全 文 ：书苜蓿皂苷对犛犇大鼠胆固醇代谢的
影响及其分子机理的初步探讨
袁德地，史莹华，王成章，郭瑞，王洁
（河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州４５０００２）
摘要：研究了苜蓿皂苷对ＳＤ大鼠胆固醇代谢的影响，并初步探讨其分子机理。取雄性健康ＳＤ大鼠３２只，随机分
为４组，分别为：正常对照组、苜蓿皂苷组、高脂模型组和高脂皂苷组，每组８只。前４周为高脂模型建立期，后４周
为灌胃期，正常对照组和苜蓿皂苷组饲喂基础饲粮，其余２组饲喂高脂饲粮，苜蓿皂苷组和高脂皂苷组从第５周开
始灌胃２４０ｍｇ／ｋｇ苜蓿皂苷，灌胃４周。测定试验大鼠体重、肝脏系数、血脂水平、粪便和肝脏中的胆固醇、胆汁酸
含量，并用实时荧光定量ＰＣＲ技术检测大鼠肝脏胆固醇７α羟化酶（ＣＹＰ７ａ１）和三磷酸腺苷结合盒转运体Ｇ５／三磷
酸腺苷结合盒转运体Ｇ８（ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８）ｍＲＮＡ的表达量。结果表明，１）苜蓿皂苷显著降低高脂大鼠体重、肝脏
系数；降低血清中总胆固醇含量，加速胆固醇向肝脏的聚集；增加粪便中胆固醇和胆汁酸的排出；２）显著增加正常
血脂水平大鼠粪便中胆固醇的含量，但对其体重、肝脏系数等影响不大；３）添加苜蓿皂苷后正常和高脂水平ＳＤ大
鼠肝脏ＣＹＰ７ａ１和ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ的表达量均成倍增加。提示苜蓿皂苷能够调节ＳＤ大鼠体内胆固醇的
分布，具有良好的降血脂效应，其效应可能与增加ＣＹＰ７ａ１和ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ表达量，加速体内胆固醇、胆
汁酸排泄有关。
关键词：苜蓿皂苷；胆固醇代谢；分子机理；胆固醇７α羟化酶；三磷酸腺苷结合盒转运体Ｇ５／三磷酸腺苷结合盒转
运体Ｇ８
中图分类号：Ｓ８１６；Ｓ５５１＋．７；Ｓ４４３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１３）０５０２９４０８
犇犗犐：１０．１１６８６／ｃｙｘｂ２０１３０５３５　　
　　 近年来，随着人们生活水平的提高，心血管疾病已成为危害人类健康的头号杀手［１］。畜禽肉蛋中较高含量
的胆固醇是人类各种心脑血管疾病的主要诱因之一［２］，美国 ＬＲＣＰ研究结果表明，通过调节膳食中胆固醇水平
的方法，降低血浆胆固醇含量１％可以减少冠心病发病率２％，因此如何降低畜禽产品中胆固醇的含量已成为营
养学家关注的焦点。而传统降脂药物的副作用和局限性，使得从绿色植物中寻求降脂药物具有重要意义。
苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪，ａｌｆａｌｆａ）是一种优良的多年生豆科牧草，素有“牧草之王”的美称［３，４］，在畜牧业上应
用广泛［５］，随着对苜蓿研究的深入，苜蓿所含有的多种活性物质越来越受到研究者的重视［６］，苜蓿皂苷（ａｌｆａｌｆａ
ｓａｐｏｎｉｎｓ）是苜蓿众多活性物质中的一种，大量研究表明苜蓿皂苷能够显著降低人和动物体内胆固醇，具有良好
的抗动脉粥样硬化效应，使其成为降低胆固醇药物和绿色饲料添加剂的理想原料。Ｍｌｇａａｒｄ等［７］研究显示正常
血脂水平的人每天食用６０～８０ｇ苜蓿种子后血液中胆固醇含量显著减少，主要成分为苜蓿皂苷的保健产品
“ＣｈｏｌｅｓｔａｉｄＴＭ”在食物胆固醇进入肝脏之前即可在胃肠道中与之结合，从而加速外源性胆固醇的排泄降低人体
内胆固醇的含量［８］。研究表明猪日粮中添加苜蓿皂苷可显著降低血清和肝脏胆固醇的含量，并一定程度上降低
肌肉中胆固醇含量［９，１０］。有些研究表明苜蓿皂苷显著降低产蛋鸡鸡蛋中胆固醇含量［１１１３］。但目前苜蓿皂苷降低
胆固醇的研究主要集中在应用方面，对其降脂机理方面的研究较少，而分子方面的研究更是鲜见报道。本试验研
究了苜蓿皂苷对正常血脂水平、高脂水平大鼠胆固醇代谢的影响，并对其分子机理做了初步的探讨。
２９４－３０１
２０１３年１０月
　　　草　业　学　报　　　
　　　ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ　　　
第２２卷　第５期
Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．５
收稿日期：２０１２１２２８；改回日期：２０１３０３０５
基金项目：国家科技支撑计划项目（２０１１ＢＡＤ１７Ｂ０４）和现代农业产业技术体系项目（ＣＡＲＳ３５）资助。
作者简介：袁德地（１９８７），男，河南信阳人，在读硕士。Ｅｍａｉｌ：ｗａｉｔｉｎｇ２００６＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ａｎｎｙｓｙｈ＠１２６．ｃｏｍ
１　材料与方法
１．１　试验动物、饲粮
雄性健康无特定病原菌（ＳＰＦ）ＳＤ大鼠３２只，体重（１９１．４１±１６．０１）ｇ，购自河南省实验动物中心。基础饲粮
由河南省实验动物中心提供，符合ＧＢ１３０７８２００１和ＧＢ１４９２４．２２００１饲料卫生标准；胆固醇、猪胆盐和蛋黄粉由
安徽天启化工科技有限公司提供；猪油和全脂奶粉购自郑州成果商贸有限公司；苜蓿皂苷由河北省沧州市宝恩生
物科技有限公司提供，总皂苷含量为５１％。
１．２　主要试剂和仪器
ＴＲＩｚｏｌ核酸提取试剂：宝生物（大连）有限公司；反转录ＰＣＲ试剂盒：宝生物（大连）有限公司；ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ
试剂盒：东洋纺（上海）生物科技有限公司。ＨＩＴＡＣＨＩ７１７０Ａ全自动生化分析仪：日立中国有限公司；荧光定量
ＰＣＲ仪：艾本德中国有限公司；台式高速冷冻离心机：艾本德中国有限公司；ＤＹＹ８Ｃ型电泳设备：北京市六一仪
器厂；电泳凝胶成像分析系统：英国Ｓｙｎｇｅｎｅ公司；总胆固醇测定试剂盒：北京北化康泰临床试剂有限公司；总胆
汁酸测定试剂盒：南京建成生物工程研究所；酶标仪：ＭｕｌｔｉｓｋａｎＧＯ１．００．４０；ＬＤＬ测定试剂盒：广州达尔斯科生
物科技公司；ＨＤＬ测定试剂盒：广州达尔斯科生物科技公司；甘油三酯检测试剂盒：宁波美康生物科技有限公司。
１．３　时间与地点
本试验在河南农业大学牧医工程学院试验动物房进行。时间从２０１１年８月－１０月，其中预试期７ｄ，正试
期５６ｄ。
１．４　高脂模型的建立及试验设计
预试期结束后，所有大鼠禁食过夜，称量体重，尾动脉采血，检测血清总胆固醇（ＴＣ）含量，并根据血清ＴＣ含
