全 文 ：书微囊藻毒素（犕犆－犚犚）对白三叶种子萌发
及幼苗生理生化特性影响
薛延丰１，李慧明１，２，易能１，３，李优琴１，石志琦１
（１．江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所，江苏 南京２１００９４；２．南京大学生命科学院，江苏 南京２１００９３；
３．南京农业大学资源与环境资源学院，江苏 南京２１００９５）
摘要：以白三叶种子和幼苗为材料，研究了不同浓度 ＭＣ－ＲＲ对白三叶种子萌发、抗氧化酶活性变化以及 ＭＣ－
ＲＲ在白三叶体内积累规律。结果表明，发芽率和发芽势随着处理浓度的增加而降低，在高浓度处理下，与对照相
比显著降低；株高随着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度增加而显著降低，根长和鲜重在低浓度处理下显著增加，在高浓度处理
下显著降低；抗氧化酶活性的变化不尽相同，ＳＯＤ活性随着处理浓度的增加与对照相比呈先增加后降低而后又增
加的趋势，ＰＯＤ活性随着处理浓度的增加呈先增加后降低的趋势，ＣＡＴ活性的变化趋势不同于ＳＯＤ和ＰＯＤ；单位
鲜重白三叶 ＭＣ－ＲＲ含量随着处理浓度的增加与０．０５ｍｇ／Ｌ处理下的 ＭＣ－ＲＲ含量相比显著增加，而生物富集
系数的变化趋势则与单位鲜重白三叶 ＭＣ－ＲＲ含量相反，随着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加而降低。说明随着 ＭＣ
－ＲＲ处理浓度的增加，白三叶受到的伤害增大。
关键词：藻毒素；白三叶；种子；抗氧化酶
中图分类号：Ｓ５４１＋．２０１；Ｑ９４５．３４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２００９）０６０１８００６
　 淡水富营养化使蓝藻爆发成为一个世界性的问题，工业的快速发展加剧了富营养化现象［１，２］。蓝藻爆发不仅
破坏了水生生态，更为严重的是一些种类蓝藻所产生的微囊藻毒素（ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎｓ，ＭＣｓ），ＭＣｓ是由７个氨基酸
组成的环状多肽化合物，具有６０多种变体，存在最普通、含量较多、毒性较大的以 ＭＣ－ＬＲ、ＭＣ－ＲＲ和 ＭＣ－
ＹＲ为主［３］，是目前发现与乙肝、黄曲霉毒素并列的强致肝癌的三大因子之一。它的产生对动物、甚至人类健康
带来严重危害［４］。１８７８年，Ｆｒａｎｃｉｓ首次报道动物由于饮用含蓝藻的水而死亡的事件以来，ＭＣｓ导致人类和动物
中毒的事件屡有发生。１９９６年，巴西Ｃａｒｕａｒｕ地区某血液透析中心因使用含藻类毒素污染的水作为透析用水，
导致１２６名患者出现急性神经毒性和亚急性肝脏毒性症状，其中至少４３人死亡［５］。Ｈａｍｖａｓ等［６］的研究表明
ＭＣ－ＬＲ能够影响芥菜（犛犻狀犪狆犻狊犪犾犫犪）幼苗侧根的形态发育。ＭＣｓ明显抑制独行菜（犔犲狆犻犱犻狌犿狊犪狋犻狏狌犿）根的生
长［７］。另外，ＭＣｓ也影响植物地上部的生长。例如，ＭＣ－ＬＲ能够使植物叶片失绿并抑制植物地上部的生长，这
可能与 ＭＣ－ＬＲ影响花青素的合成、光合氧的产生以及光合作用有关［８，９］。淹水植物和自然界中存在的水生植
物都能够从外界吸收 ＭＣ－ＬＲ，并累积在茎部［１０］。苦草（犞犪犾犾犻狊狀犲狉犻犪狀犪狋犪狀狊）幼苗根部能够吸收 ＭＣｓ，并将部分
ＭＣｓ转移到地上部；ＭＣｓ在苦草体内的积累量随处理浓度的增加和处理时间的延长而增加。由此可见，ＭＣｓ不
但影响植物的生长，而且能够在植物体内积累，积累的 ＭＣｓ可能对植物造成更为严重的胁迫。而藻毒素通常存
在于藻细胞中，只有其死亡之后才会释放到周围环境中。当施用含有蓝藻的水体进行浇灌时，可能会有大量的藻
毒素释放到土壤中［９］。
白三叶（犜狉犻狅犳犾犻狌犿狉犲狆犲狀狊）为豆科三叶草属多年生牧草，主根短，侧根发达，有根瘤固氮，可大量固定空气中
的氮素，耐践踏［１１］，是优质豆科牧草，茎叶细软，叶量丰富，粗蛋白含量高，粗纤维含量低，既可放养牲畜，又可饲
喂草食性鱼类［１２，１３］，同时是目前世界上许多国家人工草地中重要的豆科牧草［１４］。但有关藻毒素对白三叶生长的
