)" #*$) <
$% "*,# "*: #*)" #*$) <
$$ "*): "*:: #*$, #*)" <
$) "*): "*:) #*$! #*$+ <
$, "*)% "*: #*$! #*, <
$+ "*), "*:! #*%: #*$: <
$: "*), "*+ #*%$ #*$! <
$ "*)$ "*:# #*%$ #*)" <
)" "*)! "*:! #*%$ #*)+ <
)# "*)# "*:% #*%$ #*,# <
)! "*)" "*:) #*%$ #*+# /<
)% "*)" "*+, #*!, #*)! <
)$ "*$: "*+: #*!, #*,% <
)) "*$) "*:! #*!, #*:% /<
), "*$% "*:% #*!, #*$ /<
)+ "*$+ "*+, #*!! #*,# <
): "*%, "*+$ #*## !*"$ /<

%
!
部分材料
887
电泳图
图中数字为材料编号!同表
#
&无编号的泳道为资源圃中的其他材料
e.
B
*%
!
887U>UDWGA
[
@AGUWA
B
G=[
=GW.=><=WUG.=>/
b@UDAXU0?B
G=
[
@DAU#
&
1A0UDAXU0?<=WUG.=>/=GUAW@UG<=WUG.=>/YGAB
=GD=0UGU/A?GDU0?G/UG
F
目符合中国种的染色体数目范围+,!但其它中国种
的核型还没有报道
BCD
!
$$E
聚类分析
选用
#%
对多态性好的
887
引物进行
L47

增!不同种间呈现不同的多态性!在所有参试材料
中!共扩增出
$#

\16
谱带!其中热带种
%##
条(中国种
%$)
条(印度种
%,$
条(杂交品种
$"%
条!
而)德阳大叶子*共扩增出
#,

\16
谱带!其中
热带种(中国种(印度种和杂交品种与)德阳大叶子*
的共有条带分别占)德阳大叶子*总条带比列的
:!*,)c
(
:,*+%c
(
#*:$c

$*%c
!说明)德阳
大叶子*更接近于杂交种质从单一引物的扩增图
谱来看!
I884P7%,
号引物扩增的结果显示)德阳大
叶子*的图谱与中国种类似"图
%
#通过所有引物
聚类分析!如图
$
所示!参试的热带种(中国种(杂交
品种各材料均按2种3各自聚类!如热带种)拔地拉*(
+"!!
##

!!!!!!!!!!
刘洪博!等$基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析

G
!
种间相似性系数比较
b=C>U)
!
b@U/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0WDA<
[
=G=W.A0AY.0WUG(/
[
UD.U/

8
[
UD.U/
德阳大叶子
\U
F
=0
B
\=
F
U^.
表型性状聚类
L@U0AW
F[
.DD@=G=DWUGD>?/WUG
平均相似性系数
6]UG=
B
U/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W
最大相似性系数
I=V/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W
887
聚类
887D>?/WUG
平均相似性系数
6]UG=
B
U/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W
最大相似性系数
I=V/.<.>=G.W
F
DAUYY.D.U0W
热带种
!)*
++
,#,-"&(O* "*)# "*) "*+" "*+$
中国种
!).,-/-./7* "*+# "*:! "*, "*+#
印度种
!)0"&0/&,9* "*)) "*+% "*,: "*++
杂交品种
!"##%"&(/
[[
* "*%# "*%, "*, "*+)

$
!
887
分子聚类图
#
"
!$
为材料编号!同表
#
e.
B
*$
!
KLMI6XU0XGA
B
G=9=DD=GXDAUYY.D.U0WAY887
b@U<=WUG.=>DAXU0?"
!$DAU#
)克林斯它林那*()越南牛蔗*()黑车里本*和)路打
士聚*在
#
类中&)
7S4#"
*()
7)+"
*()
7S4!!
*(
)
7S4#,
*()桂糖
##
*和)粤糖
%(#)
*聚在
$
类中!
其中包含)德阳大叶子*&而中国种的竹蔗和芦蔗品
种则更近的聚在
%
类中&印度种
)
个材料分别与杂
交种质和中国种相聚表
)
中种间平均相似性系数
显示!)德阳大叶子*与热带种(中国种(印度种和杂
交品种间的平均相似性系数分别为
"*+"
(
"*,
(
"*,:

"*,
!与)
7S4!!
*和)
L=0/=@.
*的相似性系数
最大!分别为
"*+)

"*++
!虽然)德阳大叶子*在聚
类图中与杂交品种聚在一起!但种间相似性系数相
差不明显
%
!

