全 文 ：第 源愿 卷 第 缘 期
圆 园 员 圆 年 缘 月
林 业 科 学
杂悦陨耘晕栽陨粤 杂陨蕴灾粤耘 杂陨晕陨悦粤耘 灾燥造郾 源愿袁晕燥郾 缘酝葬赠袁圆 园 员 圆
白桦雄花突变体早期发育差异表达
基因的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析鄢
刘雪梅摇 刘摇 瀛摇 宋福南摇 邢摇 磊摇 戴摇 超摇 杨传平
渊东北林业大学生命科学学院摇 哈尔滨 员缘园园源园冤
摘摇 要院摇 白桦是雌雄同株的单性花树种袁已发现的天然的雄花序突变体袁其结构和生殖发育均不同于正常雄花
序袁显示出明显的雄性不育特征遥 为揭示该雄花突变体的发育机制袁采用 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分子标记技术袁分析白桦雄
花突变体发育早期的差异基因表达谱袁共获得 愿员 个 耘杂栽泽袁缘员 个 耘杂栽泽 与 郧藻灶月葬灶噪 中的基因相似性较低袁视为新基
因袁猿园 个 耘杂栽泽与已知蛋白具有较高同源性遥 郧韵 和 运耘郧郧 对其功能的注释表明袁这些蛋白参与催化活性尧结合活
性尧生物调节信号转导尧生物合成以及基因编码转录因子和花发育等过程遥 选择 缘 个与白桦花发育有关的 耘杂栽泽袁分
别为 酝粤孕激酶尧泛素结合酶尧纤维素合成酶尧热激蛋白和细胞色素 孕源缘园袁应用 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸检测它们在白桦雄
花突变植株的不同组织和雄花发育过程的转录表达袁结果表明袁这些基因在白桦突变植株中表达水平发生不同程
度的上调或下调表达袁推测它们参与白桦营养生长和生殖发育袁并与雄花的迟缓发育尧花药和花粉发育异常等雄性
不育特征有关遥
关键词院摇 白桦曰 突变体曰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕曰 雄性不育曰 转录表达
中图分类号院 杂苑员愿郾 源远摇 摇 摇 文献标识码院粤摇 摇 摇 文章编号院员园园员 原 苑源愿愿渊圆园员圆冤园缘 原 园园圆园 原 园怨
收稿日期院圆园员员 原 园怨 原 园圆曰 修回日期院圆园员员 原 员园 原 圆园遥
基金项目院国家自然科学基金项目渊猿员员园园源源怨冤曰 黑龙江省自然科学基金项目渊悦圆园员园源园冤曰 黑龙江省博士后科研启动金渊蕴月匀鄄匝员园员远苑冤遥
鄢杨传平为通讯作者遥
阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 栽则葬灶泽糟则蚤责贼泽 葬贼 耘葬则造赠 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 杂贼葬早藻 燥枣
酝葬造藻 陨灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻 酝怎贼葬灶贼 燥枣 宰澡蚤贼藻 月蚤则糟澡渊月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬冤遭赠 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕
蕴蚤怎 载怎藻皂藻蚤摇 蕴蚤怎 再蚤灶早摇 杂燥灶早 云怎灶葬灶摇 载蚤灶早 蕴藻蚤摇 阅葬蚤 悦澡葬燥摇 再葬灶早 悦澡怎葬灶责蚤灶早
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 晕燥则贼澡藻葬泽贼 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 匀葬则遭蚤灶 员缘园园源园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院摇 月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬 蚤泽 葬 皂燥灶燥藻糟蚤燥怎泽 贼则藻藻 泽责藻糟蚤藻泽 憎蚤贼澡 怎灶蚤泽藻曾怎葬造 枣造燥憎藻则泽援 宰藻 澡葬增藻 责则藻增蚤燥怎泽造赠 枣燥怎灶凿 葬 灶葬贼怎则葬造
皂怎贼葬灶贼 燥枣 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻 泽澡燥憎蚤灶早 燥遭增蚤燥怎泽 枣藻葬贼怎则藻泽 燥枣 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造蚤贼赠袁憎澡蚤糟澡 澡葬泽 葬遭灶燥则皂葬造 泽贼则怎糟贼怎则藻 葬灶凿 则藻责则燥凿怎糟贼蚤增藻
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 糟燥皂责葬则藻凿 贼燥 憎蚤造凿 贼赠责藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻援 栽燥 则藻增藻葬造 贼澡藻 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 贼澡藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻
皂怎贼葬灶贼袁 葬 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 皂燥造藻糟怎造葬则 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 憎葬泽 怎泽藻凿 贼燥 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 责则燥枣蚤造藻泽 燥枣 糟葬灶凿蚤凿葬贼藻 早藻灶藻泽 葬贼
藻葬则造赠 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 泽贼葬早藻 燥枣 贼澡藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻援 栽燥贼葬造造赠 愿员 耘杂栽泽 憎藻则藻 燥遭贼葬蚤灶藻凿袁 葬皂燥灶早 憎澡蚤糟澡 缘员 耘杂栽泽 凿蚤凿 灶燥贼 泽澡燥憎
澡燥皂燥造燥早赠 贼燥 贼澡葬贼 蚤灶 贼澡藻 郧藻灶藻月葬灶噪袁 葬灶凿 憎藻则藻 糟燥灶泽蚤凿藻则藻凿 葬泽 灶藻憎 早藻灶藻泽援 栽澡藻 燥贼澡藻则 猿园 耘杂栽泽 泽澡燥憎藻凿 澡蚤早澡 澡燥皂燥造燥早赠 憎蚤贼澡
噪灶燥憎灶 责则燥贼藻蚤灶泽援 郧韵 葬灶凿 运耘郧郧 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 葬灶灶燥贼葬贼蚤燥灶 凿藻皂燥灶泽贼则葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻泽藻 责怎贼葬贼蚤增藻 责则燥贼藻蚤灶泽 憎藻则藻 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 责则燥糟藻泽泽藻泽
