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Preliminary Screen of Virulent Strains of Metarhizium anisopliae against Hylobitelus xiaoi

感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选


A total of 12 strains of Metarhizium anisopliae Sorokin were tested for pathogenicity to Hylobitelus xiaoi,and a superior strain was used to infect trials in a forest. The results indicated that the strain Ma1291-2 had strong pathogenicity to H.xiaoi after treatment for 30 d by dipping inoculation with (1.5±0.5)×108 conidia·mL-1. The correct mortality, the muscardine cadaver rate and the conidia content individual of H.xiaoi were respectively 70.59%, 70.81% and (1.90±0.34)×108dia individual, and the quickest median lethal times (LT50) were 13.89 d. The median lethal concentration (LC50) was 1.135 3×106 conidia·mL-1. By infecting trials to H.xiaoi in a forest with the strain Ma1291-2, mortality of the treatment was extremely significant higher than the control, the correct mortality, the muscardine cadaver rate and the conidia content individual of H.xiaoi were 57.85%±1.19%, 55.43%±2.90% and (1.12±0.41)×10.8 conidia individual after 30 d, respectively, and the median lethal times (LT50) was 16.56 d. The results suggest that the strain of Ma1291-2 has great application value.


全 文 :第 !" 卷 第 # 期
$ % # % 年 # 月
林 业 科 学
&’()*+(, &(-.,) &(*(’,)
./01 !",*/1 #
2345,$ % # %
感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选!
童应华# 6 陈顺立# 6 林 6 强$
(#5福建农林大学林学院 6 福州 78%%%$;$5福建省森林病虫害防治检疫总站 6 福州 78%%%7)
关键词:6 萧氏松茎象;金龟子绿僵菌;致病力;菌株筛选
中图分类号:&9"71 7%"1 !6 6 6 文献标识码:,6 6 6 文章编号:#%%# : 9!;;($%#%)%# : %#"< : %"
收稿日期:$%%; : %9 : %<。
基金项目:福建省自然科学基金项目(=%8#"%$%);福建省科技厅重点项目($%%"*%%%$);福建省科技厅重点项目($%%!*%#7)。
!陈顺立为通讯作者。本研究 < 个供试金龟子绿僵菌菌株由福建省林业科学研究院森林保护研究所何学友教授级高工提供,在此表示衷
心感谢。
#)国家林业局植树造林司,国家林业局森林病虫害防治总站 5 $%%" 年上半年全国主要林业有害生物发生情况及下半年发生趋势预测 5 森
防简报,$%%",#"5
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6 6 萧 氏 松 茎 象( A,$#B/+%$-* C/0#/)属 鞘 翅 目
( ’/0C/LECH3)象 甲 科( ’BHMB0@/4@K3C)松 茎 象 属
(A,$#B/$%$-*),#<<9 年被定 名 为 新 种(张 润 志,
