全 文 ：　　收稿日期: 1999208217
　　基金项目: 1994～ 1999 年原林业部科技开发资助项目
作者简介: 汪来发 (19642) , 男, 安徽望江人, 副研究员, 博士.
　林业科学研究　2001, 14 (5) : 484～ 489
　F orest R esearch
　　文章编号: 100121498 (2001) 0520484206
华东地区根结线虫的调查
汪来发1, 杨宝君1, 李传道2
(1. 中国林业科学研究院 森林生态环境与保护研究所, 北京　100091; 2. 南京林业大学, 江苏 南京　210037)
摘要: 通过对华东地区 6 个省 104 个样本根结线虫区系调查, 应用会阴花纹技术和酯酶同工酶技
术将 65 种植物上的根结线虫鉴定为南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫。南方根结线虫
是华东地区的优势种群, 3 种线虫所占比例分别为 88%、4% 和 8%。同时增补了该地区 26 种根结
线虫寄主国内新记录。本文的研究结果为华东地区制定根结线虫防治规划提供了依据。
关键词: 南方根结线虫; 花生根结线虫; 爪哇根结线虫
中图分类号: S43214　　　　文献标识码: A
植物根结线虫 (M eloid ogy ne spp. ) 是植物病原线虫中种类最多, 分布最广, 危害最严重的
一类线虫。华东地区的部分地方根结线虫种类鉴定已有一些报道[1～ 5 ], 但都存在取样少的问
题, 从而缺乏对该地区根结线虫的系统研究, 也未见对该地区根结线虫种群的研究分析。本文
对该地区的 65 种植物 104 份根结线虫标本进行了鉴定, 并对根结线虫进行了种群分析, 为该
地区的根结线虫防治及检疫提供科学依据。
1　材料与方法
111　标本的采集
1997 年 5～ 6 月在福建、浙江、江苏, 9～ 10 月在山东、安徽、江西分别采集样品。以孙时宜
等[5 ]所述方法确定受害程度。受害程度分 4 个等级: 0: 健康; + : 根结很少; + + : 根结很多;
+ + + : 根系严重受害甚至坏死。样品用塑料袋密封, 低温保藏。单卵块接种于番茄 (L y cop er2
sion escu len tum M ill. ) , 温室内培养 50 d, 培养的雌成虫供以下试验使用。
112　会阴花纹的制作
在体视显微镜下挑取雌成虫, 放在 45% 的乳酸中, 切下会阴花纹的表皮, 制片观察。
113　酯酶电泳试验
酯酶浸提液的配制: 质量浓度为 200 g·L - 1的蔗糖 (或甘油) 溶液, 2% T riton X2100, 定容
至 100 mL。制样: 雌虫 1～ 4 条移入微型研磨管, 加一小滴浸提液 (4 ℃) , 研磨至匀浆, 再加浸
提液, 使样液约 10～ 15 ΛL。再移入毛细离心管, 置- 15 ℃下待用。离心: 电泳前, 将所制样品
于 3 000 r·m in - 1下离心 15 m in (4 ℃) , 取其中层清液作为电泳样品。电泳: 凝胶厚约 1 mm ,
分离胶、浓缩胶浓度分别为 7%、3%。电泳初期 015 h, 电压为 80 V , 随后调至 200～ 300 V。电
泳于 4 ℃下进行, 电泳毕, 于 37 ℃下染色约 1 h, 染色后的凝胶保存于 7% 的乙酸溶液中。染色
液的配制: 先后将 ED TA 30 m g、坚牢蓝RR 60 m g 溶于 100 mL、pH 712 的磷酸缓冲液中, 再
将 40 m g Α2醋酸萘酯溶于 2 mL 丙酮中, 逐滴加入到缓冲液中, 并同时搅拌, 然后将染液过滤,
除去不溶物。染液在用前 015 h 时配制。每次电泳时均加入来自北京植物园牡丹上的北方根结
线虫的样品作为内部对照。相对迁移率 (R f ) = 固定染色后凝胶酶蛋白区带的迁移距离ö固定
染色前凝胶中指示剂的迁移距离。
2　调查结果
211　危害的寄主
华东地区受根结线虫危害的植物种类达 65 种, 其中 26 种寄主植物为国内根结线虫危害
的寄主新记录, 它们受根结线虫危害的程度也有所不同 (见表 1)。根结线虫的寄主范围宽, 在
华东地区受根结线虫危害的植物有农作物、林木、花卉、蔬菜、中草药和杂草等。线虫既可生活
在土壤中, 也可生活在种植材料中 (移栽材料、块茎和球茎) 或活植物的根中, 因此防治根结线
虫时首先要选择无病苗床育苗和选用无病苗; 其次是轮作和选用抗病品种; 要清除有病田间的
杂草以防影响轮作效果; 用物理方法和生物防治方法也是防治根结线虫的有效途径。
表 1　根结线虫样本及酯酶谱
种　　名 采集地 寄主植物 　　　　寄主植物学名 受害程度 酯酶谱带
花生根结线虫 济南 一串红 S a lv ia sp lend ens Ker. 2Gaw l + + + A 3
