全 文 ：林业科学研究摇 圆园员猿渊专刊冤院园愿圆 园愿远云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员猿冤专刊鄄园园愿圆鄄园缘
杂种落叶松嫩枝离体培养与芽增殖研究
李魁鹏员袁 王亚珍圆袁 孙晓梅员袁 韩摇 华员袁 谢允慧员袁 张守攻员鄢
渊员郾 林木遗传育种国家重点实验室袁中国林业科学研究院林业研究所袁北京摇 员园园园怨员曰 圆郾 青岛市崂山林场袁山东 青岛摇 圆远远园远员冤
收稿日期院 圆园员猿鄄园愿鄄圆园
基金项目院 国家野怨苑猿冶计划项目渊圆园园怨悦月员员怨员园苑冤
作者简介院 李魁鹏渊员怨愿源要冤袁男袁在读博士研究生袁主要从事落叶松遗传改良研究曰电话院园员园鄄远圆愿愿怨远愿缘曰耘鄄皂葬蚤造院造噪责灶燥噪蚤葬岳 员远猿援 糟燥皂
鄢 通讯作者院 博士生导师袁主要从事针叶树遗传改良与可持续经营技术研究曰电话院园员园鄄远圆愿愿怨园园愿曰耘鄄皂葬蚤造院泽澡燥怎早燥灶早援 扎澡葬灶早岳 糟葬枣援 葬糟援 糟灶
摘要院以生长和生根兼优的杂种落叶松无性系日永 愿 伊长混 员愿鄄员园 的嫩枝和休眠芽为试验材料袁开展了嫩枝生长和
芽增殖的离体组织培养技术研究袁确定了两种试验材料的最佳灭菌条件及最适培养基遥 结果表明院员缘豫的次氯酸钠
溶液处理 员园 皂蚤灶袁材料无菌存活率达到 怨员援 苑豫 袁灭菌效果最好曰最适嫩枝生长培养基为 月培养基曰芽增殖过程中袁最
适腋芽萌发诱导培养基为 月耘酝月培养基袁单个嫩枝平均诱导萌发 圆 个腋芽曰无外源激素的改良 月耘酝月 培养基渊硝态
氮与铵态氮含量比为 远颐 员冤袁最适于腋芽成枝诱导袁成枝率为 猿远援 缘豫 曰培养基 酝悦酝 垣员援 缘 皂早窑蕴 原员在栽 垣 园援 员缘 皂早窑蕴 原员
运栽袁最适用于休眠芽不定芽诱导袁不定芽诱导率为 猿怨援 员豫 袁增殖倍数为 圆援 远遥
关键词院杂种落叶松曰嫩枝生长曰芽增殖曰组织培养
中图分类号院杂苑圆圆援 猿 文献标识码院粤
砸藻泽藻葬则糟澡 燥灶 贼澡藻 杂澡燥燥贼 郧则燥憎贼澡 葬灶凿 月怎凿 孕则燥责葬早葬贼蚤燥灶 陨灶 灾蚤贼则燥 悦怎造贼怎则藻
蕴陨 运怎蚤鄄责藻灶早员袁 宰粤晕郧 再葬鄄扎澡藻灶圆袁 杂哉晕 载蚤葬燥鄄皂藻蚤员袁 匀粤晕 匀怎葬员袁 载陨耘 再怎灶鄄澡怎蚤员袁 在匀粤晕郧 杂澡燥怎鄄早燥灶早员
渊员援 杂贼葬贼藻 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 栽则藻藻 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 月则藻藻凿蚤灶早袁 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园怨员袁 悦澡蚤灶葬曰
圆援 蕴葬燥泽澡葬灶 晕葬贼蚤燥灶葬造 孕葬则噪袁 匝蚤灶早凿葬燥摇 圆远远园远员袁 杂澡葬灶凿燥灶早袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽葬噪蚤灶早 贼澡藻 泽澡燥燥贼 葬灶凿 贼澡藻 凿燥则皂葬灶贼 遭怎凿 枣则燥皂 枣蚤灶藻 糟造燥灶藻 责造葬灶贼泽 燥枣 澡赠遭则蚤凿 造葬则糟澡渊蕴葬则蚤曾 噪葬藻皂责枣藻则蚤 砸蚤赠燥灶早 愿 伊
蕴援 燥造早藻灶泽蚤泽 员愿鄄员园冤袁 憎澡蚤糟澡 蚤泽 责燥泽泽藻泽泽藻凿 燥枣 早燥燥凿 增葬则蚤藻贼赠 枣燥则 遭燥贼澡 早则燥憎贼澡 葬灶凿 则燥燥贼蚤灶早袁 贼澡藻 贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼 燥枣