影响及在其体内积累的研究尚未见报道。为使白三叶能更好地服务于人类，本研究以白三叶草为研究对象，以
１８０－１８５
２００９年１２月
　　　草　业　学　报　　　
　　　ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ　　　
第１８卷　第６期
Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．６
 收稿日期：２００９０４３０；改回日期：２００９０５３１
基金项目：９７３预研项目（２００８ＣＢ１１７００１）资助。
作者简介：薛延丰（１９７８），男，河南孟州人，博士。Ｅｍａｉｌ：ｘｕｅｙａｎｆｅｎｇ＠ｊａａｓ．ａｃ．ｃｎ
通讯作者。
ＲＲ为标准对白三叶在不同浓度藻毒素处理下对其种子萌发和幼苗生长及生理代谢进行了初步探索，同时并用
液相色谱／质谱联用法（ＬＣ／ＭＳ法）测定 ＭＣ－ＲＲ在白三叶幼苗体内的积累浓度，以期为含有 ＭＣｓ的水体安全
使用进行评估。
１　材料与方法
１．１　材料和处理
试验材料为白三叶；藻毒素标准样 ＭＣ－ＲＲ购自Ｓｉｇｍａ公司；干藻粉购自中国科学研究院武汉水生生物研
究所，－２０℃冷藏备用。该试验在江苏省农业科学院培苗室进行，时间为２００８年８－１２月。
１．１．１　藻毒素提取和测定　藻毒素粗提液按下列步骤提取：称取０．２ｇ干藻粉加入到８０％甲醇中（×１６管），超
声１ｈ破碎藻细胞，离心去沉淀（１２０００ｒ／ｍｉｎ，１２ｍｉｎ，４℃），旋转蒸发去除甲醇，调节ｐＨ＝２～４并离心（１２０００
ｒ／ｍｉｎ，１２ｍｉｎ，４℃）去除杂质蛋白，过０．２μｍ滤膜，调节ｐＨ＝７．０，１２１℃灭菌１５ｍｉｎ，用蒸馏水定容藻毒素至８０
ｍＬ。将藻毒素粗提液过ＳｅｐＰａｋＣ１８柱。操作步骤如下：５ｍＬ甲醇润洗、５ｍＬ单蒸水润洗、上样、２ｍＬ单蒸水
洗脱、２ｍＬ２０％甲醇洗脱，最后用２ｍＬ７０％甲醇洗脱收集 ＭＣｓ。用ＬＣ／ＭＳ法测定 ＭＣ－ＲＲ含量。液质联用
仪型号：液相ＨＰ１２００，质谱６４１０，ＴｒｉｐｌｅＱｕａｄ。ＬＣ／ＭＳ液质条件参考Ｃｏｎｇ等［１５］的方法。经测定用干藻粉提取
的藻毒素粗提液换算成 ＭＣ－ＲＲ，其浓度为１０ｍｇ／Ｌ。
提取白三叶幼苗体内藻毒素方法如下：称取０．５～１．０ｇ左右整株幼苗，并用蒸馏水洗涤几次以除去表面的
ＭＣｓ，然后用滤纸吸干表面水分，用２ｍＬ８０％ 甲醇研磨后超声破碎，下面步骤参考藻毒素粗提液提取方法进行。
１．１．２　发芽试验与处理　发芽试验方法参考ＧＢ２９３０２００１《牧草种子检验规程》［１６］进行。白三叶种子用０．３％
的Ｈ２Ｏ２ 消毒后，用蒸馏水洗净，然后挑选均一、形态正常的种子置于铺３层滤纸的培养皿（直径１５ｃｍ）中，每皿
１００粒，设置３个重复。ＭＣ－ＲＲ处理浓度分别为：０．０５，０．１０，０．５０，１．００和５．００ｍｇ／Ｌ，以蒸馏水作为对照
（ＣＫ）。发芽后光照时间１２ｈ，温度（１９±１）℃。第１天向各培养皿中加入１５ｍＬ不同浓度的藻毒素和蒸馏水，
使滤纸完全浸湿，每日补充等量蒸发掉的溶液以保持滤纸湿润。处理７ｄ后，将其收获，用于生理生化指标测定。
１．２　测定方法
１．２．１　发芽率、鲜重、干重、株高和根长测定　分别在第４和７天统计发芽种子数并计算发芽率和发芽势。计算
公式如下：发芽率（％）＝（第７天发芽种子粒数／供试种子数）×１００；发芽势（％）＝（第４天发芽种子粒数／供试种
子总数）×１００。试验结束后，每皿随机挑取６棵生长状况较一致的幼苗测量其株高、根长和鲜重，并将每株幼苗
７５℃烘干至恒重，然后测其干重。
１．２．２　抗氧化酶活性测定　酶的提取参照Ｘｕｅ等［１７］的方法，取幼苗根上部分０．５～１．０ｇ，加入５ｍＬ预冷的
０．０５ｍｏｌ／ＬｐＨ＝７．８磷酸缓冲液，在冰浴上研磨成浆，４℃下１００００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，上清液即为酶液。超氧