花生根结线虫 济南 鸡冠花 Celosia sp. + + + A 3
花生根结线虫 连云港 仙客来 Cy clam en p ersicum M ill. + A 1
花生根结线虫 南京 合　欢 A lbiz la ju librissin D urazz. + A 2
爪哇根结线虫 合肥 南　瓜 Cucu rbita m oscha ta (D uch. ex
L am . ) D uch. ex Po iret
+ + + J 1
爪哇根结线虫 泰安 花　生 A rach ia hyp og aea L inn. + J 1
爪哇根结线虫 杭州 异色猕猴桃 A ctin id ia ca llosa L indl var. + + + J 1
d iscolor C. F. L iang
爪哇根结线虫 厦门 桂　花3 O sm an thus f rag rans L our. + + J 1
爪哇根结线虫 厦门 鬼针草3 B id ens bip inna ta L. + J 1
爪哇根结线虫 厦门 龙　葵 S olanum n ig rum L. + + + J 1
爪哇根结线虫 厦门 一串红 S a lv ia sp lend ens Ker. 2Gaw l + J 1
爪哇根结线虫 厦门 牛　膝 A chy ran thes asp era L. + + + J 1
南方根结线虫 福州 烟　草 N icotiana tabacum L. + + I1
南方根结线虫 福州 绿　豆 P haseolus rad ia tus L inn. + I1
南方根结线虫 福州 豇　豆 V ig na sinensis (L inn . ) Savi + I1
南方根结线虫 福州 茄　子 S olanum m elong ena L. + I1
南方根结线虫 南安 杨　梅 M y rica rubra (L our. ) Siet. et Zucc. + + I1
南方根结线虫 海沧 辣　椒 Cap sicum annuum L. + + + I1
南方根结线虫 海沧 空心菜 Ip om oea aqua tica Fo rsk. + + + I1
南方根结线虫 海沧 黄　瓜 Cucum is sa tivus L inn. + + + I1
南方根结线虫 厦门 菊　花3 D end ran them a m orif olium T zvel. + + I1
南方根结线虫 福州 香　蕉 M usa p arad isiaca L. + I1
南方根结线虫 杭州 番茄 L y cop ersion escu len tum M ill. + + I1
南方根结线虫 杭州 小叶黄杨 B ux us sin ica (Rehd. et W ils. ) + + + I1
M. Cheng
南方根结线虫 杭州 重瓣红石榴3 P sid ium ca ttleianum Sab ine + + I1
南方根结线虫 杭州 柳叶牛膝 A chy ran thes long if olia (M ak ino ) M ak ino + I1
南方根结线虫 杭州 凤仙花 Imp a tiens ba lsam ina L. + I1
南方根结线虫 杭州 绞股兰3 Gy nostemm a p enap hy llum (T hunb. ) M ak ino + + + I1
南方根结线虫 杭州 薄　荷 M entha arvensis L inn. + I1
584　第 5 期　　　　　　　　　　　汪来发等: 华东地区根结线虫的调查
(续表 1)
种　　名 采集地 寄主植物 　　　　寄主植物学名 受害程度 酯酶谱带
南方根结线虫 杭州 京大戟3 E up horh ia p ek inensis Rup r. + + I1
南方根结线虫 杭州 剪夏罗3 L y chn is corona ta T hunb. + I1
南方根结线虫 杭州 九头狮子3 P eristrop he jap on ica (T hunb. ) B rem ek . + I1
南方根结线虫 杭州 龙须藤3 B auh in ia champ ion ii (Ben th . ) Ben th. + I1
南方根结线虫 杭州 番　茄 L y cop ersion escu len tum M ill. + + I1
南方根结线虫 杭州 金丝桃3 H yp eriecum and rosaem um L inn + I1
南方根结线虫 杭州 苦　参3 S op hora f lavescens A it. + I1
南方根结线虫 杭州 栀子花3 Gard en ia jasm inoid es E llis. + I1
南方根结线虫 杭州 长萼半夏3 E laeag nus m u ltif lora T hunb. var. sip honan tha + I1
