对河朔荛花活性成分最佳流分WCME-7和WCME-11处理后的雌成螨进行症状观察,初步推测它们可能通过影响山楂叶螨的神经传导和生殖、消化系统而导致雌成螨死亡。其中WCME-11击倒作用迅速,从12h开始山楂叶螨就进入了大量死亡期,具有比WCME-7更为强烈的症状表现和更全方位的作用方式。WCME-11能引起成螨体内的生理生化代谢,解毒酶类的活性被激活,Ca2+-ATP酶和乙酰胆碱酯酶活性被强烈抑制。
Wikstroemiae chamedaphne has good acarocidal activity against Tetranychus viennensis,a serious pest of many crops including apple trees in China.Its active constitutes,WCME-7 and WCME-11,were separated and purified by column chromatograghy.The symptomal observiation showed that they had many actions,such as stomach poison,controlling development,controlling reproducing and so on.They maybe affect not only the nerve transmition but also digest,growing system.In contrast,WCME-11 showed more strong symptom phenomenon with more all-directions function method,knocked down more quickly.From 12 h,the mites began to enter death period on large.Function mechanism of WCME-11 was studied in the experiment.The results indicate that the WCME-11 could cause the fast reaction of the enzymes inside the mites.Before 8 h, the enzymes were changed.WCME-11 could cause mite to counteract poison by GSTS and CarE,Ca2+-ATP enzyme and AchE have been restrained strongly.
全 文 :第 wv卷 第 {期
u s s z年 { 月
林 业 科 学
≥≤∞× ≥∂ ∞ ≥≤∞
∂²¯1wv o²1{
∏ªqou s s z
河朔荛花对山楂叶螨作用机制的初步研究 3
曹 挥t ou 王有年t 张铁强t 赵莉蔺v 刘素琪u 师光禄t
kt1 北京市农业应用新技术重点实验室 北京 tsuusy ~ u1山西农业大学农学院 太谷 svs{st ~ v1 中国科学院动物研究所
农业虫鼠害综合治理国家重点实验室 北京 tsss{sl
摘 要 } 对河朔荛花活性成分最佳流分 • ≤ ∞p z和 • ≤ ∞p tt处理后的雌成螨进行症状观察 o初步推测它们可
