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Classification of Tomicus Species

切梢小蠹属昆虫分类鉴定方法


采用形态学和分子生物学相结合的方法,建立一套快速、准确鉴定切梢小蠹的特征系统。利用鞘翅斜面第2沟间部的瘤状颗粒和刻点分布、鞘翅斜面刚毛长短和前胸背板刻点及刚毛分布3种特征,在体视显微镜放大30倍条件下可实现切梢小蠹虫的准确鉴定。通过形态鉴定为同种的小蠹虫在利用28S rDNA序列片段构建的系统发育树上能首先聚在一起,并且切梢小蠹属昆虫种下、种间和种上的遗传距离分布在3个不重叠的范围内,利用28S rDNA基因构建切梢小蠹属分子鉴定体系是理想的方法之一。通过系统发育树的聚类分析或遗传距离比较均可实现种类鉴定。

Both morphological characters and a portion of of 28S rDNA sequences were used to identifying Tomicus species. The specimens were classed into groups with the following characters:1) granules or punctures on interstria 2 on the declivity of the elytra. 2) length of the elytral interstrial hairs and hairs arising from punctures. 3)arrangement of pronotal punctures and hairs. These characters could be clearly examined under a binocular microscope at 30×magnification and they were applicable and valuable for the forest entomologists to identify Tomicus species. The phylogenetic tree established with difference in 28S rDNA sequence of D2 region revealed that the specimens of each group identified by morphological characters were also grouped together. The genetic distances of intra-species, inter-species and inter-genus were not overlapped. Genetic divergence of 28S rDNA was also useful for identifying Tomicus species.


全 文 :第 源愿 卷 第 圆 期
圆 园 员 圆 年 圆 月
林 业 科 学
杂悦陨耘晕栽陨粤 杂陨蕴灾粤耘 杂陨晕陨悦粤耘 灾燥造郾 源愿袁晕燥郾 圆云藻遭援 袁圆 园 员 圆
切梢小蠹属昆虫分类鉴定方法鄢
李摇 霞员袁圆 摇 张摇 真员 摇 曹摇 鹏员 摇 王鸿斌员 摇 韩平定员
渊员郾 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所摇 国家林业局森林保护学重点实验室摇 北京 员园园园怨员曰
圆郾 国家知识产权局专利局专利审查协作北京中心摇 北京 员园园园怨园冤
摘摇 要院摇 采用形态学和分子生物学相结合的方法袁建立一套快速尧准确鉴定切梢小蠹的特征系统遥 利用鞘翅斜面
第 圆 沟间部的瘤状颗粒和刻点分布尧鞘翅斜面刚毛长短和前胸背板刻点及刚毛分布 猿 种特征袁在体视显微镜放大
猿园 倍条件下可实现切梢小蠹虫的准确鉴定遥 通过形态鉴定为同种的小蠹虫在利用 圆愿杂 则阅晕粤序列片段构建的系统