(N akai ) C . Y. Chang
南方根结线虫 杭州 肉根马蓝3 S trobilan thes sp. + I1
南方根结线虫 杭州 芍　药 P aeon ia lactif lora Pall. + + + I1
南方根结线虫 杭州 射　干3 B elam cand a ch inensis (L . ) DC. + I1
南方根结线虫 福州 苦　瓜 M om ord ica charan tia L. + + + I1
南方根结线虫 杭州 紫花乾葛3 P ueraria tonk inensis Gagn. + + + I1
南方根结线虫 南京 茶　树 Cam ellia sinensis O . Ktze. + I1
南方根结线虫 连云港 小叶黄杨 B ux us sin ica (Rehd. et W ils. ) M . Cheng + + + I1
南方根结线虫 南京 小叶黄杨 B ux us sin ica (Rehd. et W ils. ) M. Cheng + + + I1
南方根结线虫 南京 马褂木 L iriod end ron ch inensis (H em sl. ) Sarg. + I1
南方根结线虫 南京 楸　树 Cata lp a bung ei C . M . M ey. + + + I1
南方根结线虫 南京 无花果 F icus carica L. + + + I1
南方根结线虫 江宁 小叶黄杨 B ux us sin ica (Rehd . et W ils. )M. Cheng + + + I1
南方根结线虫 南京 柳　树 S a lix sp. + I1
南方根结线虫 南京 龙　葵 S olanum n ig rum L. + + + I1
南方根结线虫 连云港 楸　树 Cata lp a bung ei C. M. M ey. + + + I1
南方根结线虫 连云港 梓　树 Cata lp a ova ta Don + + + I1
南方根结线虫 江宁 无花果 F icus carica L. + + + I1
南方根结线虫 江宁 猕猴桃 A ctin id ia ch inenses P lanch. + + + I1
南方根结线虫 江宁 革命草3 A lternan thera p h ilox eroid es (M art . ) Griseb + I1
南方根结线虫 江宁 小叶栀子花3 Gard en ia stenop hy lla M err. + + I1
南方根结线虫 江宁 桂　花3 O sm an thus f rag rans L our. + I1
南方根结线虫 江宁 马褂木 L iriod eneron ch inensis (H em sl. ) Sarg. + I1
南方根结线虫 江宁 葡　萄 V itis v in if era L. + + + I1
南方根结线虫 江宁 一串红 S a lv ia sp lend ens Ker. 2Gaw l + + I1
南方根结线虫 江宁 楸　树 Cata lp a bung ei C . M . M ey. + + + I1
南方根结线虫 南昌 丝　瓜 L uf f a cy lind rica (L . ) Roem. + + + I1
南方根结线虫 南昌 苦　瓜 M om ord ica charan tia L. + + + I1
南方根结线虫 南昌 豇　豆 V ig na sinensis (L inn . ) Savi + I1
南方根结线虫 南昌 茄子 S olanum m elong ena L. + + + I1
南方根结线虫 济南 小叶黄杨 B ux us sin ica (Rehd. et W ils. ) M. Cheng + + + I1
南方根结线虫 济南 桑 M orus a lba L. + I1
南方根结线虫 济南 石榴3 P sid ium g uajava L. + I1
南方根结线虫 济南 南　瓜 Cucu rbita m oscha ta (D uch. ex L am . ) + + + I1
D uch. ex Po iret
南方根结线虫 泰安 猕猴桃 A ctin id ia ch inenses P lanch. + + + I1
南方根结线虫 泰安 辣　椒 Cap sicum annuum L. + + I1
南方根结线虫 泰安 朝　颜3 P harbitis sp. + + I1
南方根结线虫 泰安 丝　瓜 L uf f a cy lind rica (L . ) Roem. + I1
南方根结线虫 泰安 野苋菜3 A m aran thus liv id us L. + + + I1
南方根结线虫 泰安 番　茄 L y cop ersicon escu len tum M ill. + + I1
