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Molecular Detection and Sequence Analysis of wsp Gene from Wolbachia in a New Species of Ericerus pela Parasitic Wasps

一种新的白蜡虫寄生蜂体内Wolbachia的wsp基因分子检测及序列分析



全 文 :林业科学研究摇 圆园员员袁圆源渊猿冤院猿源园 猿源源云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员员冤园猿鄄园猿源园鄄园缘
一种新的白蜡虫寄生蜂体内 宰燥造遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责基因
分子检测及序列分析鄢
杨摇 璞员袁 朱家颖圆袁 谢正华员袁 李摇 萌员袁 陈晓鸣员鄢鄢袁 陈晓庆圆
渊员郾 中国林业科学研究院资源昆虫研究所袁国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室袁云南 昆明摇 远缘园圆圆源曰
圆郾 西南林业大学保护生物学院袁云南省森林灾害预警与控制重点实验室袁云南 昆明摇 远缘园圆圆源冤
收稿日期院 圆园员园鄄员员鄄圆缘
基金项目院 国家自然基金委青年基金渊猿员园园园怨愿猿冤曰云南省应用基础研究基金渊圆园员园在悦圆猿缘冤和中国林科院资源昆虫研究所中央级公益性
科研院所基本科研业务费专项资金渊苑鄄园员缘鄄猿冤资助
作者简介院 杨摇 璞渊员怨员怨要冤袁男袁博士袁助理研究员袁主要从事白蜡虫分子生物学研究援 耘鄄皂葬蚤造院扎躁怎赠葬灶早责怎岳 赠葬澡燥燥援 糟灶
鄢浙江大学昆虫科学研究所的吴琼博士帮助鉴定白蜡虫寄生蜂的种类袁在此表示感谢浴
鄢鄢通讯作者院 研究员袁博士生导师袁主要从事资源昆虫学研究援 耘鄄皂葬蚤造院糟葬枣糟曾皂岳 贼燥皂援 糟燥皂
摘要院采用 宰燥造遭葬糟澡蚤葬的通用引物尧粤大组和 月大组的特异性引物对一种新的白蜡虫寄生蜂要要要长尾啮小蜂渊粤责则燥泽鄄
贼燥糟藻贼怎泽 泽责援 冤体内宰燥造遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责基因进行分子检测袁所获得的基因片段分别命名为 憎粤责则尧憎粤责则粤和 憎粤责则月袁长度分别
为 远圆园尧缘远远 和 源远猿 遭责曰基因序列分析表明院憎粤责则粤尧憎粤责则月与 憎粤责则在对应位置序列仅有 源 个碱基的差异遥 系统发育分
析表明院该寄生蜂仅感染了 月大组 阅蚤早亚组的 宰燥造遭葬糟澡蚤葬遥 憎粤责则和 憎粤责则月基因序列已经递交到 晕悦月陨袁登录号分别是
匀匝员圆员源员缘 和 匀匝员圆员源员苑遥
关键词院白蜡虫曰长尾啮小蜂曰宰燥造遭葬糟澡蚤葬曰憎泽责
中图分类号院杂愿怨怨郾 员 文献标识码院粤
酝燥造藻糟怎造葬则 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 葬灶凿 杂藻择怎藻灶糟藻 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 憎泽责 郧藻灶藻 枣则燥皂 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 蚤灶
葬 晕藻憎 杂责藻糟蚤藻泽 燥枣 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬 孕葬则葬泽蚤贼蚤糟 宰葬泽责泽
再粤晕郧 孕怎员袁 在匀哉 允蚤葬鄄赠蚤灶早圆袁 载陨耘 在澡藻灶早鄄澡怎葬员袁 蕴陨 酝藻灶早员袁 悦匀耘晕 载蚤葬燥鄄皂蚤灶早员袁 悦匀耘晕 载蚤葬燥鄄择蚤灶早圆
渊员援 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻 陨灶泽藻糟贼泽袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠曰 栽澡藻 运藻赠 造葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 悦怎造贼蚤增葬贼蚤灶早 葬灶凿 哉贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻泽 陨灶泽藻糟贼泽 燥枣
杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆圆源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬曰 圆援 云葬糟怎造贼赠 燥枣 悦燥灶泽藻则增葬贼蚤燥灶 月蚤燥造燥早赠袁 杂燥怎贼澡憎藻泽贼 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠曰
运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 云燥则藻泽贼 阅蚤泽葬泽贼藻则 宰葬则灶蚤灶早 葬灶凿 悦燥灶贼则燥造 燥枣 再怎灶灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆圆源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 憎葬泽 藻皂责造燥赠藻凿 贼燥 凿藻贼藻糟贼 贼澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 燥枣 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 燥灶 粤责则燥泽贼燥糟藻贼怎泽 泽责援 袁 葬 灶藻憎 泽责藻糟蚤藻泽
燥枣 责葬则葬泽蚤贼蚤糟 憎葬泽责泽 燥灶 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬袁 遭赠 怎泽蚤灶早 贼澡藻 怎灶蚤增藻则泽葬造 责则蚤皂藻则泽 葬灶凿 泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则泽 枣燥则 憎泽责 早藻灶藻 燥枣 粤 葬灶凿 月 泽怎鄄
责藻则早则燥怎责援 栽澡藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿袁 憎藻则藻 灶葬皂藻凿 葬泽 憎粤责则袁 憎粤责则粤 葬灶凿 憎粤责则月袁 憎澡蚤糟澡 泽蚤扎藻泽 憎藻则藻 远圆园袁 缘远远 葬灶凿 源远猿 遭责
则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 杂藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 枣燥怎灶凿 贼澡葬贼 源 增葬则蚤葬遭造藻 遭葬泽藻责葬蚤则泽 燥糟糟怎则则藻凿 葬皂燥灶早 贼澡藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽援 栽澡藻 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬鄄
灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 憎泽责 早藻灶藻 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 蚤灶 粤责则燥泽贼燥糟藻贼怎泽 泽责援 憎藻则藻 糟造葬泽泽蚤枣蚤藻凿 葬泽 阅蚤早 早则燥怎责 燥枣 月鄄宰燥造遭葬糟澡蚤葬援 栽澡藻 泽藻鄄
择怎藻灶糟藻泽 燥枣 憎粤责则 葬灶凿 憎粤责则月 憎藻则藻 泽怎遭皂蚤贼贼藻凿 贼燥 郧藻灶月葬灶噪 葬灶凿 贼澡藻 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 灶怎皂遭藻则泽 葬泽泽蚤早灶藻凿 憎藻则藻 匀匝员圆员源员缘
葬灶凿 匀匝员圆员源员苑援
运藻赠 憎燥则凿泽院 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬曰粤责则燥泽贼燥糟藻贼怎泽 泽责援 曰宰燥造遭葬糟澡蚤葬曰憎泽责
宰燥造遭葬糟澡蚤葬属于细菌门变型菌纲的 琢 亚纲袁立克
次氏体目袁立克次氏体科袁宰燥造遭葬糟澡蚤葬 属袁是广泛存在
于节肢动物体内的一类共生微生物袁可引起宿主胞
质不亲和尧诱导孤雌生殖尧雌性化及雄性致死咱员 原 源暂 遥
宰燥造遭葬糟澡蚤葬在昆虫种群中的分布十分广泛袁据统计袁