量和体重情况将雄性健康ＳＤ大鼠３２只随机分为２组，每组１６只，分别为：正常对照组、高脂模型组，各组之间
血清ＴＣ含量和体重无统计学差异（犘＞０．０５）。采用饲喂高脂饲粮的方法建立大鼠高脂模型。正常对照组饲喂
基础日粮，高脂模型组饲喂高脂饲料，２组大鼠均自由饮水。高脂饲粮组成：１．０％胆固醇、０．１％猪胆盐，１０．０％
猪油，５．０％蛋黄粉，５．０％全脂奶粉，７８．９％基础饲粮。建模时间为第１～４周。每周称量１次体重，第４周末尾
动脉采血。
建模期结束后根据血清ＴＣ含量和体重分别将正常对照组和高脂模型组随机分为２组，每组８只，分组情况
及具体实验设计如下，１）正常对照组：饲喂基础饲粮，每天０９：００灌胃２ｍＬ蒸馏水；２）苜蓿皂苷组：饲喂基础日
粮，每天０９：００灌胃２４０ｍｇ／ｋｇ苜蓿皂苷２ｍＬ；３）高脂对照组：饲喂高脂日粮，每天０９：００灌胃２ｍＬ蒸馏水；４）
高脂皂苷组：饲喂高脂日粮，每天０９：００灌胃２４０ｍｇ／ｋｇ苜蓿皂苷２ｍＬ。以上各组大鼠均自由饮水、采食，试验
周期为４周。
１．５　血液和组织样本的采集
收集大鼠最后３ｄ的粪便，－２０℃阴干，保存于－２０℃冰箱待测。试验结束后，所有大鼠禁食过夜。按大鼠
每１００ｇ体重腹腔注射３．０％戊巴比妥钠溶液０．１ｍＬ进行麻醉，断尾采血，３０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，分离出血
清分装于Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，保存于－２０℃冰箱待测。沿大鼠腹部中部剖开，取肝脏，吸干血迹后称重，将肝脏一分
为二，用锡箔纸包装好后一半置于－２０℃冰箱待测，另一半迅速置于液氮中冷冻，并保存于－８０℃冰箱待测。
１．６　体重和肝脏系数的测定
试验期间每周称量大鼠体重。试验结束时，称量各组大鼠的体重和肝脏重量，并计算肝脏系数。肝脏系数
（％）＝１００×肝脏重量／体重。
１．７　血清脂类相关指标的测定
采用全自动生化分析仪测定血清中ＴＣ、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、低密度脂蛋白胆固
醇（ＬＤＬＣ）含量，具体操作参照试剂盒说明书。
１．８　肝脏、粪便中总胆固醇和总胆汁酸的测定
称取０．５ｇ样品，按适当比例加入ＰＢＳ（ｐＨ７．４），充分匀浆，２０００～３０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，取上清待测，
总胆固醇的测定采用紫外分光光度计测量，总胆汁酸的测定采用酶标仪测量，具体操作详见试剂盒说明书。
５９２第２２卷第５期 草业学报２０１３年
１．９　ＣＹＰ７ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ表达量的测定
取肝脏组织３０～５０ｍｇ，液氮速冻并研磨至细粉末状，用ＴＲＩｚｏｌ核酸提取试剂提取总ＲＮＡ，测定ＲＮＡ样品
浓度及纯度，所有样品ＯＤ２６０／２８０在１．９～２．０之间，说明其纯度满足分子生物学实验的要求。将上述总ＲＮＡ进行
反转录，反应采用１０μＬ体系，反转录产物分装后于－２０℃保存备用。
以ＧｅｎｅＢａｎｋ上大鼠ＣＹＰ７Ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ＤＮＡ序列为模板，采用Ｐｒｉｍｉｅｒ５．０软件设计引物，上下游
引物跨越内含子，由华大基因合成。以甘油醛３磷酸脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）作为内参。具体引物序列见表１。
表１　实时荧光定量犘犆犚引物序列
犜犪犫犾犲１　犘狉犻犿犲狉狊犲狇狌犲狀犮犲狊犳狅狉狉犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚
基因
Ｇｅｎｅ
登录号
ＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ．
引物序列
Ｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅ（５′－３′）
产物大小
Ｐｒｏｄｕｃｔｓｉｚｅ（ｂｐ）
甘油醛３磷酸脱氢酶 ＧＡＰＤＨ ＮＣ＿００５１０３．３ 上游Ｓｅｎｓｅ：ＡＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＧＴＧＧＴＧＡＡＧＣＡＧ １１８
下游 Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：ＴＣＡＡＡＧＧＴＧＧＡＡＧＡＡＴＧＧＧＡＧＴＴ
胆固醇７α羟化酶ＣＹＰ７ａ１ ＮＣ＿００５１０４．３ 上游Ｓｅｎｓｅ：ＴＣＣＡＴＣＴＴＧＡＧＧＡＣＧＧＴＴＣ １５２
下游 Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：ＡＧＧＴＧＧＴＣＴＴＴＧＣＴＴＴＣＣＣ
三磷酸腺苷结合盒转运体Ｇ５ＡＢＣＧ５ ＮＣ＿００５１０５．２ＲＥＧＩＯＮ：
８０２７６４７．．８０６４４２
上游Ｓｅｎｓｅ：ＧＡＴＴＴＣＣＡＧＴＧＧＣＧＡＧＣＧ １３４
下游 Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：ＣＧＡＣＣＡＡＧＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＴ
三磷酸腺苷结合盒转运Ｇ８ＡＢＣＧ８ ＮＣ＿００５１０５．２ＲＥＧＩＯＮ：
８０６４６３１．．８０８３２７１
上游Ｓｅｎｓｅ：ＡＴＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＧＡＣＴ ９７
下游 Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：ＣＣＡＴＡＧＡＴＧＡＴＧＡＣＡＴＡＧＧＣＡＣ
　ＧＡＰＤＨ：ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ；ＣＹＰ７ａ１：Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ７ａｌｐｈａｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ；ＡＢＣＧ５：ＡＴＰｂｉｎｄｉｎｇｃａｓｓｅｔｔｅｓｕｂｆａｍｉｌｙＧ
ｍｅｍｂｅｒ５；ＡＢＣＧ８：ＡＴＰｂｉｎｄｉｎｇｃａｓｓｅｔｔｅｓｕｂｆａｍｉｌｙＧｍｅｍｂｅｒ８．