燥枣 糟葬贼葬造赠贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 遭蚤灶凿蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 泽蚤早灶葬造 贼则葬灶泽凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 则藻早怎造葬贼蚤燥灶袁 遭蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 葬灶凿 早藻灶藻泽 藻灶糟燥凿蚤灶早
贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则泽 葬泽 憎藻造造 葬泽 枣造燥憎藻则 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼援 云怎则贼澡藻则皂燥则藻袁 缘 耘杂栽泽 渊酝粤孕 噪蚤灶葬泽藻袁 怎遭蚤择怎蚤贼蚤灶鄄糟燥灶躁怎早葬贼蚤灶早 藻灶扎赠皂藻袁
糟藻造造怎造燥泽藻 泽赠灶贼澡葬泽藻袁 澡藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 葬灶凿 糟赠贼燥糟澡则燥皂藻 孕源缘园冤袁 则藻造葬贼藻凿 贼燥 贼澡藻 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻袁 憎藻则藻
泽藻造藻糟贼藻凿 贼燥 凿藻贼藻糟贼 贼澡藻 贼则葬灶泽糟则蚤责贼 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 责则燥枣蚤造藻泽 遭赠 怎泽蚤灶早 贼澡藻 择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼
贼蚤泽泽怎藻泽 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 泽贼葬早藻泽 燥枣 贼澡藻 皂怎贼葬灶贼 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶泽藻援 砸藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 造藻增藻造泽 燥枣 贼澡藻泽藻 早藻灶藻泽
憎藻则藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠 怎责鄄 燥则 凿燥憎灶鄄则藻早怎造葬贼藻凿 蚤灶 贼澡藻 皂怎贼葬灶贼 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻袁 泽怎早早藻泽贼蚤灶早 贼澡葬贼 皂燥泽贼 燥枣 贼澡藻泽藻 早藻灶藻泽 责葬则贼蚤糟蚤责葬贼藻凿
蚤灶 贼澡藻 增藻早藻贼葬贼蚤增藻 早则燥憎贼澡 葬灶凿 则藻责则燥凿怎糟贼蚤增藻 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 葬灶凿 澡葬凿 糟造燥泽藻造赠 则藻造葬贼蚤燥灶 贼燥 皂葬造藻 枣造燥憎藻则 早则燥憎贼澡 则藻贼葬则凿葬贼蚤燥灶袁 葬灶贼澡藻则
葬灶凿 责燥造造藻灶 葬遭灶燥则皂葬造 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 憎澡蚤糟澡 憎藻则藻 贼澡藻 枣藻葬贼怎则藻泽 燥枣 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造蚤贼赠 蚤灶 月援 责造葬贼赠责澡赠造造葬援
运藻赠 憎燥则凿泽院摇 月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬曰 皂怎贼葬灶贼曰 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕曰 皂葬造藻 泽贼藻则蚤造蚤贼赠曰 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶
摇 摇 白桦渊月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬冤是中国北方重要的阔
叶树种之一袁是典型的雌雄同株单性花树种袁因此是
研究单性花发育机制的理想材料遥 目前袁白桦花发
育研究主要集中在细胞学和系统发育研究袁而分子
摇 第 缘 期 刘雪梅等院 白桦雄花突变体早期发育差异表达基因的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析
生物学研究则较少袁进展较慢遥 近年来袁对桦木属
渊月藻贼怎造葬冤花发育调控基因的研究取得了一些成果袁
例如袁已从欧洲白桦渊月藻贼怎造葬 责藻灶凿怎造葬冤中分离出 苑 个
花发育相关的基因袁其中包括 远 个 酝粤阅杂鄄遭燥曾 基因
渊蕴藻皂皂藻贼赠蚤灶藻灶 藻贼 葬造援袁 圆园园源曰 耘造燥 藻贼 葬造援袁 圆园园员冤和 员 个
杂月孕鄄遭燥曾基因渊蕴葬灶灶藻灶责葬葬 藻贼 葬造援袁 圆园园源冤袁这些基因可
能作用于早期营养阶段向生殖阶段的转变遥 作用于
开花时间调控路径的结点基因 杂韵悦员袁参与营养生长
和生殖生长渊刘菲菲等袁 圆园员员冤袁参与花序及花分生
组织特异性的形成袁促进其早花渊耘造燥 藻贼 葬造援袁 圆园园员冤遥
王超等渊圆园园愿冤发现了多个花发育相关基因袁其功能
涉及到调控花序形成尧花分化及花粉管发育渊杨传
平等袁 圆园园远冤遥 白桦雄花序发育初期的一些表达差
异蛋白袁可能与花分生组织及花器官的形成有关
渊杨传平等袁 圆园园源冤遥 另外袁通过外施激素研究了调
控白桦花发育中成花基因的表达情况渊宰葬灶早 藻贼 葬造援袁
圆园员员曰 在澡葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园员员冤遥 虽然白桦花发育研究已
有一些成果袁但是袁高等植物的花发育是一个复杂而
精细的动态过程袁作为该领域研究的新树种袁其花发
育分子机制研究还处于初期阶段袁现有的成果还远
不能揭示其发育机制袁需要更深入系统的研究遥
花发育突变体是研究花器官发育及其功能基因
组学的理想材料遥 前期发现的天然白桦雄花序发育
异常突变体袁与正常的雄花序相比袁该突变体在花序
的着生位置尧形态结构尧花药形态及生殖发育等方面
都有明显不同渊刘雪梅等袁 圆园员园冤遥 正常植株的雄花
序着生在枝条的顶端袁而突变植株上有 圆种不同的雄
花序院一种与正常雄花序形态结构和着生位置等很相
似渊晕蕴冤袁但后期发育异常袁表现为败育特征袁且越冬后
散粉时雄花序枯死袁或者只有少数花药开裂散粉曰另一
种雄花序则为典型的雄花序突变体渊酝冤袁其花药的形
态及发育尧减数分裂及雄配子体形成均严重异常袁越冬
后枯死袁花药不开裂袁导致败育渊刘雪梅等袁 圆园员园冤遥 因
此袁该突变体可用于白桦雄花发育机制的研究遥
糟阅晕粤鄄粤云蕴孕技术效率高袁重复性好袁灵敏度高袁
可用于基因表达差异分析 渊 在澡葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园园愿曰
悦葬责燥皂葬糟糟蚤燥 藻贼 葬造援袁 圆园园怨曰 安泽伟等袁 圆园员园曰 杂澡蚤 藻贼 葬造援袁
圆园员员冤袁可在一定程度上揭示植物发育机制袁并在相