宰燥造遭葬糟澡蚤葬在昆虫纲的鞘翅目尧双翅目尧半翅目尧同翅
目尧膜翅目尧鳞翅目尧直翅目中都有广泛分布咱缘 原 苑暂 遥
栽葬早葬皂蚤等咱缘暂对日本鳞翅目中 怨 个科和 源怨 个种的昆
第 猿 期 杨摇 璞等院一种新的白蜡虫寄生蜂体内 宰燥造遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责基因分子检测及序列分析
虫进行了调查袁结果表明院苑苑郾 愿豫的科和 源源郾 怨豫的种
都感染了 宰燥造遭葬糟澡蚤葬咱愿暂 遥 到目前为止袁已有许多报道
证实袁在多种昆虫的自然种群中存在着 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 的
超感染现象咱怨 原 员园暂 遥 目前袁检测昆虫体内是否感染
宰燥造遭葬糟澡蚤葬主要依赖于对其 憎泽责 基因进行 孕悦砸 检测
与序列分析咱员员 原 员缘暂 袁而且在 郧藻灶月葬灶噪 中登录的 憎泽责 基
因越来越多袁为 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 的研究提供了大量的资
料袁随着对 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 的不断研究袁又有新的亚组被
发现咱员远暂 遥
白蜡虫渊耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬冤是我国一种重要的资源
昆虫袁该虫被多种寄生蜂寄生咱员苑暂 袁长尾啮小蜂属的
粤责则燥泽贼燥糟藻贼怎泽 泽责援为首次发现在白蜡虫上寄生袁对该寄
生蜂的生物学特性研究较少袁关于该寄生蜂 宰燥造遭葬鄄
糟澡蚤葬的 孕悦砸 检测还未见报道遥 对该寄生蜂体内
宰燥造遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责基因进行序列分析袁对于了解 宰燥造鄄
遭葬糟澡蚤葬在白蜡虫寄生蜂内的感染和传播以及进一步
研究 宰燥造遭葬糟澡蚤葬白蜡虫寄生蜂生殖方式的影响具有
重要意义遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 材料
所用白蜡虫长尾啮小蜂采自昆明资源昆虫研究
所人工大棚内白蜡虫上袁于 原 圆园 益冻存遥
员援 圆摇 基因组 阅晕粤提取
采用改良的蛋白酶 运 法咱员愿暂 遥 取 缘 头寄生蜂用
蒸馏水漂洗干净袁研碎袁加入 缘园园 滋蕴 裂解液渊员园园
皂皂燥造 栽则蚤泽鄄匀悦造袁圆缘 皂皂燥造 耘阅栽粤袁缘园园 皂皂燥造 晕葬悦造袁员豫
杂阅杂袁责匀值 愿郾 园冤袁加蛋白酶 运 至终浓度为 员园园 滋早窑
皂蕴 原员袁缘园 益水浴 源 澡袁等体积的酚颐氯仿颐异戊醇渊圆缘
颐 圆源颐 员冤袁员源 园园园 早离心 缘 皂蚤灶袁用氯仿颐异戊醇渊圆源颐 员冤
重复抽提 员 次袁取上清加入 圆 倍体积无水乙醇袁 原 圆园
益静置 员 澡袁员源 园园园 早 离心 员园 皂蚤灶袁沉淀用 苑缘豫乙醇
洗涤 圆 次袁充分干燥后加入适量 园郾 缘 伊 栽耘溶解沉淀袁
源 益保存备用遥
员援 猿摇 孕悦砸扩增
参照 在澡燥怎 等咱员缘暂设计的 憎泽责 基因的引物院愿员云
渊 缘 爷鄄栽郧郧栽悦悦粤粤栽粤粤郧栽郧粤栽郧粤粤郧粤粤粤悦鄄猿 爷冤尧 员猿远云
渊缘爷鄄栽郧粤粤粤栽栽栽栽粤悦悦栽悦栽栽栽栽悦鄄猿 爷冤尧 缘圆圆砸 渊缘爷鄄粤悦鄄
悦粤郧悦栽栽栽栽郧悦栽栽郧粤栽粤鄄猿爷冤尧 远怨员砸 渊缘 爷鄄粤粤粤粤粤栽栽粤鄄
粤粤悦郧悦栽粤悦栽悦悦粤鄄猿爷冤袁其中袁愿员云 辕 远怨员砸为 宰燥造遭葬糟澡蚤葬
的 憎泽责基因的通用引物袁员猿远云 辕 远怨员砸 为 粤 大组特异
性引物袁愿员云 辕 缘圆圆砸 为 月 大组特异性引物袁猿 对引物
所用扩增体系和 孕悦砸 反应程序相同遥 扩增体系为
缘园 滋蕴体系院凿凿匀圆韵为 猿员郾 缘 滋蕴袁员园 伊 孕悦砸 遭怎枣枣藻则 为 缘
滋蕴袁员园 滋皂燥造窑蕴 原员 责则蚤皂藻则 云为 员郾 缘 滋蕴袁员园 滋皂燥造窑蕴 原员
责则蚤皂藻则 砸为 员郾 缘 滋蕴袁员园 皂皂燥造窑蕴 原员 凿晕栽孕 为 源 滋蕴袁缘
哉窑滋蕴 原员 栽葬择 责燥造赠皂藻则葬泽藻 为 园郾 缘 滋蕴袁圆缘 皂皂燥造窑蕴 原员