#<<9)。该虫主要以幼虫钻蛀松树树干基部或根颈
部的韧皮组织,松树被害后,大量流脂,树势减弱
(李宗顺等,#<<;;梁承丰等,$%%7;温小遂等,
$%%!;林仲桂等,$%%!;高发祥等,$%%8;戴立霞等,
$%%"),或导致次期性害虫侵入,加快树木枯死(梁
承丰等,$%%7),成虫亦有上树取食枝条韧皮补充营
养为 害 的 习 性;其 寄 主 主 要 有 湿 地 松( %$$/#++//)(张润志,#<<9)、火炬松(尾 松 ( +0/D01%1*/*)、华山松($%%#)和黑松( 桂等,$%%!)。该虫国外分布未见报道,国内主要分
布江西、福建、贵州、广东、广西、湖南、湖北 9 省
(区)的 #%% 多个县(市)#)。各发生地开展了该害
虫种群发生规律与控制技术研究,但尚无有效控制
方法。
虫生真菌是昆虫种群自然调控的重要因子,在害
虫控制方面有巨大的潜力(蒲蛰龙等,#<<")。自 #;9<
年 OCEMA4@I/FF 首 次 从 奥 地 利 丽 金 龟( 21/*#@$/0
0-*+)/030)中分离出绿僵菌,并成功进行奥地利丽金龟
和甜菜象甲(E#+8,1#4%)%* @-13+/6%1+)/*)的防治以来,绿
僵菌就成为了害虫微生物防治的主要病原菌之一(蒲
蛰龙等,#<<";Z/430K %+ 0$!,$%%!)。绿僵菌寄主极为
广泛,达 9个目 $%% 多种昆虫(-3EMA,#<"8;.CC4 %+ 0$!,
#<""),是当今世界广泛应用于防治农林害虫的病原真
林 业 科 学 !" 卷 #
菌(蒲蛰龙等,$%%"),其应用于蛀干害虫的防治也有许
多成功的实例,樊美珍等($%&’)从青杨天牛(!"#$%&"
#’#()*$")的罹病幼虫上分离到 $ 株金龟子绿僵菌
(+$,"%-./.(0 "*.1’#)."$),并将其用于天牛等害虫的防
治;()*+,-等(.//!)利用球孢白僵菌、布氏白僵菌和金
龟子绿僵菌无纺布菌条相结合的方法防治光肩星天牛
(2*’#)’#-’%" 3)"4%.#$**.1);夏成润等(.//0)利用金龟
子绿僵菌无纺布菌条与引诱剂相结合防治短角幽天牛
(!#’*&5).1 4(#%$1,’.&$1 )。萧氏松茎象生物防治研究甚
少,应用绿僵菌生物防治方面的研究尚无报道,而绿僵
菌较白僵菌有更强的耐高温和耐旱特性(江英成,
.///;宋漳等,.//1),对林间气候条件的适应性较强,
因此,本研究应用 $.株金龟子绿僵菌菌株对萧氏松茎
象进行致病力测定和林间感染试验,筛选出高致病力
菌株,为林间生物防治提供应用基础。
!" 材料与方法
$2 $# 金龟子绿僵菌的分离 # $)样品采集# 在萧氏
松茎象危害较重的林分,选择树干近土表根茎部头年
受害后尚留排泄物的松树为样株,清除蛀孔处土表层
的杂物和排泄物,用 ’03酒精擦拭干净土铲后,铲取土
壤约 0// 4,装入干净的保鲜袋内密封,带回室内置于冰
箱内保存备用。
.)培养基 # 常用培养基采用 55(6 培养
基:去皮马铃薯 .// 4,葡萄糖 ./ 4,蛋白胨 $/ 4,#
# # # # #
琼脂$& 4,蒸馏水$ /// 78。选择性培养基:在王滨
等(.///)、胡开辉等(.//!)的基础上进行改进,配
方为:蛋白胨 0 4,葡萄糖 $/ 4,磷 酸 二 氢 钾
(9:.5;!)$ 4,’ 水硫酸镁(<4=;!·’:.;)/2 0 4,琼
脂 ./ 4,结晶紫 $// !4 · 78 > $,多菌灵 /2 & !4 ·
78 > $,硫 酸 链 霉 素 $// !4 · 78 > $,蒸 馏
水$ /// 78。
1)样品处理与菌株分离# 将采集的样品分别过
. 77 筛,以逐步 ! 分法取适量进行分离。称取 . 4
样品放入锥形瓶,加入 $// 78 /2 /03吐温 > &/ 无菌
水,置于高速恒温振荡器(国华企业 =:6?@ 恒温振荡
器 $0(A)上充分振荡 $/ 7,B($0/ C · 7,B > $)。用无
菌移液管吸取 /2 . 78 悬浊液滴入选择性培养基平板
表面,无菌三角玻璃刮棒涂布均匀,静置后置于(.0
D $)E培养箱中倒置培养,每个样品 1 个重复。同
时,接 1 株金龟子绿僵菌作对照。第 . 天起观察菌落
生长情况,并挑取与对照相似的菌落,用选择性培养
基再次进行纯化培养,连续纯化 . F 1 次。产孢后根
据孢子形态、菌落特征和产孢结构等进行鉴定(魏景
超,$%’%;裘晖等,.//!),并将分离的菌株转入试管斜
面培养,充分产孢后冷藏备用。
$2 .# 致病力测定 # $)供试菌株 # $. 个供试金龟
子绿僵菌菌株中,% 个菌株由福建省林业科学研究
院森林保护研究所提供,1 株为笔者林间分离所得
的菌株。各菌株来源情况见表 $。
表 !" 供试绿僵菌菌株来源!