化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）活性的测定采用氮蓝四唑（ｎｉｔｒｏｂｌｕｅｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＮＢＴ）光化还原法测
定［１８］，以抑制ＮＢＴ光化学还原的５０％为１Ｕ。过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＰＯＤ）活性采用愈创木酚法测定［１９］，过
氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）活性采用过氧化氢法测定［１０］。蛋白质含量采用考马斯亮蓝法［１８］。
１．２．３　幼苗体内藻毒素提取和测定　称取０．５～１．０ｇ左右整株幼苗，并用蒸馏水洗涤４次，以除去表面的ＭＣ，
然后用滤纸吸干表面水分，用２ｍＬ８０％甲醇研磨后超声破碎，下面步骤参考１．１．１进行。生物富集系数
（ｂｉｏｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ，ＢＣＦ）是描述化学物质在生物体内累积趋势的重要指标，以单位鲜重幼苗体内积累的
ＭＣ浓度与 ＭＣ处理浓度之比计算富集系数［２０］。
１．３　统计分析
运用Ｅｘｃｅｌ和ＳＰＳＳ生物统计软件进行相关数据分析。
２　结果与分析
２．１　ＭＣ－ＲＲ对白三叶种子萌发和幼苗生长的影响
白三叶种子在不同浓度 ＭＣ－ＲＲ处理下表现不同（表１）。发芽率和发芽势随着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加
均表现出逐渐降低的趋势，当 ＭＣ－ＲＲ浓度小于１．０ｍｇ／Ｌ时，发芽率和发芽势虽然有所降低但与对照相比差
异不显著，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为１．０和５．０ｍｇ／Ｌ时，发芽率和发芽势分别是对照的９４．５％，９１．０％和９２．５％，
１８１第１８卷第６期 草业学报２００９年
表１　不同浓度 犕犆－犚犚对白三叶发芽率、株高、根长和生物量的影响
犜犪犫犾犲１　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳犕犆－犚犚狅狀犵犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狆犲狉犮犲狀狋犪犵犲，
狊犲犲犱犾犻狀犵犺犲犻犵犺狋，狉狅狅狋犾犲狀犵狋犺犪狀犱犫犻狅犿犪狊狊犻狀犜．狉犲狆犲狀狊
ＭＣ－ＲＲ浓度
ＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＭＣ－ＲＲ
（ｍｇ／Ｌ）
发芽率
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ
（％）
发芽势
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇｖｉａｂｉｌｉｔｙ
（％）
株高
Ｓｈｏｏｔｈｅｉｇｈｔ
（ｃｍ）
根长
Ｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈ
（ｃｍ）
鲜重
Ｆｒｅｓｈｗｅｉｇｈｔ
（ｍｇ）
０ ９６．３３±２．０８ａ ８８．６７±１．５３ａ ０．８６±０．０３ａ ２．０６±０．２０ａｂ ６．５３±０．６６ａ
０．０５ ９４．６７±１．５３ａｂ ８６．００±１．００ａｂ ０．７２±０．０８ｂｃ ２．３９±０．０１ａ ６．２７±０．３１ａ
０．１ ９３．３３±２．３１ａｂ ８６．６７±３．０６ａ ０．７８±０．１５ａｂ ２．４８±０．２６ａ ６．９１±０．１５ａ
０．５ ９３．００±２．６５ａｂ ８４．３３±３．０６ａｂ ０．７０±０．０４ｂｃ １．９８±０．０７ｂ ６．８８±０．８３ａ
１ ９１．００±２．００ｂｃ ８２．００±１．７３ｂｃ ０．６２±０．０２ｃｄ １．３３±０．２０ｃ ５．７１±０．５９ａｂ
５ ８７．６７±２．３１ｃ ７８．６７±３．５１ｃ ０．５４±０．０７ｄ ０．５１±０．１５ｄ ４．６５±１．１３ｂ