泽澡燥燥贼 早则燥憎贼澡 葬灶凿 遭怎凿 责则燥责葬早葬贼蚤燥灶 憎葬泽 糟燥灶凿怎糟贼藻凿援 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 员缘豫 泽燥凿蚤怎皂 澡赠责燥糟澡造燥则蚤贼藻 枣燥则 员园 皂蚤灶泽 燥灶 泽贼藻则蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶
贼则藻葬贼皂藻灶贼 则藻泽怎造贼泽 贼澡藻 遭藻泽贼袁 憎蚤贼澡 葬 澡蚤早澡 则葬贼藻 燥枣 葬泽藻责贼蚤糟 泽怎则增蚤增葬造 怎责 贼燥 怨员援 苑豫 援 酝藻凿蚤怎皂 月 蚤泽 泽怎蚤贼葬遭造藻 枣燥则 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶
早则燥憎贼澡 燥枣 贼澡藻 藻曾责造葬灶贼援 宰澡蚤造藻 贼澡藻 皂藻凿蚤怎皂 月耘酝月 蚤泽 泽怎蚤贼葬遭造藻 枣燥则 葬曾蚤造造葬则赠 遭怎凿泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 贼憎燥 葬曾蚤造造葬则赠 遭怎凿泽 泽责则燥怎贼
燥灶 燥灶藻 泽澡燥燥贼援 粤皂燥灶早 贼澡藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥枣 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬曾蚤造造葬则赠 遭怎凿泽 贼燥 遭藻糟燥皂藻 遭则葬灶糟澡藻泽袁 贼澡藻 月耘酝月袁 燥枣 憎澡蚤糟澡 贼澡藻 糟燥灶贼藻灶贼
则葬贼藻 燥枣 灶蚤贼则葬贼藻 灶蚤贼则燥早藻灶 辕 葬皂皂燥灶蚤怎皂 灶蚤贼则燥早藻灶 蚤泽 远颐 员袁 憎蚤贼澡燥怎贼 藻曾燥早藻灶燥怎泽 糟澡藻皂蚤糟葬造 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则泽袁 澡葬泽 贼澡藻 遭藻泽贼 蚤灶鄄
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责造葬灶贼藻凿 燥灶 酝悦酝 皂藻凿蚤怎皂 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟赠贼燥噪蚤灶蚤灶 贼则藻葬贼皂藻灶贼袁 葬灶凿 贼澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 酝悦酝 垣 员援 缘 皂早窑蕴 原员 在栽 垣
园郾 员缘 皂早窑蕴 原员 运栽 蚤泽 贼澡藻 遭藻泽贼 皂藻凿蚤怎皂 枣燥则 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶援 栽澡藻 则葬贼藻 燥枣 遭怎凿泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 蚤泽 猿怨援 员豫 葬灶凿 贼澡藻
葬增藻则葬早藻 遭怎凿泽 灶怎皂遭藻则 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 葬 遭怎凿 蚤泽 圆援 远援