能通过影响山楂叶螨的神经传导和生殖 !消化系统而导致雌成螨死亡 ∀其中 • ≤ ∞p tt击倒作用迅速 o从 tu «开
始山楂叶螨就进入了大量死亡期 o具有比 • ≤ ∞ p z更为强烈的症状表现和更全方位的作用方式 ∀ • ≤ ∞ p tt能
引起成螨体内的生理生化代谢 o解毒酶类的活性被激活 o≤¤un 2×°酶和乙酰胆碱酯酶活性被强烈抑制 ∀
关键词 } 河朔荛花 ~山楂叶螨 ~作用机制
中图分类号 }≥zy{1z ~≥wvy1yt| 文献标识码 } 文章编号 }tsst p zw{{kusszls{ p ssyx p sy
收稿日期 }ussx p tt p s| ∀
基金项目 }北京市科委区县专项资金项目kussyl !北京市都市农业学科群项目k÷tsst|sxxvl !北京市属市管高校人才强教计划k°÷ usszp
stwuszp swwxvyl !北京市属市管高校引进人才计划k°÷ usszp stwuszp swwxv{l o山西省科技攻关项目ksxtswwl !山西省青年科学基金资助项目
kussxtsvy oussysutsvvl !山西农业大学创新基金kusswssul ∀
3 师光禄为通讯作者 ∀
Αχαροχιδαλ Αχτιονσ οφ Ωικστροεµιαε χηαµεδαπηνε αγαινστ Τετρανψχηυσϖιεννενσισ
≤¤² ∏¬tou • ¤±ª≠²∏±¬¤±t «¤±ª×¬¨ ¬´¤±ªt «¤²¬¯¬±v ¬∏≥∏´¬u ≥«¬∏¤±ª¯∏t
kt1 ΚεψΛαβορατορψοφ Νεω Τεχηνολογψ οφ ΑγριχυλτυραλΑππλιχατιον οφ Βειϕινγ Βειϕινγ tsuusy~ u1 Χολλεγε οφ Αγριχυλτυρε oΣηανξι Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ Ταιγυ svs{st~
v1 Στατε Κεψ Λαβορατορψοφ Ιντεγρατεδ Μαναγεµεντ οφ Ινσεχτσ ανδ Ροδεντσ Ινστιτυτε οφ ΖοολογψoΧηινεσε Αχαδεµψοφ Σχιενχεσ Βειϕινγ tsss{sl
Αβστραχτ } Ωικστροεµιαε χηαµεδαπηνε «¤¶ª²²§¤¦¤µ²¦¬§¤¯ ¤¦·¬√¬·¼¤ª¤¬±¶·Τετρανψχηυσϖιεννενσισo¤¶¨µ¬²∏¶³¨¶·²©°¤±¼¦µ²³¶
¬±¦¯∏§¬±ª¤³³¯¨·µ¨ ¶¨¬± ≤«¬±¤q·¶¤¦·¬√¨ ¦²±¶·¬·∏·¨¶o • ≤∞ p z ¤±§ • ≤∞ p tt o º¨ µ¨ ¶¨³¤µ¤·¨§¤±§³∏µ¬©¬¨§¥¼ ¦²¯∏°±
¦«µ²°¤·²ªµ¤ª«¼q ׫¨ ¶¼°³·²°¤¯ ²¥¶¨µ√¬¤·¬²± ¶«²º¨ § ·«¤··«¨¼ «¤§ °¤±¼ ¤¦·¬²±¶o ¶∏¦« ¤¶ ¶·²°¤¦« ³²¬¶²±o ¦²±·µ²¯ ¬¯±ª
§¨ √¨ ²¯³°¨ ±·o¦²±·µ²¯ ¬¯±ªµ¨³µ²§∏¦¬±ª¤±§¶² ²±q ׫¨ ¼ °¤¼¥¨ ¤©©¨¦·±²·²±¯¼ ·«¨ ±¨ µ√¨ ·µ¤±¶°¬·¬²± ¥∏·¤¯¶² §¬ª¨¶·oªµ²º¬±ª