　注：同列不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５），下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｍｅａｎｔｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ犘＜０．０５，ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
８８．７％，与对照相比差异显著。株高与对照相比，随
图１　不同浓度 犕犆－犚犚对白三叶幼苗犛犗犇（犃）、
犘犗犇（犅）和犆犃犜（犆）活性的影响
犉犻犵．１　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犕犆－犚犚狅狀狋犺犲犪犫犻犾犻狋狔狅犳犛犗犇（犃），
犘犗犇（犅）犪狀犱犆犃犜（犆）狅犳犜．狉犲狆犲狀狊狊犲犲犱犾犻狀犵狊
着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加而显著降低，当 ＭＣ－
ＲＲ浓度为１．０和５．０ｍｇ／Ｌ时，株高仅为对照的
７２．４％和６２．８％；根长和鲜重的变化趋势与株高不
同，在低浓度处理下根长和鲜重随着处理浓度的增加
而增加，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为０．０５和０．１０ｍｇ／Ｌ时，
根长分别为对照的１．１６和１．２１倍，差异显著，虽然有
所增加但与对照相比差异不显著，在高浓度处理下，根
长和鲜重与对照相比显著降低，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为
５．０ｍｇ／Ｌ 时，根长和鲜重仅为对照的 ２４．９％ 和
７１．３％。
２．２　ＭＣ－ＲＲ对白三叶幼苗体内抗氧化酶活性的影响
ＳＯＤ、ＰＯＤ和ＣＡＴ三种抗氧化酶活性随着 ＭＣ
－ＲＲ处理浓度的增加变化不同（图１）。ＳＯＤ活性
（图１Ａ）随着 ＭＣ－ＲＲ浓度的增加与对照相比呈先增
加后降低而后又增加的趋势，在低浓度（ＭＣ－ＲＲ浓
度为０．０５ｍｇ／Ｌ）处理下，ＳＯＤ活性与对照相比显著增
加，是对照的１．１６倍，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为０．１０ｍｇ／Ｌ
时，ＳＯＤ活性虽然有所增加但与对照相比差异不显
著，随着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加，ＳＯＤ活性与对照
相比显著增加，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为５．０ｍｇ／Ｌ时，
ＳＯＤ活性是对照的１．４０倍；ＰＯＤ活性（图１Ｂ）随着
ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加呈先增加而后降低的趋势，
当 ＭＣ－ＲＲ浓度为０．０５ｍｇ／Ｌ时，ＰＯＤ活性虽然有
所增加但与对照相比差异不显著，随着处理浓度的增
加，ＰＯＤ活性显著增加，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为１．０ｍｇ／Ｌ
时，ＰＯＤ活性是对照的５．３７倍，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为
２８１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２００９） Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．６
５．０ｍｇ／Ｌ时，ＰＯＤ活性虽然有所降低但显著大于对照，是对照的３．７７倍；ＣＡＴ活性（图１Ｃ）随着 ＭＣ－ＲＲ处理
浓度增加的变化趋势不同于ＳＯＤ和ＰＯＤ，在低浓度（ＭＣ－ＲＲ浓度为０．０５ｍｇ／Ｌ）处理下，ＣＡＴ活性与对照相
比显著增加，是对照的１．２７倍，当ＭＣ－ＲＲ浓度为０．１０ｍｇ／Ｌ时，ＣＡＴ活性虽然有所增加但与对照相比差异不