酝早悦造圆 为 源 滋蕴袁阅晕粤为 圆 滋蕴遥 孕悦砸 程序为院怨源 益袁源皂蚤灶曰怨源 益袁员 皂蚤灶袁源愿 益袁员 皂蚤灶袁苑圆 益袁员 皂蚤灶袁猿圆 个循
环曰苑圆 益袁员园 皂蚤灶遥 员豫琼脂糖凝胶电泳检测袁紫外灯
下检测拍照遥
员援 源摇 克隆和测序
紫外灯下切下相应条带袁按照 粤曾赠早藻灶 凝胶回收
试剂盒操作袁最后加入 圆缘 滋蕴加热的 凿凿匀圆韵洗脱袁取源 滋蕴纯化产物与 员 滋蕴 栽 载体混匀袁加入 缘 滋蕴 泽燥造怎鄄
贼蚤燥灶 陨混匀渊按照 栽葬噪葬则葬 的 责酝阅员怨鄄栽 载体连接试剂
盒操作冤袁源 益过夜连接袁源圆 益水浴热激 怨园 泽转化大
肠杆菌 阅匀缘鄄琢感受态细胞袁涂平板后通过蓝白斑筛
选以及菌液 孕悦砸 检测阳性重组克隆遥 菌液送交南
京金斯瑞公司测序遥
员援 缘摇 序列分析
将引自 晕悦月陨的 员怨 条序列以及 憎粤责则尧憎粤责则粤尧憎粤鄄
责则月基因序列用 糟造怎泽贼葬造曾 员郾 愿猿比对后袁输入 酝耘郧粤源郾 员袁
采用 运蚤皂怎则葬鄄圆 孕葬则葬皂藻贼藻则模型建 晕允树袁各分支的 遭燥燥贼鄄
泽贼则葬责置信度用 员 园园园次自导复制来评价遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 憎泽责基因的 孕悦砸检测
以白蜡虫长尾啮小蜂基因组 阅晕粤为模板袁结合
通用引物尧粤 大组特异性引物和 月 大组特异性引物
均扩增出了目的片段渊图 员冤遥
摇 摇 泳道 员 猿 为采用通用引物尧粤 大组和 月 大组特异引物以长尾
啮小蜂基因组 阅晕粤为模板进行的 孕悦砸扩增袁酝为 酝葬则噪藻则
图 员摇 采用通用引物尧粤大组和 月大组特异引物对
白蜡虫长尾啮小蜂进行 孕悦砸扩增获得的电泳图
员源猿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
圆援 圆摇 憎泽责基因的序列分析
长尾啮小蜂基因组 阅晕粤 结合通用引物扩增获
得的基因片段命名为 憎粤责则袁长度为 远圆园 遭责袁采用 粤
大组引物扩增获得的基因片段长度为 缘远远 遭责袁命名
为 憎粤责则粤袁与 憎粤责则 在对应位置仅有 员 个碱基存在差
异渊图 圆冤袁采用 月 大组引物获得的基因片段长度为
源远猿 遭责袁命名为 憎粤责则月袁与 憎粤责则在对应位置仅有 猿 个
碱基存在差异袁猿 条序列间总共只有 源 个碱基存在
差异渊图 圆冤遥
野 原 冶为相同碱基袁野援 冶为缺失碱基袁阴影部分所示为引物序列和引物名称遥
图 圆摇 白蜡虫长尾啮小蜂体内 宰燥造遭葬糟澡蚤葬共生菌 憎泽责基因序列比较
在 晕悦月陨进行 月蕴粤栽发现袁憎粤责则尧憎粤责则粤 和 憎粤责则月
与 月 大组 阅蚤早 亚组序列 渊登录号为 耘云缘远源远圆源 和
阅匝源愿苑园怨远冤的一致性很高袁因此采用 粤 大组引物获
得的片段并非来自 粤 大组 宰燥造遭葬糟澡蚤葬遥 系统发育分
析表明院该寄生蜂感染的 宰燥造遭葬糟澡蚤葬均属于 月大组的
阅蚤早亚组渊图 猿冤遥 所获得的序列已经递交到 晕悦月陨袁
登录号为 匀匝员圆员源员缘 和 匀匝员圆员源员苑遥
圆源猿
第 猿 期 杨摇 璞等院一种新的白蜡虫寄生蜂体内 宰燥造遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责基因分子检测及序列分析
图 猿摇 基于 憎泽责基因序列的白蜡虫长尾啮小蜂体内 宰燥造遭葬糟澡蚤葬的系统进化树
猿摇 讨论
自然界的昆虫中感染 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 的情况非常普
遍袁存在复合感染咱员怨暂和三重感染咱圆园暂 袁但检测结果和
所用的引物有一定关系袁若采用通用引物检测袁只能
说明该昆虫被某一个大组的 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 感染袁其主要
原因就是昆虫体内的 粤 大组 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 和 月 大组
宰燥造遭葬糟澡蚤葬丰度不同遥 因此袁在判断昆虫是否被不同
大组 宰燥造遭葬糟澡蚤葬复合感染时袁应选择多对引物进行检
测遥 本研究采用了 粤 大组和 月 大组的特异引物进
行检测袁虽然获得了相应的片段袁但是序列分析表
