全 文 ：第 7 卷 第 1 期
1 9 9 4 年 2 月
林 业 科 学 研 究
F OR E ST R E SE A R C H
几厂0 1 . 7 , N o . 1
1子e b
.
,
1 9 9 4
湿地松枯梢病菌生物学特性的研究
景 耀 孙丹萍帐
摘共 松色二抱菌 (D ‘Pl o di a Pi 能a) 引起湿地松枯梢病。 病菌在 P D A 培养基上生长最好 ,
最适温度为25 ~ 31 ℃ , 在全光照条件下生长最快 , 子实体最早形成 。 分生抱子在 10 %的湿地 松 和
油松针叶浸汁中萌发最好 , 6 h 萌发率达90 % 以上 , 萌发的最适温度为25 ~ 30 ℃ , 最适 p H 值为 6
~ 7
, 在水滴中比在饱和湿度下萌发率高 , 光照对分生抱子萌发几乎无显著影响 。
关抽饲 湿地松 、 枯梢病、 松色二抱菌 、 生物学特性
湿地松枯梢病 〔D IPlo d ia P‘。e a (D e s m . ’ ) K ie h x 门是一种世界性的病 害 。 危害多种松
树 , 严重影响树木正常生长〔‘一9] 。 在国内危害 油 松 (尸‘, “: tab ul a ej or m ‘; Car r . )、 马 尾
松 ( P . 二 a s so n ia n a L a m b . )、 樟 子 松 (P . sy lo e s *r is L . v a r . o o n g o l‘e a L itv . )、 湿
地松(P . e llfo tt‘1 E n g e lm . )、 加勒比松 (P . c a r iba e a M o r e le t )和火炬松 (P . ta ed a L . )
等〔一 ‘’。 陕西省 自1 9 8 3年 以来主要发生在安康 、 汉中等地引种的湿地松上 , 病梢率可达40 %
一 62 % , 秋后造成大量枯梢〔‘, 。 目前对该病的病原菌形态 、 病害症状以及发病规律等已有许
多研究〔“一 ” , 但对病原菌生物学特性的研究尚未见有系统的报道 , 为此于 1 9 8 5 年进行 了 研
究 , 现总结如下 。
1 材料和方法
1
。
1 材料
1
.
1
.
1 菌种来源 1 98 5年 4 月从安康县林研所苗圃采集的湿地松病枝 和病叶中分离获得 。供
试的分生抱子分别为在湿地松病枝叶上越冬的和在培养基上产生的。
1
.
1
.
2 针叶来源 在采集菌种的同时 , 采集健康的湿地松 、 油松 、马尾松 、 火炬松 、 华山松
和云南松的嫩梢及针叶 。
1
。
2 方法
1
.
2
.
1 菌种的分 离 将带有子实体 的越冬病组 织 , 用70 % 酒精擦洗后 , 取病 、健交界处组织 ,
切成小段 , 用 0 . 1 %异汞液消毒 1~ 2 m in , 再用无菌水冲洗 3次 , 剪成2 m m 父 3 m m 的小块 ,
置于 PD A 平面培养基上 , 每皿 4 块 , 在 23 ℃恒温下培养 , 待菌落长出后 , 转皿纯化备用 。
1
.
2
.
