全 文 ：书多花黑麦草品种（系）间杂交及其
杂种后代犛犚犃犘遗传分析
季杨，张新全，马啸，初秀娟，李芳，蒙宇
（四川农业大学草业科学系，四川 雅安６２５０１４）
摘要：以多花黑麦草１２个杂交组合的亲本与后代共７０个材料，采用ＳＲＡＰ分子标记技术研究杂种与双亲之间的
扩增谱带多态性，以甄别真假杂种。结果表明，１）用１０对引物组合共得到多态性条带１０１条，平均每对引物扩增
出１０．１条多态带，多态性位点百分率为７７．１％。表明供试材料在ＤＮＡ水平上多态性较高，能够很好的揭示材料
间的差异，利用ＳＲＡＰ进行品种和杂种鉴定是可行的。２）所鉴定的６２个后代中ＳＲＡＰ扩增电泳带型表现出同父、
同母、综合和不同于亲本的新带型等多种类型。结合多对引物综合分析所鉴定的６２个后代中，有４８个后代具有
父本的特征带，这４８个后代可以鉴定为真杂种。
关键词：多花黑麦草；杂交育种；ＳＲＡＰ；杂种鉴定
中图分类号：Ｓ５４３＋．５０３．５１；Ｑ９４３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４５７５９（２００９）０４０２６００６
多花黑麦草（犔狅犾犻狌犿犿狌犾狋犻犳犾狅狉狌犿）又叫意大利黑麦草，属禾本科黑麦草属。多花黑麦草因其生长速度快，具
有产量高、适应性强、适口性好和营养价值丰富等特点在全国许多地区得到广泛地推广。目前，在我国南方各省
均有较大面积的栽培［１］。
多花黑麦草杂交选育与系统选育和引种相比，杂交育种更有利于综合双亲的优良性状，并缩短培育优良品种
的时间，刘明秀等［２］利用同工酶对双亲的初步研究证明了兼具亲本优良品质的杂种后代‘长江２号’多花黑麦草
（犔．犿狌犾狋犻犳犾狅狉狌犿ｃｖ．ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２）为阿伯得和赣选一号的杂交种。
ＤＮＡ是生物的遗传物质，ＤＮＡ的多态性是生物多样性的本质内容。目前，国内外许多学者都已经利用
ＤＮＡ分子标记技术在草坪草及牧草［３～７］上进行了各种研究。其中相关序列扩增多态性（ｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｌａｔｅｄａｍｐｌｉ
ｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＲＡＰ），又称为基于序列扩增多态性（ｓｅｑｕｅｎｃｅｂａｓｅｄａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＢＡＰ）［８］，是
Ｌｉ和Ｑｕｉｒｏｓ［９］在２００１年创建的一种ＤＮＡ分子标记技术。该技术是通过独特的引物设计对ＯＲＦｓ（ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇ
ｆｒａｍｅｓ，开放阅读框架）进行扩增。因个体不同以及物种的内含子、启动子与间隔长度不等而产生多态性。ＳＲＡＰ
技术具有简便稳定、产率高、便于克隆目标片段的特点［１０］，它克服了 ＲＡＰＤ（ｒａｎｄｏｍａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ＤＮＡ）重复性差、ＳＳＲ（ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔｓ）位点较少、ＡＦＬＰ（ａｍｐｌｉｆｉｅｄｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）成本
高的缺点，其重复性和稳定性好，已被应用于图谱构建［９］、比较基因组学［１１］和遗传多样性分析［１２］。ＳＲＡＰ在草业
科学领域中的研究不多，Ｂｕｄａｋ等［１０］利用３４对ＳＲＡＰ引物组合分析了５３份野牛草（犅狌犮犺犾狅犱犪犮狋狔犾狅犻犱犲狊）基因
型之间的遗传多样性及表型关系。易杨杰等［１３］和Ｚｅｎｇ等［１４］利用ＳＲＡＰ等分子标记对野生狗牙根（犆狔狀狅犱狅狀
犱犪犮狋狔犾狅狀）和鸭茅（犇犪犮狋狔犾犻狊犵犾狅犿犲狉犪狋犪）种植资源遗传多样性进行了深入研究。
本研究通过对我国西南地区主要的多花黑麦草品系间的杂交，旨在选育出具有双亲优势的新品系，进而选育
出具有优良的适应性、抗逆性品质的品种。
１ 材料与方法
１．１ 供试材料
供试材料为黑麦草属的８个亲本多花黑麦草品种所组成的１２个杂交组合，每个组合所收的每粒种子又分别
种于不同的花盆中。亲本来源见表１，杂交组合及其后代见表２。
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ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
第１８卷 第４期
Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．４
收稿日期：２００８１０１３；改回日期：２００８１１１０
基金项目：科技部９７３项目（２００７ＣＢ１０８９０７）和国家“十一五”牧草育种攻关项目（２００６ＢＡＤ０１Ａ１９９）资助。
