全 文 ：第 wv卷 第 v期
u s s z年 v 月
林 业 科 学
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栗瘿蜂体内 Ωολβαχηια的感染及其 ωσπ基因序列分析 3
朱道弘 贺一原 赵吕权 黄向东 阳艳萍
k中南林业科技大学资源与环境学院 长沙 wtssswl
关键词 } Ωολβαχηια ~ ωσπ基因 ~序列分析 ~产雌孤雌生殖 ~栗瘿蜂
中图分类号 }≥zt{1z 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kusszlsv p stvv p sx
收稿日期 }ussy p sz p ut ∀
基金项目 }国家自然基金资助项目kvsvzttyzl ∀
Σεθυενχινγ ανδ Πηψλογενετιχ Αναλψσισ οφ τηε ωσπ Γενε οφ Ωολβαχηια
ιν α Γαλλωασπ Σπεχιεσo ∆ρψοχοσµυσ κυριπηιλυσ kΗψµενοπτερα}Χψνιπιδαεl
«∏⁄¤²«²±ª ‹¨≠¬¼∏¤± «¤²| ∏´¤± ‹∏¤±ª ÷¬¤±ª§²±ª ≠¤±ª ≠¤±³¬±ª
k Χολλεγε οφ Ρεσουρχε ανδ Ενϖιρονµεντo ΧεντραλΣουτη Υνιϖερσιτψοφ Φορεστρψ & Τεχηνολογψ Χηανγσηα wtssswl
Αβστραχτ} „¯ ³«¤ ³µ²·¨²¥¤¦·¨µ¬¤ ²©·«¨ ª¨ ±∏¶ Ωολβαχηια ¤µ¨ ¤ º¬§¨¶³µ¨¤§ªµ²∏³ ²© °¤·¨µ±¤¯ ¼¯ ¬±«¨µ¬·¨§ ±¨§²¶¼°¥¬²±·¶²©
¤µ·«µ²³²§¤±§±¨ °¤·²§¨ «²¶·¶q Ωολβαχηιᬱ©¨¦·¬²±¬±§∏¦¨¶¤µ¤±ª¨ ²©«²¶·³«¨ ±²·¼³¨¶o¬±¦¯∏§¬±ª¦¼·²³¯¤¶°¬¦¬±¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼o
°¤¯¨®¬¯¯¬±ªo©¨ °¬±¬½¤·¬²± ¤±§·«¨ ¼¯·²®¼¬±§∏¦·¬²±q ‹ ·¨¨µ²ª²±¼ k¦¼¦¯¬¦¤¯ ³¤µ·«¨ ±²ª¨ ±¨ ¶¬¶l ¬¶¤µ¨°¤µ®¤¥¯¨¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦²©²¤®
ª¤¯¯ º¤¶³¶o≤¼±¬³¬±¬oº«¬¦«¬¶·«¨ ¤¯µª¨¶··µ¬¥¨ ¬± ≤¼±¬³¬§¤¨ q„ ©¨ º ¶³¨¦¬¨¶²© ≤¼±¬³¬±¬¤µ¨ ¬¨¦¨³·¬²±¤¯ ¼¯ oº«¬¦«¤µ¨ ∏±¬√²¯·¬±¨
¤±§ ¬¨«¬¥¬··«¨ ¼¯·²®²∏¶³¤µ·«¨ ±²ª¨ ±¨ ¶¬¶o³µ²¥¤¥¯¼ §∏¨ ·²§¨¯¨·¬²± ²©·«¨ ¤µµ«¨ ±²·²®²∏¶ª¨ ±¨ µ¤·¬²±©µ²°·«¨¬µ«¨·¨µ²ª²±¬¦¤±¦¨¶·²µ
¶³¨¦¬¨¶º¬·« Ωολβαχηιᬱ©¨¦·¬²±qŒ±·«¬¶¶·∏§¼o·«¨ ³µ¨¶¨±¦¨ ²© Ωολβαχηια º¤¶§¨·¨¦·¨§∏¶¬±ª³²¯¼°¨ µ¤¶¨ ¦«¤¬±µ¨¤¦·¬²±k°≤• l
