全 文 ：⒇文章编号: 1008 3464 ( 2006) 02 0136 04
白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫生长发育的影响
陆秀红 1, 2 , 刘志明 1 , 黄金玲 2 , 刘纪霜 2
( 1　广西农业科学院 植物保护研究所 , 广西 南宁 530007; 2　广西大学 农学院 , 广西 南宁 530005)
摘要: 研究了白花曼陀罗 (Datura metel Linn. )叶提取物对南方根结线虫 (Meloidogyne incognita Chit-
wood. )生长发育的影响。结果表明 , 白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚胎发育和胚后发育有抑制作用。
1%白花曼陀罗叶提取物处理 48 h, 仅有 19. 88%的卵完成胚胎发育 , 且变异卵增多 ; 胚后发育历程、 初侵染、
初产卵日分别推迟 2、 4、 6 d, 雌虫产卵量降低。
关键词: 白花曼陀罗 ; 叶提取物 ; 南方根结线虫 ; 胚胎发育 ; 胚后发育
中图分类号: S432. 45　　　文献标识码: A
Effect of extracts from leaf of Datura metel Linn.
on development of Meloidogyne incognita
LU Xiu-hong
1 , 2
, L IU Zhi-ming
1
, HU ANG Jin-ling
2
, L IU Ji-shuang
2
( 1　 Institute o f Plant Pr otection, Guangxi Academy of Ag ricultural Sciences, Nanning 530007, China;
2　 Co lleg e of Ag riculture, Guangxi Univ ersity, Nanning 530005, China )
Abstract: Effect of the ex t ract f rom the leaf of Datura metel Linn. on development of Meloidogyne
incognita Chi tw ood. w as studied. The resul ts show ed tha t ex tract could significant ly inhibi t embryonic
and po st-embryonic development of nematode. With 1% (W /V ) of ex t ract to t reat fo r 48 h , only
19. 88% egg s had completed thei r embryonic development and the abnormal eggs increased; The post-
embryonic development , juv enile penet ration, female reproduction were delayed 2, 4, 6 days, respectiv e-
ly , and the amount of egg s of female reduced.
Key words: Datura metel Linn. ; ex t ract o f leaf; Meloidogyne incognita Chitw ood. ; embryonic de-
velopment; post-embryonic development
白花曼陀罗 (Datura metel Linn. )是历史悠久的中草药及杀虫植物 [1 ]。 1987年 , Goswami等 [ 2]首
次报道白花曼陀罗具有杀线活性 , 但关于其提取物对线虫生长发育的影响迄今未见系统报道。 本文开
展了白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫生长发育影响的研究 , 为今后进一步利用白花曼陀罗提取物
防治南方根结线虫 , 以其活性物质为模板进行人工合成高效植物源杀线剂等研究提供理论依据。
1　材料与方法
1. 1　供试线虫
供试南方根结线虫为笔者 2003年在南宁市郊区采集 , 经分离鉴定为南方根结线虫 (Meloidogyne
第 25卷　第 2期
Vol. 25, No . 2
广 西 农 业 生 物 科 学
Journal o f Guangx i Ag ric. and Bio l. Science
2006年 6月　
June, 2006　
⒇ 收稿日期: 2005 09 02; 　　　修回日期: 2005 12 01。
基金项目: 广西 “十五” 攻关重点项目 (桂科攻 0322003A) ; 广西农科院科技发展基金项目 ( 2003001)。
作者简介: 陆秀红 ( 1979 ) ,女 (壮族 ) ,广西大新人 ,广西农业科学院实习研究员 ,硕士 ; E-mail: lu8348@ 126. com。
通讯作者: 刘志明 , 研究员 ; Email: liu0172@ 126. com。