ＣＹＰ７Ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ表达分析采用ＲｅａｌＴｉｍｅＰＣＲ荧光染料法测定，配制２０μＬ体系，具体
操作参照试剂盒说明书，每个样品３个技术重复。循环条件为：９５℃预变性２ｍｉｎ，９５℃变性１５ｓ，６０℃退火２０ｓ，
７２℃延伸３０ｓ，４０个循环。以内参基因ＧＡＰＤＨ表达量为参比，目的基因相对表达量以２－△△Ｃｔ表示。
１．１０　数据统计分析
试验数据采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件进行单因素方差分析（ＯｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ），Ｄｕｎｃａｎ氏法进行组间多重比
较，以犘＜０．０５表示差异显著，犘＜０．０１表示差异极显著，结果用“平均值±标准差”表示。
２　结果与分析
２．１　第４周末大鼠血清学指标变化情况
与正常对照组相比，高脂模型组ＴＧ水平极显著升高（表２），增加幅度为７８％（犘＜０．０１），ＴＣ水平极显著升
高，增加幅度为２６％（犘＜０．０１），ＬＤＬ水平显著升高，但增加幅度不大（犘＜０．０５），而 ＨＤＬ水平变化不明显（犘＞
０．０５）。
表２　建模末期大鼠血清脂质水平（狀＝８）
犜犪犫犾犲２　犛犲狉狌犿犾犻狆犻犱犾犲狏犲犾犻狀狋犺犲犲狀犱狅犳狋犺犲犺狔狆犲狉犾犻狆犻犱犲犿犻犪犿狅犱犲犾犲狊狋犪犫犾犻狊犺犿犲狀狋 ｍｍｏｌ／Ｌ
组别Ｇｒｏｕｐ 甘油三酯ＴＧ 总胆固醇ＴＣ 高密度脂蛋白胆固醇 ＨＤＬＣ 低密度脂蛋白胆固醇ＬＤＬＣ
正常对照组Ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ ０．６９±０．０５Ａ １．２３±０．０６Ａ ０．５９±０．０６ａ ０．３３±０．０１ａ
高脂模型组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ １．２３±０．０５Ｂ １．５５±０．０７Ｂ ０．５７±０．０４ａ ０．３８±０．０１ｂ
　注：同列不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５），不同大写字母表示差异极显著（犘＜０．０１）。下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｖａｌｕｅｓｗｉｔｈｉｎａｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（犘＜０．０５），ｗｉｔｈｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒｓｍｅａｎｖｅｒｙ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（犘＜０．０１）．ＴＧ：Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ；ＴＣ：Ｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ；ＨＤＬＣ：Ｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ；ＬＤＬＣ：Ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏ
ｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
６９２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．５
２．２　苜蓿皂苷对大鼠体重和肝脏系数的影响
与正常对照组相比较（表３），苜蓿皂苷组大鼠末重有所下降但差异并不显著（犘＞０．０５），肝脏系数基本没有
变化；而高脂对照组大鼠体重和肝脏系数均极显著升高（犘＜０．０１）。与高脂对照组相比高脂皂苷组大鼠体重极
显著下降（犘＜０．０１），肝脏系数则显著下降（犘＜０．０５）。
表３　苜蓿皂苷对大鼠体重和肝脏系数的影响
犜犪犫犾犲３　犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀犫狅犱狔狑犲犻犵犺狋犪狀犱犾犻狏犲狉犻狀犱犲狓狅犳狉犪狋狊
组别Ｇｒｏｕｐ 初始重Ｉｎｉｔｉａｌｗｅｉｇｈｔ（ｇ） 末重Ｆｉｎａｌｗｅｉｇｈｔ（ｇ） 肝脏系数Ｌｉｖｅｒｗｅｔｗｅｉｇｈｔ（％）
正常对照组 Ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ ３７８．３１±３１．０１ａ ４５６．２０±１５．１２Ａａ ２．６８±０．１８Ａａ
苜蓿皂苷组 Ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ３８６．７５±２４．０９ａ ４４６．１０±２３．７７ＡＢａ ２．６７±０．１５Ａａ
高脂对照组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ ３９６．５０±３３．６５ｂ ４８３．４０±２６．６４Ｂｂ ３．７５±０．２８Ｂｂ
高脂皂苷组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ３９９．５８±３１．３５ｂ ４６７．２８±２９．３９Ａａ ３．４１±０．２４Ｂｃ
２．３　苜蓿皂苷对大鼠血清指标的影响
与正常对照组比较（表４），苜蓿皂苷组大鼠ＴＧ、ＨＤＬＣ含量均有升高趋势、ＬＤＬＣ含量略有降低，但差异均
不显著（犘＞０．０５），ＴＣ水平则有一定程度的上升且差异显著（犘＜０．０５）；高脂模型组大鼠ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬＣ水平
极显著升高（犘＜０．０１），ＨＤＬＣ水平差异不显著（犘＜０．０５）。与高脂对照组相比高脂皂苷组大鼠ＴＧ含量显著
下降，下降幅度１７％（犘＜０．０５），ＴＣ含量显著下降，下降幅度为１２．２％（犘＜０．０５），ＨＤＬ含量变化不大（犘＞
０．０５），ＬＤＬ含量极显著下降，下降幅度为２２％（犘＜０．０１）。
表４　苜蓿皂苷对大鼠血清指标的影响（狀＝８）
犜犪犫犾犲４　犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀狊犲狉狌犿犾犻狆犻犱犾犲狏犲犾犻狀狉犪狋狊 ｍｍｏｌ／Ｌ
组别Ｇｒｏｕｐ 甘油三酯ＴＧ 总胆固醇ＴＣ 高密度脂蛋白胆固醇 ＨＤＬＣ 低密度脂蛋白胆固醇ＬＤＬＣ