2 菌落生长量的测 定 在直径 90 m m 的培养皿内 , 倒入 10 m L 的培养基 。 在 PD A 培养
1的Ze 肠一0 3收 . 。
, 工彼热 孙丹件 (西北林学跳 陕西杨陇 7 12 1朋 ) 。
今孙丹俘系西北林学晚森像专业8S 月毕业生 , 现在河南省 洛阳林校工作 。
第 7 卷 第 1 期
1 9 9 4 年 2 月
林 业 科 学 研 究
F OR E ST R E SE A R C H
几厂0 1 . 7 , N o . 1
1子e b
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1 9 9 4
湿地松枯梢病菌生物学特性的研究
景 耀 孙丹萍帐
摘共 松色二抱菌 (D ‘Pl o di a Pi 能a) 引起湿地松枯梢病。 病菌在 P D A 培养基上生长最好 ,
最适温度为25 ~ 31 ℃ , 在全光照条件下生长最快 , 子实体最早形成 。 分生抱子在 10 %的湿地 松 和
油松针叶浸汁中萌发最好 , 6 h 萌发率达90 % 以上 , 萌发的最适温度为25 ~ 30 ℃ , 最适 p H 值为 6
~ 7
, 在水滴中比在饱和湿度下萌发率高 , 光照对分生抱子萌发几乎无显著影响 。
关抽饲 湿地松 、 枯梢病、 松色二抱菌 、 生物学特性
湿地松枯梢病 〔D IPlo d ia P‘。e a (D e s m . ’ ) K ie h x 门是一种世界性的病 害 。 危害多种松
树 , 严重影响树木正常生长〔‘一9] 。 在国内危害 油 松 (尸‘, “: tab ul a ej or m ‘; Car r . )、 马 尾
松 ( P . 二 a s so n ia n a L a m b . )、 樟 子 松 (P . sy lo e s *r is L . v a r . o o n g o l‘e a L itv . )、 湿
地松(P . e llfo tt‘1 E n g e lm . )、 加勒比松 (P . c a r iba e a M o r e le t )和火炬松 (P . ta ed a L . )
等〔一 ‘’。 陕西省 自1 9 8 3年 以来主要发生在安康 、 汉中等地引种的湿地松上 , 病梢率可达40 %
一 62 % , 秋后造成大量枯梢〔‘, 。 目前对该病的病原菌形态 、 病害症状以及发病规律等已有许
多研究〔“一 ” , 但对病原菌生物学特性的研究尚未见有系统的报道 , 为此于 1 9 8 5 年进行 了 研
究 , 现总结如下 。
1 材料和方法
1
。
1 材料
1
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1
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1 菌种来源 1 98 5年 4 月从安康县林研所苗圃采集的湿地松病枝 和病叶中分离获得 。供
试的分生抱子分别为在湿地松病枝叶上越冬的和在培养基上产生的。
1
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1
.
2 针叶来源 在采集菌种的同时 , 采集健康的湿地松 、 油松 、马尾松 、 火炬松 、 华山松
和云南松的嫩梢及针叶 。
1
。
2 方法
1
.
2
.
1 菌种的分 离 将带有子实体 的越冬病组 织 , 用70 % 酒精擦洗后 , 取病 、健交界处组织 ,
切成小段 , 用 0 . 1 %异汞液消毒 1~ 2 m in , 再用无菌水冲洗 3次 , 剪成2 m m 父 3 m m 的小块 ,
置于 PD A 平面培养基上 , 每皿 4 块 , 在 23 ℃恒温下培养 , 待菌落长出后 , 转皿纯化备用 。
1
.
2
.
2 菌落生长量的测 定 在直径 90 m m 的培养皿内 , 倒入 10 m L 的培养基 。 在 PD A 培养
1的Ze 肠一0 3收 . 。
, 工彼热 孙丹件 (西北林学跳 陕西杨陇 7 12 1朋 ) 。
今孙丹俘系西北林学晚森像专业8S 月毕业生 , 现在河南省 洛阳林校工作 。
74 林 业 科 学 研 究 7 卷
衰 1 . 落生长与! 养的关系
培 养 羞¹ 生长 S d , 落
宜径 ( 。. )
长润培养皿所
摇时间 ( d )
分 生抱子器形成
所蚕时 间 ( d )
平均生长
( om /d )
57那983406氏狂0-0nl20197193,l’517689燕偏水+ 琼脂
粉翻特 + 琼脂
蔗 特 + 琼肠
麦芽箱 + 琼油
PD A
,
PD 人
火 炬松针叶及什 + 琼脂
马尾松针叶及汁 + 琼脂
油松针叶畏汁 + 玻脂
华 山松针叶 及汁 十琼脂
云南松针叶 浸汁 + 琼脂
湿地松针叶浸汁 十 琼脂
查彼克
2
.
8 5
4
.
13
4 。朽
4 。4 5
1。 72
,
。
0
4
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4
。
8
3
。
13
3
。
45
3
.
45
4
.