!

甘蔗属于异源多倍体植物!可以与甘蔗属及其
近缘属进行杂交!导致甘蔗的居群较多!种属间很难
进行区分!不利于甘蔗的杂交利用本研究通过结
合表型性状(
887
标记数据和核型分析的方法!从
%
个层次反映了)德阳大叶子*的属种关系!避免了单
一方法所带来的误差!能清楚地解释该种质的属种
归类(遗传背景和种间关系从
%
种分析结果来看!
)德阳大叶子*的核型分析!证明该种质的染色体数
目为
##,
条!属于
!3
型!符合中国种染色体数目范
围+,&通过对)德阳大叶子*的表型和
887
标记数据
进行分析!种间遗传相似性系数"表
)
#表明
887

类将)德阳大叶子*归属于杂交品种!与杂交品种的
最大相似性系数较高!但)德阳大叶子*与几个种的
种间平均相似性系数相差较小!最高也仅有
"*"!

系数差异!从)德阳大叶子*与中国种和杂交品种的
种间相似性系数比较结果可以得出!虽然杂交品种
的最大相似性系数高于中国种!但平均相似性系数
二者相同!说明
887
标记所用的引物量可能较少!
多态性不够!区分效率不是很高!在引物量较少的条
件下!相似性系数差异不显著!同时中国种属于热带
种与割手密"
!"##%"&(.
3
*-6"-/( O*
#天然杂交
的后代!在血缘上与杂交种较为相近!中国种的低世
代材料也可能出现
887
分析数据的结果&从表型性
状聚类的
8I
相似性系数来看!)德阳大叶子*与中
国种的平均相似性系数和最大相似性系数均高达
"*+#

"*:!
!远高于其它种!而与杂交品种的平均
相似性系数和最大相似性系数为
"*%#

"*%,
!差
异显著
从实际角度分析!)德阳大叶子*在种间划分上
只有两种可能!一种是杂交品种!从专业的甘蔗研究
所引到当地&另一种是古代的热带种与割手密"
!)
.
3
*-6"-/(O*
#天然杂交的后代!经过自然和人工
选择而形成的中国种+!",)德阳大叶子*的表型性
状与中国种高度聚类在一起!与中国种的
8I
遗传
相似性系数最高!同时核型分析得到的染色体数目
也符合中国种的染色体数目范围!因此表型性状的
:"!!
西
!

!

!

!

!