正常对照组Ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ ０．５６±０．１５Ａａ １．１８±０．２２Ａａ ０．６０±０．０９ａ ０．３４±０．０６Ａａ
苜蓿皂苷组Ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ０．７３±０．０９Ａａ １．３１±０．１６Ａａｂ ０．７０±０．０６ａ ０．３３±０．０５Ａａ
高脂对照组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ １．３３±０．１７Ｂｂ １．６４±０．１９Ｂｃ ０．６１±０．１４ａ ０．４１±０．１５Ｂｂ
高脂皂苷组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ １．１０±０．２６Ｂｃ １．４４±０．１１ＡＢｂ ０．６９±０．０９ａ ０．３２±０．０３Ａａ
２．４　苜蓿皂苷对大鼠肝脏、粪便中胆固醇含量的影响
和正常对照组比较苜蓿皂苷组粪便中胆固醇极显著升高（表５），升高幅度达到３８２％（犘＜０．０１），肝脏中胆
固醇略有升高但差异并不显著（犘＞０．０５）；高脂对照组和高脂皂苷组粪便和肝脏中胆固醇均极显著升高，且升高
幅度很大（犘＜０．０１）。和高脂对照组比较高脂皂苷组粪便和肝脏中胆固醇均极显著升高，升高幅度分别为
４７．５％和３０．９％（犘＜０．０１）。
表５　苜蓿皂苷对大鼠肝脏、粪便中胆固醇含量的影响（狀＝８）
犜犪犫犾犲５　犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀狋狅狋犪犾犮犺狅犾犲狊狋犲狉狅犾犾犲狏犲犾犻狀犾犻狏犲狉犪狀犱犳犲犮犲狊狅犳狉犪狋狊 ｍｍｏｌ／Ｌ
组别Ｇｒｏｕｐ 粪便中胆固醇含量Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｅｖｅｌｉｎｆｅｃｅｓ 肝脏中胆固醇含量Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｅｖｅｌｉｎｌｉｖｅｒ
正常对照组Ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ ０．３９±０．０５Ｂ ３．８４±０．３８Ａ
苜蓿皂苷组Ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ １．８８±０．２６Ａ ４．０９±０．１２Ａ
高脂对照组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ ５．０５±０．６１Ｃ １８．４３±１．０９Ｂ
高脂皂苷组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ７．４５±０．８４Ｄ ２４．１３±２．５９Ｃ
７９２第２２卷第５期 草业学报２０１３年
２．５　苜蓿皂苷对大鼠肝脏、粪便中胆汁酸含量的影响
和正常对照组相比苜蓿皂苷组肝脏和粪便中胆汁酸含量差异不大且不显著（犘＞０．０５）（表６）；高脂对照和
高脂皂苷组粪便和肝脏中胆汁酸均极显著升高（犘＜０．０１）。和高脂对照组相比较高脂皂苷组大鼠粪便和肝脏中
胆汁酸均极显著升高（犘＜０．０１），升高幅度分别达到４０．４％，１３．８％。
表６　苜蓿皂苷对大鼠肝脏、粪便中胆汁酸含量的影响（狀＝８）
犜犪犫犾犲６　犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀狋狅狋犪犾犫犻犾犲犪犮犻犱狊犾犲狏犲犾犻狀犾犻狏犲狉犪狀犱犳犲犮犲狊狅犳狉犪狋狊 μｍｏｌ／Ｌ
组别Ｇｒｏｕｐ 粪便中总胆汁酸含量Ｂｉｌｅａｃｉｄｓｌｅｖｅｌｉｎｆｅｃｅｓ 肝脏中总胆汁酸含量Ｂｉｌｅａｃｉｄｓｌｅｖｅｌｉｎｌｉｖｅｒ
正常对照Ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ ６４．８４±３．２４Ａ ８２．４２±１１．６３Ａ
苜蓿皂苷Ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ６５．５２±６．３６Ａ ７８．４２±１４．６５Ａ
高脂对照 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ ９５．７４±４．０６Ｂ １６０．０５±７．９０Ｂ
高脂皂苷 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ １３４．４２±８．４０Ｃ １８２．２０±１９．９０Ｃ
２．６　苜蓿皂苷对肝脏ＣＹＰ７ａ１，ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ表达量的影响
和正常对照组比较苜蓿皂苷组ＣＹＰ７ａ１表达量提高了３．３７倍，且差异显著（犘＜０．０５）（表７），ＡＢＣＧ５和
ＡＢＣＧ８表达量分别提高了６．７７，７．２６倍，且差异达到极显著水平（犘＜０．０１）；高脂对照组和高脂皂苷组ＣＹＰ７ａ１
表达量分别提高了５．４４，８．０８倍，差异达到极显著水平（犘＜０．０１），ＡＢＣＧ５表达量分别提高了２．３２，４．３７倍，差
异达到显著水平（犘＜０．０５），ＡＢＣＧ８表达量分别提高了２．５７，３．４０倍，差异显著（犘＜０．０５）。和高脂对照组相比
较，高脂皂苷组ＣＹＰ７ａ１、ＡＢＣＧ５、ＡＢＣＧ８的表达量均有不同程度的提高，且差异显著（犘＜０．０５）。
表７　苜蓿皂苷对肝脏犆犢犘７犪１，犃犅犆犌５／犃犅犆犌８犿犚犖犃表达量的影响
犜犪犫犾犲７　犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀犿犚犖犃犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳犆犢犘７犃１犪狀犱犃犅犆犌５／犃犅犆犌８犻狀犾犻狏犲狉狅犳狉犪狋狊 倍Ｆｏｌｄ
组别
Ｇｒｏｕｐ
胆固醇７α羟化酶
ＣＹＰ７ａ１
三磷酸腺苷结合盒转运体Ｇ５
ＡＢＣＧ５
三磷酸腺苷结合盒转运体Ｇ８
ＡＢＣＧ８
正常对照组Ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ １．００±０．０１Ａｂ １．００±０．６３Ｂｂ １．００±０．０８Ｂｂ
苜蓿皂苷组Ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ３．３７±０．３３Ａｂａ ６．７７±０．４０Ａａ ７．２６±０．６４Ａａ