应的调控机制和遗传网络基本信息方面提供基础信
息渊悦灶怎灶凿凿藻 藻贼 葬造援袁 圆园园猿冤遥 本研究采用 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕
技术袁以白桦雄花突变植株早期发育的 圆 种雄花序
渊晕蕴和 酝冤为材料袁分析二者的差异基因表达谱袁共
分离了 愿员 个 耘杂栽泽袁选取其中 缘 个与花发育相关的
耘杂栽泽分析其转录表达规律遥 该研究为今后进一步
揭示白桦雄花发育及雄性不育机制奠定了基础袁也
为将来对重要的单性花发育相关基因进行生物学功
能研究提供有价值的资料遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 植物材料
取 圆园园怨 年 苑 月 缘 日要愿 月 圆苑 日渊每 猿 天取材 员
次冤的突变植株的正常雄花序渊晕蕴冤和突变雄花序
渊酝冤用于 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析遥 圆园员园 年 苑 月 员苑 日的
正常植株雄花序和突变植株的突变雄花序渊酝冤尧雌
花序尧幼叶尧幼枝袁及不同发育阶段渊苑 月 员苑 日要愿 月
圆苑 日每 猿 天取材 员 次冤的雄花序渊酝 和 晕蕴冤进行
砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸分析遥 材料采集后以液氮速冻后
保存于 原愿园 益遥
员郾 圆摇 总 砸晕粤的提取和 糟阅晕粤的合成
利用改进的 悦栽粤月方法提取各时期正常雄花序
渊晕蕴冤和突变雄花序渊酝冤的总 砸晕粤袁并用 砸晕葬泽藻鄄枣则藻藻
阅灶葬泽藻 陨 渊孕则燥皂藻早葬袁酝葬灶凿泽燥灶袁哉杂粤冤对 砸晕粤进行 阅晕粤
消化袁分别将纯化后突变雄花序渊酝冤与正常雄花序
渊晕蕴冤 的 砸晕粤 进行等量混合 渊终浓度为 圆 滋早窑
滋蕴 原员 冤遥 采用 酝鄄酝蕴灾 砸贼葬泽藻 糟阅晕粤 合成试剂盒
渊栽葬运葬砸葬袁允葬责葬灶冤合成双链 糟阅晕粤遥
员郾 猿摇 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析
参考 月葬糟澡藻皂 等渊员怨怨愿冤的方法袁并利用已优化
的程序进行 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 分析渊邢磊等袁 圆园员园冤遥 预
扩增 孕悦砸反应体系院缘 滋蕴连接产物袁圆 滋蕴 员园 伊 孕悦砸
月怎枣枣藻则袁员郾 圆 滋蕴 酝早悦造圆 渊圆缘 皂皂燥造窑蕴 原员 冤袁圆 滋蕴 凿晕栽孕
渊圆郾 园 皂皂燥造窑蕴 原员 冤袁园郾 远 滋蕴 耘糟燥砸玉引物渊圆园 滋皂燥造窑
蕴 原员冤袁园郾 远 滋蕴 酝泽藻玉引物渊圆园 滋皂燥造窑蕴 原员 冤袁园郾 圆 滋蕴
栽葬择酶渊缘 哉窑滋蕴 原员冤袁加 凿凿匀圆韵 至 圆园 滋蕴遥 预扩增条
件如下院怨源 益 猿 皂蚤灶曰 怨源 益 猿园 泽袁缘远 益 猿园 泽袁苑圆 益
员 皂蚤灶袁猿园个循环曰 苑圆 益 缘 皂蚤灶遥 将预扩增产物稀释
源园倍袁用于选择性扩增模板遥 选择性扩增 孕悦砸 反应
体系院缘 滋蕴稀释的预扩增产物袁圆 滋蕴 员园 伊 孕悦砸 月怎枣枣藻则袁
员郾 圆 滋蕴 酝早悦造圆渊圆缘 皂皂燥造窑蕴 原员冤袁圆 滋蕴 凿晕栽孕渊圆郾 园 皂皂燥造窑
蕴 原员冤袁园郾 远 滋蕴 耘糟燥砸玉引物渊圆园 滋皂燥造窑蕴 原员 冤袁园郾 远 滋蕴
酝泽藻玉引物渊圆园 滋皂燥造窑蕴 原员 冤袁园郾 圆 滋蕴 栽葬择 酶渊缘 哉窑
滋蕴 原员冤袁加 凿凿匀圆韵至 圆园 滋蕴遥 选择性扩增条件如下院怨源 益 猿 皂蚤灶曰 怨源 益 猿园 泽袁远缘 益渊每个循环 原 园郾 苑 益冤
猿园 泽袁苑圆 益 员 皂蚤灶袁员猿 个循环曰 怨源 益 猿园 泽袁缘远 益 猿园 泽袁
苑圆 益 员 皂蚤灶袁圆猿 个循环曰 苑圆 益 缘 皂蚤灶遥 扩增产物在
远豫的聚丙烯酰胺变性凝胶上电泳袁银染检测遥
员郾 源摇 差异片段的克隆及序列分析
将差异表达片段回收纯化后克隆到 孕酝阅鄄员愿栽
载体中渊栽葬运葬砸葬袁允葬责葬灶冤并测序袁利用 月蕴粤杂栽载 程序
与 晕悦月陨 数据库进行同源性分析 渊 粤造贼泽糟澡怎造 藻贼 葬造援袁
员圆
林 业 科 学 源愿 卷摇
员怨怨苑冤遥 应用 郧韵渊郧藻灶藻 韵灶贼燥造燥早赠 悦燥灶泽燥则贼蚤怎皂冤渊澡贼贼责院椅
憎憎憎援 早藻灶藻燥灶贼燥造燥早赠援 燥则早冤进行生物学功能分析袁并运
用 运耘郧郧 软件对其代谢途径进行分析 渊 澡贼贼责院 椅
憎憎憎援 早藻灶燥皂藻援 躁责 辕 噪藻早早 辕 冤渊运蚤皂 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤遥
员郾 缘摇 差异片段的 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸分析
用 孕则蚤皂藻则 缘郾 园 软件设计引物渊表 员冤遥 反应试剂
盒 为 杂再月砸 郧则藻藻灶 砸藻葬造贼蚤皂藻 孕悦砸 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾
渊栽韵再韵月韵袁韵泽葬噪葬袁 允葬责葬灶冤袁反应体系院员园 滋蕴 杂再月砸
孕则藻皂蚤曾 耘曾 栽葬择袁圆 滋蕴 糟阅晕粤 模板袁上下游引物各
员 滋蕴袁远 滋蕴 凿凿匀圆韵遥 扩增程序为院怨缘 益 缘 皂蚤灶曰 怨缘 益猿园 泽袁缘愿 益 猿园 泽袁苑圆 益 猿园 泽袁苑怨 益 员 泽袁共 源园 个循环遥
试验设置 猿 次重复袁数据利用 韵责贼蚤糟燥灶 酝燥灶蚤贼燥则 圆 软件
保存和分析袁整个反应过程在 韵孕栽陨韵晕域荧光定量
孕悦砸仪上进行遥
表 员摇 用于定量 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸的引物
栽葬遭援 员摇 孕则蚤皂藻则泽 怎泽藻凿 蚤灶 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸
基因名称郧藻灶藻 灶葬皂藻 上游引物渊缘忆要猿忆冤云燥则憎葬则凿 责则蚤皂藻则渊缘忆要猿忆冤 下游引物渊缘忆要猿忆冤砸藻增藻则泽藻 责则蚤皂藻则渊缘忆要猿忆冤
月责造皂皂藻员缘 悦栽栽悦粤郧郧郧栽悦悦粤粤郧郧栽栽悦 悦郧粤粤郧悦悦粤粤栽郧栽悦悦粤粤栽粤
月责造皂皂藻圆怨 粤粤栽郧郧悦粤郧粤郧郧粤悦粤粤郧栽粤悦 栽悦粤栽悦郧郧粤悦郧郧粤栽栽粤郧粤
月责造皂皂藻员缘愿 栽栽郧悦栽栽粤栽郧郧栽郧悦栽郧悦栽郧栽 郧栽栽栽悦粤粤栽栽悦悦粤粤郧郧郧栽悦粤
月责造皂皂藻员远园 郧郧栽粤栽郧郧悦栽粤悦粤粤栽郧郧郧粤郧粤 粤栽悦粤郧悦郧郧郧粤栽栽郧粤郧郧栽粤粤
月责造皂皂藻圆缘圆 郧粤悦郧悦悦悦悦栽郧粤栽郧粤悦栽悦栽粤 悦粤郧郧郧粤粤郧悦郧粤栽粤悦栽粤悦郧郧
粤糟贼蚤灶 悦粤栽悦栽悦栽郧粤栽悦郧郧粤粤栽郧郧粤粤郧 粤郧粤栽悦悦栽栽栽悦栽郧粤栽粤栽悦悦粤悦郧
摇 摇
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕筛选的 耘杂栽泽序列分析
运用 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕方法筛选出白桦突变雄花序