¶¼¶·¨°q± ¦²±·µ¤¶·o • ≤∞p tt ¶«²º¨ § °²µ¨ ¶·µ²±ª¶¼°³·²° ³«¨ ±²°¨ ±²± º¬·« °²µ¨ ¤¯ 2¯§¬µ¨¦·¬²±¶©∏±¦·¬²± °¨ ·«²§o®±²¦®¨ §
§²º± °²µ¨ ∏´¬¦®¯¼qƒµ²° tu «o·«¨ °¬·¨¶¥¨ª¤±·² ±¨·¨µ§¨¤·«³¨µ¬²§²± ¤¯µª¨ qƒ∏±¦·¬²± °¨ ¦«¤±¬¶° ²© • ≤∞p tt º¤¶¶·∏§¬¨§
¬±·«¨ ¬¨³¨µ¬°¨ ±·q׫¨ µ¨¶∏¯·¶¬±§¬¦¤·¨·«¤··«¨ • ≤∞p tt ¦²∏¯§¦¤∏¶¨ ·«¨ ©¤¶·µ¨¤¦·¬²±²©·«¨ ±¨½¼°¨ ¶¬±¶¬§¨ ·«¨ °¬·¨¶q
¨ ©²µ¨
{ «o·«¨ ±¨½¼°¨ ¶º¨ µ¨ ¦«¤±ª¨§q • ≤∞p tt ¦²∏¯§¦¤∏¶¨ °¬·¨·²¦²∏±·¨µ¤¦·³²¬¶²± ¥¼ ≥×≥ ¤±§≤¤µ∞o≤¤un 2×° ±¨½¼°¨ ¤±§
¦«∞ «¤√¨ ¥¨ ±¨ µ¨¶·µ¤¬±¨ §¶·µ²±ª¯¼q
Κεψ ωορδσ} Ωικστροεµιαε χηαµεδαπηνε ~ Τετρανψχηυσϖιεννενσισ~©∏±¦·¬²± °¨ ¦«¤±¬¶°
由于杀螨活性物质广泛存在于自然界 o因此从植物源天然产物中寻找新型化学结构物质 o成为杀螨剂研
发的热点之一k罗万春等 ot||zl ∀纵观目前的杀螨剂作用机制 o常用的大都是神经毒剂和几丁质抑制剂 o专
一性程度低 o一些杀螨剂只对某一螨态有效 o有的甚至仅能杀卵 o杀螨谱广 !速效性和持效性优良 !不易产生
抗性 !对农作物安全的品种很少k浦定一 ot||wl ∀因此 o高效 !广谱 !安全杀螨剂的研制开发已成为当务之急 ∀
深入研究杀螨剂的作用机制并设计全新化学结构的先导化合物 o仍是寻找新型杀螨剂的主要途径 ∀河朔荛
花作为新开发的植物源农药之一 o已经引起了人们的关注k王乃江等 oussu ~赵莉蔺等 ousswl ∀为了更好地把
河朔荛花k Ωικστροεµιαε χηαµεδαπηνεl研发为植物源杀螨剂 o本文以山楂叶螨k Τετρανψχηυσϖιεννενσισl为对象 o对
河朔荛花活性成分 • ≤ ∞p z和 • ≤ ∞p tt的杀螨作用机制进行了初步研究 ∀
t 材料与方法
111 供试材料
试验所用河朔荛花采自山西省太谷县大佛山kttuβ{χ ∞ov{β|χ o海拔 t xss °l ∀全株洗净 o于通风处阴
干后 o放入恒温箱内 wx ε 下烘干 o磨碎 o过 ys目筛 o供提取用 ∀
山楂叶螨为室内饲养的敏感品系 }养虫室的温度kux ? tl ε o相对湿度kxs ? tsl h o光照kΒ⁄为 t{ «Βy
«l ∀
112 河朔荛花活性成分的分离
将植物干粉加入 x倍量的甲醇 o室温下kvs ? ul ε 浸提 v次 o每次 v ∗ x §o过滤 o合并 v次的提取液减压
浓缩 o得甲醇提取物 • ≤ ∞o用 ts倍量含水 ts h的甲醇液溶解 • ≤ ∞o采用液 p液分配法用石油醚萃取 v
次 o合并石油醚部分 o得到 • ≤ ∞石油醚萃取物 ∀