#$%& !" ’()*)+ ,- ./0./1 !" #$%&’()%#* 0.($)+0
菌株编号 =GCH,B I+J 采集地 8+KHL,GM 寄主或分布 :+-G- +C N,-GC,*)G,+B 分离日期 O-+LHGPN NHGP
/%
/&
$.
/%
/&
/&
/%
/%
$$
日本森林综合研究所 Q+CP-GCM HBN
Q+CP-G 5C+N)KG- AP-PHCKS OB-G,G)GP +^ ZHYHB
松墨天牛幼虫 +7 "),$%*",(1 LHCWHP .//. > /0
/%
/.
# # " /$,# # .)孢子悬液的制备 # 各菌斜面培养充分产孢
后,用 $/ 78 /2 /03吐温 > &/ 无菌水洗下,置于高
速恒温振荡器上充分振荡 $/ 7,B($0/ C · 7,B > $),
血球计数板计数,根据需要配制成不同浓度的孢子
悬液备用。
# # 1)试虫来源与饲养 # 供试成虫收集于福建省
龙岩市武平县、三明市宁化县的马尾松林和江西省
赣州市信丰万隆林场、石城县瑞坑的湿地松林。将
/’$
! 第 " 期 童应华等:感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选
收集的成虫放入 #$ %& ’ #$ %& ’ ($ %& 的自制养虫
笼内,以 " ) * 年生马尾松新鲜枝条室内笼养,每 #
天更换 " 次枝条。
() 致 病 处 理 ! 将 各 菌 株 分 别 配 成
("+ , - $+ ,)’ "$. 孢子· &/ 0 "的孢子悬液,采用浸
渍法接种。选取健康成虫,用摄子单头挟入孢子悬
液中,使整个虫体完全浸没并滞留 # 1 后立即取出,
放入玻璃罐头瓶内,瓶内放入截成小段的 " ) * 年生
马尾松新鲜枝条,在瓶盖上打 2 ) . 个小孔,每瓶装
, 头成虫,于(*, - ")3、(4, - ")5 67 的人工气候
箱(89:;/ <=>?*,$@ 型,上海博迅实业有限公司医
疗设备厂生产)内饲养。每个处理设 # 个重复,每
个重复测定 "# ) "2 头成虫,以 $+ $,5 吐温 0 .$ 无
菌水作对照。# 天更换 " 次新鲜马尾松枝条,每天
定时观察并记录各处理的死亡情况,并将死虫移出,
放入培养皿内,(*, - ")3保湿培养,观察虫体菌丝
生长和产孢情况,持续观察 #$ 天。统计死亡和感染
情况,以虫体表面长出菌丝体或子实层为有效致死。
计算公式:
死亡率 ! 死虫数
供试虫数
" "$$#,
校正死亡率 ! 处理死亡率 $ 对照死亡率
"$$ $ 对照死亡率
" "$$#,
僵虫率 ! 僵死虫数
供试虫数
" "$$#。
! ! ,)僵虫虫体含孢量测定 ! 待僵虫虫体充分产
孢后,单头放入 #$$ &/ 的锥形瓶内,加入 $+ $,5吐
温 0 .$ 无菌水 ,$ &/,并置于高速恒温振荡器上充
分振荡 "$ &AB(",$ C·&AB 0 "),洗下虫体孢子,用血
球计数板计数,换算成单头虫体含孢量。
2)高致病力菌株致死中浓度(/@,$)的确定 !