³µ¬°¨ µ¶©²µ·«¨ º¶³ ª¨ ±¨ ¶¬± ¤·«¨ ¼¯·²®²∏¶¶³¨¦¬¨¶k ∆ρψοχοσµυσ κυριπηιλυσl ²©·«¨ ≤¼±¬³¬±¬q ׫¨ ωσ𠦫¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦ytz ¥³
³µ²§∏¦·º¤¶²¥·¤¬±¨ §¤©·¨µ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±²© ¬¨·µ¤¦·¶©µ²° «∏½«²∏³²³∏¯¤·¬²±q׫¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ¦¯¨ ¤µ¯¼¦²±©²µ°¨ §·² Ωολβαχηι᪵²∏³
„ ¤±§º¤¶±¨ ¤µ¯¼¬§¨±·¬¦¤¯ ·²·«¤·²© Πλαγιοτροχηυσθυερχυσιλιχισq׫¨ ³²¶¶¬¥¯¨¬°³¯¬¦¤·¬²±¶²© Ωολβαχηιᬱ©¨¦·¬²±¬±·«¨ ª¤¯ º¯¤¶³
¤µ¨ §¬¶¦∏¶¶¨§q
Κεψ ωορδσ} Ωολβαχηια~ ωσ𠪨 ±¨ ~¶¨ ∏´¨±¦¨ ¤±¤¯¼¶¬¶~·«¨ ¼¯·²®¼~ ∆ρψοχοσµυσκυριπηιλυσ
Ωολβαχηια是一类以节肢动物及线虫为宿主的细胞质共生细菌 o属于 °µ²·¨²¥¤¦·¨µ¬¤的 Α亚门 ∀其传播方
式主要为垂直传播 o即母代感染的细菌经卵细胞的细胞质传播至子代k≥·²∏·«¤°¨ µετ αλqot|||l ∀ Ωολβαχηια
能对被感染昆虫等节肢动物的生殖方式进行调控 o如引起宿主胞质不亲和k¦¼·²³¯¤¶°¬¦¬±¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼l !诱导
孤雌生殖k³¤µ·«¨ ±²ª¨ ±¨ ¶¬¶2¬±§∏¦¬±ªl !雌性化k©¨ °¬±¬½¬±ªl及雄性致死k°¤¯ 2¨®¬¯¯¬±ªlk • µ¨µ¨±ot||z ~≥·²∏·«¤°¨ µ ετ
αλqot|||l ∀根据近年的研究 o感染 Ωολβαχηια的昆虫种类估计超过 tz h k • µ¨µ¨± ετ αλqot||x ~usss ~ • ¶¨·ετ
αλqot||{l o一些学者甚至推测感染昆虫的种类可能达到 zy h k¨¼¤³µ¤®¤¶« ετ αλqousssl ∀ Ωολβαχηια有可能是
自然界分布最广 !丰度最大的共生菌 ∀在膜翅目昆虫中 o许多寄生蜂种类的产雌孤雌生殖k·«¨ ¼¯·²®¼l被证实
与 Ωολβαχηια的共生有关k≥·²∏·«¤°¨ µ ετ αλqot||v ~ ≤«¨ ± ετ αλqot||u ~ „µ¤®¤®¬ ετ αλqousst ~ ‹∏¬ª¨±¶ ετ αλqo
usswl o还发现 Ωολβαχηια能引起一些种类寄生蜂的胞质不亲和k…µ¨ ∏¨º¨ µ ετ αλot||v ~ °¨ µµ²·2¬±±²·ετ αλqo
t||y ~∂¤√µ¨ ετ αλqousssl ∀
瘿蜂科昆虫主要危害壳斗科植物 o亦有一些种类危害蔷薇科 !菊科等 o一般于危害部位形成虫瘿 ∀瘿蜂
科可划分为 y 个族 o即 „¼¯¤¦¬±¬族k危害草本植物l !∞¶¦«¤·²¦¨µ¬±¬族≈危害金合欢属k Αχαχιαl和牧豆树属
kΠροσοπισl植物  !⁄¬³¯²¯ ³¨¬§¬±¬族≈危害蔷薇属k Ροσαl植物  !≥¼±¨ µª¬±¬族k本身不形成虫瘿 o寄居于其他瘿蜂形
成的虫瘿内l !°¨ §¬¤¶³¬§¬¯¬族≈危害槭属kΑχερl植物 及 ≤¼±¬³¬±¬族≈危害栎k Θυερχυσl属 !栗属k Χαστανεαl及其近