高脂对照组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ ５．４４±０．３３Ｂｃ ２．３２±０．８９ＡＢｃ ２．５７±０．８７ＡＢｃ
高脂皂苷组 Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ ８．０８±０．５３Ｂｄ ４．３７±０．９１ＡＢｄ ３．４０±０．５１ＡＢｄ
　ＣＹＰ７ａ１：Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ７ａｌｐｈａｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ；ＡＢＣＧ５：ＡＴＰｂｉｎｄｉｎｇｃａｓｓｅｔｔｅｓｕｂｆａｍｉｌｙＧ ｍｅｍｂｅｒ５；ＡＢＣＧ８：ＡＴＰｂｉｎｄｉｎｇｃａｓｓｅｔｔｅｓｕｂｆａｍｉｌｙＧ
ｍｅｍｂｅｒ８．
３　讨论
３．１　苜蓿皂苷对高脂大鼠胆固醇代谢的影响
血脂是血液中所含各类脂质的总称，包括胆固醇（ＣＨ）、甘油三酯（ＴＧ）、磷脂（ＰＬ）和游离脂肪酸（ＦＦＡ）等。
高脂血症是指由于脂肪代谢或运转异常使血浆中一种或多种脂质高于正常的现象。临床上把高脂血症分为以下
三类：一是高胆固醇血症即总胆固醇增高；二是高甘油三酯血症即甘油三酯增高；三是混合型高脂血症即总胆固
醇和甘油三酯均增高。故总胆固醇（ＴＣ）和甘油三酯（ＴＧ）是评定是否得高脂血症的重要指标［１４］。本研究建模
末期高脂模型组大鼠血清总胆固醇和甘油三酯水平均极显著高于正常对照组，说明高脂血症模型建立成功。
高脂血症目前已经被广泛认为是导致动脉粥样硬化等心脑血管疾病形成的一个主要危险因子［１５，１６］。大量
研究表明苜蓿皂苷能够降低血脂水平，具有良好的抗动脉粥样硬化效应［１７，１８］。Ｙｕ等［１９］的研究表明苜蓿皂苷能
够显著降低高脂小鼠血液中总胆固醇，总甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平。Ｍａｌｎｏｗ等［２０］的研究表明苜蓿
皂苷能够降低血清胆固醇的含量而不改变高密度脂蛋白的含量，增加胆汁酸和中性胆固醇的排泄。本试验结果
８９２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．５
表明添加苜蓿皂苷后高脂皂苷组大鼠体重和肝脏系数均显著降低，血清中ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ水平显著降低，粪便中
的胆固醇和胆汁酸的排泄明显增多，降脂效果明显，与前人的研究结果一致。肝脏是胆固醇合成清除的主要器
官，胆固醇在肝脏的聚集有利于胆固醇向胆汁酸的转变，从而加速胆固醇向体外的排泄。本试验添加苜蓿皂苷后
高脂大鼠体内血清总胆固醇含量显著降低，肝脏中胆固醇含量显著升高，表明苜蓿皂苷具有调节高脂大鼠体内胆
固醇分布的功能。但苜蓿皂苷对肝脏中胆固醇胆汁酸含量变化的影响与前人的研究结果并不一致，刘凯和余书
勤［２１］的研究表明添加皂苷后高脂血症大鼠肝脏中胆固醇的含量显著降低而胆汁酸的含量升高。Ｈａｒｗｏｏｄ等［２２］
用单一的人工合成皂苷（ｔｉｑｕｅｓｉｄｅ）研究发现其显著降低肝脏中胆固醇的含量。出现不同的研究结果可能与皂苷
的添加量、种类和形式不同有关。大量研究表明皂苷的来源、化学结构对胆固醇代谢的影响紧密相关［２３］。Ｍａｌｉ
ｎｏｗ等［２４］研究了苜蓿顶部、根部皂苷经过或不经过酸解对大鼠胆固醇代谢的影响，研究表明顶部和根部皂苷对
胆固醇的降低程度不同，而酸解后降低胆固醇作用进一步加强。至于苜蓿皂苷调节机体内胆固醇重新分布的机
理需要做进一步深入的研究。
３．２　苜蓿皂苷对正常大鼠胆固醇代谢的影响
机体内胆固醇的代谢具有复杂的调控机制，高脂和正常情况下胆固醇的代谢和调控存在较大的差异。因此
本试验在研究苜蓿皂苷对高脂血症大鼠胆固醇代谢影响的同时增加了苜蓿皂苷组，既苜蓿皂苷对正常血脂水平
大鼠胆固醇代谢的影响。和正常对照组相比苜蓿皂苷组大鼠血清中的ＴＣ、ＨＤＬ、ＬＤＬ的含量保持稳定，肝脏中
胆固醇含量虽有上升但并无统计学差异，肝脏和粪便中胆汁酸含量的变化并不大，唯独粪便中的胆固醇含量极显
著增加，由于正常饲料中外源性胆固醇含量很低，显然粪便中胆固醇含量的升高是源于内源性胆固醇的分泌。表
明苜蓿皂苷对正常血脂水平大鼠的影响主要是通过增加内源性胆固醇的分泌，而对胆汁酸的代谢几乎没有影响。
机体血液循环中的胆固醇主要来源于２种途径，即体内生物合成和肠道胆固醇的吸收。胆固醇的生物合成和肠
道吸收对维持肝脏的胆固醇储量，以及体内胆固醇来源的稳态平衡都至关重要［２５，２６］。这２种途径之间相互影
响，处于一种代谢平衡状态：当生物合成受到抑制，吸收会增强；反之亦然［２７］。这解释了为何苜蓿皂苷组大鼠粪
便中胆固醇分泌增加，血液和肝脏胆固醇却能维持稳定水平，因为机体通过自身的调节能力加强了体内胆固醇的
合成。
苜蓿皂苷对高脂大鼠的影响主要表现在增加粪便中胆固醇和胆汁酸的分泌，正常血脂水平大鼠则仅仅是增
加了粪便中胆固醇的分泌，表明血脂水平不同苜蓿皂苷对大鼠代谢的影响也不同，因此研究苜蓿皂苷对胆固醇代
谢影响时应考虑血脂水平的差异。另外两者的相同点是粪便中胆固醇的分泌增加，提示增加胆固醇的分泌可作
为研究苜蓿皂苷降低胆固醇代谢机理的切入点。
３．３　苜蓿皂苷对ＣＹＰ７ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ表达量的影响
植物皂苷降低胆固醇的机理方面的研究主要集中在物理化学方面，即皂苷在肠道中和胆固醇结合形成不溶
性的复合物，而分子方面的研究很少且不系统。王先科等［２８，２９］的研究表明苜蓿皂苷降低高脂血症大鼠胆固醇作
用可能是通过抑制ＡＣＡＴ２的转录和表达抑制胆固醇的吸收、升高ＣＹＰ７Ａ１转录和表达量加速胆固醇向胆汁酸
的转变有关。Ｙｕ等［１９］研究了苜蓿皂苷对高脂血症大鼠胆固醇代谢的影响，发现脂蛋白酯酶（ＬＰＬ）、肝脂酶
（ＨＴＧＬ）的活性和ｍＲＮＡ的表达量均显著升高，从而推测苜蓿皂苷降低胆固醇的效应是由肝脏脂蛋白酯酶的活
性升高引起的。本试验研究了苜蓿皂苷对胆固醇清除途径中的关键基因ＣＹＰ７ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８的ｍＲＮＡ表
达的影响，试图从分子水平阐明苜蓿皂苷是如何加速胆固醇排出体外的。
由于哺乳动物组织内缺乏分解固醇核的酶，因而胆固醇不能像其他代谢物那样转变为二氧化碳和水。胆固
醇自体内排出的唯一途径是在肝细胞内转变为胆汁酸，ＣＹＰ７ａ１是胆汁酸合成的限速酶，通常情况下由ＣＹＰ７ａ１