选择致病力较强,且僵虫虫体含孢量较高的菌株,分
别以 , 个浓度梯度的孢子悬液浸渍法接种,每个浓
度梯度 # 个重复,每个重复测定 "# ) "2 头健康成
虫,以 $+ $,5吐温 0 .$ 无菌水为对照。饲养、观察
方法同 ()。
"+ #! 林间感染试验 ! 选用致病力强和虫体含孢量
高的 " 个菌株进行复壮,以("+ $ - $+ ,)’ "$"$个孢
子·&/ 0 "的孢子悬液浸渍法处理后铁丝笼林间笼
养。设 # 个重复,每个重复处理 ", ) "2 只成虫,并
相距 ,$ & 以上,用 $+ $,5 吐温 0 .$ 无菌水处理 #
个重复为对照。供给新鲜的 " ) * 年生枝条饲养,#
天更换 " 次新鲜马尾松枝条,每天观察 " 次死亡情
况,并及时将死虫带回室内保湿培养,持续观察 #$
天,以虫体表面长出菌丝体或子实层为有效致死,统
计死亡率、侵染率。待虫体充分产孢后随机选取 *$
头僵虫,测定虫体产孢量。
!" 结果与分析
*+ "! 金龟子绿僵菌对萧氏松茎象的致病性 ! ")致
病特点 ! 从福建龙岩、三明和江西石城萧氏松茎象
危害较重的松林内,选择 "4 个样区,共取土壤样品
4, 份,分离到 # 个金龟子绿僵菌菌株,编号为
8DE=?$"、8DE=?$( 和 8DF>?$*。将其与其他 4 个
菌株分别对萧氏松茎象进行处理后,8DGHH/?$"、
8D"*4"?* 和 8D"II, 菌株处理第 . 天出现死亡。致
死虫体经(*, - ")3保湿培养后,起初口器末端、各
跗节末端和腹部末端出现白色点状,, ) 2 天后,口
器末端、各跗节末端和腹部末端有绿色孢子产生,且
跗节、各体节节间及腹板与侧板连接处,充满白色菌
丝,约 . ) 4 天后,上述部位均长满绿色孢子。因此,
从致病特点看,该虫的口器末端、各跗节间及其末
端、腹部末端、体节节间及腹板与侧板连接处是侵染
的重要部位。
*)累计死亡率动态 ! 接菌后 #$ 天内各菌株致
死的动态如图 "。从图 " 可知,8D"*4"?*、8DE=?
$"、8DGHH/?$" 和 8D"II, 等 ( 个菌株处理后,从第 .
天开始到 ". 天萧氏松茎象成虫累计死亡率上升较
快,*$ 天后趋缓;其他菌株接种后 #$ 天内累计死亡
率均在 #$5 以下,8DJK?$(、8DF>?$* 和 8D*$ 菌株
处理后 ". 天内尚未见死亡,8D7L?$" 累计死亡率
亦极低。可见,8D"*4"?*、8DE=?$"、8DGHH/?$" 和
8D"II, 等 ( 个菌株对萧氏松茎象成虫有较好的致
死效果。
#)不同菌株的致病力 ! 对接菌后 #$ 天萧氏松
茎象成虫死亡率进行方差分析,% M "I+ 4, N %$+ $"
("*,*2)M *+ 42,& M $+ $$$ " O $+ $",各处理间存在
极显著差异,进一步用邓肯氏(:PB%DB"1)新复极差
法进行多重比较,结果见表 *。试验结果表明:
8D"*4"?*、8DE=?$"、8DGHH/?$" 和 8D"II, ( 个菌
株,其校正死亡率和僵虫率间无显著差异,但极显著
高于其余供试菌株;其余各菌株的校正死亡率和僵
虫率均低于 #$5,其中 8D7L?$" 和 8D*$ 菌株未发
现僵虫。8D"*4"?* 菌株校正死亡率和僵虫率最高,
分别为 I$+ ,45和 I$+ ."5,用时间 0死亡率的机率
值分析,其 /K,$为 "#+ .4 天,表明其对萧氏松茎象的
致病力较强,致死速度比其他菌株快。
"I"
林 业 科 学 !" 卷 #
图 $# 不同菌株处理后累计死亡率动态(%& 天)
’()* $# +,-./(01 23 456 07/78.4(96 /2:4.8(4, 23 !" #$%&$ 4:6.46; <, ;(336:6-4 ’" %($)&*+$%, 14:.(-1(%& ;)
表 !" 不同菌株对萧氏松茎象成虫的致病力!