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$

分析结果排除了人为误差而导致的不准确因素&虽
然分子标记聚类结果将)德阳大叶子*划为杂交种!
但)德阳大叶子*与各种间的平均相似性系数差异不
显著!分辨率不足!反映了单一使用
887
标记方法
带来的不准确因素!不能充分证明该种质的属种划
分因此基于以上研究证据认为!)德阳大叶子*隶
属中国种或是中国种杂交后代的低世代材料
参考文献!
+
#
,
!
OPKQ3
"刘洪博#!
TP1MRI
"应雄美#!
OPKRO
"刘新龙#!
/6"4*;]=>?=W.A0AYG=WAA0D@=G=DWUG./W.D/.0/?
B
=GD=0UD?>W.]=W.A0
[
GAWA/
[
U(
D.U/
+
9
,
)74"-68,9/&.,6
:
"-2;/.*&#/.
"植物分类与资源学报#!
"#%
!
DG
"
)
#$
,!#&,!
"
.04@.0U/U
#
*
+
!
,
!
OPKRO
"刘新龙#!
I6O
"马
!
丽#!
46PN
"蔡
!
青#!
/6"4*MU0UW.DX.]UG/.W
F
=0=>
F
/./AY
[
@U0AW
F[
.DWG=.W/.0T?00=0/?
B
=GD=0U]=G.UW.U/
+
9
,
*<*&-"4*
+
74"-6=/-/6,#;/.*&#/.
"植物遗传资源学报#!
"#"
!
AA
"
,
#$
+"%&+":
"
.04@.0U/U
#
*
+
%
,
!
OPK9T
"刘家勇#!
5Q6SLe
"赵培方#!
OPKRO
"刘新龙#!
/6"4*MU0UW.DX.]UG/.W
F
=0=>
F
/./A0,:YAGU.
B
0/?
B
=GD=0U
B
UG<
[
>=/"
!"##%"$
&(/
[[
*
#
.`W@6eOLWUD@0.
E
?U
+
9
,
*<*&-"4*
+
>-"-?
@
&,#46&"4A-,9/&.,6
:
"
1=W*8D.*;X.*
#"湖南农业大学学报0自然科学版#!
!"#%
!
DH
"
)
#$
,,&$+"
"
.04@.0U/U
#
*
+
$
,
!
RK4QQ
"徐超华#!
OKR
"陆
!
鑫#!
I6O
"马
!
丽#!
/6"4*L@U0AW
F[
.DWG=.W/=0X
B
U0UW.DX.]UG/.W
F
AY1&,"-6%."&-2,-"#/(
B
UG<
[
>=/<
+
9
,
*<*&-"4*
+
>-"-?
@
&,#46&"4A-,9/&.,6
:
"
1=W*8D.*;X.*
#"湖南农业大学学报0自然科学版#!
"#$
!
FI
"
!
#$
##+&#!#
"
.04@.0U/U
#
*
+
)
,
!
2KQO
"吴海兰#!
261MRQ
"王先宏#!
Q;OO
"何丽莲#!
/6"4*MU0UW.DX.]UG/.W
F
=0=>
F
/./AYT?00=0/?
B
=GD=0UD?>W.]=G/A0887<=Ga(
UG
+
9
,
*B*4/#4"&74"-6C&//2,-
@
"植物分子育种#!
"#$
!
AB
"
#
#$
#$$&#)#
"
.04@.0U/U
#
*
+
,
,
!
L61T3*Q.
B
@>
F[
A>
F
[
@.D<.DGA/=WU>.WU\16<=GaUG/YAG/?
B
=GD=0U
B
UG<
[
>=/?=W.A0=0X]=G.UW
F
.XU0W.W
F
WU/W.0
B
+
9
,
*!
@
"&
D/#%)
!
"",
!
J
"
$
#$
!$,&!),*
+,
!
M7688O4S*P0WGA
B
GU//.A0CUW`UU0!"##%"&(=0XB,.#"-6%..01U` M?.0U==0XW@UL=D.Y.D=GU=
+
4
,%%
b@Ub@.GXLGADUUX.0
B
/AYP0WUG(
0=W.A0=>8AD.UW
F
AY8?
B
=G4=0UbUD@0A>A
B
./W/*8=09?=0
!
L?UGWA7.DA
$
P0WUG0=W.A0=>8AD.UW
F
AY8?
B
=G4=0UbUD@0A>A
B
./W/4A<<.WWUU
!
#,)
$
)&#""%*
+
:
,
!
RP6SeQ
"萧凤回#!
OPN2
"李奇伟#!
\6P73
"戴耀波#
*SC/UG]=W.A0/A0W@U=
B
GA0A<.D
!
<.>.0
B
=0XCAW=0.D=>D@=G=DWUG/=0XW@UD@GA(
D=0Ud1)"&-2,-"#/.@
F
CG.X=0X.W/
[
=GU0W/
+
9
,
*<*&-"4*
+
E--"-?
@
&,#46&"4A-,9/&.,6
:
"云南农业大学学
报#!
#)
!
AI
"
#
#$
!&%$
"
.04@.0U/U
#
*
+