运藻赠 憎燥则凿院 澡赠遭则蚤凿 造葬则糟澡曰 泽澡燥燥贼 早则燥憎贼澡曰 遭怎凿 责则燥责葬早葬贼蚤燥灶曰 贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻
落叶松渊蕴葬则蚤曾 泽责责援 冤是我国重要速生用材树种
和生态造林树种袁具有适应性强尧早期速生尧成林快尧
病虫害少等优点咱员暂 遥 落叶松种间隔离不明显袁种间
杂种优势显著遥 但受种间花期不遇尧种子丰欠年等
因素影响袁通过人工制备杂种种子方式无法满足生
产需要遥 而无性繁殖作为优良性状固定和良种繁育
的重要手段袁可有效地解决杂种优势固定与利用这
一难题遥 相比于扦插尧嫁接等常规无性繁殖方法袁组
专刊 李魁鹏等院杂种落叶松嫩枝离体培养与芽增殖研究
织培养具有不受季节尧取材数量等因素制约的优势袁
可在短期内规模繁殖性状稳定的良种苗木遥 而利用
培育出的组培苗建立采穗圃袁再进行扦插尧嫁接等常
规无性繁殖方法繁殖苗木袁不仅增加了繁殖材料尧缩
短育苗周期袁还可以结合常规育苗技术控制育苗成
本遥 因此袁开展落叶松的离体组织培养技术研究非
常必要遥
国内外对华北落叶松 渊 蕴援 责则蚤灶糟蚤责蚤泽鄄则怎责责则藻糟澡贼蚤蚤
酝葬赠则冤尧长白落叶松渊蕴援 燥造早藻灶泽蚤泽 匀藻灶则赠冤尧兴安落叶松
渊蕴援 早皂藻造蚤灶蚤蚤 渊 砸怎责则援 冤 砸怎责则援 冤尧日本落叶松 渊 蕴援
噪葬藻皂责枣藻则蚤 渊蕴葬皂遭援 冤 悦葬则则援 冤等落叶松的体胚发生尧芽
增殖和植株生根等组织离体培养技术进行了研
究咱圆 原 远暂 袁研究表明培养材料的基因型和培养基成分
是影响落叶松组培成功与否的关键遥 植物材料组织
培养按器官再生途径可划分为直接发生和间接发生
两种遥 直接发生途径以芽为外植体袁获得的植株具
有遗传稳定性好尧自然变异频率低尧适应性强和移栽
成活率高等优点咱苑暂 遥 但芽增殖系数不高一直是制约
落叶松器官直接再生组织培养途径的主要因素袁因
此提高芽的诱导和增殖效率是目前落叶松组织培养
过程中亟需解决的问题遥
本试验以中国林业科学研究院林业研究所选育
的生长性状和扦插生根能力兼优的日渊日本落叶
松冤 伊长渊长白落叶松冤杂种无性系日永 愿 伊长混 员愿鄄
员园 为研究对象袁选取该无性系的嫩枝和休眠芽两种
外植体为材料袁进行器官直接再生组织离体培养技
术的研究袁摸索适合杂种落叶松嫩枝生长和芽增殖
的最佳培养基袁以期为构建杂种落叶松高效尧稳定的
组织培养再生体系袁规模化生产杂种落叶松组培苗
木提供技术保障遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 试验材料
本试验以日永 愿 伊长混 员愿鄄员园 无性系的嫩枝和
休眠芽两种外植体为材料遥 嫩枝材料取自中国林科
院重点实验室气候室内培养的植株袁该植株穗条采
自辽宁省清原县大孤家林场 圆园园圆 年营建的无性系
采穗圃袁圆园员园 年 苑 月在该林场进行扦插袁圆园员员 年将
扦插生根植株移入气候室内培养袁方便取材袁嫩枝取
材长度约 缘 糟皂 作为外植体诱导腋芽萌发遥 气候室
以白炽灯为光源袁光照强度 员 缘园园 圆 园园园 造曾袁温度
圆猿 依 圆益袁空气湿度 缘园豫 遥 休眠芽材料取自同一采
穗圃的同一无性系袁 圆园员圆 年 员园 月待生长停止后选
择顶芽饱满的枝条进行取材遥
员援 圆摇 研究方法
员援 圆援 员摇 灭菌试验摇 采用 员缘豫次氯酸钠尧园援 员豫氯化
汞尧苑园豫酒精 猿 种灭菌剂渊灭菌剂浓度是体积百分
比冤袁分别 远 皂蚤灶尧愿 皂蚤灶尧员园 皂蚤灶和 员圆 皂蚤灶 源 个灭菌时