起始的经典途径在胆汁酸合成中占主导地位［３０］。刘凯和余书勤［２１］发现，苜蓿皂苷可以使肝脏胆固醇大量转变
为胆汁酸并推测这种作用可能是由于苜蓿皂苷增强肝细胞内胆固醇ＣＹＰ７ａ１的活性所致。ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８是
胆固醇进入胆汁的关键蛋白。在肝内表达的 ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８分子对胆汁胆固醇的分泌具有决定作用。Ｙｕ
等［３１，３２］研究发现，ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８基因缺陷的小鼠胆汁胆固醇分泌急剧减少。而在ＡＢＣＧ５／Ｇ８转基因鼠明显
存在胆汁胆固醇过饱和。本试验结果显示添加苜蓿皂苷后苜蓿皂苷组和高脂皂苷组大鼠ＣＹＰ７ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢ
９９２第２２卷第５期 草业学报２０１３年
ＣＧ８ｍＲＮＡ表达量均成倍增加，说明苜蓿皂苷通过上调ＣＹＰ７ａ１、ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８的表达增强大鼠体内胆固醇
向胆汁酸的转变、内源性胆固醇的排泄从而加速胆固醇向体外排出。
４　结论
１）苜蓿皂苷显著降低高脂血症大鼠体重、肝脏系数；降低血清中总胆固醇含量，表明苜蓿皂苷能够调节ＳＤ
大鼠体内胆固醇的分布，具有良好的降血脂效应。２）进一步研究表明苜蓿皂苷降胆固醇效应可能与增加
ＣＹＰ７ａ１和ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｍＲＮＡ表达量，加速体内胆固醇、胆汁酸排泄有关。３）大鼠体内的血脂水平影响苜
蓿皂苷对胆固醇代谢，因此研究苜蓿皂苷对胆固醇代谢影响时应考虑血脂水平的差异。
参考文献：
［１］　盛漪，谷文英．植物甾醇调节血脂功能的研究［Ｊ］．食品科技，２００６，３１（９）：２９６２９８．
［２］　ＫｒｉｔｃｈｅｖｓｋｙＳＢ，ＫｒｉｔｃｈｅｖｓｋｙＤ．Ｓｅｒｕｍｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｎｄｃａｎｃｅｒｒｉｓｋ：ａｎｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ［Ｊ］．ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＮｕ
ｔｒｉｔｉｏｎ，１９９２，１２（１）：３９１４１６．
［３］　孟季蒙，李卫军．地下滴灌对苜蓿的生长发育与种子产量的影响［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（１）：２９１２９５．
［４］　罗小勇，孙娟．２３种紫花苜蓿不同品种及器官间化感活性差异的研究［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（２）：８３９１．
［５］　李飞飞，崔大方，羊海军，等．中国新疆紫花苜蓿复合体３个种的遗传多样性及亲缘关系研究［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（１）：
１９０１９８．
［６］　甘智才，玉永雄．紫花苜蓿中的活性物质及其对畜禽的营养作用［Ｊ］．江西饲料，２００９，３：２０２５．
［７］　ＭｌｇａａｒｄＪ，ＶｏｎｓｃｈｅｎｃｋＨ，ＯｌｓｓｏｎＡＧ．ＡｌｆａｌｆａｓｅｅｄｓｌｏｗｅｒｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｎｄａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＢｃｏｎｃｅｎ
ｔｒａｔｉｏｎｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｔｙｐｅＩＩｈｙｐｅｒｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｅｍｉａ［Ｊ］．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，１９８７，６５（１）：１７３１７９．
［８］　ＬｅｖｙＳ．Ｎｅｗｐｒｏｄｕｃｔｎｅｗｓｗｉｒｅ［Ｊ］．ＤｒｕｇＴｏｐｉｃｓ，１９９９，１９：２２２６．
［９］　王彦华．苜蓿皂甙和草粉对断奶仔猪和肥育猪生产性能的影响及其机理研究［Ｄ］．郑州：河南农业大学，２００７．
［１０］　王成章，王彦华，史莹华，等．苜蓿皂苷对断奶仔猪脂质代谢，抗氧化和免疫的影响［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（４）：２１０２１８．
［１１］　侯永刚，陈辉，黄仁录，等．日粮添加苜蓿皂苷时蛋鸡生产性能，鸡蛋胆固醇及常规蛋品质的影响［Ｊ］．中国家禽，２００９，
３１（８）：２０２３．
［１２］　王成章，杨雨鑫，胡喜峰，等．不同苜蓿草粉水平对产蛋鸡蛋黄胆固醇含量影响的研究［Ｊ］．草业学报，２００５，１４（２）：７６８３．
［１３］　张丽娜．苜草素对蛋鸡生产性能及其鸡蛋与组织脂质的影响［Ｄ］．江苏：扬州大学，２０１０．
［１４］　张若曦，苑望，伍晓雄，等．共轭亚油酸对高脂血症大鼠脂质代谢及ｖｉｓｆａｔｉｎ基因表达水平的影响［Ｊ］．中国实验动物学报，
２００９，１７（６）：４５２４５６．
［１５］　ＭａｓｓｂｅｒｇＳ，ＢｒａｎｄＫ，ＧｒｎｅｒＳ，犲狋犪犾．Ａｃｒｉｔｉｃａｌｒｏｌｅｏｆｐｌａｔｅｌｅｔａｄｈｅｓｉｏｎｉｎｔｈｅｉｎｉｔｉａｔｉｏｎｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔｈｅ
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，２００２，１９６（７）：８８７８９６．
［１６］　ＭｏｒｅｎｏＪＪ，ＴｅｒｅｓａＭｉｔｊａｖｉｌａＭ．Ｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｕｎｓａｔｕｒａｔｉｏｎｏｆｄｉｅｔａｒｙｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（ｒｅ
ｖｉｅｗ）［Ｊ］．ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，１４（４）：１８２１９５．