缘属 k¬­¨¥¯¤§ ετ αλqot||{ ~ •²±´ ∏¬¶·ot|||l ∀ „¼¯¤¦¬±¬族 !∞¶¦«¤·²¦¨µ¬±¬族 !⁄¬³¯²¯ ³¨¬§¬±¬族和 ≥¼±¨ µª¬±¬族主要
进行产雄孤雌生殖 k¤µµ«¨ ±²·²®¼lk孤雌生殖中所产生的后代都是雄性的生殖方式l o在 „¼¯¤¦¬±¬族和
⁄¬³¯²¯ ³¨¬§¬±¬族中亦有一些种类进行产雌孤雌生殖k„¶®¨ º ot|{w ~°¯¤±·¤µ§ ετ αλqot||{ ~t|||l∀ °¨ §¬¤¶³¬§¬¯¬族和
≤¼±¬³¬±¬族进行周期性的孤雌生殖 o即孤雌生殖与两性生殖周期性发生的生殖方式k„¶®¨ º ot|{w ~ „·®¬±¶²± ετ
¤¯ qoussu ~≥·²±¨ ετ αλqoussul∀ ≤¼±¬³¬±¬族种类最多 o已知有 ww属 |zw种 o多数种类进行周期性孤雌生殖 o但也
有一些种类营产雌孤雌生殖k¬­¨¥¯¤§ ετ αλqot||{ ~ •²±´ ∏¬¶·ot|||l∀这些种类的产雌孤雌生殖 o很有可能与
Ωολβαχηια的共生有关 o因 Ωολβαχηια的影响导致产雄孤雌生殖世代的缺失k„¥¨ ot|{y ~≥·²±¨ ετ αλqoussul∀
栗瘿蜂k ∆ρψοχοσµυσ κυριπηιλυσ 属瘿蜂科 ≤¼±¬³¬±¬族 o主要危害板栗k Χq µολλισσιµαl o也危害茅栗k Χq
σεθυινιιl和锥栗k Χq ηενρψιl ∀受害芽春季形成瘤状虫瘿 ∀国内分布于陕西 !河北 !山东 !河南 !湖北 !湖南 !福
建等省 o国外分布于日本 !朝鲜 ∀t年发生 t代 o营孤雌生殖k靳杏蕊等 ot||x ~吴晖等 oussw ~丁玉洲等 o
usswl ∀本文通过 °≤• 法对栗瘿蜂的株洲种群共生 Ωολβαχηια进行了检测 o并对其 ωσπ基因序列进行了测定 o
通过与已知瘿蜂科中其他种类 Ωολβαχηια的 ωσπ基因序列对比 o确定了株洲种群栗瘿蜂共生 Ωολβαχηια的进
化位置 o为进一步探讨 Ωολβαχηια对其孤雌生殖的诱导提供了基础 ∀
1 材料与方法
t1t 材料 栗瘿蜂的虫瘿于 ussw年 x月采自湖南省株洲市中南林业科技大学株洲校区标本园 o采集的带
虫瘿的板栗枝条基部以吸水的脱脂棉包被置于kux ? tl ε 的人工气候室内k宁波江南仪器设备厂l o羽化成
虫以无水乙醇浸泡 o于 p us ε 的冷冻柜保存备用 ∀
t1u 总 ⁄‘„的提取 每次进行 ⁄‘„提取时 o以超纯水洗涤后的栗瘿蜂成虫 t个体置于装有 xs ˏ≥×∞缓冲
液ktss °°²¯#pt ‘¤≤¯ ots °°²¯#pt ×µ¬¶p ‹≤¯ ot °°²¯#pt ∞⁄ׄ o³‹ {1sl的 t1x °离心管内 o将其充分捣
碎 ∀加 ≥⁄≥至终浓度为 t h o加蛋白质分解酶 Žkus °ª#°ptl ovz ε 水浴加温 vs °¬±∀加等量的 °≤k苯酚Β
氯仿Β异戊醇 € uxΒuwΒtl抽提 ox sss µ#°¬±pt离心 ts °¬±o取上清液 o再加等量 °≤抽提 ox sss µ#°¬±pt离心
ts °¬±o取上清液 o然后 o加 tΠts体积 v °²¯#pt醋酸钠 o加 u1x倍体积无水乙醇 p us ε 过夜 o经低温离心 o去
上清液 o用 zx h冷乙醇洗涤 o低温离心去上清液 !干燥后 o获纯净 ⁄‘„ ∀加 ×∞缓冲液溶解 ⁄‘„备用 ∀