间的双因素灭菌试验设计袁共 员圆 个处理袁每个处理
重复 猿 次遥 选取长约 缘 糟皂 的嫩枝袁剪去基部以上 猿
糟皂内嫩枝上的叶片袁洗涤液摇晃浸泡 圆园 皂蚤灶袁刷洗
后流水冲洗 猿园 皂蚤灶遥 之后在超净台中用灭菌水清洗
猿 次以上袁接入 月咱愿暂培养基袁源 周后观察长势袁并根据
植株无菌存活率确定适宜的灭菌条件遥 植株无菌存
活率 越无菌植株的株数 辕接种植株数遥
员援 圆援 圆摇 嫩枝生长和腋芽萌发试验摇 选用无外源激
素的 月尧月耘酝月咱愿 原 怨暂和 酝悦酝咱员园暂 猿 种培养基开展嫩枝
生长和腋芽萌发试验袁每个处理重复 猿 次遥 灭菌后
的嫩枝材料分别接种于上述 猿 种培养基袁远 周后观
察嫩枝长势袁统计嫩枝平均长度尧萌发腋芽数袁并计
算平均单个嫩枝萌发的腋芽数遥 平均单个嫩枝萌发
的腋芽数 越萌发的腋芽数 辕接种的嫩枝数遥
员援 圆援 猿摇 腋芽成枝诱导试验摇 以 月耘酝月 培养基为基
础培养基袁试验分为两部分院一是采用玉米素渊在栽冤
和 远鄄苄氨基腺嘌呤渊远鄄月粤冤两种细胞分裂素袁分别设
置 园援 缘尧员尧员援 缘 和 圆 皂早窑蕴 原员源 个浓度的双因素激素
处理试验袁共 愿 个处理袁每个处理重复 猿 次曰二是保
持培养基中总氮含量不变袁改变培养基中硝态氮与
铵态氮比值袁比值分别设计为 怨颐 员尧远颐 员尧猿 颐 员 和 员颐 员
共 源 个处理袁每个处理重复 猿 次遥 将诱导出的腋芽
带茎段剪下渊约 员援 缘 糟皂冤袁接种于不同处理的 月耘酝月
培养基中遥 愿 周后统计腋芽成枝率袁并筛选最适继
代培养基遥 腋芽成枝率 越成枝的腋芽数 辕接种的总
腋芽数遥
员援 圆援 源摇 不定芽诱导试验摇 酝悦酝 培养基常用于针叶
树不定芽的诱导咱员员 原 员圆暂 遥 以 酝悦酝培养基为基础培养
基袁试验处理采用 在栽 和激动素渊运栽冤两种细胞分裂
素尧园援 员缘 圆援 园 皂早窑蕴 原员不同浓度的双因素试验袁每
个处理重复 猿 次遥 将带有休眠芽的枝条剪成 缘 糟皂
左右的短枝袁洗涤液摇晃浸泡 圆园 皂蚤灶袁刷洗后流水冲
洗 猿园 皂蚤灶遥 超净台中袁用 园援 圆缘豫的氯化汞溶液处理
员园 皂蚤灶袁用无菌水清洗 猿 次以上遥 用解剖针从短枝
中小心拨出休眠芽袁接种于不同处理的 酝悦酝培养基
中遥 远 周后统计萌发不定芽的休眠芽数量和每个休
眠芽萌发的不定芽数量袁并计算不定芽诱导率和平
均单个萌发休眠芽形成的不定芽数遥 不定芽诱导率
猿愿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
越成功诱导出不定芽的休眠芽数 辕接种的休眠芽数遥
平均单个萌发休眠芽形成的不定芽数 越不定芽形成
总个数 辕成功诱导的休眠芽数遥
员援 圆援 缘摇 组培条件 摇 组培室培养条件院温度范围 圆园
依 缘益袁根据生长阶段选择光照强度 员 缘园园 圆 园园园 造曾
的白光或红光照射遥
员援 圆援 远摇 数据处理摇 采用 杂孕杂杂员怨援 园 进行方差分析和
多重比较遥 多重比较采用 缘豫 的 阅怎灶糟葬灶检验袁百分
率数据在反正弦变换后再进行分析遥
圆摇 结果
圆援 员摇 不同处理对外植体灭菌效果的影响
不同灭菌处理的灭菌效果不同渊表 员冤袁其中
员缘豫的次氯酸钠处理 员园 皂蚤灶 嫩枝无菌存活率最高袁
达到 怨员援 苑豫 袁灭菌效果最好曰其次是 园援 员豫氯化汞处
理 愿 皂蚤灶袁嫩枝无菌存活率 愿源援 远豫 曰苑园豫酒精处理 远