发育树上能首先聚在一起袁并且切梢小蠹属昆虫种下尧种间和种上的遗传距离分布在 猿 个不重叠的范围内袁利用
圆愿杂 则阅晕粤基因构建切梢小蠹属分子鉴定体系是理想的方法之一遥 通过系统发育树的聚类分析或遗传距离比较均
可实现种类鉴定遥
关键词院摇 切梢小蠹属曰 形态特征曰 分类检索表曰 圆愿杂 则阅晕粤
中图分类号院 杂苑员愿郾 苑摇 摇 摇 文献标识码院粤摇 摇 摇 文章编号院员园园员 原 苑源愿愿渊圆园员圆冤园圆 原 园员员园 原 园苑
收稿日期院 圆园员园 原 园远 原 园愿曰 修回日期院 圆园员员 原 园苑 原 员苑遥
基金项目院 国际科技合作项目渊圆园园远阅云粤猿员苑怨园冤遥
鄢张真为通讯作者遥
悦造葬泽泽蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽燥皂蚤糟怎泽 杂责藻糟蚤藻泽
蕴蚤 载蚤葬员袁圆 摇 在澡葬灶早 在澡藻灶员 摇 悦葬燥 孕藻灶早员 摇 宰葬灶早 匀燥灶早遭蚤灶员 摇 匀葬灶 孕蚤灶早凿蚤灶早员
渊员郾 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 云燥则藻泽贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶摇 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 云燥则藻泽贼 耘糟燥造燥早赠袁 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼 葬灶凿 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁
悦粤云摇 月藻蚤躁蚤灶早 员园园园怨员曰 圆郾 孕葬贼藻灶贼 耘曾葬皂蚤灶葬贼蚤燥灶 悦燥燥责藻则葬贼蚤燥灶 悦藻灶贼藻则 燥枣 贼澡藻 孕葬贼藻灶贼 韵枣枣蚤糟藻袁 杂陨孕韵袁 月藻蚤躁灶早摇 月藻蚤躁蚤灶早 员园园园怨园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院摇 月燥贼澡 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 葬灶凿 葬 责燥则贼蚤燥灶 燥枣 燥枣 圆愿杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽 憎藻则藻 怎泽藻凿 贼燥 蚤凿藻灶贼蚤枣赠蚤灶早 栽燥皂蚤糟怎泽
泽责藻糟蚤藻泽援 栽澡藻 泽责藻糟蚤皂藻灶泽 憎藻则藻 糟造葬泽泽藻凿 蚤灶贼燥 早则燥怎责泽 憎蚤贼澡 贼澡藻 枣燥造造燥憎蚤灶早 糟澡葬则葬糟贼藻则泽院 员冤 早则葬灶怎造藻泽 燥则 责怎灶糟贼怎则藻泽 燥灶 蚤灶贼藻则泽贼则蚤葬 圆 燥灶
贼澡藻 凿藻糟造蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 藻造赠贼则葬援 圆冤 造藻灶早贼澡 燥枣 贼澡藻 藻造赠贼则葬造 蚤灶贼藻则泽贼则蚤葬造 澡葬蚤则泽 葬灶凿 澡葬蚤则泽 葬则蚤泽蚤灶早 枣则燥皂 责怎灶糟贼怎则藻泽援 猿冤 葬则则葬灶早藻皂藻灶贼 燥枣
责则燥灶燥贼葬造 责怎灶糟贼怎则藻泽 葬灶凿 澡葬蚤则泽援 栽澡藻泽藻 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 糟燥怎造凿 遭藻 糟造藻葬则造赠 藻曾葬皂蚤灶藻凿 怎灶凿藻则 葬 遭蚤灶燥糟怎造葬则 皂蚤糟则燥泽糟燥责藻 葬贼 猿园 伊
皂葬早灶蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 贼澡藻赠 憎藻则藻 葬责责造蚤糟葬遭造藻 葬灶凿 增葬造怎葬遭造藻 枣燥则 贼澡藻 枣燥则藻泽贼 藻灶贼燥皂燥造燥早蚤泽贼泽 贼燥 蚤凿藻灶贼蚤枣赠 栽燥皂蚤糟怎泽 泽责藻糟蚤藻泽援 栽澡藻