称取 • ≤ ∞石油醚萃取物 ts ªo采用常压开管柱层析法进行柱层析分离k吴文君 ot||{l ∀洗脱后的流分
经检测合并 o收集流分 • ≤ ∞p z !• ≤ ∞p tt ∀将 u个流分减压浓缩至稠状 o待用 ∀
113 症状观察
叶碟浸渍法k朱丽梅等 oussul }取平展的苹果叶片洗干净 o叶面朝下放到水培养台上 o每一叶片挑入成螨
us头以上 o待成螨稳定后 o夹取叶片浸入药液ku ot os1x os1ux °ª#°ptl中 x ¶o对照为清水 o将叶面朝下放到
水培养台上 o叶片边缘用湿棉条围住 o防止螨体逃逸 ∀从 u ∗ uw «每隔 u «观察 t次成螨的状况 o并记录其活
动情况及反应 ∀
114 酶活性测定
t1w1t 酶液制备 分别取触杀处理后 w !{ !tu !ty !us !uw «山楂叶螨雌成虫 tss头 o根据测定的酶的不同 o放
入不同的溶液中 o冰浴匀浆后 ots sss µ#°¬±pt !w ε 下离心 tx °¬±o取上清液备用 ∀其中蛋白含量 !≤¤un 2×°
酶和单胺氧化酶为放入 s1ux °生理盐水中 ~谷胱甘肽 p ≥ p转移酶置于 ys °°²¯#pt磷酸缓冲液k³ z1sl
中 ~羧酸酯酶置于 s1sw °²¯#pt磷酸缓冲液k³z1sl中 !乙酰胆碱酯酶置于 s1t °²¯#pt磷酸缓冲液k³z1xl
中 ∀
t1w1u 活性测定 蛋白含量测定 }tl 采用考马斯亮蓝 p uxs法k李娟等 ousssl ∀取酶液 s1t °于试管中 o
对照管中加入 s1t °磷酸缓冲液 ox °考马斯亮蓝 p uxs试剂 o混匀 oux ε 水浴加热 u °¬±o于 x|x ±°波长
处比色测定 ⁄值 ∀根据标准曲线计算出蛋白质含量 ∀ul 谷胱甘肽 p ≥ p转移酶活性测定 }参照慕立义等
kt||wl的方法 ouz ε 下 o记录 x °¬±内 ⁄变化值 ∀vl 羧酸酯酶测定 }参照姜家良等kt|{sl的方法 o以 Αp乙
酸萘酯作底物 o底物溶液中加毒扁豆碱 ∀条件为 vs ε o保温 vs °¬±∀wl乙酰胆碱酯酶活性测定 }参照何玉仙
等kussvl的方法 o以 ¦«¨ 为底物 o⁄×
为显色剂 o毒扁豆碱为抑制剂 ∀反应条件为 uz ε o保温 tx °¬±∀t
°°²¯#pt的毒扁豆碱 s1v °终止反应 o在 wtu ±°波长下测定光密度值 ∀xl ≤¤un 2×°酶活性测定 }参照刘素
媛等kt|||l的方法 o重复 v次 ∀yl 单胺氧化酶活性测定 }参照许妍姬等kussxl的方法 o以 的特异性底物
苄胺为反应底物 o测定其反应产物苄醛的生成量 ∀利用苄醛在紫外部分 Κ uwu ±°处的吸收高峰 o测定酶作
用反应后的光吸收值 o测定 的酶活性 o重复 v次 ∀
u 结果与分析
211 ΩΧΜΕ − 7和 ΩΧΜΕ − 11处理后雌成螨的症状表现
将不同浓度的 • ≤ ∞p z和 • ≤ ∞p tt处理雌成螨后 o进行症状观察 o结果表明 }• ≤∞p z和 • ≤ ∞p
tt对成螨的作用大致可划分为以下几个阶段k图 t !ul }tl静止期 }• ≤∞p z为处理的 s ∗ x «o• ≤∞p tt为
处理的 s ∗ w «∀症状表现为少数螨不停地运动 o但大部分静止 o足呈伸展放松状态 o无明显反应 ∀ul兴奋期 }