皂蚤灶袁嫩枝无菌存活率达到 愿圆援 愿豫 遥 而氯化汞属于
重金属有害物质袁重金属的残留会对植物造成伤害袁
氯化汞废液也需要进行特别处理咱员园暂 袁限制了氯化汞
作为灭菌剂的使用遥 用 苑园豫的酒精进行灭菌处理
后袁嫩枝叶子明显变黄袁这与处理过程中植物的叶绿
素溶解于酒精有关遥 次氯酸钠灭菌效果相对温
和咱员员暂 袁灭菌后嫩枝生长恢复得最好遥
表 员摇 不同处理的灭菌效果
处理号 灭菌剂 处理时间 辕 皂蚤灶
材料接
种数 辕个
无菌存
活率 辕 豫
员
圆
猿
源
缘
远
苑
愿
怨
员园
员员
员圆
园援 员豫氯化汞
员缘豫的次氯酸钠
苑园豫酒精
远 怨愿 远员援 圆 遭
愿 员园源 愿源援 远 凿
员园 愿猿 苑猿援 缘 糟
员圆 愿苑 缘缘援 圆 遭
远 怨愿 缘苑援 员 遭
愿 员园圆 愿猿援 猿 凿
员园 愿源 怨员援 苑 藻
员圆 愿苑 愿园援 缘 凿
远 怨猿 愿圆援 愿 凿
愿 怨缘 愿园援 园 凿
员园 愿远 远园援 缘 遭
员圆 怨员 猿怨援 远 葬
摇 摇 注院同列中不同字母表示在 园援 园缘 水平上差异显著袁下表相同遥
圆援 圆摇 培养基对嫩枝生长和腋芽萌发的影响
外植体在 月尧月耘酝月尧酝悦酝 猿 种培养基上培养 远
周后袁计算各培养基的嫩枝平均高度尧萌发腋芽数和
平均单个嫩枝萌发腋芽数的结果见表 圆遥 月 培养基
上的嫩枝伸长生长快袁嫩枝平均长度为 怨援 源 糟皂袁嫩枝
顶端优势明显袁叶片伸展袁嫩枝长势最好袁腋芽萌发
数最少袁平均单个嫩枝萌发 园援 圆 个腋芽遥 生长的嫩
枝见图 员葬遥 月耘酝月培养基上的嫩枝伸长生长比 月培
养基缓慢尧但嫩枝萌发腋芽数最多袁平均单个嫩枝萌
发 圆 个腋芽遥 植株在 酝悦酝培养基上生长势最差袁嫩
枝伸长生长受阻袁叶片打卷尧腋芽不多袁平均单个嫩
枝萌发 园援 缘 个腋芽遥 萌发的腋芽见图 员遭遥
表 圆摇 不同培养基中嫩枝生长和腋芽萌发的状况
处理号 培养基 接种数 辕个
嫩枝平均
长度 辕 糟皂
萌发腋
芽数 辕个
平均单枝嫩枝萌发的
腋芽数 辕 渊个窑枝 原 员 冤
员 月 远园 怨援 源 依 园援 猿 糟 员猿 依 员 葬 园援 圆 依 园援 园圆 葬
圆 月耘酝月 远园 远援 苑 依 园援 猿 遭 员员苑 依 远 糟 圆援 园 依 园援 员园 糟
猿 酝悦酝 远园 源援 缘 依 园援 员 葬 猿圆 依 猿 遭 园援 缘 依 园援 园缘 遭
圆援 猿摇 不同激素尧硝态氮与铵态氮含量比的腋芽成枝
诱导效果
摇 摇 月耘酝月培养基培养 远 周后袁外植体腋芽开始萌
发形成叶簇袁这些带叶簇的腋芽具有发育成枝的潜
力遥 有叶簇萌发的腋芽作为腋芽成枝诱导的材料遥
所有经 远鄄月粤处理的试验材料都存在基部膨大尧叶色
偏黄的现象袁而经 在栽处理的材料生长正常遥 从表 猿
中可以看出 园援 缘 皂早窑蕴 原员 在栽 诱导的效果最好袁诱导
成枝率为 猿圆援 源豫 遥
表 猿摇 月耘酝月培养基上不同细胞分裂素及浓度
对腋芽成枝的影响
处理号 激素浓度 辕 渊皂早窑蕴 原员 冤在栽 远鄄月粤
接种数
辕个
腋芽成
枝率 辕 豫
员 园援 缘 远愿 猿圆援 源 凿
圆 员摇 缘远 圆猿援 圆 遭
猿 员援 缘 愿圆 圆缘援 远遭
源 圆摇 远源 员源援 远 葬
缘 园援 缘 缘圆 圆圆援 源 遭
远 员摇 缘愿 圆远援 怨 糟
苑 员援 缘 远猿 员圆援 苑 葬
愿 圆摇 缘园 圆园援 园 遭
从表 源 得知袁在无外源激素添加的 月耘酝月 培养
基中袁硝态氮与铵态氮含量比值为 远颐 员 时腋芽成枝