明袁长尾啮小蜂 憎粤责则序列中含有 粤大组扩增的上下
游引物 员猿远云 辕 远怨员砸袁该小蜂体内如果 粤 大组 宰燥造遭葬鄄
糟澡蚤葬含量较低可能也难以检测遥 对于采用 粤大组引
物获得的长尾啮小蜂 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 的 憎泽责 基因片段袁挑
选了多个单克隆进行测序袁结果均相同袁同时对于通
用引物尧粤大组和 月 大组引物获得的该寄生蜂 宰燥造鄄
遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责基因进行系统聚类分析发现袁它们均
属于 月大组的 阅蚤早 亚组袁与采用其它聚类方法得到
的结果相同遥 因此袁采用 粤 大组引物获得的基因片
段并非来自 粤大组 宰燥造遭葬糟澡蚤葬袁该寄生蜂只被 月 大组
宰燥造遭葬糟澡蚤葬感染遥
宰燥造遭葬糟澡蚤葬 水平传播在寄生蜂中已有文献报
道咱圆员暂 遥 本研究发现长尾啮小蜂感染的 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 与
白蜡虫阔柄跳小蜂 酝藻贼葬责澡赠糟怎泽 藻则蚤糟藻则蚤 载怎 藻贼 允蚤葬灶早 感
染的 宰燥造遭葬糟澡蚤葬属于不同亚组袁其 憎泽责 基因序列差异
较大袁不存在 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 在这 圆 种寄生蜂之间水平
传播遥
宰燥造遭葬糟澡蚤葬 对寄主的生殖调控具有很重要的作
用袁但有研究认为 宰燥造遭葬糟澡蚤葬对不同种类的寄主所起
的生殖调控作用可能不同袁而且 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 密度不同
时其作用可能也会有所不同咱员圆袁圆圆暂 曰因此袁宰燥造遭葬糟澡蚤葬
对于长尾啮小蜂的生殖调控机制如何袁有待进一步
探讨遥
参考文献院
咱员暂 灾葬增则藻 云袁 云造藻怎则赠 云袁 灾葬则葬造凿蚤 允袁 藻贼 葬造援 耘增蚤凿藻灶糟藻 枣燥则 枣藻皂葬造藻 皂燥则贼葬造蚤贼赠 蚤灶
宰燥造遭葬糟澡蚤葬鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿 糟赠贼燥责造葬泽皂蚤糟 蚤灶糟燥皂责葬贼蚤遭蚤造蚤贼赠 蚤灶 澡葬责造燥凿蚤责造燥蚤凿 蚤灶鄄
猿源猿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
泽藻糟贼泽院 藻责蚤凿藻皂蚤燥造燥早蚤糟 葬灶凿 藻增燥造怎贼蚤燥灶葬则赠 糟燥灶泽藻择怎藻灶糟藻泽咱允暂 援 耘增燥造怎贼蚤燥灶袁
圆园园园袁 缘源渊员冤院 员怨员 原 圆园园
咱圆暂 施婉君袁 程家安袁 祝增荣袁 等援 昆虫共生细菌 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 的研究
进展咱允暂 援 生态学报袁 圆园园圆袁 圆圆渊猿冤院 源园怨 原 源员怨
咱猿暂 匀怎蚤早藻灶泽 酝 耘袁 阅藻 粤造皂藻蚤凿葬 砸 孕袁 月燥燥灶泽 孕 粤 匀袁 藻贼 葬造援 晕葬贼怎则葬造 蚤灶贼藻则鄄
泽责藻糟蚤枣蚤糟 葬灶凿 蚤灶贼则葬泽责藻糟蚤枣蚤糟 澡燥则蚤扎燥灶贼葬造 贼则葬灶泽枣藻则 燥枣 责葬则贼澡藻灶燥早藻灶藻泽蚤泽鄄蚤灶凿怎鄄
糟蚤灶早 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 蚤灶 栽则蚤糟澡燥早则葬皂皂葬 憎葬泽责泽咱允暂 援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 砸燥赠鄄
葬造 杂燥糟蚤藻贼赠 燥枣 蕴燥灶凿燥灶院 杂藻则蚤藻泽 月袁 圆园园源袁 圆苑员渊员缘猿愿冤院 缘园怨 原 缘员缘
咱源暂 阅怎则燥灶 韵袁 宰蚤造噪藻泽 栽 耘袁 匀怎则泽贼 郧 阅 阅援 陨灶贼藻则泽责藻糟蚤枣蚤糟 贼则葬灶泽皂蚤泽泽蚤燥灶 燥枣 葬
皂葬造藻鄄噪蚤造造蚤灶早 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 燥灶 葬灶 藻糟燥造燥早蚤糟葬造 贼蚤皂藻泽糟葬造藻咱 允暂 援 耘糟燥造燥早赠 蕴藻贼鄄