作者简介：季杨（１９８３），男，四川崇州人，在读硕士。Ｅｍａｉｌ：ｊｉｙａｎｇ２２１＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｘｑ＠ｓｉｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
表１ 亲本及其来源
犜犪犫犾犲１ 犛狅狌狉犮犲狅犳狆犪狉犲狀狋狊
序号Ｎｏ． 试验编号Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｎｕｍｂｅｒｓ 品种Ｓｐｅｃｉｅｓ 材料来源 Ｍａｔｅｒｉａｌｓｒｅｓｏｕｒｃｅ
１ ＹＡ０７０１ 长江２号ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２ 四川农业大学ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
２ ＹＡ０７０２ 特高 Ｔｅｔｒｔａｇｏｒｄ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
３ ＹＡ０７０３ 杰威Ｓｐｌｅｎｄｏｒ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
４ ＹＡ０７０４ 剑宝Ｊｉａｎｂａｏ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
５ ＹＡ０７０５ 沃土Ｂａｒｓｐｅｃｔｒａ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
６ ＹＡ０７０６ 燎原Ｌｉａｏｙｕａｎ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
７ ＹＡ０７０７ 邦德 Ａｂｕｎｄａｎｔ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
８ ＹＡ０７０８ 海湾 Ｇｕｌｆ 百绿集团Ｂａｒｅｎｂｒｕｇ
表２ 杂交组合及其后代
犜犪犫犾犲２ 犎狔犫狉犻犱犻狕犲犱犮狅犿犫犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱狆狉狅犵犲狀犻犲狊
序号Ｎｏ． 组合 （♀×♂）Ｈｙｂｒｉｄｉｚｅｄｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ 后代Ｐｒｏｇｅｎｉｅｓ
１ 剑宝×沃土Ｊｉａｎｂａｏ×Ｂａｒｓｐｅｃｔｒａ １１，１２，１３，１４，１５
２ 燎原×长江２号Ｌｉａｏｙｕａｎ×ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２ ２１，２２，２３，２４，２５，２６，２７，２８，２９，２１０，２１１
３ 剑宝×海湾Ｊｉａｎｂａｏ×Ｇｕｌｆ ３１，３２，３３，３４，３５，３６，３７，３８，３９
４ 长江２号×剑宝ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２×Ｊｉａｎｂａｏ ４１，４２，４３，４４，４５，４６，４７
５ 邦德×长江２号 Ａｂｕｎｄａｎｔ×ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２ ５１，５２，５３，５４，５５，５６
６ 长江２号×燎原ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２×Ｌｉａｏｙｕａｎ ６１，６２，６３，６４，６５，６６，６７
７ 沃土×长江２号Ｂａｒｓｐｅｃｔｒａ×ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２ ７１，７２，７３，７４，７５
８ 燎原×剑宝Ｌｉａｏｙｕａｎ×Ｊｉａｎｂａｏ ８１，８２，８３
９ 燎原×杰威Ｌｉａｏｙｕａｎ×Ｓｐｌｅｎｄｏｒ ９１，９２
１０ 长江２号×海湾ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２×Ｇｕｌｆ １０１，１０２，１０３
１１ 剑宝×长江２号Ｊｉａｎｂａｏ×ＣｈａｎｇｊｉａｎｇＮｏ．２ １１１，１１２
１２ 燎原×邦德Ｌｉａｏｙｕａｎ×Ａｂｕｎｄａｎｔ １２１，１２２，１２３
１．２ ＤＮＡ提取
分别选取不同品种单株多花黑麦草健康幼叶，用ＣＴＡＢ（ｃｅｔｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，十六烷基三甲
基溴化铵）法提取其基因组ＤＮＡ，具体参照邹喻苹等［１５］的方法。通过采用紫外分光光度检测法及１．８％琼脂糖
电泳检测ＤＮＡ纯度和浓度，合格的ＤＮＡ样品于４℃冰箱内保存备用。
１．３ ＳＲＡＰ反应体系的建立和优化
利用正交设计Ｌ１６（４４）与单因素相结合的方法［１６］，对 Ｍｇ２＋浓度、ｄＮＴＰ、引物浓度、Ｔａｑ酶浓度进行４因素４
水平的正交试验，并在ＴｈｅｒｍｏＨｙｂａｉｄＰＣＲ仪上进行引物最佳退火温度的筛选。