南方根结线虫 泰安 葡　萄 V itis v in if era L. + + + I1
684 林 业 科 学 研 究　　　　　　　　　　　　　　第 14 卷　
(续表 1)
种　　名 采集地 寄主植物 　　　　寄主植物学名 受害程度 酯酶谱带
南方根结线虫 临沂 烟　草 N icotiana tabacum L. + + + I1
南方根结线虫 淄博 地　瓜 Ip om oea ba ta tas (L . ) L am. + + + I1
南方根结线虫 和县 柿　树3 D iospy ros kak i L. f + I1
南方根结线虫 和县 芹　菜 A p ium g raveolens L. + + + I1
南方根结线虫 和县 香　瓜3 Cucum is m elo L. + + + I1
南方根结线虫 合肥 龙　葵 S olanum n ig rum L. + I1
南方根结线虫 合肥 冬　瓜 B en incasa h isp id a (T hunb . ) Cogn. + + + I1
南方根结线虫 合肥 苋　菜3 A m aran thus tricolor L. + I1
南方根结线虫 合肥 茄　子 S olanum m elang ena L. + + + I1
南方根结线虫 合肥 桑 M orus a lba L. + I1
南方根结线虫 合肥 石　榴 P sid ium g uajava L. + + I1
南方根结线虫 合肥 空心菜 Ip om oea aqua tica Fo rsk. + + I1
南方根结线虫 合肥 棉　花 Gossyp ium sp. + I1
南方根结线虫 合肥 苋　菜3 A m aran thus tricolor L. + I1
南方根结线虫 合肥 革命草3 A lternan thera p h ilox eroid es (M art. ) Griseb + I1
南方根结线虫 合肥 葡　萄 V itis v in if era L. + + I1
南方根结线虫 合肥 小叶黄杨 B ux us sin ica (Rehd. et W ils. ) M. Cheng + + + I1
南方根结线虫 合肥 丝　瓜 L uf f a cy lind rica (L . ) Roem. + + + I1
南方根结线虫 合肥 番　茄 L y cop ersion escu len tum M ill. + + + I1
南方根结线虫 合肥 栀子花 Gard en ia jasm inoid es E llis. + + I1
南方根结线虫 合肥 桂　花3 O sm an thus f rag rans L our. + I1
南方根结线虫 合肥市郊 丝　瓜 L uf f a cy lind rica (L . ) Roem. + I1
南方根结线虫 合肥市郊 茄　子 S olanum m elang ena L. + + + I1
南方根结线虫 合肥市郊 鸡冠花 Celosia crista ta L. + + + I1
南方根结线虫 合肥市郊 木耳菜3 B asella rubra L. + + + I1
南方根结线虫 合肥市郊 无花果 F icus carica L. + + + I1
　　注: 3 示根结线虫寄主新记录。
212　根结线虫种类鉴定
根据根结线虫的会阴花纹与酯酶谱综合比较, 鉴定出 104 份样本中 3 种常见的根结线虫
是:
(1) 南方根结线虫[ M eloid ogy ne incog n ita (Kofo id etW h ite) Ch itw ood ], 是优势种群, 占
鉴定标本总数的 88%。
(2) 花生根结线虫[M . a rena ria (N eal) Ch itw ood ], 占鉴定标本总数的 4%。
(3) 爪哇根结线虫[ M . javan ica (T reub) Ch itw ood ], 占鉴定标本总数的 8%。
213　雌虫会阴花纹
根结线虫种的分类的主要依据是根结线虫雌虫的会阴花纹, 这 3 个种的会阴花纹 (图 1)
特征如下:
南方根结线虫: 会阴花纹具有一明显高的背弓, 由平滑到波浪形的线纹组成, 一些线纹在
侧面分叉, 但无明显的侧线, 此为南方根结线虫的典型特征, 有些变异群体, 其背弓圆而扁平,
由波浪形线纹组成。
花生根结线虫: 会阴花纹背弓扁平到圆形, 弓上的线纹在侧线处分叉, 并通常于弓上形成
肩状突起, 背面和腹面的线纹通常在侧线处相遇, 而成一角度, 近侧线处形成的一些线纹分叉,
784　第 5 期　　　　　　　　　　　汪来发等: 华东地区根结线虫的调查
图 1　3 种根结线虫的会阴花纹
短且不规则。线纹平滑到波纹状, 其中一些可能弯向阴门, 也有一些会阴花纹向侧面延伸形成