显著，随着ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加，ＣＡＴ活性变化呈先增加后降低的趋势，当ＭＣ－ＲＲ浓度为５．０ｍｇ／Ｌ时，
ＣＡＴ活性是对照的８４．６％，显著降低。
２．３　ＭＣ－ＲＲ在白三叶体内的积累
　　单位鲜重白三叶 ＭＣ－ＲＲ含量随着 ＭＣ－ＲＲ处
理浓度的增加而增加（表２），当 ＭＣ－ＲＲ浓度为０．０５
ｍｇ／Ｌ时，ＭＣ－ＲＲ含量为０．０８２ｍｇ／ｋｇ，随着处理浓
度的增加，单位鲜重白三叶 ＭＣ－ＲＲ含量与０．０５
ｍｇ／Ｌ处理下的 ＭＣ－ＲＲ含量相比显著增加，分别是
０．０５ｍｇ／Ｌ处理下 ＭＣ－ＲＲ含量的１．５４，１．９２，２．３４
和７．１２倍，当在最高浓度５．０ｍｇ／ＬＭＣ－ＲＲ处理
下，白三叶体内 ＭＣ－ＲＲ含量为０．５８２ｍｇ／ｋｇ。而生
物富集系数的变化趋势则与单位鲜重白三叶 ＭＣ－
ＲＲ含量相反，生物富集系数随着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度
的增加而降低，当 ＭＣ－ＲＲ浓度为０．０５ｍｇ／Ｌ时，其
生物富集系数为１．６３，随着处理浓度的增加，生物富
集系数与０．０５ｍｇ／Ｌ处理下的生物富集系数相比显著
表２　犕犆－犚犚在白三叶幼苗体内的含量及生物富集系数
犜犪犫犾犲２　犆狅狀狋犲狀狋犪狀犱犫犻狅犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犳犪犮狋狅狉
狅犳犕犆－犚犚犻狀犜．狉犲狆犲狀狊狊犲犲犱犾犻狀犵狊
ＭＣ－ＲＲ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ
ＭＣ－ＲＲ（ｍｇ／Ｌ）
ＭＣ－ＲＲ含量
ＣｏｎｔｅｎｔｏｆＭＣ－ＲＲ
（ｍｇ／ｋｇＦＷ）
生物富集系数
Ｂｉｏｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｆａｃｔｏｒ（ＢＦＣ）
０ ０ ０
０．０５ ０．０８２±０．０２５ｅ １．６３±０．５１ａ
０．１０ ０．１２６±０．０１７ｄ １．２６±０．１７ｂ
０．５０ ０．１５７±０．０２３ｃ ０．３１±０．０５ｃ
１．０ ０．１９６±０．０５６ｂ ０．２０±０．０６ｄ
５．０ ０．５８２±０．１４５ａ ０．１２±０．０３ｅ
降低，分别是０．０５ｍｇ／Ｌ处理下ＭＣ－ＲＲ含量的７７．２％，１９．３％，１２．０％和７．１％，当在最高浓度５．０ｍｇ／ＬＭＣ
－ＲＲ处理下，白三叶的富集系数为０．１２。这说明富集系数与单位鲜重的含量并不成正相关，不随着处理浓度的
增加而增加。
３　讨论
种子萌发是植物生命开始的重要事件，也是植物最早接受环境胁迫的阶段。本试验结果表明，发芽率和发芽
势随着 ＭＣ－ＲＲ处理浓度的增加均表现出逐渐降低的趋势（表１），在高浓度处理条件下，与对照相比均显著降
低。种子萌发后，幼苗处在含藻毒素的培养液中，株高、根长和鲜重受到不同程度的影响，Ｐｆｌｕｇｍａｃｈｅｒ［８］研究表
明 ＭＣ抑制植物生长和光合氧的产生，使叶片失绿。Ｇｅｈｒｉｎｇｅｒ等［７］研究发现，用１μｇ／ｍＬ的 ＭＣ处理独行菜明
显抑制根的生长，用１０μｇ／ｍＬ的 ＭＣ处理时，整个植株的生长受到抑制。本试验发现，株高随着 ＭＣ－ＲＲ处理
浓度的增加而显著降低；根长和鲜重在低浓度处理下随着处理浓度的增加而增加，在高浓度处理下，与对照相比
显著降低。
在正常情况下，植物体内ＳＯＤ、ＰＯＤ和ＣＡＴ等清除活性氧的酶类活性较强，可及时清除植物受环境胁迫时
产生的过量活性氧，从而使活性氧的产生和清除保持一种动态平衡［２１，２２］。当植物遭受环境胁迫时，可通过 Ｍｅ
ｈｌｅｒ反应产生大量活性氧。活性氧可使酶失活，膜脂被氧化，核酸缺失，甚至引起突变。ＳＯＤ的功能是将超氧阴
离子自由基Ｏ２·－歧化为Ｈ２Ｏ２，ＰＯＤ和ＣＡＴ能够进一步把 Ｈ２Ｏ２ 降解成无毒的 Ｈ２Ｏ和Ｏ２［２３，２４］。同时发现当
植物体遭受 ＭＣ－ＲＲ胁迫时，其细胞内活性氧含量的改变而引起抗氧化酶活性的改变［２５］。本研究结果显示，３