责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 蚤灶 圆愿杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 阅圆 则藻早蚤燥灶 则藻增藻葬造藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 泽责藻糟蚤皂藻灶泽 燥枣 藻葬糟澡 早则燥怎责
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 憎藻则藻 葬造泽燥 早则燥怎责藻凿 贼燥早藻贼澡藻则援 栽澡藻 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻泽 燥枣 蚤灶贼则葬鄄泽责藻糟蚤藻泽袁 蚤灶贼藻则鄄泽责藻糟蚤藻泽 葬灶凿
蚤灶贼藻则鄄早藻灶怎泽 憎藻则藻 灶燥贼 燥增藻则造葬责责藻凿援 郧藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则早藻灶糟藻 燥枣 圆愿杂 则阅晕粤 憎葬泽 葬造泽燥 怎泽藻枣怎造 枣燥则 蚤凿藻灶贼蚤枣赠蚤灶早 栽燥皂蚤糟怎泽 泽责藻糟蚤藻泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院摇 栽燥皂蚤糟怎泽曰 皂燥则责澡燥造燥早赠曰 噪藻赠 贼燥 泽责藻糟蚤藻泽 燥枣 栽燥皂蚤糟怎泽曰 圆愿杂 则阅晕粤
摇 摇 切梢小蠹属 渊 栽燥皂蚤糟怎泽 泽责责援 冤 隶属于鞘翅目
渊 悦燥造藻燥责贼藻则葬 冤 象虫科 渊 悦怎则糟怎造蚤燥灶蚤凿葬藻 冤 小蠹亚 科
渊杂糟燥造赠贼蚤灶葬藻冤袁主要危害云南松渊孕蚤灶怎泽 赠怎灶灶葬灶藻灶泽蚤泽冤尧
马尾松渊孕援 皂葬泽泽燥灶蚤葬灶葬冤尧思茅松渊孕援 噪藻泽蚤赠葬冤尧华山
松渊孕援 葬则皂葬灶凿蚤蚤冤尧高山松渊孕援 凿藻灶泽葬贼葬冤等松类植物遥
目前发现的切梢小蠹共有 愿 个种袁其中 栽援 责怎藻造造怎泽尧
多毛切梢小蠹 渊 栽援 责蚤造蚤枣藻则冤和短毛切梢小蠹 渊 栽援
遭则藻增蚤责蚤造燥泽怎泽冤仅在亚洲地区发生为害曰 纵坑切梢小蠹
渊栽援 责蚤灶蚤责藻则凿葬冤和横坑切梢小蠹渊栽援 皂蚤灶燥则冤广布于亚
洲和欧洲地区曰 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽主要分布于环地中海地
区曰 云南纵坑切梢小蠹渊栽援 赠怎灶灶葬灶藻灶泽蚤泽冤和华山松切
梢小蠹渊栽援 葬则皂葬灶凿蚤蚤冤主要分布在我国西南地区遥 我
国地域广阔袁物种分布也很丰富袁除 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽 外袁
其余 苑 种切梢小蠹在我国均有分布渊李丽莎等袁
员怨怨苑曰 运蚤则噪藻灶凿葬造造 藻贼 葬造援袁 圆园园愿曰 蕴蚤 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤遥
国内对切梢小蠹属分类的系统研究仅见于殷
惠芬等渊员怨愿源冤编撰的叶中国经济昆虫志曳第二十
九册袁其中仅记载了纵坑切梢小蠹袁多毛切梢小蠹
和横坑切梢小蠹 猿 个种类袁远远不能满足科研和
森防工作的需要遥 云葬糟糟燥造蚤渊圆园园远冤筛选了 愿 个形态
学特征用于切梢小蠹的分类鉴定研究袁并成功地
将纵横切梢小蠹和 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽 圆 个种区分开来遥
运蚤则噪藻灶凿葬造造等渊圆园园愿冤构建了 苑 种切梢小蠹的分类
检索表袁其所用形态学特征比较复杂院 一些特征在
摇 第 圆 期 李摇 霞等院 切梢小蠹属昆虫分类鉴定方法
个体间存在差异渊如体长尧体色冤袁一些特征需要严
格的观察条件 渊如触角刚毛分布及前足胫节特
征冤袁在分类实践中难以实施袁李霞等渊圆园园怨冤初步
提出一套形态学分类系统袁并基于分子和形态观
察发现一疑似新种遥
圆园 世纪 远园 年代后袁现代生物技术成为研究种
群分类的有力工具遥 尽管小蠹种类的最终确定需要