渊酝冤与正常雄花序渊晕蕴冤超过 源 缘园园 个差异 糟阅晕粤片
段袁每对引物组合平均扩增 圆园 耀 猿园 条片段袁片段长
度为 员园园 耀 缘园园 遭责袁从中挑选 圆愿园 条多态性片段渊图
员冤袁回收后得到 愿员 条差异片段袁在 晕悦月陨 中应用
月蕴粤杂栽载数据库进行基因同源性比对袁并提交
郧藻灶月葬灶噪 耘杂栽 数据库 渊 允运缘源远远圆源要允运缘源远苑园源 冤 渊表
圆冤遥 其中袁缘员 个 耘杂栽泽渊远猿豫 冤在数据库中显示相似
性较低即无匹配渊灶燥 皂葬贼糟澡冤袁猿园 个 耘杂栽泽渊猿苑豫 冤显示
与已知蛋白同源性较高遥 另外袁在 愿员 个 耘杂栽泽中袁圆缘
个 耘杂栽泽渊猿员豫 冤在 酝中下调表达袁猿猿 个 耘杂栽泽渊源员豫 冤
在 酝中上调表达袁员猿 个 耘杂栽泽渊员远豫 冤在 晕蕴 中特异
摇 摇 摇 摇
性表达袁员园 个 耘杂栽泽在 酝中特异性表达遥
图 员摇 不同引物组合的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕扩增图谱
云蚤早援 员摇 栽澡藻 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 皂葬责 怎泽蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责则蚤皂藻则泽
晕蕴院突变株中类似正常雄花序曰 酝院突变株中突变雄花序遥 下同遥
晕蕴院 晕燥则皂葬造鄄造蚤噪藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼曰
酝院 酝怎贼葬灶贼 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼援 栽澡藻 泽葬皂藻 遭藻造燥憎援
表 圆摇 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕差异片段的序列同源性分析
栽葬遭援 圆摇 粤灶葬造赠泽藻泽 燥枣 泽藻择怎藻灶糟藻 澡燥皂燥造燥早赠 燥枣 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 枣则葬早皂藻灶贼泽
耘杂栽 克隆耘杂栽 糟造燥灶藻 序列号粤糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援 长度杂蚤扎藻 辕 遭责 编码可能的蛋白耘灶糟燥凿蚤灶早 责燥泽泽蚤遭造藻 责则燥贼藻蚤灶 相似性杂蚤皂蚤造葬则蚤贼赠渊豫 冤 耘值耘鄄增葬造怎藻
催化活性 悦葬贼葬造赠贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻员园 允运缘源远远猿园 源愿缘 短链脱氢酶 杂澡燥则贼鄄糟澡葬蚤灶 凿藻澡赠凿则燥早藻灶葬泽藻袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱 蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘猿源圆源缘援 员冤 怨猿 愿藻 原 苑缘
月责造皂皂藻员猿苑 允运缘源远远苑猿 员愿缘 镁螯合酶 匀亚基 酝葬早灶藻泽蚤怎皂 糟澡藻造葬贼葬泽藻 匀 泽怎遭怎灶蚤贼 咱葡萄 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬暂渊粤阅耘园缘圆怨员援 员冤 愿猿 源藻 原 圆圆
月责造皂皂藻员远猿 允运缘源远远愿园 圆缘圆 韵砸云 员源猿 咱大豆 郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾暂渊悦粤粤猿园缘圆圆援 员冤 怨猿 圆藻 原 员源
月责造皂皂藻员远愿 允运缘源远远愿圆 圆员怨 异黄酮还原酶类似蛋白 缘 栽孕粤院 蚤泽燥枣造葬增燥灶藻 则藻凿怎糟贼葬泽藻鄄造蚤噪藻 责则燥贼藻蚤灶 缘咱葡萄 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬暂渊悦粤陨缘远猿猿源援 员冤 愿猿 圆藻 原 圆愿
转移酶活性 栽则葬灶泽枣藻则葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻远 允运缘源远远圆苑 员员愿 细胞分裂素 原 韵 原葡萄糖 圆 悦赠贼燥噪蚤灶蚤灶鄄韵鄄早造怎糟燥泽赠造贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 圆咱玉米 在藻葬 皂葬赠泽暂渊晕孕赃园园员员源怨圆园缘援 员冤 苑员 圆藻 原 员圆
月责造皂皂藻苑圆 允运缘源远远缘猿 圆愿园 蛋白质转运 孕则燥贼藻蚤灶 贼则葬灶泽责燥则贼藻则袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘猿圆园猿员援 员冤 远园 源藻 原 圆源
圆圆
摇 第 缘 期 刘雪梅等院 白桦雄花突变体早期发育差异表达基因的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析
续表 悦燥灶贼蚤灶怎藻凿
耘杂栽 克隆耘杂栽 糟造燥灶藻 序列号粤糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援 长度杂蚤扎藻 辕 遭责 编码可能的蛋白耘灶糟燥凿蚤灶早 责燥泽泽蚤遭造藻 责则燥贼藻蚤灶 相似性杂蚤皂蚤造葬则蚤贼赠渊豫 冤 耘值耘鄄增葬造怎藻
月责造皂皂藻员远园 允运缘源远远苑怨 圆怨愿 纤维素合成酶 缘 悦藻造造怎造燥泽藻 泽赠灶贼澡葬泽藻 缘 咱巨桉 耘怎糟葬造赠责贼怎泽 早则葬灶凿蚤泽暂渊粤粤再远园愿源苑援员冤 怨员 缘藻 原源远
月责造皂皂藻员愿源 允运缘源远远愿远 圆圆怨 哈霉素 琢 孕怎贼葬贼蚤增藻 蚤皂责燥则贼蚤灶 葬造责澡葬 咱红车轴草 栽则蚤枣燥造蚤怎皂 责则葬贼藻灶泽藻暂渊月粤耘苑员圆园怨援员冤 愿圆 员藻 原猿圆
氧化还原酶活性 韵曾蚤凿燥则藻凿怎糟贼葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻员员愿 允运缘源远远远愿 怨源 酰基辅酶 粤 氧化酶 粤糟赠造鄄糟燥粤 燥曾蚤凿葬泽藻 咱三叶草 栽则蚤枣燥造蚤怎皂 则藻责藻灶泽 暂渊粤阅阅园怨远员愿援 员冤 怨猿 怨藻 原 员园
月责造皂皂藻圆缘圆 允运缘源远苑园园 员圆怨 细胞 色 素 孕源缘园 悦赠贼燥糟澡则燥皂藻 孕源缘园 咱 脂 麻 杂藻泽葬皂怎皂 泽糟澡蚤灶扎蚤葬灶怎皂 暂渊月粤允园怨园远愿援 员冤 缘猿 猿藻 原 园源
分子结构活性 杂贼则怎糟贼怎则葬造 皂燥造藻糟怎造藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻怨愿 允运缘源远远远圆 猿苑愿 远园杂 核糖体蛋白质 蕴员愿 远园杂 则蚤遭燥泽燥皂葬造 责则燥贼藻蚤灶 蕴员愿袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘员圆源缘缘援 员冤 怨远 圆藻 原 员园