• ≤ ∞p z为处理的 x ∗ z «o• ≤∞p tt为处理的 w ∗ y «∀站立不稳 o步态失调 o运动不停 o四处逃散 ∀vl运动
失调和过度兴奋期 }• ≤ ∞p z为处理的 z ∗ tw «o表现为过度兴奋 o运动失调 o原地打滑 ~身体重心抬高 o足
痉挛 ~停止颤抖 o表现前足孤立抽搐 ~少数逃逸 ~排泄物极少 o呈黑色 ~产卵量急剧下降 ∀ • ≤ ∞p tt为处理
的 y ∗ tu «o除了 • ≤ ∞p z所有的症状之外 o还有以下特点 }表现比 • ≤ ∞p z更为强烈 ~足极力伸展 o原地
打转 ~扩散现象严重 ~腹部朝天仰卧 o努力翻身 ~普遍前足孤立抽搐 ~兴奋与静止轮流间隙 ~少数有失水体
湿现象 ~无麻痹期 o身体颤抖并收缩至死亡 ∀wl麻痹期 }• ≤∞p z为处理的 tw ∗ t{ «o螨体静止不动 o身体开
始收缩 ~ • ≤ ∞p tt无麻痹期 ∀xl死亡期 }• ≤ ∞p z为处理的 t{ ∗ uw «o• ≤∞p tt为处理的 tu ∗ uw «o身体
逐渐收缩至死亡 ∀
• ≤ ∞p z和 • ≤ ∞p tt处理后 o螨脱皮大量减少 o产生黑色液状排泄物 ∀ • ≤ ∞ p z和 • ≤ ∞ p tt使
单雌产卵量减少 o尤其是 • ≤ ∞p tt o从 u «开始产卵量一直没有增加趋势 o强烈地抑制了山楂叶螨繁殖力 ∀
yy 林 业 科 学 wv卷
图 t • ≤ ∞p z处理后对山楂叶螨的症状学观察
ƒ¬ªqt ≥¼°³·²°¤¯ ²¥¶¨µ√¤·¬²± ²© Τ q ϖιεννενσι󦲱·¤¦·¨§º¬·« • ≤ ∞p z
• ≤ ∞p z和 • ≤ ∞p tt各个浓度梯度症状基本一致 o症状随着浓度降低而表现缓慢 ∀它们对山楂叶螨
表现出与神经毒剂相似的作用阶段 o但作用方式更为多样 o初步推测具有胃毒 !忌避 !抑制生长发育 !抑制繁
殖等多方面的作用 ∀其中 o• ≤ ∞p tt击倒作用迅速 o从 tu «开始就进入了大量死亡期 o具有比 • ≤ ∞ p z
更为强烈的症状表现和更全方位的作用方式 o没有明显的麻痹期 o直接进入死亡期 ∀
212 对代谢酶活性的影响
u1u1t 蛋白含量 图 v显示 }{ «之前处理组与对照组之间的蛋白含量变化趋势相同而且差异很小 ~从 { ∗
us «之间蛋白含量上下波动 ~但整体上蛋白含量变化不大 o受 • ≤ ∞p tt的影响不明显 ∀
u1u1u 谷胱甘肽 p ≥ p转移酶 由图 w可见 }uw «内处理组均显著高于对照组 o说明 • ≤ ∞p tt对山楂叶螨
体内谷胱甘肽 p ≥ p转移酶有强烈的激活作用 ∀在 w «时 o处理的酶活力高达对照的 v1zt倍 o使螨体对药剂
的解毒代谢增加 ∀在 w «以后 o由于 • ≤ ∞p tt中的有毒物质在其体内的积累增多 o毒性增大而导致其解毒
代谢稍受抑制 o谷胱甘肽 p ≥ p转移酶活性有下降的趋势 ~ty ∗ uw «时 o谷胱甘肽 p ≥ p转移酶又有回升趋
势 o说明存活螨体内强烈的解毒反应是使其生命力延长的主要原因 ∀
u1u1v 羧酸酯酶 当药剂处理约 y «后 o山楂叶螨通过体内的生理生化机制 o羧酸酯酶活性被 • ≤ ∞ p tt
zy 第 {期 曹 挥等 }河朔荛花对山楂叶螨作用机制的初步研究
图 u • ≤ ∞p tt处理后对山楂叶螨的症状学观察