找到形态学差异袁但是最初对小蠹种类的质疑多是
以分子水平的差异为基础的遥 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽 在外形
及生态学上与纵坑切梢小蠹十分相似袁 常被认为是
后者的一个生态型袁其分类地位一直存在争议遥 直
到通过 阅晕粤 分析发现二者在分子系统发育水平上
聚为两大类袁栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽 才被作为区别于纵坑切梢
小蠹的种独立存在渊郧葬造造藻早燥 藻贼 葬造援袁 圆园园员冤遥 云南纵坑
切梢小蠹的发现完全依赖于分子生物学方法的应
用遥 云南地区危害云南松的切梢小蠹种群一直被认
为是纵坑切梢小蠹袁尽管有研究发现其生物学特征
与其他地区发现的纵坑切梢小蠹明显不同渊再藻 藻贼
葬造援袁 员怨怨苑曰 蕴覽灶早泽贼则觟皂 藻贼 葬造援袁 圆园园圆曰 蕴蚤藻怎贼蚤藻则 藻贼 葬造援袁
圆园园猿曰 李丽莎等袁 员怨怨苑曰 圆园园远曰 李青青等袁 圆园园苑曰 叶
辉袁 员怨怨远曰员怨怨怨曰叶辉等袁 圆园园源冤遥 阅怎葬灶 等渊圆园园源冤发
现该种群与其他切梢小蠹在分子系统发育水平上聚
为两大类袁应该是一新种遥 运蚤则噪藻灶凿葬造造 等渊圆园园愿冤找
到形态学特征差异并将其命名为 栽援 赠怎灶灶葬灶藻灶泽蚤泽遥
不同的种类在防治技术上存在较大差异袁特别
是小蠹类害虫通常采用化学信息素进行监测和防
治袁种类识别上的错误可能造成防效差甚至完全失
败的后果袁因此开展切梢小蠹虫的分类鉴定工作是
开展其生物生态学研究尧精确监控尧预测和防治工作
的基础遥 本研究针对我国的切梢小蠹种类袁在已有
研究基础上袁结合分子生物学方法袁扩大样品观察数
量袁进一步规范形态学特征袁探索建立一套快速尧稳
定可靠的分类鉴定系统袁为基层林业工作者提供简
便准确的鉴定方法遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 形态学鉴定
员郾 员郾 员摇 供试材料摇 圆园园愿 年 怨 月要圆园员园 年 员圆 月袁分
别从 猿 省 圆猿 个县采集 愿园园 余头切梢小蠹样品渊表
员冤遥 每个样地分别从枝梢中收集 猿园 耀 缘园 头样品
渊部分地区样品不足 猿园 头冤袁并迅速保存至无水乙
醇中遥 云南楚雄地区样品采自华山松曰 四川理县和
山东泰安样品采自油松渊孕援 贼葬遭怎造葬藻枣燥则皂蚤泽冤曰 其他样
品均采自寄主云南松遥
表 员摇 各采集地的样品种类及标本数量
栽葬遭援 员摇 杂责藻糟蚤藻泽 葬灶凿 泽责藻糟蚤皂藻灶 灶怎皂遭藻则 枣则燥皂 葬造造 造燥糟葬贼蚤燥灶泽
地点 云南纵坑梢小蠹栽援 赠怎灶灶葬灶藻灶泽蚤泽
纵坑切梢小蠹
栽援 责蚤灶蚤责藻则凿葬
横坑切梢小蠹
栽援 皂蚤灶燥则
短毛切梢小蠹
栽援 遭则藻增蚤责蚤造燥泽怎泽
多毛切梢小蠹
栽援 责蚤造蚤枣藻则
华山松切梢小蠹
栽援 葬则皂葬灶凿蚤蚤
泰山渊鲁冤 栽葬蚤泽澡葬灶袁 杂澡葬灶凿燥灶早 圆园
理县渊川冤 蕴蚤曾蚤葬灶袁 杂蚤糟澡怎葬灶 猿园
德昌渊川冤 阅藻糟澡葬灶早袁 杂蚤糟澡怎葬灶 远
攀枝花渊川冤 孕葬灶扎澡蚤澡怎葬袁 杂蚤糟澡怎葬灶 猿园
昆明渊滇冤 运怎灶皂蚤灶早袁 再怎灶灶葬灶 缘 缘
曲靖渊滇冤 匝怎躁蚤灶早袁 再怎灶灶葬灶 员缘 愿 源
开远渊滇冤 运葬蚤赠怎葬灶袁 再怎灶灶葬灶 源 圆源
蒙自渊滇冤 酝藻灶早扎蚤袁 再怎灶灶葬灶 员员 员缘 员
宁洱渊滇冤 晕蚤灶早蒺藻则袁 再怎灶灶葬灶 圆园
建水渊滇冤 允蚤葬灶泽澡怎蚤袁 再怎灶灶葬灶 员园 圆猿 员园
砚山渊滇冤 再葬灶泽澡葬灶袁 再怎灶灶葬灶 源源 摇 缘
文山渊滇冤 宰藻灶泽澡葬灶袁 再怎灶灶葬灶 员愿 圆愿
大理渊滇冤 阅葬造蚤袁 再怎灶灶葬灶 猿圆 远
华坪渊滇冤 匀怎葬责蚤灶早袁 再怎灶灶葬灶 圆园 缘
祥云渊滇冤 载蚤葬灶早赠怎灶袁 再怎灶灶葬灶 猿源 源远
会泽渊滇冤 匀怎蚤扎藻袁 再怎灶灶葬灶 猿园
丘北渊滇冤 匝蚤怎遭藻蚤袁 再怎灶灶葬灶 源园 员