6 9
8
。
00
¹ PD 人产—PD人堵养器中 , 翻有特减半 。
2 . 1. 4 菌落生 长与光照的关 系 在 PD A 培养基上接种直径为 3 . s m m 的菌 丝 块 , 在 2 一
26 ℃变温条件下分别进行全光 ( 白天散射光 , 晚上40 平的日光灯 ) 、 光暗交替及全黑暗三种
处理 , 每种处理重复3次 , 每隔24 h 测量菌落直径 , 观察子实体形成情 况 , 结 果 见 表 2 。 可
见 , 在全光照的条件下 , 菌落生长最快, 子实体形成早且多 , 光 、暗交替其次 , 全黑暗最差 。
裹2 , 落生长与兜级的关系
, 落宜径 ( . . ) 分生抱子器 分生抱子处 理——1 d 2 d 3 d 4 d S d 形成时间 ( d ) 形 成时间 ( d )全 光 2。 13 4。 87 7 。2 9 . 00 9 . 00 10 20光 、 暗交替 1. 69 4 . 23 5 一93 7 . 90 9 . 加 12 32全 黑 暗 1. 58 3. 89 5 . 7 7 7 . 4弓 9 . 00 一 一2 . 2 袍子萌发试脸2 . 2 . 1 分生抱子 萌发与时间的关系 用 10 %湿地松针叶浸汁配成抱子悬浮液 , 每视野约20个抱子 , 用悬滴法在25 ℃下进行抱子萌发试验 , 每处理重复 3次 , 每隔Z h 镜检一次 , 直到24 h , 结
果见图3 。 由图3可知 , 越冬抱子 l h 后开始萌发 , Z h 萌发率达 65 . 3% , 6 h 达93 . 9 % , 直到 s h 后 ,
增长趋势缓慢 , 纯培养抱子 Z h 以后才开始萌发 , 6 h 达57 . 4% , 18 h 后达到 9 0% , 以后增长
趋势较为缓慢 。
抱子萌发的特性是 : 先吸水膨胀 , 后产生芽管 。 多为单极萌发 , 少数双极 , 个别侧面发
芽 。 绝大多数只产生一个芽管 , 少数产生 2 一 5 个芽管 , 萌发 s h 后 , 抱子产生一个分隔 。
2
.
2
.
2 分生艳子叻发与温度的关系 用10 %湿地松针叶浸汁配成抱予悬浮液 , 采用悬滴法进
行抱于萌发试验 , 分别置于 5 、 9 、 15一 18 ( 变温 ) 、 19 ~ 21(变温 ) 、 2 5 、 3 0 、 35 、 40 ℃不
同温店下 , 培养 6 h , 蒸汽杀死 (2 m in ) , 镜检 。 每种处理重复3次 。 结果见 图4 。由图 4可见越
1 期 景 粗等 : 湿地松枯梢病菌生物学特性的研究 7 5
1 0 0
, 尹
6 OT . ~ - 一
40的助1
(次”移拐辞
一一 一 一 纯培养抱于
—越冬袍子
纯培葬抱子
2 6 10 1 4 1 8 2 2 邪
时间 ( h )
图 3 分生抱子萌发与时 间的关系
1 0 1 5 20 2 污 弓0 3 Ji 1 0
谧度 ( ( : )
//l
"
;
,⋯!:":,.城的70630504加1
ƒ%„件留绒
圈 4 分生抱子萌发与皿度 的关系
冬抱子萌发的适温范围18 一25 ℃ , 最适25 ℃ ; 纯培养抱子萌发的适沮 范 围 25 ~ 30 ℃ , 最 适
3 。℃ 。 越冬抱子和纯培养抱子萌发的最低温度为8 ℃ , 最高温度为 40 ℃ , 在 8 ℃ 以下和 40 ℃ 以
上均不萌发 。
2
.
2
.
3 分生艳子萌发与湿度的关系 在干燥器内 , 用不 同浓度的硫酸溶液控制不同的相对湿
度 , 将抱子悬浮液用喉头喷雾器喷在载玻片上 , 阴干后 , 置于干燥器内 , 以悬滴作对照 , 在
表 3 分生抢子萌发与沮度的关系
相对很度 ( % ) 抱子来想 抱子总数 ( 个 ) 萌发数 (个 ) 萌发率 ( % )
5 9
.