诱导效果最好袁腋芽成枝率达 猿远援 缘豫 遥 腋芽成枝见
图 员糟遥 由此可以看出袁通过改变培养基的总氮含量
和硝态氮与铵态氮含量的比值袁在无外源细胞分裂
素添加的情况下袁进一步提高了植物材料腋芽成枝
的潜力遥
表 源摇 硝态氮与铵态氮含量比值不同的 月耘酝月
培养基对腋芽成枝的影响
处理号 硝态氮含量 辕铵态氮含量 接种数 辕个 腋芽成枝率 辕 豫
员 怨颐 员 源圆 圆远援 圆 遭
圆 远颐 员 猿愿 猿远援 缘 糟
猿 猿颐 员 源缘 圆园援 园 葬
源 员颐 员 源园 圆缘援 园 遭
源愿
专刊 李魁鹏等院杂种落叶松嫩枝离体培养与芽增殖研究
圆援 源摇 不同激素配比的不定芽诱导效果
试验结果表明渊表 缘冤袁在栽 和 运栽单独使用时袁以
员援 缘 皂早窑蕴 原员 在栽 和 园援 缘 皂早窑蕴 原员 运栽 的不定芽诱导
效果最好遥 两个处理不定芽诱导率分别为 猿园援 园豫
和 圆猿援 猿豫 袁平均单个萌发休眠芽形成的不定芽数为
圆援 猿 个和 员援 远 个遥 在此基础上袁保持 在栽 员援 缘 皂早窑
蕴 原员浓度不变袁改变 运栽 浓度袁以 员援 缘 皂早窑蕴 原员 在栽 垣
园援 员缘 皂早窑蕴 原员运栽的组合不定芽的诱导效果最佳袁不
定芽诱导率和平均单个萌发休眠芽形成的不定芽数
分别为 猿怨援 员豫和 圆援 远 个袁优于 员援 缘 皂早窑蕴 原员在栽 的诱
导效果遥 诱导出的不定芽见图 员凿遥
表 缘摇 酝悦酝培养基上不同细胞分裂素及
浓度对休眠芽的不定芽诱导
处理号 激素浓度 辕 渊皂早窑蕴 原员 冤在栽 运栽
接种
数 辕个
不定芽诱
导率 辕 豫
平均单个萌发休眠
芽形成的不定芽数
员 园援 缘 远园 圆员援 苑 遭 员援 圆 依 园援 猿 葬
圆 员援 园 远园 员缘援 园 葬 员援 猿 依 园援 猿 遭
猿 员援 缘 远园 猿园援 园 凿 圆援 猿 依 园援 缘 糟凿
源 圆援 园 远园 圆远援 苑 糟 圆援 园 依 园援 猿 糟
缘 园援 缘 远园 圆猿援 猿 遭 员援 远 依 园援 圆 遭糟
远 员援 园 远园 员愿援 猿 葬 员援 猿 依 园援 圆 葬
苑 员援 缘 远园 员缘援 园 葬 员援 源 依 园援 员 葬遭
愿 圆援 园 远园 员远援 苑 葬 员援 猿 依 园援 源 葬
怨 员援 缘 园援 员缘 远园 猿怨援 员 凿 圆援 远 依 园援 苑 凿
员园 员援 缘 园援 猿 远园 圆猿援 猿 遭 圆援 猿 依 园援 远 糟凿
员员 员援 缘 园援 源缘 远园 员愿援 猿 葬 员援 愿 依 园援 缘 遭糟
员圆 员援 缘 园援 远 远园 圆愿援 猿 糟 圆援 依 园援 远 糟凿
员猿 员援 缘 园援 苑缘 远园 圆园援 园 遭 员援 苑 依 园援 猿 遭糟
葬援生长的嫩枝曰遭援 萌发的腋芽曰糟援 腋芽萌发诱导成枝曰凿援 增殖的不
定芽
图 员摇 杂种落叶松组织培养芽生长和增殖过程
猿摇 小结与讨论
猿援 员摇 灭菌条件选择
为方便试验获取嫩枝材料袁将日永 愿 伊长混 员愿鄄
员园 的无性系植株进行气候室内培养遥 室内相对空
气湿度的变化对嫩枝材料灭菌后的污染率影响很
大遥 当相对空气湿度大于 缘园豫时袁随着空气湿度的
增加袁材料污染率会随之提高遥 将室内相对湿度控
制在 缘园豫以下袁选择 员缘豫的次氯酸钠进行灭菌的效
果较好遥
猿援 圆摇 氮对嫩枝生长的影响
组织培养过程外植体分化和生长受多种因素影
响袁其中培养基中氮源的形式和含量对组织培养植