玉溪渊滇冤 再怎曾蚤袁 再怎灶灶葬灶 员缘 员怨
双柏渊滇冤 杂澡怎葬灶早遭葬蚤袁 再怎灶灶葬灶 源愿 员远
南华渊滇冤 晕葬灶澡怎葬袁 再怎灶灶葬灶 圆 缘园
楚雄渊滇冤 悦澡怎曾蚤燥灶早袁 再怎灶灶葬灶 猿园
腾冲渊滇冤 栽藻灶早糟澡燥灶早袁 再怎灶灶葬灶 源园
石林渊滇冤 杂澡蚤造蚤灶袁 再怎灶灶葬灶 怨 摇 圆缘
员员员
林 业 科 学 源愿 卷摇
员郾 员郾 圆摇 形态鉴别特征筛选摇 本试验将收集到的全
部样品分别在 晕蚤噪燥灶体视显微镜下观察遥 观察特征
包括 运蚤则噪藻灶凿葬造造等渊圆园园愿冤和 云葬糟糟燥造蚤渊圆园园远冤采用的体
长尧体色尧触角锤状部尧前足胫节尧鞘翅斜面第二沟间
部特征尧前胸背板刻点及刚毛分布遥 比较各种形态
学特征的稳定性及对观察放大倍数尧光源条件的要
求遥 筛选稳定性高尧观察条件简单的特征做切梢小
蠹属分类探讨遥
员郾 圆摇 分子生物学验证方法
员郾 圆郾 员摇 供试材料摇 从经形态学鉴定的样品中分别
选取 缘 个以上样品渊收集到的样品少于 缘 个的则选
取全部样品冤用于分子鉴定袁进而检验形态学鉴定
的准确性遥
员郾 圆郾 圆摇 基因组提取及 孕悦砸扩增摇 取单头小蠹的胸
部用于基因组 阅晕粤 的提取袁阅晕粤 提取应用天根生
化科技渊北京冤有限公司生产的试剂盒 阅孕猿园源鄄圆袁按
照说明书步骤操作遥 采用 允燥则凿葬造 等渊圆园园愿冤和 阅怎葬灶
等渊圆园园源冤引物对 圆愿杂泽糟燥造员 辕 阅猿砸 对 则阅晕粤 的 圆愿杂 亚
基的拓展区 阅圆 区进行扩增袁引物序列如下院
圆愿杂泽糟燥造员院 缘忆鄄粤粤悦郧粤粤粤郧郧栽悦郧粤粤郧郧粤粤郧鄄猿忆 和
阅猿砸院 缘忆鄄栽粤郧栽栽悦粤悦悦粤栽悦栽栽栽悦郧郧郧栽悦 鄄猿忆遥 孕悦砸 反
应条件院 怨源 益预变性 缘 皂蚤灶袁怨源 益变性 猿园 泽袁缘园 益退
火 源园 泽袁苑圆 益 延伸员 皂蚤灶袁猿缘 个循环袁苑圆 益 延伸
员园 皂蚤灶遥
员郾 圆郾 猿摇 孕悦砸 产物的序列测定与分析摇 孕悦砸 产物直
接测序袁测序工作由北京华大基因生物技术有限公
司完成遥 所测序列应用软件 阅晕粤酝粤晕远 进行拼接遥
应用 郧藻灶藻月葬灶噪中的 月蕴粤杂栽 进行同源序列搜索袁并
应用软件 悦造怎泽贼葬造 宰 对所有序列进行比对遥 以黑山
大小蠹渊阅藻灶凿则燥糟贼燥灶怎泽 责燥灶凿藻则燥泽葬藻冤 渊粤云猿园愿猿愿缘冤 为外
群袁利用 酝耘郧粤猿郾 员 分子进化遗传分析软件的最大
简约法渊酝孕冤和邻接法渊晕允冤进行系统发育关系分
析袁节点支持率使用 缘园园 次 遭燥燥贼泽贼则葬责 检验遥 黑山大

小蠹渊粤云猿园愿猿愿缘冤的序列信息从 郧藻灶月葬灶噪 数据库中
获得遥 遗传距离的计算采用软件 阅晕粤酝粤晕远 的
允怎噪藻鄄悦葬灶贼燥则 模型遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 形态学鉴定结果
最终选用体视显微镜 猿园 倍条件下可以清楚观
察的 猿 个形态特征院 一是鞘翅斜面第 圆 沟间部的瘤
状颗粒和刻点分布曰 二是鞘翅斜面刚毛长短曰 三是
前胸背板刻点及刚毛分布渊图 员冤遥 利用以上 猿 个特
征对全部样品进行鉴定袁共发现云南纵坑切梢小蠹
猿远猿 头袁纵坑切梢小蠹 圆园 头袁横坑切梢小蠹 圆员缘 头袁
短毛切梢小蠹 员缘远 头袁多毛切梢小蠹 猿园 头和华山松
切梢小蠹 猿园 头袁没有发现 栽援 责怎藻造造怎泽遥
圆郾 圆摇 分子鉴定结果
用于分子生物学鉴定的样品包括 员猿 头云南纵
坑切梢小蠹尧愿 头纵横切梢小蠹尧怨 头横坑切梢小蠹尧
苑 头短毛切梢小蠹和 员园 头华山松切梢小蠹遥 样品
多毛切梢小蠹 阅晕粤存在降解现象袁未获得序列遥 最
终用于比对的序列长度为 缘缘怨 遭责袁比对得到的碱基袁
存在差异的序列分别命名为云南纵坑切梢小蠹 员鄄
远尧短毛切梢小蠹 员鄄缘尧横坑切梢小蠹 员鄄圆尧纵坑切梢
小蠹 员鄄猿 和华山松小蠹 员遥 序列已提交到 郧藻灶藻月葬灶噪
中渊登录号为 郧哉员苑远猿圆圆鄄郧哉员苑远猿猿愿冤袁从 郧藻灶藻月葬灶噪