0
4 8
。
6
49
。
0
肠 。 9
37
。
S
2 3
。
3
36
。
4
14
。
1
32
.
0
12
。
2
3 1
。
9
6
。
0
3
。
5
5
.
9
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5
.
nUn一nU
0289乃76435书147l’592011738940526230185964纯培养越 冬
纯培养
越 冬
纯培养
越 冬
纯培养
越 冬
纯堵养
越 冬
纯堵养
越 冬
纯培养
越 冬
纯培养
越 冬
纯培养
越 冬
纯 培养
越 冬
抽
0.51⋯9泊,8
悬198%始2756
7 6 林 业 科 学 研 究 7 卷
恒温 25 ℃下 , 培养 6 h , 杀死镜检 , 结果见表 3 。 由表 3 可以看出 , 相对湿度在6 . 8 % 以上分生
抱子才能萌发 。 在饱和湿度下 , 抱子萌发率仍 比在液滴中低 , 这说明抱子萌发需要有充足的
水分条件 。
2
.
2
.
4 分生胞子萌发与 p H 值的关系 以不同比例磷酸盐缓冲液调 整用蒸馏水配制 的 抱 子
悬浮液酸碱度 , 使其具有不同的 p H 值 。 用 25 型酸度计测 p H 值 。 采用悬滴法 , 恒温 25 ℃下
培养 , 培养6 h 后 , 杀死镜检 , 结果如图5 。 由图5可知分生抱子在p H值 4 . 6一 9 . 0的范围内均可
萌发 , 适宜的范围为 p H 值 6 一 7 , 其中, 以 p H 值6 . 78 萌发率最高 。
7 0 ;
、
.. .,i,,
ƒ次„砰翎‘日†n甘n”甘J怪任dgŽ,上ƒ次)绷哥橱
火 华 马炬 山 尾松 松 松
握地检液
养
云南松葡 营萄麦 橄芽馆燕馏水
图 5 分生抱子萌发与 pH 值的关系 图 6 分生抱子萌发与营养的关系
- 一一纯 培养抱子 , —越冬抱子
2
.
2
.
5 分生袍子萌发与营养的关系 用 6 种 10 %的针叶浸汁和3种功%的糖液分别配成抱子
悬浮液 , 采用悬滴法进行抱子萌发 , 每种处理重复 3次 , 置于 25 ℃恒温箱中, 6 h 后 , 杀死镜
检 , 结果见图6 。 由图6可知 , 分生抱子在湿地松针叶浸汁中萌发率最高。 越冬的分生抱子在 10
种营养液中 , 萌发率均在 8 0 % 以下 ; 纯培养的分生抱子 , 除在湿地松 、 火炬松针叶浸汁中 ,
萌发率达 7 0 % 以上外 , 在其它营养液中均在 60 % 以下 , 尤以蒸馏水中为最低 。
2
.
2
.
6 分生抱子萌发与光照的关 系 用 1 0 %湿地松针叶浸汁配成抱子悬浮液 , 采用悬滴法 ,
置于 室内变温下 , 进行全光 ( 散射光 ) 、 光暗交替和全黑暗三种处理 , 每种处理重复 3 次 ,
待6 h 后 , 杀死镜检 , 结果见表 4 。 由表 4可知 , 光照对分生抱子的萌发几乎没有显著影响 。
表4 分生艳子翁发与光照的关系
处 理 抱子来源 抱子总数 (个 ) 萌发数 (个 ) 萌发率 ( % )
5 1
.
2
5吕。 8
21350976养冬培越纯光全
6
内j. .17月八山了
ro’ UnŽ4Jq乙O
一匕11Un内jn月峙nUC71’JJnnl1人1Jl且,tI山件
光 暗交替
(每隔 l h)
纯 培 养
越 冬
全 黑 暗
纯 培 养
越 冬
1 期 景 耀等 : 湿地松枯梢病菌生物学特性的研究 7 7
参 考 文 献
9
景耀 , 张永 安 . 湿地松枯梢病 的研究 . 林 业科技通讯 , 19 86 , 199( l2) : l ~ 4 .