一至两个翼的线纹。有些种群会阴花纹发生变异与南方根结线虫的相似, 背弓高而方, 且无肩
状突起。
爪哇根结线虫: 会阴花纹具有一个圆而扁平的背弓, 有可将花纹分成前区和腹区的明显侧
线。无线纹通过侧线, 一些线纹弯向阴门。
214　生物化学方法 (酯酶电泳)鉴定
将内部对照的北方根结线虫的唯一迁移率定为
0150, 3 种根结线虫的酯酶谱带类型及迁移率 (图 2)
如下:
南方根结线虫酯酶谱带类型为 I1, R f 为 0147。
花生根结线虫酯酶谱带类型为A 1、A 2、A 3, A 1
的 R f 值为 0154, A 2 的 R f 值分别为 0154、0157, A 3
的谱带R f 值为 0150、0154、0157。
爪哇根结线虫酯酶谱带类型为 J 1, R f 值分别为 图 2　根结线虫酯酶图谱
0147、0155、0159。
根结线虫的酯酶谱带明显、稳定, 可作为根结线虫种类鉴定依据。
3　讨　论
(1) 根结线虫在世界上 35°S 和 35°N 之间的广大地区广泛危害多种寄主植物。其中适于
在温暖地区维持生存、常见的根结线虫有爪哇根结线虫、南方根结线虫和花生根结线虫。在
35°N 以北地区最常见的根结线虫是北方根结线虫[8, 9 ]。但本次调查的地点中济南、泰安和临
沂在 35°N 以北仍未发现北方根结线虫, 可能与调查样点较少有关。本次调查表明在华东地区
南方根结线虫为优势种群, 今后在选用抗病品种时应考虑这一点。
(2)本次调查常见的 3 种根结线虫作为鉴定依据的会阴花纹特征存在一定程度的变异, 如
果仅凭此鉴定可导致鉴定结果的错误。自D ick son 等[10 ]第一次将电泳技术用于鉴定根结线虫
以后,D alm asso 等和 E sben shade [11, 6 ]也做了类似的工作, 国内胡凯基[7 ]也证明酯酶在常见的 4
884 林 业 科 学 研 究　　　　　　　　　　　　　　第 14 卷　
种根结线虫分类上的应用价值, 本次试验花生根结线虫出现 3 个谱带, 也与以前的研究相一
致[6, 7 ]。根据在电泳分析中常存在酶带迁移等变化的问题, 用已知种作内部对照, 提高不同电泳
间、不同研究者的电泳结果可比性, 从而较简便、准确地鉴定根结线虫常见种。
参考文献:
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Investiga tion of Root-knot Nematodes in East Ch ina
W A N G L ai2f a1, YA N G B ao2jun1, L I Chuan2d ao2
(1. Research Institu te of Fo rest Eco logy, Environm ent and P ro tection, CA F, Beijing　100091, Ch ina;
2. N an jing Fo restry U niversity, N an jing　210037, J iangsu, Ch ina)
Abstract: T he fauna of the roo t2kno t nem atodes w as invest igated from 104 samp les in six
p rovinces of East Ch ina. T he roo t2kno t nem atodes on 65 species of ho st p lan ts w ere ident ified as
M eloid ogy ne incog nita , M . arenaria and M . javanica by the perineal pat terns and the esterase
isozym es. T he occurrence frequencies of them w ere 88% , 4% and 8% , respect ively. M . incog nita
w as the mo st common species. 26 of the 65 ho st p lan ts w ere reco rded fo r the first t im e in Ch ina.
T he resu lts of invest igat ion can be used as reference to wo rk out a contro l schem e of the roo t2kno t
nem atodes in th is region.
Key words: M eloid ogy ne incog nita; M eloid ogy ne arenaria; M eloid ogy ne javanica
984　第 5 期　　　　　　　　　　　汪来发等: 华东地区根结线虫的调查