中搜索到的 圆愿杂 同源序列 粤再缘苑园愿圆愿袁 粤再缘苑园愿圆园袁
粤再缘苑园愿猿圆 经 阅晕粤酝粤晕 裁切成同等长度后用于分
子系统树的构建遥
各物种间的遗传距离见表 圆遥 由表 圆 可见院 种
内遗传距离渊园 耀 园郾 园园源冤明显低于种间遗传距离
渊园郾 园圆缘 耀 园郾 园怨苑冤曰 种间遗传距离又显著低于属间遗
传距离渊逸园郾 员源猿冤遥 种内尧种间和种上 猿 个水平的
遗传距离区间没有重叠袁与 郧藻灶遭葬灶噪 中其他同源序
列的遗传距离比较发现也存在以上规律遥
表 圆摇 各种类间的遗传距离渊允怎噪藻鄄悦葬灶贼燥则冤
栽葬遭援 圆摇 郧藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻 皂葬贼则蚤曾 燥枣 栽燥皂蚤糟怎泽 泽责藻糟蚤藻泽 葬灶凿 贼澡藻 燥怎贼早则燥怎责渊允怎噪藻鄄悦葬灶贼燥则冤
纵坑切梢小蠹
栽郾 责蚤灶蚤责藻则凿葬 横坑切梢小蠹栽援 皂蚤灶燥则 云南纵坑切梢小蠹栽援 赠怎灶灶葬灶藻灶泽蚤泽 短毛切梢小蠹栽援 遭则藻增蚤责蚤造燥泽怎泽 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽 华山松切梢小蠹栽援 葬则皂葬灶凿蚤蚤
纵坑切梢小蠹 栽援 责蚤灶蚤责藻则凿葬 摇 摇 园 耀 园援 园园圆
横坑切梢小蠹 栽援 皂蚤灶燥则 园郾 园怨员 耀 园援 园怨苑 摇 摇 园 耀 园援 园园圆
云南纵坑切梢小蠹
栽郾 赠怎灶灶葬灶藻灶泽蚤泽 园郾 园源圆 耀 园援 园源远 园郾 园苑猿 耀 园援 园苑怨 摇 摇 园 耀 园援 园园源
短毛切梢小蠹 栽郾 遭则藻增蚤责蚤造燥泽怎泽 园郾 园圆缘 耀 园援 园圆怨 园郾 园愿怨 耀 园援 园怨猿 园郾 园源源 耀 园援 园源愿 摇 摇 园 耀 园援 园园源
栽郾 凿藻泽贼则怎藻灶泽 园郾 园远园 耀 园援 园远猿 园郾 园远缘 耀 园援 园远苑 园郾 园远园 耀 园援 园远圆 园郾 园远员 耀 园援 园远猿 园
华山松切梢小蠹 栽郾 葬则皂葬灶凿蚤蚤 园郾 园缘园 耀 园援 园缘源 园郾 园愿缘 耀 园援 园愿苑 园郾 园猿缘 耀 园援 园猿苑 园郾 园缘源 耀 园援 园缘愿 园郾 园缘愿 园
阅郾 责燥灶凿藻则燥泽葬藻 园郾 员源怨 耀 园援 员缘圆 园郾 员苑远 耀 园援 员苑愿 园郾 员源猿 耀 园援 员源缘 园郾 员源猿 耀 园援 员源缘 园郾 员源苑 耀 园援 员缘源 园郾 员缘远
圆员员
摇 第 圆 期 李摇 霞等院 切梢小蠹属昆虫分类鉴定方法
图 员摇 切梢小蠹虫形态特征
云蚤早援 员摇 酝燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 栽燥皂蚤糟怎泽 泽责责援
猿员员
林 业 科 学 源愿 卷摇
摇 摇 利用 酝耘郧粤猿郾 员 软件构建的 酝孕和 晕允树基本一
致遥 从 晕允树上渊图 圆冤可以看到院用形态学特征鉴定
为一个种的样本序列在分子系统树中也首先聚到一
起遥 分子鉴定结果与利用 猿 个主要形态学特征鉴定
的结果是一致的遥
圆郾 猿摇 切梢小蠹属分类检索表
利用筛选到的 猿 个形态特征建立的切梢小蠹属
分类检索表如下院
员摇 鞘翅斜面第 圆 沟间部有瘤状颗粒 圆……………
鞘翅斜面第 圆 沟间部无瘤状颗粒 源……………
图 圆摇 以黑山大小蠹为外群构建的切梢小蠹属系统发育树渊晕允树冤
云蚤早援 圆摇 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 栽燥皂蚤糟怎泽 泽责藻糟蚤藻泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿 遭赠 灶藻蚤早澡遭燥则 躁燥蚤灶蚤灶早
节点支持率使用 缘园园 次 遭燥燥贼 泽贼则葬责检验 月燥燥贼泽贼则葬责 增葬造怎藻泽 糟葬造糟怎造葬贼藻凿 枣则燥皂 缘园园 则藻责造蚤糟葬贼藻泽 葬则藻
早蚤增藻灶 燥灶 贼澡藻 灶燥凿藻援 阅援 责燥灶凿藻则燥泽葬藻 憎葬泽 怎泽藻凿 葬泽 燥怎贼早则燥怎责援