ƒ¬ªqu ≥¼°³·²°¤¯ ²¥¶¨µ√¤·¬²± ²© Τ q ϖιεννενσι󦲱·¤¦·¨§º¬·« • ≤ ∞p tt
图 v • ≤ ∞p tt对山楂叶螨蛋白含量的影响
ƒ¬ªqv ∞©©¨¦·¶²© • ≤ ∞p tt ²± ³µ²·¨¬± ¦²±·¨±·¶
) ) )τ • ≤ ∞2tt ) ) )≅ ≤ 下同 ∀ ׫¨ ¶¤°¨ ¥¨ ²¯º q
图 w • ≤ ∞p tt对山楂叶螨 ≥׶的影响
ƒ¬ªqw ∞©©¨¦·¶²© • ≤ ∞p tt ²± ≥׶
的次生代谢物质诱导激活 o处理组的酶活力开始高于对照组 ∀在 { «之前处理和对照都有一个急速上升的
过程 o之后就都在各自的小范围内上下波动 otu «时处理组酶活力增长幅度最大 o为对照组的 t1{w倍 ∀整体
上 o• ≤∞p tt使得螨体内羧酸酯酶被激活 t1ws倍 o山楂叶螨通过增加水解酶活性来克服因外源物的加入
所引起的体内代谢不平衡k图 xl ∀
213 对神经系统靶标酶活性的影响
u1v1t 单胺氧化酶 从图 y可以看出 }{ «之前螨体内的单胺氧化酶活性被抑制 o但在 tu «时当对照组活力
继续下降时 o处理却急剧上升 ~tu «后酶活性变化幅度大 o呈快速下降 !上升的急剧变化 o但整体活力高于对
照组 o为对照组酶活力的 t1sz倍 ∀总之 o单胺氧化酶没有被抑制 o也许不是 • ≤ ∞ p tt在螨体内的作用靶
标 o相反 o它通过某种方式激活了螨的解毒机制 o使积累的有毒胺类被氧化 ∀
u1v1u ≤¤un 2×°酶 从图 z中可以看出处理组与对照组酶活力变化趋势基本一致 o都有一个先上升后下降
{y 林 业 科 学 wv卷
图 x • ≤ ∞p tt对羧酸酯酶的影响
ƒ¬ªqx ∞©©¨¦·¶²© • ≤ ∞p tt ²± ≤¤µ∞
图 y • ≤ ∞p tt对 ƒ的影响
ƒ¬ªqy ∞©©¨¦·¶²© • ≤ ∞p tt ²± ƒ
的过程 ∀ ≤¤un 2×°酶在整个 uw «被显著抑制 o平均比活力是对照的 xs1y{ h ∀在 { «时下降幅度最大 o处理
组只有对照组活力的 ut1{z h ~随着作用时间的推移 o到 uw«时酶活力降到极低 o比活力只有 s1svz ∀可以说
明 o≤¤un 2×°酶有可能是 • ≤ ∞p tt在山楂叶螨体内的重要靶标之一 o• ≤ ∞p tt对 ≤¤un 2×°酶的抑制是
山楂叶螨导致死亡的重要因素之一 ∀
u1v1v 乙酰胆碱酯酶 试验证明k图 {l }用 • ≤ ∞p tt处理山楂叶螨能够显著抑制乙酰胆碱酯酶 o使螨体
内的乙酰胆碱酯酶活性降低 o在 w ∗ { «之间酶活力就大幅度下降 o{ «以后随着中毒时间的延长继续下降 o
尤其在 tu «时受抑制程度最大 o其体内的酶活性仅为对照组的 ux h o之后一直没有回升的趋势 ouw «时降至
极低水平 ∀乙酰胆碱酯酶可能是 • ≤ ∞p tt在山楂叶螨体内重要的靶标酶之一 ∀
图 z • ≤ ∞p tt对 ≤¤un 2×°酶的影响
ƒ¬ªqz ∞©©¨¦·¶²© • ≤ ∞p tt ²± ≤¤un 2×° ±¨½¼°¨
图 { • ≤ ∞p tt对山楂叶螨乙酰胆碱酯酶的影响
ƒ¬ªq{ ∞©©¨¦·¶²© • ≤ ∞p tt ²± ≤«∞
v 结论与讨论
植物源杀虫剂具有对害虫作用谱广 o对天敌干扰少 o无明显脊椎动物毒性和环境中降解迅速 !资源丰富 !