项存梯 , 原 树忠 , 孟繁荣 , 等 . 樟子松枯 梢病的研究 . 东北林学院学 报 , 1 981 , (2) : l ~ 9 .
梁子超 , 祁惠芳 . 马尾松枯梢病的研究 . 植物病理学报 . 19 80 , 10(2 ) : 1 9 ~ 123 .
别润之 , 杨么明 , 余世 明 , 等 . 火 炬松 、 湿地松梢枯病 初步研究 . 森林病虫通讯 , 19 8 6 , (2) : 8 一10 .
苏开君 , 谭松山 , 邓群 . 国外 松枯梢病症状和病原的研究 . 森林病虫通讯 , 1991 , (1 ) : 2 一 弓.
W a ll
a T A
.
D IPlo d ia P‘”e a fo u n d o n N o r th D a k o ta . Pla n t D is . R r eP tr , 197 9 , 6 3(6 ) : 4 6 4 .
Pe te rs o n G W
.
In fe c tio n
, e Pid e m io lo g y a n d e o n tr o l o f D ‘Plo d ia b li‘h t o f A u str ia . , Po n d er o sa ‘盆d
S o o ts p in e s
.
Ph yto Pa tli
. ,
19 77
,
6 7 (4 ) t 5 1 1一 5 14 .
C ho u C K 5
.
A s ho o t d ieba ek i口 P‘n u s r a d ia ta e a u se d by D ‘Plo d fa P‘。e a . 1 . 5了m p t o m s , d is ea se
d e v e lop m e n t a n d is o la tio n o f p a th o g e n
.
N e w Z e a la n d Jo u r n a l o f Fo r e str y S c ie n c e
,
1 9 76
,
6 (1 )
:
7 2~
7 9
.
W a
n 忆 C G , Bla n ch et te R A , Ja c kso n W A , e t a l
.
D iff。: en e es 云n 0 0 皿idj . 1 m o rPho lo ‘了 a也 o a ‘
iso la te s o f S P ho e r o Ps‘5 s a Pi”e a . Pla n * d 坛ea se , 1 9 8 5 , 6 9 (10 ) * 8 , 8 ~ 84 1 .
13245
户07
Stu die s o n the B io lo g ic a l Cha ra c te ristic s o f
Pa tho g e n
, 刀 iPlo d ‘a Pin e a o f Sla sh Pin e D ie ba c k
J in g Y a o S u n D a n P in g
A七: tra e t T h e p a th o g e n ie fu n g u s e a u s in g d ie b a e k o f s la s h p in e is D ‘Plo d ia
P‘n e a (D es m . ) K ie k x . In fu ll lig h t a n d a t 2 5~ 3 1 ,C , th e fu n g u s g r o w s b e s t
o n P D A m e d iu m
, a n d fo r m s its fr u e t ifie a tio n e a r ly
.
Its e o n id ia g e r m in a te
b e st o n 1 0% n e e d le in fu s io n o f P‘n u s e ll‘o ttr“ a n d P . ta bla ej o r m ‘5
.
Its
g e r m in a tio n p e r e e n ta g e a fte r 6 h o u r s r e a e h e s o v e r g峭 . O p tim u m te m p e r a t u r e fo r
e o n id ia l g e r m in a t io n 15 b e tw e e n 2 5 ℃ t o 3 0℃ , a n d p H 6 ~ 7 th e m o s t fa v o r a b le .
G e r m in a tio n Pe r e e n ta g e in w a te r d r o Ps 15 h ig h e r th a n th a t u n d e r s a tu r a t e d
m o is tu r e e o n d itio n
.
L ig h t h a s n o o b v io u s in flu e n e e o n e o n id ia l g e r m in a tin g
.
Ke y w o r d s P i”us e ll蓄o tt ii , d ‘e ba c k , D IPlo d ‘a P宕n e a , b io lo g ie a l e h a r a e te r -
ist ie s
Jin g Y a o
,
Pr o fe sso r
,
S u n D a n p in g (N o r thw e sto r n Co l压e‘。 o f F o re str了 Y a n 忆lin ‘, S ha n x i 7 12 100) .