,
!
\hQS1b6
!
76SL8
!
e;O\I611L
!
/6"4*PXU0W.Y.D=W.A0=0XD@=G=DWUG.^=W.A0AY/?
B
=GD=0U.0WUG
B
U0UG.D@
F
CG.X/
!
"##%"&(*
++
,#,-"$
&(d1&,"-6%."&-2,-"#/.
!
.`W@
UD?>=G<=GaUG/=0X\16,-.,6@
F
CG.X.^=W.A0
+
9
,
*D%/*&/6,#"4"-2?
33
4,/2=/-/6,#.
!
#)
!
HA
"
!
#$
%!"&%!,*
+
#"
,
!
OPe8Q
"李富生#!
Q;OO
"何丽莲#!
T61MNQ
"杨清辉#!
/6"4*;]=>?=W.A0AY/A[
UD.=>D@=G=DWUG/AY1&,"-6%.
+
49.=0X.XU0W.Y.(
D=W.A0AY/?
B
=GD=0U@
F
CG.X/C=/UXA0D@GA
9
,
*B*4/#4"&74"-6C&//2,-
@
"分子植物育种#!
""%
!
A
"
,
#$
++)&
+:#
"
.04@.0U/U
#
*
+
##
,
!
OP1RN
"林秀琴#!
OKR
"陆
!
鑫#!
I6S9
"毛
!
钧#!
/6"4*MP8Q=0=>
F
/./AY.0WUG
B
U0UG.De
#
@
F
CG.X/CUW`UU0!"##%"&(*
++
,#,-"&(
=0X1&,"-6%.&*#5,,
+
9
,
*!*6%F/.6G%,-"<*&-"4*
+
?
@
&,#46&"4!#,/-#/.
"西南农业学报#!
"#%
!
BK
"
$
#$
#%!+&#%%#
"
.04@.0U/U
#
*
+
#!
,
!

!
青!范源洪
*
甘蔗种质资源描述规范和数据+
8
,
*
北京$中国农业出版社!
"",
$
+&$"*
+
#%
,
!

!
青!范源洪
*
农作物优异种质资源评价规范///甘蔗+
8
,
*
北京$中国农业出版社!
"":
$
#&$*
+
#$
,
!
OPIR
"李懋学#!
4Q;17T
"陈瑞阳#
*6/?
BB
U/W.A0A0W@U/W=0X=GX.^=W.A0AYa=G
F
AW
F[
U=0=>
F
/./
[
>=0W/
+
9
,
*<*&-"4*
+
H%"-C*6"-,$
#"4;/./"&#%
"武汉植物学研究#!
#:)
!
D
"
$
#$
!+&%"!
"
.04@.0U/U
#
*
+
#)
,
!
O;f616*1A=W?GUYAGDU0WGA[
A/.W.A0.0D@GA
+
9
,
*>/&/2,6".
!
#,$
!
GB
"
!
#$
!"#&!!"*
+
#,
,
!
8b;33P18MO*4@GA
?W.A0.0Q.
B
@L>=0W/
+
I
,
*OA0XA0
$
;X` =GX6G0A>X
!
#+#
$
:+&"*
+
#+
,
!
67611SQ*4
F
WA>A
B
.D=>/W?X.U/.0/?CY=<.>
F
G"&2*,2/"/
"
4A<
[
A/.W=U
#
AY9=
[
=0
+
9
,
);*0*6B"
@
"I,-/
"
bAa
F
A
#!
#,%
!
LK
"
#
#$
$#&
$!+*
+
#:
,
!
46PN
"蔡
!
青#!
e61TQ
"范源洪#!
6PbZ;1Z
!
/6"4*6//U//[
@
F
>A
B
U0UW.DGU>=W.A0/@.
[
/ .`W@.0W@U
2
!"##%"&(#*(
3
4/J
3
?/.0
B
6eOL<=GaUG/
+
9
,
*?#6"?
@
&*-*(,#"!,-,#"
"作物学报#!
"")
!
DA
"
)
#$
))#&))
"
.04@.0U/U
#
*
+
#
,
!
OPKQ3
"刘洪博#!
TP1MRI
"应雄美#!
I6S9
"毛
!
钧#!
/6"4*MU0UW.DX.]UG/.W
F
=0=>
F
/./YAG##D>A0U/AY!"##%"&(.
3
*-6"-/( O*
+
9
,
*<*&-"4*
+
74"-6=/-/6,#;/.*&#/.
"植物遗传资源学报#!
"#%
!
AF
"
%
#$
)$!&)$,
"
.04@.0U/U
#
*
+
!"
,
!
陈如凯
*
现代甘蔗遗传育种+
I
,
*
北京$中国农业出版社!
"#"
$
!"&!$*
"!!
##

!!!!!!!!!!
刘洪博!等$基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析