１．４ ＳＲＡＰＰＣＲ反应
扩增反应体系为２０μＬ，包括ＤＮＡ３．５μＬ（４０ｎｇ／μＬ），１０×ＰＣＲＢｕｆｆｅｒ２μＬ，Ｍｇ
２＋ ２μＬ（２５ｍｍｏｌ／Ｌ），
ｄＮＴＰ１．６μＬ（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ），ＴａｑＤＮＡ聚合酶０．２μＬ（５Ｕ／μＬ），上、下游引物均为０．７μＬ（１０μｍｏｌ／μＬ），灭菌
水补足２０μＬ。
参照Ｌｉ和Ｑｕｉｒｏｓ［９］发表的引物，设计了１１个引物序列（表３），引物由上海生工生物工程技术服务有限公司
合成。ＳＲＡＰ－ＰＣＲ反应采用的是复性变温法，循环包括９４℃变性５ｍｉｎ；９４℃变性１ｍｉｎ，３５℃复性１ｍｉｎ，７２℃
延伸１ｍｉｎ，共５个循环；之后３５个循环：９４℃变性１ｍｉｎ，５０℃复性１ｍｉｎ，７２℃延伸１ｍｉｎ，最后７２℃延伸１０
ｍｉｎ；４℃保存。
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表３ 用于多花黑麦草犛犚犃犘分析的引物序列
犜犪犫犾犲３ 犘狉犻犿犲狉狊犲狇狌犲狀犮犲狊狌狊犲犱犻狀犛犚犃犘犪狀犪犾狔狊犲狊狅犳犔．犿狌犾狋犻犳狅狉狌犿
编号Ｃｏｄｅ 正向引物Ｆｏｒｗａｒｄｐｒｉｍｅｒ 编号Ｃｏｄｅ 反向引物 Ｒｅｖｅｒｓｅｐｒｉｍｅｒ
Ｍｅ２ ５′ＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＧＣ３′ ｅＭ２ ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣ３′
Ｍｅ４ ５′ＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＣＣ３′ ｅＭ４ ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＴＧＡ３′
Ｍｅ５ ５′ＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＡＧ３′ ｅＭ７ ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＣＡＡ３′
Ｍｅ６ ５′ＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＴＡＡ３′ ｅＭ８ ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＣＴＧ３′
Ｍｅ７ ５′ＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＴＣＣ３′ ｅＭ１０ ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＣＡＧ３′
ｅＭ１１ ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＣＣＡ３′
１．５ 电泳检测
在ＰＣＲ扩增产物中加入１／６体积的ＬｏａｄｉｎｇＢｕｆｆｅｒ，在１．８％琼脂糖凝胶（含ＥＢ）电泳分离，缓冲体系为０．５
×ＴＢＥ，电压１２０Ｖ，时间约４ｈ。用ＢＩＯ－ＲＡＤ公司的ＧｅｌＤｏｃ１０００型凝胶成像系统观察并照相记录。
２ 结果与分析
２．１ 供试材料ＳＲＡＰ扩增产物的多态性
用１０对引物组合对７０份多花黑麦草基因组
ＤＮＡ进行ＳＲＡＰ扩增，共得到１３１．００条清晰可辨条
带。其中，多态性条带１０１．００条，多态性位点百分率
为７７．０９％，扩增的ＤＮＡ片段大约集中在１００～１５００
ｂｐ。平均每对引物扩增出１３．１０条带，其中１０．１０条
具有多态性（表４），表明ＳＲＡＰ能检测出较多的遗传
位点，能获得多态性较好的ＰＣＲ结果。
２．２ 杂种后代的鉴定
根据杂交组合的亲本及其后代电泳谱带特征，对
杂交后代进行鉴定，并将后代分为如下２类：１）父本
与母本比较有特征带，且后代也具有父本特征带，则后
代为真杂种。２）父本与母本比较具有特征带，但后代
不具有该特征带，并与母本的电泳条带有差异，此类不
能确定其为自交种还是杂交种，需进一步分析。
２．２．１ 有父本特征谱带的杂种后代 利用一对引物
对群体进行扩增时，会出现杂种后代的真实性鉴定多
种类型（图１），通过这一判断标准，利用１０对引物对
表４ 多花黑麦草犛犚犃犘标记的多态性
犜犪犫犾犲４ 犃犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀狉犲狊狌犾狋狊犳狉狅犿１０狆狉犻犿犲狉犮狅犿犫犻狀犪狋犻狅狀
引物对
Ｐｒｉｍｅｒ
ｐａｉｒｓ
扩增总条带数
ＴｏｔａｌＮｕｍｂｅｒ
ｏｆｂａｎｄｓ
多态性条带数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ
多态性比率
Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｂａｎｄｓ（％）
Ｍｅ２＋ｅＭ２ １４．００ １１．００ ７８．５７