物的生长和形态有着显著的影响遥 植物吸收硝态氮
可能是通过 圆匀 垣 辕 员晕韵猿 原同向运输的机制咱员源暂 袁所以
只有在酸性条件下硝酸盐才能被植物吸收遥 植物对
硝酸根的吸收伴随着阴离子从植物中的释放遥 而铵
根的吸收则伴随着氢离子的释放袁这导致培养基中
责匀值逐渐变小遥 当 责匀 值降到 源援 圆 源援 远 时袁植物
停止对铵根的吸收遥 而硝酸根持续吸收又使得 责匀
值升高咱员缘暂 遥 两种形式的氮源对于平衡植物对氮源
吸收很关键遥 硝酸根和铵根的含量和其相对比值的
变化对直接形态建成和再生植株生长影响很
大咱员苑 原 员怨暂 遥 而培养基质中氮的可利用程度与培养材
料的顶端优势有着密切的关系咱圆园暂 遥 月尧月耘酝月 与
酝悦酝培养基的总氮含量在 猿园园 皂早窑蕴 原员到 缘园园 皂早
窑蕴 原员之间袁含量高低顺序为 月 跃 酝悦酝 跃 月耘酝月遥 在
氮含量高的 月培养基上袁嫩枝生长的顶端优势显著袁
氮含量低的 月耘酝月 培养基促进材料腋芽萌发袁而硝
态氮与铵态氮含量比为 远颐 员 的改良 月耘酝月培养基最
适成枝诱导遥
猿援 猿摇 培养基对芽增殖的影响
芽增殖过程中袁最适腋芽萌发培养基是 月耘酝月
培养基遥 研究发现袁与花旗松渊孕泽藻怎凿燥贼泽怎早葬 皂藻灶扎蚤藻泽蚤蚤
渊酝蚤则遭藻造冤 云则葬灶糟燥冤和挪威云杉渊孕蚤糟藻葬 葬遭蚤藻泽 渊 蕴蚤灶灶援 冤
匀援 运葬则泽贼藻灶冤芽相比袁落叶松在无外源激素培养基上
具有很强的芽诱导伸长的能力咱圆员暂 遥 但腋芽萌发诱
导形成长枝需要培养基尧光照尧温度等多种因素的综
合作用咱圆圆暂 遥 针叶树中袁不定芽的繁殖系数高于腋
芽袁不定芽诱导途径是针叶树组织培养扩繁的首
选咱圆猿暂 遥 而休眠芽是诱导不定芽的理想材料之
一咱圆源暂 遥 但芽诱导的效果受到材料基因型尧树龄尧培
养基尧培养条件等多方面影响咱圆源 原 圆远暂 遥 本试验中袁最
缘愿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
适不定芽诱导培养基为 酝悦酝 垣 员援 缘 皂早窑蕴 原员 在栽 垣
园援 员缘 皂早窑蕴 原员 运栽遥 虽然不定芽的诱导率稍高于腋
芽诱导率袁但对诱导出的材料进行继代培养发现袁由
腋芽萌发的嫩芽继代存活率高于不定芽萌生的嫩
芽袁同时植株后期长势明显优于后者遥
组织培养过程中影响植物生长发育的因素很
多遥 本试验着重对基本培养基尧外源激素和氮源对
植物材料的生长和增殖的影响进行了初步探索遥 在
后续研究中袁还需采用正交试验进一步开展上述因
子及温度尧光照等其它因子对芽增殖尧嫩枝生长及生
根影响的探索研究遥
参考文献院
咱员暂 于忠波援落叶松资源利用现状及发展前景咱 允暂 援林业科技袁 圆园员园袁
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咱圆暂 齐力旺袁韩素英袁杨云龙袁等援 华北落叶松的组织培养再生植株
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咱猿暂 吴克贤袁李摇 伟袁徐妙珍袁等援长白落叶松组织培养的研究咱允暂 援林
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咱源暂 吕守芳袁张守攻袁齐力旺袁等援日本落叶松体细胞胚胎发生的研究
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