图 t 栗瘿蜂株洲种群 Ωολβαχηια的
ωσπ基因片段的 °≤• 扩增
ƒ¬ªqt ׫¨ °≤• ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²± ²©·«¨ º¶³ª¨ ±¨ ©µ¤ª°¨ ±·²©
Ωολβαχηιᬱ «∏½«²∏³²³∏¯¤·¬²± ²© ∆ q κυριπηιλυσ
 }核酸分子量参照 ²¯ ¦¨∏¯¤µ°¤¶¶°¤µ®¨µ~
t !u !w }栗瘿蜂 ∆ q κυριπηιλυσ~
v }阴性对照k水l‘¨ª¤·¬√¨ ¦²±·µ²¯kº¤·¨µl q
t1v Ωολβαχηια的 ωσπ基因片段的 °≤• 扩增 使用的 ωσπ基因特异性引物为 ωσπ{tƒkxχ2 ׊Š×≤≤„„ׄ„Š×
Š„׊„„Š„„„≤2vχl和 ωσπy|t• kxχ2„„„„„×ׄ„„≤Š≤ׄ≤×≤≤„2vχ ∀ °≤• 扩增体积为 ux ˏo包括 u ˏ模板
⁄‘„ otz1t ˏ‹u ’ ou1x ˏts ≅ ¥∏©©¨µot ˏ§‘×°¶kts °°²¯#ptl o上游和下游引物kts Λ°²¯#ptl各 t ˏ以
及 s1w Λ×¤´ ⁄‘„ 聚合酶ku1x ˜#ˏptl ∀ °≤• 扩增循环是 }|x ε 预变性 v °¬±o|x ε vs ¶oxu ε vs ¶o
zu ε t °¬±o共 vx个循环 o循环结束后 zu ε 处理 z °¬±∀
°≤• 扩增产物用 t1s h的琼脂糖凝胶于 s1x ≅ ׅ∞缓冲液中电泳 o电压 zs ∂ o电泳时间约 t «∀电泳后
以溴化乙锭染色 o凝胶成像系统检测并摄影 ∀ ⁄‘„分子质量采用 ƒ µ¨°¨ ±·¤¶公司的 ⁄‘„  • ¤®¨µ标记 ∀以
水为阴性对照 ∀
t1w Ωολβαχηια的 ωσπ基因片段序列测定与分析 采用克隆测序方法 o回收后的 °≤• 产物与 ³⁄t{ p ×载体
k大连宝生物公司l连接 o再转化到感受态大肠杆菌中 o筛选阳性克
隆 o随机挑选 v个克隆产物由上海英俊生物技术有限公司进行序列
测定 o以它们的一致序列为准 ∀ ⁄‘„ 序列检索和同源性比较利用
…„≥×工具k‘≤…Œl ∀利用 ≤¯ ∏¶·¤¯ ÷ 软件对所测得的 Ωολβαχηια 的
ωσπ基因序列以及 Š¨ ±…¤±®中已知的其他瘿蜂 Ωολβαχηια 的 ωσπ基
因序列进行序列完全排列 o用支序系统学 °‹≠Œ° v1y¤软件包进行
t sss次的自导复制k¥²²·¶·µ¤³µ¨³¯¬¦¤·¬²±l o用 ⁄‘„⁄Œ≥× 程序根据
Ž¬°∏µ¤. ¶u p ³¤µ¤°¨ ·¨µ模型计算遗传距离 o在 ‘∞ŒŠ‹…’• 程序中用
邻位相连法 k±¨ ¬ª«¥²∏µ2­²¬±¬±ª ¤±¤¯¼¶¬¶l获得聚类图 o 最后在
≤’‘≥∞‘≥∞程序中形成系统进化树 ∀
2 结果与分析
u1t 栗瘿蜂共生 Ωολβαχηια的 °≤• 检测 利用 Ωολβαχηια的 ωσπ基
因的一对通用引物k{tƒ oy|t• l o成功地从栗瘿蜂总 ⁄‘„ 中扩增到
一条 yss ¥³左右的 ωσπ基因片段k图 tl o证实了 Ωολβαχηια在我国
栗瘿蜂体内的感染 ∀采用克隆测序方法 o对该基因片段进行了序
wvt 林 业 科 学 wv卷
列测定 ∀栗瘿蜂 Ωολβαχηια的 ωσπ基因片段为 ytz ¥³o已提交 Š¨ ±…¤±®注册k注册号为 ⁄±w|vzusl ∀
u1u 栗瘿蜂共生 Ωολβαχηια的 ωσπ基因序列分析及系统进化树的建立 将栗瘿蜂共生 Ωολβαχηια的 ωσπ基因