圆摇 鞘翅瘤状颗粒上的刚毛长而尖袁刻点上的刚毛短
而钝 猿……………………………………………
鞘翅瘤状颗粒上的刚毛与刻点上的刚毛等长袁难
区分 栽援 责怎藻造造怎泽…………………………………
猿摇 前胸背板上刻点分布不均匀 袁中部刻点稀疏袁平
滑光亮 横坑切梢小蠹……………………………
前胸背板上刻点多袁分布均匀 多毛切梢小蠹…
源摇 鞘翅斜面第 圆 沟间部刻点少袁呈单列 缘…………
鞘翅斜面第 圆 沟间部刻点多袁呈 圆 列尧猿 列或无
规则 远……………………………………………
缘摇 鞘翅斜面瘤状颗粒上的刚毛长而尖袁约与沟间距
等长 纵坑切梢小蠹………………………………
鞘翅斜面瘤状颗粒上的刚毛短而钝袁约为沟间距
的 员 辕 圆 短毛切梢小蠹……………………………
远摇 鞘翅斜面瘤状颗粒上的刚毛长而尖袁约与沟间距
等长 苑……………………………………………
鞘翅斜面瘤状颗粒上的刚毛短而钝袁约为沟间距
的 员 辕 圆 华山松切梢小蠹…………………………
苑摇 欧洲种群袁鞘翅斜面第 圆 沟间部刻点无规则排列
栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽………………………………………
亚洲种群袁鞘翅斜面第 圆 沟间部刻点呈双列或
野在冶形排列 云南纵坑切梢小蠹…………………
猿摇 结论与讨论
本研究建立了一套简单尧实用的切梢小蠹属分
类鉴定体系遥 通过对切梢小蠹属 愿园园 多个样品形态
学观察和部分样品的分子生物学鉴定袁证明应用 猿
个形态学特征可以准确地将切梢小蠹区分开遥 猿 个
特征如下院 一是鞘翅斜面第 圆 沟间部的瘤状颗粒和
刻点分布曰 二是鞘翅斜面刚毛长短曰 三是前胸背板
刻点及刚毛分布遥
云葬糟糟燥造蚤渊圆园园远冤和 运蚤则噪藻灶凿葬造造等渊圆园园愿冤研究了切
梢小蠹属分类特征袁主要包括体长尧体色尧体表刻点
和颗粒尧触角锤状部尧前足胫节尧头部尧前胸背板尧鞘
翅斜面尧前胃板和雌雄生殖器官等袁其中有些特征不
稳定或对观察条件要求苛刻袁不适合在生产实践中
应用曰 另外袁分类鉴定时使用的特征太多容易使人
迷惑袁不能实现准确鉴定袁所以本研究对这些特征进
行了筛选遥 在观察中发现院体长尧体色在不同个体
间尧个体不同的生长阶段和不同的光源照射条件下
变异较大曰 前胃板和雌雄生殖器官的观察要求有一
定的专业技能曰 触角和前足胫节虽存在差异袁但要
源员员
摇 第 圆 期 李摇 霞等院 切梢小蠹属昆虫分类鉴定方法
观察到这些差异需要放大 猿园园 倍以上且对观察光源
的要求也比较严格袁有时甚至需要借助于电镜观察袁
这些特征在小蠹分类的实际应用中很难推广遥 鞘翅
斜面及体表刚毛特征的差异在显微镜下放大 猿园 倍
就可以清楚观察到袁非常适合在基层单位推广使用遥
值得注意的是在云南纵坑切梢小蠹中左右鞘翅
不对称现象非常普遍袁可能一边鞘翅刻点为 圆 列而
另一边看上去更似 员 列袁这种情况多出现在多种切
梢小蠹同域为害区袁在云南纵坑切梢小蠹单独为害
的地区其鞘翅斜面多为典型 圆 列遥 因此袁在鉴定过
程中应详细观察 圆 边鞘翅特征袁今后应就该虫 圆 种
表型间分化原因做进一步探讨遥 过去几十年中云南
的一些地区切梢小蠹 圆 次大暴发袁并扩散至现在的
员圆 个州市 远苑 个县袁一个重要原因就在于没有认清
防控对象遥 从表 员 可以看出院 云南普遍存在 圆 种或
猿 种切梢小蠹同域危害现象遥 因此袁在云南小蠹防
治工作中袁首先应利用本研究建立的分类体系对切
梢小蠹进行分类鉴定袁确定优势种并对其进行有针
对性的重点防控遥
分子生物学技术在切梢小蠹的分类研究中已有
广泛应用 渊 郧葬造造藻早燥 藻贼 葬造援袁 圆园园员曰 运燥澡造皂葬赠则 藻贼 葬造援袁
圆园园圆曰 阅怎葬灶 藻贼 葬造援袁 圆园园源曰 蕴蚤 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤遥 本研究通
过对 圆愿杂 则阅晕粤 的 阅圆 区部分序列的分析发现袁切梢
小蠹属种下尧种间和种上的遗传距离落在 猿 个不重