月责造皂皂藻员源远 允运缘源远远苑缘 员苑苑 微管蛋白 琢 链 栽怎遭怎造蚤灶 葬造责澡葬 糟澡葬蚤灶袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊粤悦酝苑怨猿远缘援 员冤 员园园 圆藻 原 圆远
抗氧化剂活性 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻员员 允运缘源远远猿员 猿愿圆 类似于 圆远杂 蛋白酶体亚基 孕则藻凿蚤糟贼藻凿院 泽蚤皂蚤造葬则 贼燥 圆远杂 责则燥贼藻葬泽燥皂藻 泽怎遭怎灶蚤贼砸孕晕缘遭 咱葡萄 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬暂渊载孕赃园园圆圆苑愿圆源怨援 员冤 愿愿 员藻 原 缘怨
月责造皂皂藻员猿猿 允运缘源远远苑圆 圆员圆 四旋蛋白 源 栽藻贼则葬泽责葬灶蚤灶 源 咱拟南芥 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬暂渊晕孕赃圆园园愿猿园援 员冤 苑园 圆藻 原员怨
结合活性 月蚤灶凿蚤灶早
月责造皂皂藻源 允运缘源远远圆远 猿源怨 枯草杆菌蛋白酶 杂怎遭贼蚤造蚤泽蚤灶鄄造蚤噪藻 责则燥贼藻葬泽藻 责则藻责则燥藻灶扎赠皂藻 咱烟草 晕蚤糟燥贼蚤葬灶葬贼葬遭葬糟怎皂暂渊粤悦栽猿源苑远源援 员冤 远猿 怨藻 原 员猿
月责造皂皂藻员缘 允运缘源远远猿源 猿源员 酝葬责激酶 酝葬责 噪蚤灶葬泽藻 咱拟南芥泥糊菜亚种 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 造赠则葬贼葬 泽怎遭泽责援造赠则葬贼葬暂渊载孕赃园园圆愿苑远园怨远援 员冤 缘苑 远藻 原 圆愿
月责造皂皂藻猿苑 允运缘源远远源猿 圆员园 含 悦砸酝域蛋白 悦砸杂员 辕 再澡遭再渊悦砸酝冤 凿燥皂葬蚤灶鄄糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 责则燥贼藻蚤灶 咱拟南芥 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬暂渊晕孕赃员愿愿源远愿援 员冤 源怨 源藻 原 员园
月责造皂皂藻源缘 允运缘源远远源缘 员缘远 杂宰陨酝 锌指类似蛋白 杂宰陨酝 扎蚤灶糟 枣蚤灶早藻则鄄造蚤噪藻 责则燥贼藻蚤灶 咱拟南芥 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽贼澡葬造蚤葬灶葬暂渊晕孕赃怨苑源园缘源援 员冤 怨园 圆藻 原 圆员
月责造皂皂藻缘圆 允运缘源远远源苑 圆远园 二磷酸核酮糖羧化酶 砸蚤遭怎造燥泽藻 遭蚤泽责澡燥泽责澡葬贼藻 糟葬则遭燥曾赠造葬泽藻 咱拟南芥粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬暂渊悦粤粤猿员怨源愿援 员冤 愿缘 员藻 原 猿源
月责造皂皂藻怨缘 允运缘源远远远员 员苑源 富含亮氨酸重复受体蛋白 蕴藻怎糟蚤灶藻鄄则蚤糟澡 则藻责藻葬贼 则藻糟藻责贼燥则鄄造蚤噪藻 责则燥贼藻蚤灶 咱豌豆 孕蚤泽怎皂 泽葬贼蚤增怎皂暂渊月粤运猿怨怨缘源援 员冤 愿圆 猿藻 原 圆圆
月责造皂皂藻员缘愿 允运缘源远远苑苑 猿猿员 热激蛋白 匀藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 苑园 咱黄瓜 悦怎糟怎皂蚤泽 泽葬贼蚤增怎泽暂渊悦粤月苑圆员圆愿援 员冤 怨愿 员藻 原 缘源
月责造皂皂藻圆员愿 允运缘源远远怨源 员圆园 转导素家族蛋白 栽则葬灶泽凿怎糟蚤灶 枣葬皂蚤造赠 责则燥贼藻蚤灶 咱拟南芥泥糊菜亚种粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 造赠则葬贼葬 泽怎遭泽责援 造赠则葬贼葬暂渊载孕赃园园圆愿愿苑缘园员援 员冤 愿怨 猿藻 原 员猿
月责造皂皂藻圆猿苑 允运缘源远远怨愿 圆愿员 山松醇 孕怎皂蚤造蚤燥袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘员猿猿员源援 员冤 缘愿 远藻 原 员远
通道调节活性 悦澡葬灶灶藻造 则藻早怎造葬贼燥则 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻员员缘 允运缘源远远远苑 圆圆苑 保守 的 假 设 蛋 白 悦燥灶泽藻则增藻凿 澡赠责燥贼澡藻贼蚤糟葬造 责则燥贼藻蚤灶 咱 蓖 麻 砸蚤糟蚤灶怎泽糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘猿圆员圆员援 员冤 苑苑 愿藻 原 员苑
水解酶活性 匀赠凿则燥造葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻源园 允运缘源远远源源 圆员员 粤栽孕结合蛋白 粤栽孕 遭蚤灶凿蚤灶早 责则燥贼藻蚤灶袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘圆猿园缘源援 员冤 愿苑 苑藻 原 员猿
酶调节活性 耘灶扎赠皂藻 则藻早怎造葬贼燥则 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻愿苑 允运缘源远远缘愿 员猿苑 信号 转 导 体 亚 基 杂蚤早灶葬造燥泽燥皂藻 泽怎遭怎灶蚤贼袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱 蓖 麻 砸蚤糟蚤灶怎泽糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘圆怨圆员园援 员冤 怨缘 员藻 原 员远
化学引诱物活性 悦澡藻皂燥葬贼贼则葬糟贼葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻员圆愿 允运缘源远远苑员 源源圆 悦圆 域 蛋 白 悦圆 凿燥皂葬蚤灶鄄糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 责则燥贼藻蚤灶 咱 拟 南 芥 泥 糊 菜 亚 种粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 造赠则葬贼葬 泽怎遭泽责援 造赠则葬贼葬暂渊载孕赃园园圆愿怨园缘圆员援 员冤 苑缘 猿藻 原 缘缘
连接酶活性 蕴蚤早葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻圆怨 允运缘源远远猿愿 员怨园 泛素结合酶 耘圆 猿圆 哉遭蚤择怎蚤贼蚤灶鄄糟燥灶躁怎早葬贼蚤灶早 藻灶扎赠皂藻 耘圆 猿圆 咱拟南芥粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬暂渊晕孕赃缘远远缘远猿援 员冤 愿愿 远藻 原 圆园