#$%& !" ’$()*+,-./.(0 *1 2.11,3,-( 4(3$.-4 (* !" 5.$*. $267(4
菌株编号
=4:.(- >2*
死亡率
?2:4.8(4, @ A
校正死亡率
B2::604 /2:4.8(4, @ A
僵虫率
?710.:;(-6 0.;.96:
:.46 @ A
毒力回归方程
C2D(0(4, :6):611(96
6E7.4(2-
致死中时
FCG& @ ;
相关系数
B2::68.4(2-
02633(0(6-4(-)
?.$HI$JH K&L M$ . N K&L GI K&L M$ . N . O $L KHM ! P &L H%G " # $%L MI &L IKI $
?.QRJ&$ K&L &H . N "IL KI K&L &H . N . O HL &"G " P &L $M% " # $GL IM &L MMH M
?.’SSFJ&$ "!L MH . N "!L GG "HL M . N . O HL $!I I P &L $G& ! # $ML IG &L I!H H
?.$KKG GHL %H .< NT G$L I" G%L G! . NT . O %L $G& % P &L $H$ " # $GL HG &L IH& M
?.URCVJ&H HIL K$ <0 TB HIL $K HIL K$ < T — — —
?.WCJ&! HML "$ <0 TB HML &" HKL G < T — — —
?.QRJ&! HKL !I <0 TB H"L I! H"L HM < TB — — —
?.W+CVJ&&M H!L !! 0 TB H%L M" H!L !! < TB — — —
?.W+CVJ&$& GL "K ; B+ !L I! !L K! 0 B+ — — —
?.XYJ&H GL &G ; B+ !L %H GL &G 0 B+ — — —
?.ZNJ&$ &L MK ; + &L $$ & — — —
?.H& &L M$ ; + &L &G & — — —
B[ &L K" ; + — — — — —
# # ! 接种量为($L G \ &L G)] $&M 孢子· /F ^ $。不同大、小写字母表示 +7-0.-"1 新复极差显著性检验分别达到 &L &$,&L &G 水平,同列中有相
同字母表示差异不显著,下同。_-2078.4(-) 02-06-4:.4(2- ‘.1($L G \ &L G)] $&M 02-(;(.·/F ^ $ * +(336:6-4 0.a(4.8 2: 1/.88 86446:1 /6.-4 1()-(3(0.-4
;(336:6-06 <, +7-0.-"1 -6‘ /784(a86 :.-)6 /6452; 4614 .4 &* &$ .-; &L &G 86968 :61a604(968,,456 1./6 <682‘*
HL H# 僵虫虫体含孢量 # 虫体带菌量是该菌再侵染
和害虫持续控制的重要条件,对其致病力和林间流
行病的诱发、传播、扩散起重要作用。经测定其充分
产孢后的僵虫虫体平均单头含孢量(表 %),结果表
明,感染 ?.$HI$JH 菌株僵虫虫体平均单头含孢量为
($L I& \ &L %!)] $&K 个,除 ?.$KKG 菌株致死的虫体
含孢量外,与其余菌株致死的虫体含孢量间有极显
著差异。?.$KKG 菌株致死僵虫虫体含孢量亦显著
高于其余菌株。?.WCJ&!,?.XYJ&H 和 ?.W+CVJ&$&
等 % 个菌株致死僵虫虫体含孢量较低。说明,#
# # 表 8" 萧氏松茎象僵虫虫体平均单头含孢量
#$%& 8" 9,$- /*-.2.$ /*-(,-( .-2.:.26$7 *1
;64/$32.-, !" #$%&$
菌株编号
=4:.(- >2*
含孢量
B2-(;(. 02-46-4 @
$&"
差异显著性
=()-(3(0.-4 86968
GA $A
?.$HI$JH $ML IK \ %L !$ . N
?.$KKG $&L MK \ %L IK . NT
?.QRJ&$ !L !$ \ &L M$ < TB
?.’SSFJ&$ %L KI \ &L !$ < TB
?.QRJ&! HL G& \ &L !" <0 B+
?.W+CVJ&&M HL HG \ &L %! <0 B+
?.URCVJ&H $L $G! \ &L H& 0 +b
?.WCJ&! &L G& \ &L &I ; b’
?.XYJ&H &L !" \ &L &% ; b’
?.W+CVJ&$& &L H! \ &L &M ; ’
HK$
! 第 " 期 童应华等:感染萧氏松茎象的金龟子绿僵菌菌株的初步筛选
#$"%&"’% 和 #$"(() 菌株有效致死僵虫具有较高的
虫体含孢量。
%* +! 高致病力菌株 ,-).的测定 ! 上述研究结果表
明,#$"%&"’% 有较强的致病力和较高的僵虫虫体
! ! ! !