可再生等优点k江建云 ot||tl ∀在对川楝素等多种植物源杀虫物质的研究中发现 o它们对害虫的作用不同于
常规化学农药 o其作用靶标和作用机制较为特殊 o全方位进行作用 o既抑制神经电位的正常传达 o又干扰体内
激素平衡 o抑制解毒酶系 o特别是对消化系统作用明显 o对肌肉系统也有毒害作用 ∀植物源杀虫剂以其独特
的作用方式使害虫不易产生抗药性 ∀
本试验中 • ≤ ∞p tt能引起山楂叶螨快速反应 o对雌成螨症状观察可以看出 o河朔荛花对山楂叶螨具
有多种作用方式 o推测可能影响神经传导 o并对消化 !生殖系统也会产生影响 ∀进一步的作用机制研究证明
了螨体内无论解毒代谢酶还是靶标酶都在 { «之前产生较大变化 o从而引起成螨体内的生理生化代谢 ∀
就整个过程而言 o• ≤∞p tt可以激发解毒酶类的活性 o对药剂进行水解 !集团转移等降解作用 ∀在解
毒酶类中 o谷胱甘肽 p ≥ p转移酶是最活泼的解毒酶系之一 o能催化生物体内的还原型谷胱甘肽与外源化合
物的亲电子基团发生轭合 o最终形成硫醚氨酸排出体外 o从而降低它们的细胞毒性 ∀此外 o该酶在谷胱甘肽
过氧化物酶活力高的条件下 o具有清除体内脂质过氧化物的功能 o酶活力的升高可作为昆虫解毒代谢作用的
|y 第 {期 曹 挥等 }河朔荛花对山楂叶螨作用机制的初步研究
敏感指标k沈同 ot|||l ∀另一类是羧酸酯酶 o它有 u个作用 }一是催化羧酸酯或酰酯的水解 o另一个作用是作
为结合蛋白 o保护乙酰胆碱酯酶不受破坏k宗静等 ousss ~陈巧云 ot|{s ~李腾武等 ot|{{l ∀在 • ≤ ∞ p tt处
理螨后 os ∗ w «之间谷胱甘肽 p ≥ p转移酶活性首先被激活 o在解毒代谢反应方面可能起主要作用 ~羧酸酯
酶活性在 w ∗ { «之间被激活 o但此时谷胱甘肽 p ≥ p转移酶的变化幅度有所减小 o两者以不同方式共同对
• ≤ ∞p tt进行分解反应 o降低毒性 ∀
神经系统是目前大多数农药的作用靶标 o其中重要的靶标酶是乙酰胆碱酯酶 !单胺氧化酶和 ≤¤un 2×°
酶 ∀乙酰胆碱酯酶可水解乙酰胆碱 o使其成为乙酸和胆碱 ∀乙酰胆碱的释放是昆虫神经突触传递所必需 o但
是 o它必须迅速地被分解 !除去 o乙酰胆碱的积累会引起神经传导的异常反应 o直至最终阻断突触传递 o使昆
虫死亡 ∀单胺氧化酶被抑制 o会造成神经胺积累起来 o神经胺是某些神经突触传递处的传递物质 o这些物质
的积累与乙酰胆碱在胆碱激性突触处的积累一样 o也会引起神经传导阻断 ∀ ×°酶存在于组织细胞及细胞
器膜上 o是生物膜的一种蛋白酶 o在物质运送 !能量转换及信息传递方面有重要作用k冷欣夫等 ot||yl ∀
从 • ≤ ∞p tt对神经系统靶标酶来看 o在 s ∗ w «o单胺氧化酶和 ≤¤un 2×°酶活性都被强烈抑制 o但乙酰
胆碱酯酶活性抑制程度小 o加上谷胱甘肽 p ≥ p转移酶的解毒作用 o螨体症状表现不明显 o处于静止期 ~w ∗
y «o随着谷胱甘肽 p ≥ p转移酶活性的减小 o羧酸酯酶未被激活之际 o单胺氧化酶和 ≤¤un 2×°酶抑制程度稍
有加强 o尤其是乙酰胆碱酯酶抑制程度明显加大 o引起突触传导不能正常进行 o螨体进入兴奋期 ~y ∗ tu «o
≤¤un 2×°酶和乙酰胆碱酯酶的活性被强烈抑制 o中枢神经系统轴突传导逐渐被阻断 o周缘神经正常突触传
递受阻严重 o出现痉挛症状 ~特别到 tu «时 o靶标酶活力抑制程度最大 o螨体衰竭 o进入大量死亡期 ∀
生物是一个有机的整体 o当外来物质进入后 o生物体会调动各种系统来保护生命活动的正常进行 o从本
试验结果来看 o• ≤∞p tt激发了解毒代谢酶类的活性 o对药剂进降解 o但与解毒作用相比 o• ≤∞p tt对神