激酶活性 运蚤灶葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻圆猿圆 允运缘源远远怨苑 员圆园 酝葬噪袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘员怨愿苑园援 员冤 愿怨 愿藻 原 员源
裂解酶活性 蕴赠葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
月责造皂皂藻员圆园 允运缘源远远远怨 员怨缘 蕴 原异 原苏氨酸醛缩酶 蕴鄄葬造造燥鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻 葬造凿燥造葬泽藻袁 责怎贼葬贼蚤增藻 咱蓖麻 砸蚤糟蚤灶怎泽糟燥皂皂怎灶蚤泽暂渊载孕赃园园圆缘圆员怨苑源援 员冤 愿怨 员藻 原 圆远
摇 摇
猿圆
林 业 科 学 源愿 卷摇
摇 摇 对 猿园 个已知同源性蛋白的 耘杂栽泽 序列进行 郧韵
功能分类袁猿园 个 耘杂栽泽 均归类为生物学过程和分子
功能袁圆怨 个 耘杂栽泽 归于细胞组分遥 在生物学过程中
渊图 圆 冤袁参与代谢过程和刺激反应过程均为
员猿郾 猿猿豫 袁其他高表达 耘杂栽泽 参与细胞过程渊员园豫 冤尧
发育过程渊员园豫 冤尧生物黏附渊远郾 远苑豫 冤等过程遥 另
外袁本研究结果显示碳水化合物的代谢和生物合成
过程只存在于 晕蕴 雄花序中袁而生物调节和细胞成
分的组织或起源过程则特异性地存在于突变雄花序
酝中遥 圆怨 个 耘杂栽泽 归于细胞组分袁其中包含叶绿体
渊员远郾 远苑豫 冤尧胞外区渊圆园豫 冤尧内膜系统渊员园豫 冤等细胞
组分袁与线粒体和液泡膜有关的 耘杂栽泽 特异出现于
晕蕴中遥 在分子功能分类中袁参与结合活性的 耘杂栽泽
为 猿园豫 袁催化活性为 员猿郾 猿猿豫 袁 转移酶活性为
员猿郾 猿猿豫 袁其中水解酶活性相关的 耘杂栽泽 只在 晕蕴 中
表达袁而激酶活性和化学诱导活性则特异表达于 酝
中渊数据未列出冤遥 这些差异暗示了突变雄花序发
育的复杂性和多样性袁其不同基因在雄花发育的过
程中发挥着重要作用遥
图 圆摇 晕蕴和 酝花序中差异序列的 郧韵生物过程分析
云蚤早援 圆摇 郧韵 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 责则燥糟藻泽泽 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 泽藻择怎藻灶糟藻泽 藻曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 晕蕴 葬灶凿 酝 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽
表 猿摇 耘杂栽序列的 运耘郧郧生物化学途径分析淤
栽葬遭援 猿摇 粤灶葬造赠泽藻泽 燥枣 运耘郧郧 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 责葬贼澡憎葬赠 皂葬责责蚤灶早泽 燥枣 耘杂栽泽
酝葬责号酝葬责 晕燥援 途径孕葬贼澡憎葬赠泽 片段数目耘杂栽泽 百分率孕藻则糟藻灶贼葬早藻渊豫 冤 晕蕴 酝
园员员园园 代谢途径 酝藻贼葬遭燥造蚤糟 责葬贼澡憎葬赠泽 远 圆园郾 园园 垣 垣
园猿园员园 核糖体 砸蚤遭燥泽燥皂藻 圆 远郾 远苑 垣 垣
园圆园员园 粤月悦转运蛋白 粤月悦 贼则葬灶泽责燥则贼藻则泽 圆 远郾 远苑 垣 垣
园源员源缘 吞噬小体 孕澡葬早燥泽燥皂藻 圆 远郾 远苑 垣 垣
园源园员园 酝粤孕运信号传导途径 酝粤孕运 泽蚤早灶葬造蚤灶早 责葬贼澡憎葬赠 员 猿郾 猿猿 垣 垣
园源猿员园 宰灶贼信号传导途径 宰灶贼 泽蚤早灶葬造蚤灶早 责葬贼澡憎葬赠 员 猿郾 猿猿 垣 垣
园员园远园 植物次生代谢产物的生物合成 月蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 燥枣 责造葬灶贼 泽藻糟燥灶凿葬则赠 皂藻贼葬遭燥造蚤贼藻泽 圆 远郾 远苑 垣 垣
园源员圆园 泛素介导的蛋白水解 哉遭蚤择怎蚤贼蚤灶 皂藻凿蚤葬贼藻凿 责则燥贼藻燥造赠泽蚤泽 圆 远郾 远苑 垣元 垣
园园源园圆 异羟肟酸生物合成 月藻灶扎燥曾葬扎蚤灶燥蚤凿 遭蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 员 猿郾 猿猿 垣元 垣
园源苑源源 光传导 孕澡燥贼燥贼则葬灶泽凿怎糟贼蚤燥灶 员 猿郾 猿猿 垣元 垣
园源员源员 内质网蛋白质加工 孕则燥贼藻蚤灶 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 蚤灶 藻灶凿燥责造葬泽皂蚤糟 则藻贼蚤糟怎造怎皂 员 猿郾 猿猿 垣元 垣
园猿园员猿 砸晕粤转运 砸晕粤 贼则葬灶泽责燥则贼 员 猿郾 猿猿 垣元 垣
园猿园缘园 蛋白酶体 孕则燥贼藻葬泽燥皂藻 员 猿郾 猿猿 垣元 垣
园源员员园 细胞周期 悦藻造造 糟赠糟造藻 猿 员园郾 园园 垣 垣元
园猿园远园 蛋白运输 孕则燥贼藻蚤灶 藻曾责燥则贼 员 猿郾 猿猿 垣 垣元
园源怨员园 胰岛素信号传导途径 陨灶泽怎造蚤灶 泽蚤早灶葬造蚤灶早 责葬贼澡憎葬赠 员 猿郾 猿猿 垣 垣元
园源园苑缘 植物激素信号转导 孕造葬灶贼 澡燥则皂燥灶藻 泽蚤早灶葬造 贼则葬灶泽凿怎糟贼蚤燥灶 员 猿郾 猿猿 垣 垣元
园源愿苑源 蛋白消化和吸收 孕则燥贼藻蚤灶 凿蚤早藻泽贼蚤燥灶 葬灶凿 葬遭泽燥则责贼蚤燥灶 员 猿郾 猿猿 垣 垣元
摇 摇 淤 垣元院在 晕蕴或 酝中有较高的表达曰 垣 院在 晕蕴 或 酝 中表达曰 晕蕴院 突变株中类似正常雄花序曰 酝院 突变株中突变雄花序遥 垣 元院 酝燥则藻澡蚤早澡造赠 则藻责则藻泽藻灶贼藻凿 蚤灶 晕蕴 燥则 酝曰 垣 院 耘曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 晕蕴 燥则 酝曰 晕蕴院 晕燥则皂葬造鄄造蚤噪藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼曰 酝院 酝怎贼葬灶贼 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼援
源圆
摇 第 缘 期 刘雪梅等院 白桦雄花突变体早期发育差异表达基因的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析
摇 摇 运用 运耘郧郧数据库对 猿园 个 耘杂栽泽进行生物途径
分析渊表 猿冤袁远 个 耘杂栽泽渊圆园豫 冤参与新陈代谢途径袁猿
个 耘杂栽泽渊员园豫 冤参与细胞周期袁另外袁分别有 圆 个
耘杂栽泽渊远郾 远苑豫 冤参与核糖体尧粤月悦 转运蛋白尧吞噬体尧
次生代谢产物的合成和泛素介导的蛋白水解等途
径遥 此外袁有 远 个生化途径相关的 苑 个 耘杂栽泽 在 酝
中下调表达袁另外 缘 个生化途径相关的 苑 个 耘杂栽泽在
酝中上调表达渊表 猿冤遥 这些突变雄花序的生化代谢
途径差异说明了白桦雄花发育的复杂性袁并提供了
一些可能与雄性不育有关的代谢调控途径和基因遥
圆郾 圆摇 差异表达 耘杂栽泽的转录表达
选择 缘 个 耘杂栽泽 进行 择砸栽鄄孕悦砸 分析袁其中 猿 个