含孢量。进一步测定其 ,-).,结果见表 /,随着孢子
浓度的增大其校正死亡率上升,致死中时 ,0).缩短,
通过剂量 1死亡率机率值分析,其 ,-).为"* "+) + 2
".3 孢子· 4, 1 "。
表 !" #$%&’%(& 菌株对萧氏松茎象的 )*+,(-, .)
/$01 !" #2.3$4 5267$5 8948246:$6394()*+,)9; 672 <6:$34 #$%&’%(& 69 !" #$%&$(-, .)
孢子浓度
-567869:$9;56 <
".(
死亡率
#5:9$=;9> < ?
校正死亡率
-5::879
45:9$=;9> < ?
致死中时
,0). < @
毒力回归方程
05A;7;9> :8B:8CC;56
8DE$9;56
致死中浓度
,-). <
( 756;@;$·4, 1 ")
相关系数
-5::8=$9;56
758FF;7;869(!)
%(. (+* %) (%* 3/ "%* G%
"+* % ("* .G (.* /% "+* //
"* +. )(* () )3* (& "3* &. > H +* (G) ( I .* %.. ) " "* "+) + 2 ".3 .* &(. )
.* "% )+* %/ )%* "G "&* +)
.* ." /%* .G /.* (3 —
-J %* %% — —
%* /! 林间感染试验结果分析 ! 林间感染试验设在
福建省龙岩市武平县马头山公园。以 #$"%&"’% 菌
株的孢子悬液浸液法处理后林间笼养,观察统计结
果见表 ),处理后 +. 天,萧氏松茎象的死亡率极显
著高于对照[# H 3G* ." K #.* ."(",/)H %"* %;$ H
.* .." % L .* ."],校正死亡率和僵虫率分别为
()(* G) M "* "&)?和())* /+ M %* &.)?,致死中时为
"3* )3 天。僵虫室内保湿培养充分产孢后虫体含孢
量为( "* "% M .* /")2 ".( 个孢子 · 头 1 ",说明
#$"%&"’% 菌株对该虫林间有较强的侵染力和虫体
带菌量,但由于林间的各种复杂因子的影响,尤其是
气候因子,导致该菌株对萧氏松茎象林间的致病力
与室内有一定差距。
表 +" #$%&’%(& 菌株林间感染试验结果(-, 天)!
/$01 +" /72 :2<=56< 9; 34;28634> 6:3$5< 34 672 ;9:2<6 ?367 672 <6:$34 #$%&’%(&(-, .)(福建武平 @=A34>,B=C3$4,&,,D)
菌株编号
N9:$;6 O5P
死亡率
#5:9$=;9> < ?
校正死亡率
-5::879 45:9$=;9> < ?
僵虫率
-$@$Q8: :$98 < ?
致死中时
,0). < @
毒力回归方程
05A;7;9> :8B:8CC;56
8DE$9;56
相关系数
-5::8=$9;56
758FF;7;869(!)