Ｍｅ２＋ｅＭ４ １３．００ ９．００ ６９．２３
Ｍｅ４＋ｅＭ８ １５．００ １２．００ ８０．００
Ｍｅ５＋ｅＭ７ １２．００ ９．００ ７５．００
Ｍｅ５＋ｅＭ８ １２．００ １０．００ ８３．３３
Ｍｅ５＋ｅＭ１１ １１．００ ８．００ ７２．７２
Ｍｅ６＋ｅＭ２ １２．００ ９．００ ７５．００
Ｍｅ７＋ｅＭ８ １３．００ １０．００ ７６．９２
Ｍｅ６＋ｅＭ１０ １５．００ １２．００ ８０．００
Ｍｅ７＋ｅＭ２ １４．００ １１．００ ７８．５７
总和Ｔｏｔａｌ １３１．００ １０１．００
平均Ａｖｅｒａｇｅ １３．１０ １０．１０ ７７．０９
群体进行扩增。具有父本特征带的后代共有４８个，这些后代及其所具有的父本特征带的情况见表５。
利用ＳＲＡＰ鉴定结果表明，杂交后代在任何１对引物扩增后具有父本１条或多条特征带，均能证明杂种真实
性。由此判断这１２个亲本组合共６２个杂交种中有４８个为真杂种。
２．２．２ 无父本特征带的后代 杂种后代中１２份（２１，２５，３７，５６，７１，８３，１０１，１０２，１０３，１２１，１２２和１２３）
Ｆ１材料属于无父本特征谱带的后代或父本特征谱带不明显；２份Ｆ１材料（９１和９２）属于父本相对于母本没有
特征带后代却有新的特征带。对于上述１４份无父本特征带的杂种后代，在仅有１对引物的扩增下无法判断杂种
的真实性，需要结合多对引物相互补充。
３ 讨论
在杂种的鉴定过程中发现，当一种引物的父本与母本相比较没有特征带时，另一种引物可能有；或者一种引
物的父本虽有特征带，但后代中不显示，而另一种引物的父本特征带中却有显示，所以利用多种引物进行杂种鉴
定，可以相互补充，结果更准确。
３５２第１８卷第４期 草业学报２００９年
表５ 真杂种及具有的父本特征带
犜犪犫犾犲５ 犜狉狌犲犺狔犫狉犻犱狊犪狀犱犻狋狊犿犪狉犽犲狉
编号ＣｏｄｅＭｅ２＋ｅＭ２ Ｍｅ２＋ｅＭ４ Ｍｅ４＋ｅＭ８ Ｍｅ５＋ｅＭ７ Ｍｅ５＋ｅＭ８ Ｍｅ５＋ｅＭ１１ Ｍｅ６＋ｅＭ２ Ｍｅ７＋ｅＭ８ Ｍｅ６＋ｅＭ１０ Ｍｅ７＋ｅＭ２
１１ Ｏ Ｏ ＋ ＋ ＋ Ｏ ＋ ＋ Ｏ ＋
１２ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ
１３ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋
１４ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ
１５ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ
２１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ Ｘ ＋ ＋
２２ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ
２３ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ － ＋ ＋
２４ ＋ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ
２５ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋
２６ Ｏ Ｏ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋
２７ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ － ＋ ＋
２８ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ － ＋ ＋
２９ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｘ Ｏ ＋
２１０ ＋ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｏ ＋ － Ｏ ＋
２１１ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ － ＋ ＋
３１ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ ＋ Ｏ ＋ － Ｏ Ｏ
３２ ＋ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｏ ＋ － Ｏ Ｏ
３３ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ － ＋ ＋
３４ Ｏ Ｏ ＋ ＋ ＋ Ｏ ＋ － Ｏ Ｏ
３５ Ｏ Ｏ ＋ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｘ Ｏ ＋
４３ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ － Ｏ
４４ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ － Ｏ