序列利用 ‘≤…Œ网站提供的 …„≥×分析工具 o与 Š¨ ±…¤±®中注册的瘿蜂种类共生 Ωολβαχηια的 ωσπ基因序列
进行了同源性比较k表 tl ∀栗瘿蜂体内的 Ωολβαχηια的 ωσπ 基因序列与 Š¨ ±…¤±®中 „ 大组的其他瘿蜂
Ωολβαχηια株的同源性在 {{1z h ∗ {v1| h之间 o与同为产雌孤雌生殖的 Πλαγιοτροχηυσ θυερχυσιλιχισ体内的 º±∏¨
株的同源性最高 ∀与 …大组 Χεροπτρεσχερρι体内的 º≤ µ¨株的同源性为 {u1| h ∀
表 1 栗瘿蜂及其他瘿蜂科种类感染 Ωολβαχηια的 ωσπ基因序列的同源性及其寄主的繁殖方式
Ταβ . 1 Τηειδεντιτψ οφ σεθυενχε οφ τηε ωσπ γενε οφ Ωολβαχηια φροµ ∆ . κυριπηιλυσ ανδ
οτηερ σπεχιεσ οφ Χψνιπιδαε ανδ τηε ρεπροδυχτιϖε µ οδεσ οφ τηειρ ηοστσ
株
Ωολβαχηια¶·µ¤¬±
核苷酸数目
‘∏°¥¨µ²©
±∏¦¯ ²¨·¬§¨¶
同源性
Œ§¨±·¬·¼Πh
注册号
„¦¦¨¶¶¬²±
±∏°¥¨µ
寄主
‹²¶·¶³¨¦¬¨¶
寄主繁殖方式 ≠
• ³¨µ²§∏¦·¬√¨
°²§¨ ²©«²¶·
来源
≥²∏µ¦¨
ºŽ∏µ ytz ) ⁄±w|vzus 栗瘿蜂 ∆ q κυριπηιλυσ × )
„大组 „ ¶∏³¨µªµ²∏³
º±∏¨ x|s {{1z „≠s|xtx{ Πλαγιοτροχηυσ θυερχυσιλιχισ × •²®¤¶ ετ αλqoussu
º≥²¯ ytz {y1x „≠s|xtxt Ανδριχυσσολιταριυσ ≤° •²®¤¶ ετ αλqoussu
º⁄¬¤ yus {y1{ „≠s|xtw{ Σψνεργυσ διαπηανυσ „ •²®¤¶ ετ αλqoussu
º• ¬¨ yus {y1{ „≠s|xtwz Σψνεργυσρεινηαρδτι „ •²®¤¶ ετ αλqoussu
º˜°¥ yus {y1{ „≠s|xtw| Σψνεργυσ υµβραχυλυσ „ •²®¤¶ ετ αλqoussu
º∏® ysx {x1s „…sxuyyz Ανδριχυσ µυκαιγαωαε × „¥¨ ετ αλqoussu
ºŠ¤¯ yvu {w1w „≠s|xtxx Σψνεργυσ γαλλαεποµιφορµισ „ •²®¤¶ ετ αλqoussu
ºŠ¯¤ yv{ {v1| „≠s|xtxy Χαλλψρηψτισ γλανδιυµ ≤° •²®¤¶ousst
º°¤¯ ys{ {x1x „ƒvv|yu| Βιορηιζα παλλιδα ≤° •²®¤¶ousst
º≤µ¤ ys{ {x1x „≠s|xtxw Σψνεργυσ χρασσιχορνισ „ •²®¤¶ ετ αλqoussu
º¤¦ ys{ {x1x „≠s|xtxu Νευροτερυσ µαχροπτερυσ × •²®¤¶ ετ αλqoussu
…大组 … ¶∏³¨µªµ²∏³
º≤ µ¨ x{{ {u1| „≠s|xtxz Χεροπτρεσ χερρι „ •²®¤¶ ετ αλqoussu
≠ × }产雌孤雌生殖 ׫¨ ¼¯·²®¼ ~≤° }周期性孤雌生殖 ≤¼¯¬¦³¤µ·«¨ ±²ª¨ ±¨ ¶¬¶~„ }产雄孤雌生殖 „µµ«¨ ±²·²®¼²q