耘杂栽泽在突变雄花序渊酝冤中下调表达渊图 猿冤袁包括
月责造皂皂藻员缘 渊 酝粤孕 噪蚤灶葬泽藻袁 酝粤孕 激 酶 冤袁 月责造皂皂藻圆怨
渊 哉遭蚤择怎蚤贼蚤灶鄄糟燥灶躁怎早葬贼蚤灶早 藻灶扎赠皂藻袁 泛 素 结 合 酶 冤袁
月责造皂皂藻员远园渊悦藻造造怎造燥泽藻 泽赠灶贼澡葬泽藻袁纤维素合成酶冤曰 圆 个
耘杂栽泽 在突变雄花中上调表达 渊图 猿 冤袁 包括
月责造皂皂藻员缘愿 渊 匀藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶袁 热 激 蛋 白 冤袁
月责造皂皂藻圆缘圆渊悦赠贼燥糟澡则燥皂藻 孕源缘园袁细胞色素 孕源缘园冤遥 此
结果对应于 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕的差异表达袁证明这种方法
对 晕蕴和 酝花序之间差异表达的研究是可信的遥
图 猿摇 择砸栽鄄孕悦砸验证 晕蕴和 酝花序中的差异表达基因
云蚤早援 猿摇 阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 早藻灶藻 增葬造蚤凿葬贼藻凿 遭赠
择砸栽鄄孕悦砸 蚤灶 晕蕴 葬灶凿 酝 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽
酝院突变植株中的突变雄花序曰
晕蕴院突变植株中类似正常的雄花序遥
酝院 酝怎贼葬灶贼 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼 责造葬灶贼曰
晕蕴院 晕燥则皂葬造鄄造蚤噪藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼 责造葬灶贼援
为了探索这 缘 个基因的转录表达特征和规律袁
首先进行了正常植株渊宰贼孕冤和突变植株渊酝孕冤源 种
组织渊雄花序尧雌花序尧幼叶和幼枝冤的表达分析渊图
源葬袁糟袁藻袁早袁蚤冤遥 结果表明袁这些基因在不同组织表达
情况有明显差异遥 与正常植株相比袁这 缘 个基因在
突变植株的雌花尧幼叶尧幼枝中的表达情况有很大的
不同袁其中 月责造皂皂藻员缘袁月责造皂皂藻圆缘圆 圆 个基因在突变植
株的雌花中下调表达渊图 源葬袁蚤冤袁而其他 猿 个基因则
出现上调表达渊图 源糟袁 藻袁 早冤遥 突变植株的幼叶中
月责造皂皂藻圆缘圆 出现下调表达 渊图 源蚤冤袁而 月责造皂皂藻员缘袁
月责造皂皂藻圆怨袁月责造皂皂藻员远园 出现上调表达渊图 源葬袁糟袁早冤遥
此外袁这种差异也出现在突变幼枝中袁月责造皂皂藻员缘袁
月责造皂皂藻圆缘圆 下 调 表 达 渊 图 源葬袁 蚤 冤袁 月责造皂皂藻圆怨袁
月责造皂皂藻员缘愿 上调表达 渊图 源糟袁 藻冤遥 缘 个基因中除
月责造皂皂藻员缘 和 月责造皂皂藻员缘愿 在突变植株的雄花序中表
达无明显变化外 渊图 源葬袁 藻 冤袁 其他 猿 个基因
渊月责造皂皂藻圆怨袁月责造皂皂藻员远园袁月责造皂皂藻圆缘圆冤均出现下调表
达渊图 源葬袁早袁蚤冤遥 另外袁个别基因在 圆 种植株中个别
部位的表达有显著变化袁例如 月责造皂皂藻员缘 在雌花中
显著下调而在幼叶中显著上调表达 渊图 源葬 冤袁
月责造皂皂藻圆怨 在雄花中显著下调而在雌花中显著上调
表达渊图 源糟冤遥 可见袁这些基因不仅参与生殖器官发
育袁也在营养器官中发挥一定的作用袁同时袁也暗示
它们可能与突变植株的异常发育及雄性不育有关遥
摇 摇 此外袁本研究还对突变植株的 圆 种雄花序渊晕蕴
和 酝冤减数分裂期间渊苑 月中旬要愿 月末冤的转录表
达进行了分析遥 结果表明袁缘 个基因在 圆 种雄花序
之间存在明显的差异表达渊图 源遭袁凿袁枣袁澡袁躁冤遥 与 晕蕴
相比袁月责造皂皂藻员缘 和 月责造皂皂藻圆怨 在减数分裂晚期渊愿 月
员缘要圆苑 日 冤 的 表 达 量 显 著 降 低 渊图 源遭袁 凿 冤袁
月责造皂皂藻员远园 减数分裂中期渊苑 月 猿员 日要愿 月 员缘 日冤
轻微下调表达渊图 源澡冤遥 另外袁月责造皂皂藻圆缘圆 在突变雄
花减数分裂发育初期发生明显下调表达袁而在减数
分裂发育晚期出现明显的上调表达渊图 源躁冤遥 推测
这些基因在特定时期的表达变化与突变雄花序的减
数分裂有关袁它们可能是白桦雄花配子体发育中的
重要基因遥
猿摇 讨论
关于植物雄性不育性的机制已有很多报道袁但
对于生殖周期较长的白桦来说袁其雄性不育的研究
还未见报道袁尤其是自然条件下形成的白桦花发育
突变体更为少见遥 本研究应用 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕 技术分
析 圆 种白桦早期发育雄花序渊晕蕴 与 酝冤的差异表达
转录图谱袁共获得 愿员 条差异表达 耘杂栽泽袁参与信号转
导尧能量代谢尧胁迫反应尧蛋白运输和转录等过程袁这
些基因差异表达的多样性袁暗示白桦雄花序早期发
育的复杂性遥 另外袁有 缘员 个 耘杂栽泽可视为新基因袁说
明白桦作为一个花发育基因组研究的新物种袁还有
很多方面值得更多的研究和探索遥
本研究中袁有 缘愿 个渊苑圆豫 冤耘杂栽泽 序列在白桦突
变体早期雄花中出现上调或下调表达袁有 圆猿 个
渊圆愿豫 冤耘杂栽泽序列特异性地表达于 晕蕴和 酝雄花中袁
这些差异片段共产生 员愿 个生物代谢途径渊表 猿冤袁由
此可以推测袁这些差异表达的基因及其参与的代谢
缘圆
林 业 科 学 源愿 卷摇
图 源摇 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸分析 缘 个基因在白桦植株各组织和雄花序发育的不同阶段的表达情况
云蚤早援 源摇 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸 葬灶葬造赠泽藻泽 燥枣 枣蚤增藻 早藻灶藻泽 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽 蚤灶 憎澡蚤贼藻 遭蚤则糟澡 责造葬灶贼渊 贼蚤泽泽怎藻泽冤
葬灶凿 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 皂怎贼葬灶贼渊泽贼葬早藻泽冤
宰贼孕院 野生型植株曰 酝孕院 突变植株曰 晕蕴院 突变株中类似正常雄花序曰 酝院 突变株中突变雄花序遥
宰贼孕院 宰蚤造凿鄄贼赠责藻 责造葬灶贼曰 酝孕院 酝怎贼葬灶贼 责造葬灶贼曰 晕蕴院 晕燥则皂葬造鄄造蚤噪藻 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼曰
酝院 酝怎贼葬灶贼 皂葬造藻 蚤灶枣造燥则藻泽糟藻灶糟藻泽 蚤灶 皂怎贼葬灶贼援
途径可能与白桦雄性不育有着某种联系遥 要特别指
出的是袁这些差异表达基因还可能与雄花早期发育
有关袁它们参与的生物学过程主要包括发育尧代谢尧
应激反应等过程渊图 圆冤遥 研究结果显示白桦的雄花
早期发育是由多基因参与及精确调控的复杂生物
过程遥
通过 对 缘 个 耘杂栽泽 渊 月责造皂皂藻员缘袁 月责造皂皂藻圆怨袁
月责造皂皂藻员远园袁月责造皂皂藻员缘愿 和 月责造皂皂藻圆缘圆冤的 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻
砸栽鄄孕悦砸分析袁发现它们在白桦不同组织和雄花序
发育不同阶段中的表达量存在差异渊图 源冤袁表明它
们在雄花的结构尧功能和发育上发挥着不同的作用遥
例如 月责造皂皂藻圆怨渊泛素结合酶冤尧月责造皂皂藻员远园渊纤维素
远圆
摇 第 缘 期 刘雪梅等院 白桦雄花突变体早期发育差异表达基因的 糟阅晕粤鄄粤云蕴孕分析
合成酶冤和 月责造皂皂藻员缘愿渊热激蛋白冤的表达量均明显
高于 月责造皂皂藻员缘渊酝粤孕 激酶冤 和 月责造皂皂藻圆缘圆渊细胞色
素 孕源缘园冤袁平均相差约 愿 耀 员园 倍渊图 猿冤袁推测前 猿 个
基因在白桦发育过程中具有重要作用遥 同时袁这 缘
个基因不仅仅在雄花序中表现出表达差异袁在其他
组织渊雌花尧叶尧枝条等冤中的表达也有差异袁说明这
些基因除了与雄花序异常发育有关之外袁也参与其
他组织的代谢和基因表达系统遥
雄配子体形成与花药发育尧小孢子发生尧减数分
裂等多个过程密切相关袁其中袁减数分裂是非常重要
的环节袁不正常的减数分裂是导致雄性不育的重要
原因之一遥 本研究中突变植株中的突变雄花序 酝
的减数分裂延迟且异常袁直接影响了小孢子和花粉
的形成渊刘雪梅等袁 圆园员园冤遥 研究中发现有的基因在
酝进行减数分裂期间的表达发生了很大变化袁推测
这些基因与 酝早期花药发育尧减数分裂和小孢子发
育异常有着一定的联系袁在雄性生殖发育中起着重
要作用遥 例如袁月责造皂皂藻员缘 与拟南芥的 酝粤孕 激酶有
很高的同源性袁该基因在植物体受到机械压力尧创
伤尧盐害尧极端温度尧干旱缺水等信号传递过程中发
挥着重要作用渊宋东辉等袁 圆园园源曰江静等袁 圆园园猿冤遥
也有证据表明袁酝粤孕 激酶家族成员在花粉中表达袁
并可能对花粉发育和萌发具有调节功能渊匀藻遭藻则造藻鄄
月燥则泽 藻贼 葬造援袁 圆园园员冤遥 月责造皂皂藻员缘 在雌花尧幼枝及突变
雄花序 酝 减数分裂晚期呈现较明显的下调表达
渊图 源遭冤袁暗示该基因表达受到抑制与突变植株的异
常发育有密切关系遥 月责造皂皂藻圆怨 同源于拟南芥的泛
素结合酶袁该基因在植物中发挥重要的作用袁如参与
阅晕粤的修复尧维管的分化调控尧光周期反应袁缺素
渊王金利等袁 圆园员园冤尧植物衰老渊孕蚤糟贼燥灶 藻贼 葬造援袁 员怨怨猿冤及
抗逆胁迫响应等渊在澡燥怎 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤遥 月责造皂皂藻圆怨 在
突变雄花序 酝 中减数分裂后期表达受到明显抑制
渊图 源凿冤袁推测该基因参与减数分裂后期发育遥
月责造皂皂藻员远园 与桉树的纤维素合成酶有 怨员豫的同源
性袁该基因在植物细胞壁发育渊运葬造造怎则蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园源冤
及茎伸长 渊宰蚤泽藻 藻贼 葬造援袁 圆园员员 冤中具有重要作用遥
月责造皂皂藻员远园 在突变植株 酝孕 的雄花序中下调表达袁
在雌花和幼叶中上调表达渊图 源早冤袁但在正常雄花序
晕蕴和突变雄花序 酝减数分裂期间的表达无明显差
异渊图 源澡冤袁推测 月责造皂皂藻员远园 在减数分裂中作用不
大袁 但 可 能 参 与 雌 花 及 初 生 细 胞 壁 发 育遥
月责造皂皂藻员缘愿 与黄瓜渊悦怎糟怎皂蚤泽 泽葬贼蚤增怎泽冤的热激蛋白有
怨愿豫的同源性袁该基因对植物抵抗胁迫环境和生长
发育起着重要作用渊胡雨晴等袁 圆园员员冤遥 在突变植株
的雌花和幼枝中的上调表达说明 月责造皂皂藻员缘愿 可能
参与二者的发育过程渊图 源藻冤遥 另外 月责造皂皂藻员缘愿 在
酝减数分裂晚期的下调渊愿 月 员缘 日冤和大量渊愿 月 圆苑
日冤表达渊图 源枣冤预示该基因可能主要参与减数分裂
晚期发育袁 并与由此导致的雄性不育有关遥
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胞色素 孕源缘园袁该基因参与多种生化反应尧生物体内
代谢途径及催化机制渊杨致荣等袁 圆园园猿冤袁也参与花
发育的调控渊杂怎 藻贼 葬造援袁 圆园园怨冤遥 月责造皂皂藻圆缘圆 在雌花序
中表达量明显高于其他组织渊图 源蚤冤袁在突变雄花序
酝减数分裂早期和晚期的表达有明显改变渊图 源躁冤袁
说明该基因参与雌花的发育袁并且在突变雄花减数
分裂早晚期发育中发挥着重要的作用遥
植物的器官发育是一个复杂而循序渐进的形态
建成过程袁其中涉及到很多代谢和调控过程袁需要很
多基因的协调表达来维持系统平衡袁一旦这种平衡
被打破袁就会造成发育异常遥 本研究表明袁白桦雄花
异常发育突变植株不仅仅表现为雄花序的异常袁其
他组织器官中多个基因的表达也发生了较大改变袁
因此袁本研究筛选的这些基因不仅与雄性不育有关袁
还可能参与了其他组织的发育过程遥 今后将对这些
基因进行系统深入的生物学功能研究袁以便于了解
这些基因在白桦花器官和其他组织发育过程中的调
控机制和作用遥
参 考 文 献
安泽伟袁 陈根辉袁程 摇 汉袁等援 圆园员园郾 橡胶树冷应答转录组 糟阅晕粤鄄
粤云蕴孕分析援 林业科学袁源远渊猿冤院远圆 原 远苑郾
胡雨晴袁孙文婷袁马摇 婧袁等援 圆园员员郾 蜡梅热激蛋白基因 悦责匀杂孕员 的克
隆与表达分析援 林业科学袁源苑渊缘冤院员远圆 原 员远苑郾
江摇 静袁安国勇袁王鹏程袁等援 圆园园猿郾 酝粤孕 激酶调节蚕豆保卫细胞中
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刘菲菲袁李慧玉袁王摇 姗袁等援 圆园员员郾 白桦 月责杂韵悦员 基因的克隆及时序
表达分析援 东北林业大学学报袁猿怨渊源冤院员 原 源郾
刘雪梅袁周摇 菲袁邢摇 磊袁等援 圆园员园郾 白桦雄花突变体及其细胞学特
征援 东北林业大学学报袁猿愿渊远冤院员 原 猿郾
宋东辉袁宋凤鸣袁郑摇 重援 圆园园源郾 酝粤孕激酶在植物信号传递网络中的
功能援 浙江大学学报院农业与生命科学版袁猿园渊圆冤院员员怨 原 员圆远郾
王摇 超袁杨传平袁魏继承袁等援 圆园园愿郾 白桦雌花序抑制性消减文库构建
及 耘杂栽分析援 植物研究袁圆愿渊猿冤院圆怨猿 原 圆怨愿郾
王金利袁史胜青袁贾利强袁等援 圆园员园郾 植物泛素结合酶 耘圆 功能研究进
展援 生物技术通报袁员圆渊源冤院苑 原 员园郾
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立援 东北林业大学学报袁猿愿渊员园冤院员缘 原 员愿郾
杨传平袁姜摇 静袁梁摇 艳袁等援 圆园园源郾 白桦雄花序发育初期蛋白质的双
向电泳图谱分析援 东北林业大学学报袁猿圆渊员冤院员 原 源郾
杨传平袁魏继承袁李同华袁等援 圆园园远郾 实时定量 孕悦砸 法分析白桦中一
花发育相关基因 月责匀耘晕 的时序表达援 东北林业大学学报袁猿源
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杨致荣袁毛摇 雪袁杨致芬袁等援 圆园园猿郾 细胞色素 孕源缘园 基因及其在植物
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林 业 科 学 源愿 卷摇
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