［１７］　ＫｈａｌｅｅｅｌＡＥ，ＧａｄＭＺ，ＥｌＭａｒａｇｈｙＳＡ，犲狋犪犾．Ｓｔｕｄｙｏｆｈｙｐｏｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉｃａｎｄａｎｔｉａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆ犕犲犱犻犮犪犵狅
狊犪狋犻狏犪Ｌ．ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｉｎＥｇｙｐｔ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＡｎａｌｙｓｉｓ，２００５，１３（３）：２１２２１８．
［１８］　ＭａｌｎｏｗＭ，ＭｃｌａｕｇｈｌｉｎＰ，ＫｏｈｌｅｒＧ，犲狋犪犾．Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆｅｌｅｖａｔｅｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａｉｎｍｏｎｋｅｙｓｂｙａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓ［Ｊ］．Ｓｔｅｒ
ｏｉｄｓ，１９７７，２９（１）：１０５１１０．
［１９］　ＹｕＣＨ，ＸｉｅＧ，ＨｅＲＲ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｐｕｒｉｆｉｅｄｓａｐｏｎｉｎｍｉｘｔｕｒｅｆｒｏｍａｌｆａｌｆａｏｎｐｌａｓｍａｌｉｐｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｈｙｐｅｒｌｉｐｉ
ｄｅｍｉｃｍｉｃｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅａｌｔｈＳｃｉｅｎｃｅ，２０１１，５７（５）：４０１４０５．
［２０］　ＭａｌｎｏｗＭ，ＭｃｎｕｌｔｙＷ，ＨｏｕｇｈｔｏｎＤ，犲狋犪犾．Ｌａｃｋｏｆｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｉｎｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓｍａｃａｑｕｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ
ＭｅｄｉｃａｌＰｒｉｍａｔｏｌｏｇｙ，１９８２，１１（２）：１０６．
［２１］　刘凯，余书勤．苜蓿皂甙对胆固醇排泄和内皮细胞释放一氧化氮的影响［Ｊ］．徐州医学院学报，１９９９，１９（６）：４４２４４４．
［２２］　ＨａｒｗｏｏｄＨＪ，ＣｈａｎｄｌｅｒＣＥ，ＰｅｌａｒｉｎＬＤ，犲狋犪犾．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ
ｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｒｅｄｕｃｔｉｏｎｉｎｐｌａｓｍａｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅｓｙｎｔｈｅｔｉｃｓａｐｏｎｉｎｂｅｔａｔｉｇｏｇｅｎｉｎ
ｃｅｌｏｂｉｏｓｉｄｅ（ＣＰ８８８１８；ｔｉｑｕｅｓｉｄｅ）［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＬｉｐｉｄＲｅｓｅａｒｃｈ，１９９３，３４（３）：３７７３９５．
［２３］　ＭａｌｉｎｏｗＭ．Ｓａｐｏｎｉｎｓａｎｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，１９８４，５０（１）：１１７．
００３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１３） Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．５
［２４］　ＭａｌｉｎｏｗＭ，ＭｃｌａｕｇｈｌｉｎＰ，ＰａｐｗｏｒｔｈＬ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｏｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．Ｔｈｅ
ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９７７，３０（１２）：２０６１２０６７．
［２５］　ＢａｙｓＨ，ＤｕｊｏｖｎｅＣ．Ｃｏｌｅｓｅｖｅｌａｍ ＨＣｌ：ａｎｏｎｓｙｓｔｅｍｉｃｌｉｐｉｄａｌｔｅｒｉｎｇｄｒｕｇ［Ｊ］．ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎｉｏｎｏｎＰｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，２００３，
４（５）：７７９７９０．
［２６］　ＴｕｒｌｅｙＳＤ，ＤｉｅｔｓｃｈｙＪＭ．Ｓｔｅｒｏｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｂｙｔｈｅｓｍａｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＬｉｐｉｄｏｌｏｇｙ，２００３，１４（３）：２３３
２４０．
［２７］　ＴｕｒｌｅｙＳＤ，ＤｉｅｔｓｃｈｙＪＭ．Ｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｂｉｌｉａｒｙａｎｄｄｉｅｔａｒｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｓａｄｒｕｇｔａｒｇｅｔｆｏｒｌｏｗｅｒｉｎｇｔｈｅｐｌａｓｍａ
ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｅｖｅｌ［Ｊ］．ＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅＣａｒｄｉｏｌｏｇｙ，２００３，６（１）：２９６４．
［２８］　王先科，史莹华，王成章，等．苜蓿皂甙对高脂血症大鼠胆固醇代谢及肝脏 ＡＣＡＴ２和 ＨＭＧＣｏＡｒ基因表达的影响［Ｊ］．
草业学报，２０１２，２１（３）：２８７２９３．
［２９］　王先科，史莹华，王成章，等．苜蓿皂苷对高脂血症大鼠胆固醇代谢及其相关基因表达的影响［Ｊ］．动物营养学报，２０１２，
２４（５）：９８３９９０．