４６ ＋ Ｏ － Ｏ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ － ＋
４７ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ － Ｏ
５１ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ － Ｘ Ｏ
５２ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ － Ｘ Ｏ
５３ Ｏ Ｏ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｏ Ｘ － Ｏ
５４ Ｏ Ｏ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｏ － － Ｏ
５５ Ｏ Ｏ ＋ ＋ Ｏ ＋ Ｏ － － Ｏ
６１ Ｏ ＋ － Ｏ Ｏ Ｘ ＋ Ｏ － Ｏ
６２ Ｏ ＋ － Ｏ Ｏ Ｘ ＋ Ｏ － Ｏ
６３ Ｏ ＋ － ＋ Ｏ Ｘ ＋ ＋ － Ｏ
６４ ＋ ＋ － Ｏ ＋ Ｘ ＋ Ｏ － ＋
６５ Ｏ ＋ － Ｏ Ｏ Ｘ ＋ Ｏ － Ｏ
６６ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ Ｘ Ｏ Ｏ － Ｏ
６７ Ｏ Ｏ － Ｏ Ｏ Ｘ Ｏ Ｏ － Ｏ
７２ ＋ Ｏ Ｏ ＋ ＋ Ｏ Ｏ Ｘ Ｏ ＋
７３ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ － Ｏ ＋
７４ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｏ Ｏ － Ｏ ＋
８１ Ｘ Ｏ Ｘ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｘ
８２ Ｘ Ｏ Ｘ ＋ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｘ
１１１ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ ＋ Ｘ Ｘ Ｏ Ｘ Ｏ
注：“－”父本与母本比较没有特征带，子代也不具有；“Ｘ”父本与母本比较没有特征带，子代具有；“Ｏ”父本与母本比较有特征带，后代具有；
“＋”父本与母本比较有特征带，后代不具有。
Ｎｏｔｅ：“－”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｔｈａｔｍａｌｅｐａｒｅｎｔｓｈａｖｅｎ’ｔｍａｒｋｅｒｂａｎｄｓ，ａｎｄｐｏｒｇｅｎｉｅｓｈａｖｅｎ’ｔｔｏｏ；“Ｘ”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｔｈａｔｍａｌｅｐａｒｅｎｔｓｈａｖｅｎ’ｔｂｕｔｐｏｒｇｅｎｉｅｓ
ｈａｖｅｍａｒｋｅｒｂａｎｄｓ；“Ｏ”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｔｈａｔｐｏｒｇｅｎｉｅｓｈａｖｅｍａｌｅｐａｒｅｎｔｓ’ｍａｒｋｅｒｂａｎｄｓ；“＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｔｈａｔｐｏｒｇｅｎｉｅｓｈａｖｅｎ’ｔｍａｌｅｐａｒｅｎｔｓ’ｍａｒｋｅｒ
ｂａｎｄｓ．
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图１ 杂交组合１（犢犃０７０４×犢犃０７０５）的犛犚犃犘电泳图谱
犉犻犵．１ 犛犚犃犘犪犿狆犾犻犳犻犪犫犾犲狊狆犲犮狋狉犪犾犫犪狀犱狊狅犳犺狔犫狉犻犱犮狅犿犫犻狀犪狋犻狅狀１
箭头所指为父本的特征带Ａｒｒｏｗｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈｅｍａｌｅｐａｒｅｎｔ′ｓｍａｒｋｅｒｂａｎｄｓｔｈａｔｔｈｅｆｅｍａｌｅｐａｒｅｎｔｓｈａｖｅｎ’ｔ
在黑麦草属甚至其他植物方面至今还未见到利用ＳＲＡＰ分子标记鉴定杂种的报告，但在其他植物上已有大
量利用ＡＦＬＰ、ＳＳＲ等分子标记鉴定杂种的文章，多以后代有无父本的特征型电泳带为鉴定标准，本研究也采用
了这个鉴定标准，本试验结果分析后代具有父母本均没有的“特征带”，也就是说这种“特征带”是因为双亲的杂交
而产生的，这在已明确后代为杂交种中被证实。因为本研究是杂种鉴定，所以就没有采取后一种鉴定，是否具有
父本均没有的特征带的后代也为真杂种，还有待于通过细胞学，并结合外部形态特征进行综合鉴定。
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６５２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２００９） Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．４