利用 ≤¯ ∏¶·¤¯ ÷ 软件对所测得序列 !Š¨ ±…¤±®中已知的其他瘿蜂以及 „大组代表性菌株 º≥¬°和 …大组代
表性菌株 º°¬³!º„¯ ¥的 ωσπ基因序列进行排列 o用 °‹≠Œ°软件进行 t sss次的自导复制 o获得了 ‘系统进
化树k图 ul ∀从系统进化树中可以看出 o栗瘿蜂体内共生的 Ωολβαχηια与其他多数瘿蜂种类的共生菌株属于
„大组 ∀
v 结论与讨论
Ωολβαχηια是节肢动物体内最为丰富的共生微生物之一k • µ¨µ¨±ot||zl ∀本研究发现栗瘿蜂体内存在
Ωολβαχηια的共生 o在 ‘系统进化树中可以看出 o栗瘿蜂体内的 Ωολβαχηια与大多数瘿蜂科种类的 Ωολβαχηια
相同 o属于 „大组 ∀
瘿蜂科昆虫的生殖方式比较复杂 o有产雄孤雌生殖 !产雌孤雌生殖以及周期性孤雌生殖 ~但是 o其遗传
机制尚不十分清楚k‹ ¥¨¨µ·ot|{z ~≥∏²°¤¯¤¬±¨ ± ετ αλqot|{zl ∀ •²®¤¶等kussul对欧洲的 yw种瘿蜂是否存在
Ωολβαχηια的共生进行了检测 o仅仅 z 种检出了 Ωολβαχηια o检测种类的共生率较低 o为 ts1| h ∀瘿蜂科
≤¼±¬³¬±¬族的许多种类营周期性的孤雌生殖k¬­¨ ¥¯¤§ ετ αλqot||{ ~ •²±´ ∏¬¶·ot|||l o对于存在 Ωολβαχηια共生
的 ≤¼±¬³¬±¬族营产雌孤雌生殖的种类 o•²®¤¶等kussul推测其祖先繁殖方式是周期性的孤雌生殖 o由于
Ωολβαχηια的共生 o而导致产雄孤雌生殖世代的缺失 ∀但是 o已知感染 Ωολβαχηια的种类中 o既有产雌孤雌生
殖的种类 o也有周期性孤雌生殖及产雄孤雌生殖的种类k表 tl o可见 Ωολβαχηια对瘿蜂生殖的影响较为复杂 ∀
就栗瘿蜂而言 o产雌孤雌生殖是否与共生的 Ωολβαχηια有关 o调控机制如何 o有待进一步探讨 ∀
xvt 第 v期 朱道弘等 }栗瘿蜂体内 Ωολβαχηια的感染及其 ωσπ基因序列分析
图 u 栗瘿蜂与其他昆虫种类 Ωολβαχηια的 ωσπ基因序列的系统进化关系
ƒ¬ªqu ׫¨ ³«¼¯²ª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³²© ωσ𠪨 ±¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨ ²© ωολβαχηιᬱ ∆ q κυριπηιλυ󤱧²·«¨µ¬±¶¨¦·¶
参 考 文 献
丁玉洲 o毕守东 o方国飞 o等 qussw1 栗瘿蜂虫瘿形成及发育与发生量关系研究 q应用生态学报 otxktl }ts{ p tts
靳杏蕊 o田士波 o赵淑娥 o等 qt||x1 控制栗瘿蜂形成虫瘿的研究 q林业科学 ovtktl }zz p {s
吴 晖 o陈顺立 o黄金聪 o等 qussw1 锥栗品种抗栗瘿蜂性状的评价 q福建林学院学报 ouwkwl }vww p vw{
„¥¨ ≠ qt|{y1 פ¬²±²°¬¦¶·¤·∏¶²©·«¨ Ανδριχυσ µυκαιγαωαε ¦²°³¯ ¬¨ ¤±§¬·¶¶³¨¦¬¤·¬²± º¬·« ª¨²ªµ¤³«¬¦¤¯ ³¤µ·«¨ ±²ª¨ ±¨ ¶¬¶k‹¼° ±¨²³·¨µ¤} ≤¼±¬³¬§¤¨ l q „³³¯
∞±·²°²¯ ²²¯ out }wvy p wwz