incognita Chi tw ood) , 接种在广西大学农学院教学科研示范基地实验室网室内种植的番茄苗上繁殖备
用。
1. 2　供试白花曼陀罗叶采集及其提取物的制备
白花曼陀罗叶采自广西药用植物园内 , 为野生种。
将收集到的白花曼陀罗叶经烘干 ( 50°C, 48 h)粉碎 , 称取 1. 0 g叶粉溶于 10 mL清水中 , 24 h后
过滤提取液 , 并用清水定容至 10 mL; 量取 5 mL提取液 , 蒸去清水 , 对所得干物质称重 , 参照阎钟坤
等方法 [3 ]计算植物物质提取率 , 其余 5 mL提取液供试验用。
1. 3　白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚胎发育的影响试验
将南方根结线虫病病根冲洗干净 , 在解剖镜下挑取卵囊 , 用 1%次氯酸钠溶液消毒 15 min, 灭菌水
冲洗 3遍 ,用小的吸管吸取单胞卵 8～ 10粒到凹玻片上 , 将凹玻片置于盛水的托盘内保湿 , 以清水作对
照 , 加入 “ 1. 2” 中制备的 1% (W /V ) 提取物为处理 , 处理与对照 ( CK) 均为 4次重复。置于室温下
培养 ,处理组 48 h后将白花曼陀罗叶提取液除去 ,换成清水继续观察。分别在处理后的 24、 48、 72、 96、
120、 144、 168、 192 h调查各发育阶段卵和变异卵的比率。
1. 4　白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚后发育的影响试验
采用直径 35 cm、高 12 cm的塑料盆 , 将二龄幼虫密度大约为 3条 /mL的土壤装入盆内。处理组淋
500 mL的 1% (W /V )白花曼陀罗叶提取物 , 对照组淋 500 m L清水 , 每个处理设置 4个重复。处理当
天每盆播种番茄种子 100粒。出苗后隔天取样调查 , 每处理取 5株番茄 , 将根冲洗干净 , 在解剖镜下解
剖 , 记录各发育阶段幼虫出现的时间 ( 50%根结出现各发育阶段幼虫的时间 ) 和完成发育的历期、 初
产日 ( 50%雌虫产卵日 ) 及雌虫产卵量 (初产日当天计数 10个卵囊的平均卵粒数 )。
2　结果与分析
2. 1　白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚胎发育的影响
试验结果表明 , 1%白花曼陀罗叶提取物对胚胎发育有抑制作用 ,表现在群体发育进程与对照相比
相对滞后。 其中 72 h调查 , 对照组已没有卵停留在一胞期和二胞期 , 有 58. 94%的卵块进入多胞期 ,
25. 49%的卵块进入囊胚期 ,而此时处理组仍有 30. 32%的卵停留在一胞期 , 28. 31%的卵停留在二胞期 ,
仅有 12. 21%的卵块进入多胞期 , 3. 88%的卵块进入囊胚期。 120 h调查 , 对照组 29. 89%的卵进入一龄
幼虫阶段 , 而此时处理组还未有卵发育至一龄幼虫阶段 , 仍有 22. 25%的卵停留于一胞期 , 5. 47%的卵
停留于二胞期。 144 h调查 , 对照组已有 55. 65%的卵进入一龄幼虫阶段 , 而此时处理组仅有 5. 53%的
卵进入一龄幼虫阶段 , 仍有 19. 57% 、 5. 95%的卵分别停留于一胞期、 二胞期。 192 h调查 , 对照组除
了 15. 57%的卵因变异成两头黑中间透明而未能发育外 ,其余 84. 43%的卵已全部进入一龄幼虫阶段 ;而
此时处理组仅有 19. 88%的卵进入一龄幼虫阶段。 详见表 1。
试验还发现 , 白花曼陀罗叶提取物能显著提高变异卵的比率。 24 h调查 , 对照组和处理组分别有
15. 57%和 25. 15%变异卵 (图 1) , 且变异卵均是两头黑中间透明 , 这些卵最终从中间透明的部分断开
未能完成发育。对照组在整个发育阶段变异卵的比率均为 15. 57% ,而处理组在 72 h时变异卵的比率上
升为 25. 28% , 并且这个比率在随后的调查中未发生变化。
2. 2　白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚后发育的影响
试验结果表明 , 白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚后发育有抑制作用。 对照组从二龄幼虫侵
入根内到根内出现雌成虫的历程为 12 d,而施用 1%白花曼陀罗叶提取物 500 mL /盆的处理组相应历期
为 14 d, 比对照组推迟 2 d。推迟时期在从二龄幼虫发育至三龄幼虫的阶段 , 对照组从二龄幼虫发育至
三龄幼虫需 4 d,而提取液处理组需 6 d。对照组与处理组从三龄幼虫发育为四龄幼虫、四龄幼虫发育为
成虫均需 4 d。
白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚后发育的影响还表现在降低雌虫产卵量。调查发现 ,对照组
雌虫平均产卵量为 36粒 /卵囊 ,处理组平均产卵量为 21粒 /卵囊 ,两者差异显著。此外 ,处理组能推迟根
结线虫的初侵染和始产卵日。番茄出苗后第 3天 ,对照组番茄根内就能解剖到二龄幼虫 ,而处理组直到
第 7天才能在植株根内解剖到二龄幼虫。即处理组与对照组相比 ,可使南方根结线虫初侵染推迟 4 d。对