［３０］　李燕，凌文华．胆固醇和脂肪酸对ＣＹＰ７Ａ１的调节［Ｊ］．国外医学（内科学分册），２００４，３１（１）：１４．
［３１］　ＹｕＬ，ＬｉＨａｗｋｉｎｓＪ，ＨａｍｍｅｒＲＥ，犲狋犪犾．ＯｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡＢＣＧ５ａｎｄＡＢＣＧ８ｐｒｏｍｏｔｅｓｂｉｌｉａｒｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｓｅｃｒｅｔｉｏｎａｎｄ
ｒｅｄｕｃｅｓｆｒａｃｔｉｏｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｄｉｅｔａｒｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，２００２，１１０（５）：６７１６８０．
［３２］　ＹｕＬ，ＨａｍｍｅｒＲＥ，ＬｉＨａｗｋｉｎｓＪ，犲狋犪犾．ＤｉｓｒｕｐｔｉｏｎｏｆＡｂｃｇ５ａｎｄＡｂｃｇ８ｉｎｍｉｃｅｒｅｖｅａｌｓｔｈｅｉｒｃｒｕｃｉａｌｒｏｌｅｉｎｂｉｌｉａｒｙｃｈｏｌｅｓ
ｔｅｒｏｌｓｅｃｒｅｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００２，９９（２５）：１６２３７１６２４２．
犈犳犳犲犮狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪狊犪狆狅狀犻狀狊狅狀犮犺狅犾犲狊狋犲狉狅犾犿犲狋犪犫狅犾犻狊犿犪狀犱犻狋狊犿狅犾犲犮狌犾犪狉犿犲犮犺犪狀犻狊犿狊
ＹＵＡＮＤｅｄｉ，ＳＨＩＹｉｎｇｈｕａ，ＷＡＮＧＣｈｅｎｇｚｈａｎｇ，ＧＵＯＲｕｉ，ＷＡＮＧＪｉｅ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００２，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｏｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｉｔｓｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍ，
３２ｈｅａｌｔｈｙｍａｌｅＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ（ＳＤ）ｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，
ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ，ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌ＋ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｆｉｒｓｔ
ｆｏｕｒｗｅｅｋｓｗｅｒｅｔｈｅｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｐｅｒｉｏｄ：ｒａｔｓｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｉｎｔｈｅ
ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈａｂａｓａｌｄｉｅｔｗｈｉｌｅｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈａｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔ．Ｔｈｅ
ｌａｓｔｆｏｕｒｗｅｅｋｓｗｅｒｅｔｈｅａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｔｒｅａｔｍｅｎｔｐｅｒｉｏｄ，ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓ（２４０ｍｇ／ｋｇ）ｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｔｏ
ｂｏｔｈｔｈｅａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｇｒｏｕｐａｎｄｔｏｔｈｅｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｍｏｄｅｌ＋ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓｇｒｏｕｐｂｙｇａｖａｇｅ．Ｔｈｅｂｏｄｙ
ｗｅｉｇｈｔ，ｌｉｖｅｒｉｎｄｅｘ，ｓｅｒｕｍｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌ，ｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｎｄｔｏｔａｌｂｉｌｅａｃｉｄｓｉｎｌｉｖｅｒａｎｄｆａｅｃｅｓｏｆｔｈｅｒａｔｓｗｅｒｅ
ｍｅａｓｕｒｅｄ．ＴｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＹＰ７ａ１ａｎｄＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ．Ａｌｆａｌｆａ
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ｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｉｎｌｉｖｅｒａｎｄｔｈｅｅｘｃｒｅｔｉｏｎｏｆｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｎｄｂｉｌｅａｃｉｄｓｉｎｆａｅｃｅｓｉｎｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｒａｔｓ
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犓犲狔狑狅狉犱狊：ａｌｆａｌｆａｓａｐｏｎｉｎｓ；ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａ；ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ；ＣＹＰ７ａ１；ＡＢＣＧ５／ＡＢＣＧ８
１０３第２２卷第５期 草业学报２０１３年