„¥¨ ≠ o ¬∏µ¤Žqussu1 ⁄²¨ ¶ Ωολβαχηιᬱ§∏¦¨ ∏±¬¶¨¬∏¤¯¬·¼¬± ²¤®ª¤¯¯ º¤¶³¶‚ k‹¼° ±¨²³·¨µ¤}≤¼±¬³¬§¤¨ l q „±± ∞±·²°²¯ ≥²¦„° o|x }x{v p x{y
„µ¤®¤®¬‘o’¬¶«¬× o‘²§¤ ‹ qusst1 °¤µ·«¨ ±²ª¨ ±¨ ¶¬¶¬±§∏¦¨§¥¼ Ωολβαχηιᬱ Γρονοτοµα µιχροµορπηα k‹¼° ±¨²³·¨µ¤}∞∏¦²¬¯¬§¤¨ l q∞±·²°²¯ ≥¦¬ow }| p tx
„¶®¨ º • • qt|{w1 ׫¨ ¥¬²¯²ª¼ ²©ª¤¯¯ º¤¶³¶ΠΠ„±¤±·«¤®µ¬¶«±¤± × ‘q׫¨ …¬²¯²ª¼ ²© Š¤¯ ¬¯±ªŒ±¶¨¦·¶q ‘¨º ⁄¨ «¯¬}Œ…‹ °∏¥¯¬¶«¬±ª ≤²ouuv p uzt
„·®¬±¶²± • o ¦∂ ¤¨± Š „ × o≥·²±¨ Š ‘qussu1 ˜¶¨ ²©³²³∏¯¤·¬²± ª¨ ±¨ ·¬¦§¤·¤·²¬±©¨µ²√¬³²¶¬·¬²± ¥¨«¤√¬²∏µ}¶³¨¦¬¨¶2¶³¨¦¬©¬¦³¤·¨µ±¶¬± ©²∏µ²¤® ª¤¯ º¯¤¶³¶
k‹¼°¨ ±²³·¨µ¤}≤¼±¬³¬§¤¨ l q°µ²¦¨ §¨¬±ª¶²©·«¨ •²¼¤¯ ≥²¦¬¨·¼ ²©²±§²±}≥¨ µ¬¨¶…ouy| }v{v p v|s
…µ¨ ∏¨º µ¨ „ o • µ¨µ¨±  ‹ qt||v1 ≤¼·²³¯¤¶°¬¦¬±¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼ ¤±§¥¤¦·¨µ¬¤¯ §¨±¶¬·¼¬± Νασονια ϖιτριπεννισq Š¨ ±¨ ·¬¦¶otvx }xyx p xzw
≤«¨ ± … ‹ oŽ©¬µ• o≤«¨ ± ≤ ‘qt||u1 ׫¨ ·«¨ ¼¯·²®²∏¶ Τριχηογραµ µα χηιλονισ¬± ×¤¬º¤±q∞±·²°²¯ ∞¬³ „³³¯ oyx }t{z p t|w
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Τριχηογραµ µα º¤¶³¶q°µ²¦¨ §¨¬±ª¶²© •²¼¤¯ ≥²¦¬¨·¼ ²©²±§²±}≥¨ µ¬¨¶…ouzt }txv{ p txwx
¨¼¤³µ¤®¤¶« „ o ‹²¼  „ qusss1 ²±ª°≤• ¬°³µ²√¨ ¶ Ωολβαχηια ⁄‘„ ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±} ωσ𠶨 ∏´¨ ±¦¨¶©²∏±§¬± zy h ²©yv ¤µ·«µ²³²§¶³¨¦¬¨¶qŒ±¶¨¦·²¯ …¬²o| }
v|v p wsx
¬¯­¨ ¥¯¤§o •²±´ ∏¬¶·ƒ qt||{1 „ ³«¼¯²ª¨ ±¨ ·¬¦¤±¤¯¼¶¬¶²©«¬ª«¨µ2¯ √¨¨¯ ª¤¯¯ º¤¶³µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³¶k‹¼° ±¨²³·¨µ¤}≤¼±¬³¬§¤¨ l q≥¼¶∞±·²°²¯ ouv }uu| p uxu
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k责任编辑 朱乾坤l
zvt 第 v期 朱道弘等 }栗瘿蜂体内 Ωολβαχηια的感染及其 ωσπ基因序列分析