137第 2期 陆秀红等:白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫生长发育的影响
照组初产卵日为 10月 11日 ,而处理组为 10月 17日 ,即处理组比对照组推迟初始产卵 6 d。
表 1　白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚胎发育的影响
Tab. 1　 Ef fect of extract from the leaf of Datura metel on the embryonic
development ofMeloidogyne incognita
处理后调查时间
Cultural time after
treatm ent /h
处理
T reatm ent
单胞期
1 cells
/%
二胞期
2 cells
/%
多胞期
More cells
/%
囊胚期
Blastula
/%
一龄幼虫
Juvenile 1
/%
变异卵
Abno rma l egg
/%
24 提取液 Ex tr act 74. 85 0. 00 0. 00 0. 00 0. 00 25. 15 aA
CK 55. 67 6. 67 22. 09 0. 00 0. 00 15. 57 bB
48 提取液 Ex tr act 53. 02 16. 36 5. 47 0. 00 0. 00 25. 15 aA
CK 50. 51 0. 00 33. 92 0. 00 0. 00 15. 57 bB
72 提取液 Ex tr act 30. 32 28. 31 12. 21 3. 88 0. 00 25. 28 aA
CK 0. 00 0. 00 58. 94 25. 49 0. 00 15. 57 bB
96 提取液 Ex tr act 26. 50 6. 55 23. 21 18. 46 0. 00 25. 28 aA
CK 0. 00 0. 00 56. 86 27. 57 0. 00 15. 57 bB
120 提取液 Ex tr act 22. 25 5. 47 26. 70 20. 00 0. 00 25. 28 aA
CK 0. 00 0. 00 24. 51 30. 03 29. 89 15. 57 bB
144 提取液 Ex tr act 19. 57 5. 95 22. 15 21. 52 5. 53 25. 28 aA
CK 0. 00 0. 00 12. 10 16. 68 55. 65 15. 57 bB
168 提取液 Ex tr act 15. 31 4. 58 16. 32 26. 49 12. 02 25. 28 aA
CK 0. 00 0. 00 0. 00 13. 00 71. 43 15. 57 bB
192 提取液 Ex tr act 14. 81 3. 41 4. 00 32. 62 19. 88 25. 58 aA
CK 0. 00 0. 00 0. 00 0. 00 84. 43 15. 57 bB
　　注 ( No te): a, b, P < 0. 05; A, B , P < 0. 01.
图 1　白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚胎发育的影响
Fig. 1　 Ef fect of extract f rom the leaf of Datura metel on the embryonic development ofMeloidogyne incognita
1. 变异卵 ; 2. 正常卵　　 1. Abnormal egg; 2. Normal egg
3　结论与讨论
( 1) 白花曼陀罗叶提取物对线虫胚胎发育有抑制作用 ,表现在群体发育进程与对照相比相对滞后
及变异卵的比率增大。 研究发现 ,变异卵均是原生质向卵的两端凝聚 ,且在整个调查阶段变异卵的比率
波动不大。原因可能是卵块发育前期对杀线活性物质更敏感。也有可能是卵块对提取物逐渐有抗性 ,因
此对其发育的影响不大。
( 2) 白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫胚后发育有抑制作用 ,主要表现为对二龄幼虫和成虫的
影响 ,而对三龄幼虫和四龄幼虫的影响不大。这一结果与文艳华等 [4 ]报道三尖杉提取物对花生根结线虫
胚后发育的影响结论相似。 其作用机理还有待进一步的研究。
138 广 西 农 业 生 物 科 学 第 25卷　
( 3)提取物对线虫胚后发育的影响还表现在推迟初侵染期、降低雌虫产卵量及推迟初产卵日。说明
白花曼陀罗叶提取物可减少南方根结线虫的虫口基数 ,减少侵染量 ,减少损失 ,对根结线虫病害有一定
防治效果。作为一种杀线植物其具有良好的研究价值及应用前景 ,有望研制出以白花曼陀罗提取物有效
成分为主的新型植物性杀线剂 ,为根结线虫病的防治提供新的途径。
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(责任编辑　梁健 )
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(责任编辑　裴润梅 )
139第 2期 陆秀红等:白花曼陀罗叶提取物对南方根结线虫生长发育的影响