经系统靶标酶的抑制作用更为强烈 o活性被强烈抑制 o≤¤un 2×°酶和乙酰胆碱酯酶可能就是导致螨体死亡
的重要靶标 ∀目前已从河蒴荛花中提取分离到芫花酯甲k¼∏¤±«∏¤¦¬±¨ lk康少文等 ot|{xl和从种子中分离出的
河蒴荛花素k¶¬°³¯ ¬¨¬±l o同属二萜原酸酯类结构k王成瑞等 ot|{tl ∀该类物质可能与其毒性有关 o但杀螨活性
物质是否为同类或同一物质 o仍需进一步的研究 ∀
植物中广泛存在杀螨物质 o但植物源杀螨剂的开发还是一个漫长的过程 ∀本试验的结果对河朔荛花的
开发将提供理论依据 ∀
参 考 文 献
陈巧云 qt|{s1淡色库蚊对敌百虫抗性的研究 ) ) ) 水解酶同敌百虫抗性的关系 q昆虫学报 ouvkwl }vxs p vxz
何玉仙 o王长方 o陈 锋 o等 qussv q杀虫剂处理对甜菜夜蛾幼虫体内酶活性的影响 q江西农业大学学报 ouxkyl }{|y p {||
康少文 o于永芳 o魏清波 o等 qt|{x q从黄芫花中分离出芫花酯甲 q中草药 otykyl }vz
冷欣夫 o唐振华 o王荫长 qt||y q杀虫药剂分子毒理学及昆虫抗药性 q北京 }中国农业出版社 ot{ p ut
李 娟 o张耀庭 o曾 伟 o等 qusss q应用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量 q中国生物制品学杂志 otvkul }tt{ p tus
李腾武 o高希武 qt|{{1 不同地区小菜蛾种群羧酸酯酶的毒理学性质的研究 q昆虫学报 owtktl }uy p vv
刘素媛 o孙黎光 o邢 伟 o等 qt||| q慢性染铅对大鼠海马区神经细胞 ≤¤u n浓度及 ≤¤u n 2×°酶活性的影响 q卫生毒理学杂志 otvktl }tsu p tsv
罗万春 o慕立义 o李云寿 qt||z q植物源生物碱的杀虫作用 q农药 ovykzl }tt p tx
姜家良 o陈巧云 o黄 刚 qt|{s q抗有机磷淡色库蚊的羧酸酯酶研究 q昆虫学研究集刊 oktl }y| p zy
江建云 qt||t q植物性农药研究进展 q湖南农业科学 okyl }wv p wy
慕立义 qt||w q植物化学保护研究方法 q北京 }中国农业出版社 otys p tyt
浦定一 qt||w q研制杀螨剂的一些思考 q农药 ov|kul }uw p uy
沈 同 qt||| q生物化学 qu版 q北京 }高等教育出版社
王成瑞 o黄慧珠 o韩 玫 o等 qt|{t q抗生育有效成分河蒴荛花素的分离与鉴定 q中草药 otuk{l }t p v
王乃江 o刘建军 o令志哲 o等 qussu q河朔荛花灌丛特性及其毒性的初步研究 q陕西林业科技 okvl }t p x
吴文君 qt||{1天然产物杀虫剂 ) ) ) 原理#方法#实践 q陕西文艺出版社 ot|| p uss
许妍姬 o韩春姬 o俞 星 qussx q沙棘汁对铅中毒小鼠脑组织单胺氧化酶活性的影响 q延边大学医学学报 ou{kul }|z p ||
赵莉蔺 o刘素琪 o侯 辉 o等 qussw q河朔荛花对山楂叶螨活性的研究 q山西农业大学学报 ouwkul }t{w p t{y
宗 静 o张 帆 o孙光芝 o等 qusss1繁殖寄主对赤眼蜂羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的影响 q昆虫学报 owvk≥∏³³¯l }zs p zy
朱丽梅 o倪钰萍 o黄春霞 o等 qussu q螨的综合测试方法的研究 q南京农专学报 otzktl }tv p tz
k责任编辑 朱乾坤l
sz 林 业 科 学 wv卷