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作 者 ：吴庆丰 王崇英 王新宇 李志孝 王亚馥

期 刊 ：西北植物学报 2006年 7期

关键词：山黧豆；蛋白质提取；SDS-PAGE；双向电泳；蛋白质组学；

Keywords:Lathyrus sativus, protein extraction, SDS-PAGE, two-dimension electrophoresis, proteomics,

摘 要 ：以山黧豆叶片为材料，比较分析了蛋白质的不同提取方法，在此基础上着重于样品制备。对IPG胶条的选择，第一向等电聚焦和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的电泳程序及参数、染色方法等相关技术进行了比较和条件优化。结果显示：采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质，裂解液中加入Tris-base作为蛋白酶抑制剂，等电聚焦电泳时延长低电压的电泳时间（30V、12h，500V、1h，1000V、2h）以促进盐离子泳出的方法对山黧豆叶片蛋白质进行双向电泳，并用考马斯亮蓝和银染复合染色法进行凝胶染色，能够获得蛋白点清晰的双向电泳图谱，说明用优化后的方法建立起的山黧豆叶片蛋白质双向电泳技术，蛋白质样品制备质量好，电泳分辨率高，完全适合于进一步的蛋白质组学研究。

Abstract:Different protein extraction methods were comparatively examined with Lathyrus sativus leaves as the experimental material and on the basis of this the sample preparation was studied.The choices of IPG strips and the protocols,parameters and staining meth

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