叠的范围内袁通过对未知种类与已知种类间遗传距
离的比较就可以确定其种类袁因此利用 圆愿杂 则阅晕粤
的 阅圆 区构建的分子分类系统可以实现切梢小蠹属
种群分类鉴定遥 与构建 月葬则糟燥凿藻 燥枣 蕴蚤枣藻 阅葬贼葬 杂赠泽贼藻皂
的初衷相同袁该分子鉴定方法可以帮助对形态特征
尚把握不准的林业工作者实现小蠹虫种类的准确
鉴定遥
系统发育树显示 远 种切梢小蠹形成 圆 大簇群遥
短毛切梢小蠹和纵坑切梢小蠹最先聚到一起形成一
簇袁形态学观察可见二者的鞘翅斜面第 圆 沟间部刻
点较少袁呈单列袁短毛切梢小蠹的鞘翅斜面刚毛较短
而纵坑切梢小蠹的刚毛较长曰 华山松切梢小蠹和云
南纵坑切梢小蠹在系统树上也最先聚到一起形成一
簇袁形态学观察可见二者的斜面第 圆 沟间部刻点较
多袁呈 圆 列或 猿 列袁华山松切梢小蠹的鞘翅斜面刚毛
较短而云南纵切梢小蠹的刚毛较长曰 这 圆 个簇群聚
到一起与 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽 和横坑切梢小蠹形成 圆 个独
立的簇群遥 形态学观察可见院 短毛切梢小蠹尧纵坑
切梢小蠹尧华山松切梢小蠹和云南纵坑切梢小蠹簇
群鞘翅斜面第 圆 沟间部均为刻点袁而横坑切梢小蠹
的第 圆 沟间部却是瘤状颗粒遥 栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽的第 圆 沟
间部虽然也分布刻点袁但是其仅在欧洲分布袁因此袁
栽援 凿藻泽贼则怎藻灶泽与其他来自中国的种类之间遗传距离
较大可能是受到地理隔离的影响遥 从以上分析中可
以认为院 员冤 切梢小蠹属分化过程中受到地理隔离
因素的影响曰 圆冤 本研究中采用的表型特征的分化
渊尤其是鞘翅斜面第 圆 沟间部特征的分化冤与 圆愿杂
则阅晕粤 阅圆 区的遗传分化具有一致性遥
尽管本文涉及的种类较少袁但在一定程度上说
明了将核糖体 圆愿杂基因作为遗传标记用于切梢小蠹
属系统分类研究是理想的方法之一遥 如果在下一步
的试验中增加切梢小蠹属种类的数量及重复袁同时
采用多种不同的分子标记袁将会更好地阐明切梢小
蠹属昆虫的分子进化过程与其形态分化过程的
关系遥
参 考 文 献
程家安袁唐振华援 圆园园员援 昆虫分子科学援 北京院 科学出版社援
李丽莎袁刘宏屏援 圆园园远援 两种切梢小蠹生态学特征比较研究援 西部林
业科学袁猿缘渊员冤院 员 原 缘援
李丽莎袁王海林袁柴秀山援 员怨怨苑援 云南松纵坑切梢小蠹危害及生物学
特性研究援 云南林业科技袁渊圆冤院 员 原 苑援
李青青袁段焰青袁继摇 红袁等援 圆园园苑援 纵坑切梢小蠹分子生物学研究
进展援 中国森林病虫袁圆远渊员冤院 猿圆 原 猿远援
李摇 霞袁张摇 真袁王鸿斌袁等援 圆园园怨援我国切梢小蠹鉴定方法研究及一
新种发现援第二届中国林业学术大会要要要杂远 森林昆虫与自然调
控论 文 集援 澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 糟灶噪蚤援 灶藻贼 辕 噪糟皂泽 辕 凿藻贼葬蚤造 辕 凿藻贼葬蚤造援 葬泽责曾钥
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叶摇 辉袁母其爱袁吕摇 军袁等援 圆园园源援 纵坑切梢小蠹携带云南半帚孢
研究援 昆虫知识袁源员渊远冤院 缘缘缘 原 缘缘愿援
叶摇 辉援 员怨怨远援 纵坑切梢小蠹蛀梢期生物学研究援 昆虫学报袁猿怨渊员冤院
缘愿 原 远圆援
叶摇 辉援 员怨怨怨援 纵坑切梢小蠹对云南松蛀害研究援 昆虫学报袁源圆渊源冤院
猿怨源 原 源园园援
殷蕙芬袁黄复生袁李兆麟援 员怨愿源援 中国经济昆虫志援 第二十九册援 鞘
翅目小蠹科援 北京院 科学出版社援
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林 业 科 学 源愿 卷摇
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渊责任编辑摇 朱乾坤冤
远员员