#$"%&"’% )&* 3. $ R )(* G) M "* "& ))* /+ M %* &. $ "3* )3 % H "* )+3 ( I .* %.& " " .* &.( )
-J %* G% S T — — — — —
! ! ! 接种量为("* ) M .* ))2 ".".孢子· 4, 1 "。U657E=$9;6B 7567869:$9;56 V$C("* ) M .* ))2 ".". 756;@;$·4, 1 " *
-" 结论与讨论
福建省是我国南方的主要林区,现有松林
+%3* )3( 万 W4%,占有林地面积的 )/* G)?,萧氏松
茎象是福建省松属植物的一种新危险性害虫,自
%..+ 年 " 月在武平县首先发现该害虫危害以来,经
全面调查,该虫在福建省主要分布于南平市、三明市
和龙岩市,而这三市松林面积点全省松林面积的
)3* /&?,发生面积达约 %. 万 W4%,且发生呈加重趋
势,对我省的森林资源构成了较大威胁。要有效控
制该虫的为害,必须以林业防治为基础,以生物防治
为主要手段。
由于该害虫生活较隐蔽,林间调查中尚未发现
自然感染虫生真菌的僵虫,因此,本研究采用选择性
培养基,从该害虫发生较严重的林间土壤中分离出
了 + 个金龟子绿僵菌菌株,其中 #$XY’." 菌株在致
病力筛选中体现较强的致病力,说明,松林土壤中宿
存有对该虫具致病性的绿僵菌,这为该虫生物防治
开辟了新途径。
运用 "% 个金龟子绿僵菌菌株,分别对萧氏松茎
象进行致病性试验,从致病特点看,成虫的口器末
端、各跗节末端及跗节间、腹部末端、体节节间及腹
板与侧板连接处是绿僵菌侵染的重要部位。综合各
菌株接菌后萧氏松茎象成虫的校正死亡率、僵虫率、
僵虫虫体含孢量及 ,0).的情况比较,#$"%&"’% 菌株
对该虫有较好的致死效果。但金龟子绿僵菌对寄主
的入侵不仅是寄主与病原菌之间的生理生化作用的
综合结果(Z;==8C[;8 &’ ()*,%...),而且与环境因子
有极大的关系。因此,进一步优化 #$"%&"’% 菌株生
长、萌发和产孢的营养与环境条件,深入该菌在害虫
发生地的定殖与流行病诱发等方面的研究,对应用
该菌进行萧氏松茎象的生物防治有重要现实意义。
应用 "% 个供试菌株中,#$XY’."、#$\]],’." 和
#$"(() 亦有较好的致病效果,有一定的应用潜力,
+("
林 业 科 学 !" 卷 #
尤其是分离自林间土壤中的 $%&’()* 菌株,其林间
宿存环境与该虫的习性有一定的关系。萧氏松茎象
主要以幼虫在蛀道、成虫在蛹室或土中越冬,且成虫
有傍晚上树行取食、交配和扩散等活动,早晨回到树
干基部或土缝中的夜出性活动节律(温小遂等,
+))!;戴立霞等,+))"),而真菌对昆虫最活跃的侵
染范围在土壤的表土层() , *- ./)(&01.23.40567%
!" #$8,*9::),土壤中的绿僵菌可以以分生孢子
(;%/<3=6 !" #$8,*99))、芽生孢子( >3==3? !" #$8,
*9@")、菌丝段(AB?<3BB3? !" #$8,
*99+)或僵虫的方式宿存和侵染寄主昆虫。因此,
进一步对 $%&’()* 菌株的生长、萌发和产孢条件的
研究,并强化其对萧氏松茎象的致病力,有利于挖掘
该菌株的应用潜力。
$%*+9*(+ 菌株林间感染试验,萧氏松茎象校正
死亡 率 和 僵 虫 率 分 别 为( -:D @- E *D *9)F 和
(--D !G E +D 9))F,致死中时为 *"D -" 天,僵虫虫体
平均含孢量为(*D *+ E )D !*)H *): 个孢子·头 I *。
说明该 $%*+9*(+ 菌株对该虫林间亦有较强的致病
力,且害虫感染后有较高的虫体含孢量。因此,深入
开展该真菌病在林间的发生和传播规律的研究,提
高致病率,促进其林间流行,对该害虫的生物防治有
极其重要的实际意义。
参 考 文 献
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602=8 ’0= V.0= ;S(责任编辑 # 朱乾坤)
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