种抗氧化酶活性随着处理 ＭＣ－ＲＲ浓度的改变而改变。白三叶幼苗体内ＳＯＤ和ＣＡＴ活性在低浓度 ＭＣ－ＲＲ
处理下活性增加，随着处理浓度的增加ＳＯＤ活性呈先降低而后增加，ＣＡＴ活性先降低后增加而后降低，ＰＯＤ活
性随着处理浓度的增加呈先增加后降低的趋势。这与Ｃｈｅｎ等［２６］的报道相似。这些发现一方面说明了藻毒素除
了毒素成分之外，还可以引起氧化胁迫，同时也阐明了氧化胁迫所造成的有害影响。
藻毒素在富营养化水体中的成分较为复杂，已发现的异构体多达６０多种，其中存在较多、毒性较大的是
－ＬＲ、－ＲＲ和－ＹＲ［３］。Ｐｆｌｕｇｍａｃｈｅｒ等［２７］和Ｙｉｎ等［１０］研究发现，当外部藻毒素浓度为０．５μｇ／ｍＬ时，淹水植
物和自然界中存在的水生植物能够从外界吸收 ＭＣ，累积在茎部，且积累量随处理浓度的增加和处理时间的延长
３８１第１８卷第６期 草业学报２００９年
而增加。本研究以 ＭＣ－ＲＲ为标准对白三叶进行了研究，结果显示，ＭＣ－ＲＲ可被白三叶幼苗吸收和积累，且
随着 ＭＣ处理浓度增加，单位鲜重白三叶体内 ＭＣ－ＲＲ含量显著增加，但是ＢＣＦ随着处理浓度的增加而显著降
低。这说明了白三叶由于能够吸收 ＭＣ－ＲＲ，从而导致了生长受到抑制［２１］。同时说明了藻毒素对植物的毒害作
用可能与其在植物体内的积累有关，如果藻毒素被可食性植物吸收对动物和人类的健康存在着潜在的威胁。
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４８１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２００９） Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．６
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ｏｆｒａｐｅ（犅狉犪狊狊犻犮犪狀犪狆狌狊Ｌ．）ａｎｄｒｉｃｅ（犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪Ｌ．）［Ｊ］．Ｔｏｘｉｃｏｎ，２００４，４３：３９３４００．
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犈犳犳犲犮狋狊狅犳犕犆－犚犚狅狀狋犺犲狊犲犲犱犵犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳狆犺狔狊犻狅犾狅犵狔
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ａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｓｅｅｄａｎｄｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆ犜狉犻犳狅犾犻狌犿狉犲狆犲狀狊ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｖａｒｉｏｕｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＭＣ－ＲＲ．
ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＭＣ－ＲＲｏｎｔｈｅｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｅｎｚｙｍｅｓａｎｄｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＭＣ－
ＲＲａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎ犜．狉犲狆犲狀狊ｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ
ａｎｄｔｈｅｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇｖｉａｂｉｌｉｔｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆＭＣ－ＲＲｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｗｈｅｎａｔｔｈｅｈｉｇｈｅｒｃｏｎ
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｐｅｒｃｅｎｔａｇｅａｎｄｔｈｅｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇｖｉａｂｉｌｉｔｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅ
ｃｏｎｔｒｏｌ．ＳｈｏｏｔｈｅｉｇｈｔｍａｒｋｅｄｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒｉｓｉｎｇｏｆＭＣ－ＲＲｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈａｎｄｆｒｅｓｈ
ｗｅｉｇｈｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｕｎｄｅｒｔｈｅｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｗｈｅｒｅａｓｔｈｅｙｍａｒｋｅｄｌｙｒｅｄｕｃｅｄａｔｔｈｅｈｉｇｈｅｒｃｏｎ
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｅｎｚｙｍｅｓｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅａｃｈｏｔｈｅｒ．ＳＯＤａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈｅｔｒｅｎｄｏｆ
ｉｎｃｒｅａｓｅ－ｄｅｃｒｅａｓｅ－ｉｎｃｒｅａｓｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ．ＰＯＤａｃｔｉｖｉｔｙｉｌｕｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｉｔｉｎｃｒｅａｓｅｄｆｉｒｓｔｌｙａｎｄ
ｔｈｅｎｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｔｒｅｎｄｏｆＣＡＴａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍＳＯＤａｎｄＰＯＤ．ＴｈｅＭＣ－ＲＲｃｏｎｔｅｎｔ
ｏｆ犜．狉犲狆犲狀狊ｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｔｒｅａｔｉｎｇｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ０．０５ｍｇ／Ｌ，ｗｈｅｒｅａｓ
ｂｉｏｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ（ＢＣＦ）ｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ａｌｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｅｅｄａｎｄｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆ犜．狉犲狆犲狀狊
ｗｏｕｌｄｂｅｄａｍａｇｅｄｓｅｒｉｏｕｓｌｙｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆＭＣ－ＲＲｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ＭＣ－ＲＲ；犜狉犻犳狅犾犻狌犿狉犲狆犲狀狊；ｓｅｅｄ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｅｎｚｙｍｅ
５８１第１８卷第６期 草业学报２００９年