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糟蚤藻贼赠 燥枣 蕴燥灶凿燥灶袁 杂藻则蚤藻泽 月袁 月蚤燥造燥早蚤糟葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 圆园园员袁 圆远愿渊员源苑圆冤院
员员圆猿 原 员员圆远
咱远暂 国摇 伟袁 沈佐锐援 棉蚜体内感染沃尔巴克氏体渊宰燥造遭葬糟澡蚤葬冤的分
子检测咱允暂 援 微生物学杂志袁 圆园园源袁 圆源渊圆冤院 员 原 猿
咱苑暂 王摇 欢袁李摇 凯袁 刘摇 怀袁 等援 两种金小蜂体内宰燥造遭葬糟澡蚤葬的 憎泽责
基因分子检测及序列分析咱 允暂 援 植物保护学报袁 圆园园远袁 猿猿渊怨冤院
圆猿缘 原 圆源园
咱愿暂 栽葬早葬皂蚤 再袁 酝蚤怎则葬 运援 阅蚤泽贼则蚤遭怎贼蚤燥灶 葬灶凿 责则藻增葬造藻灶糟藻 燥枣 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 蚤灶
允葬责葬灶藻泽藻 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 燥枣 蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬咱 允暂 援 陨灶泽藻糟贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁
圆园园源袁 员猿渊源冤院 猿缘怨 原 猿远源
咱怨暂 悦燥增葬糟蚤灶 悦袁 月葬则噪藻则 杂 悦援 杂怎责藻则早则燥怎责 云 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 遭葬糟贼藻则蚤葬 责葬则葬泽蚤贼蚤泽藻
造蚤糟藻 渊 陨灶泽藻糟贼葬院 孕澡贼澡蚤则葬责贼藻则葬冤 咱 允暂 援 孕葬则葬泽蚤贼燥造燥早赠 砸藻泽藻葬则糟澡袁 圆园园苑袁
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咱员园暂 运燥灶凿燥 晕袁 陨躁蚤糟澡蚤 晕袁 杂澡蚤皂葬凿葬 酝袁 藻贼 葬造援 孕则藻增葬蚤造蚤灶早 贼则蚤责造藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶
憎蚤贼澡 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 蚤灶 悦葬造造燥泽燥遭则怎糟澡怎泽 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽 渊 悦燥造藻燥责贼藻则葬院 月则怎糟澡蚤鄄
凿葬藻冤 咱允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 耘糟燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 员员渊圆冤院 员远苑 原 员愿园
咱员员暂 在澡燥怎 宰 郧袁 砸燥怎泽泽藻贼 云袁 韵蒺晕藻蚤造造 杂 蕴援 孕澡赠造燥早藻灶赠 葬灶凿 孕悦砸鄄遭葬泽藻凿
糟造葬泽泽蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 泽贼则葬蚤灶泽 怎泽蚤灶早 憎泽责 早藻灶藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽咱 允暂 援
孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 砸燥赠葬造 杂燥糟蚤藻贼赠 燥枣 蕴燥灶凿燥灶袁 杂藻则蚤藻泽 月袁 员怨怨愿袁 圆远缘
渊员猿怨缘冤院 缘园怨 原 缘员缘
咱员圆暂 郭晓鹏袁 李正西援 我国烟粉虱自然种群中存在广泛的 宰燥造遭葬鄄
糟澡蚤葬感染现象咱允暂 援 微生物学报袁 圆园园愿袁 源愿渊员冤院 远猿 原 远苑
咱员猿暂 林煌真袁 李正西援 福建省烟粉虱自然种群 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 感染特点
咱允暂 援 昆虫学报袁 圆园园愿袁 缘员渊员冤院 员源 原 员怨
咱员源暂 宋摇 月袁 王 摇 哲袁 刘宏岳袁 等援 北京地区亚洲玉米螟种群中
宰燥造遭葬糟澡蚤葬超感染咱允暂 援 昆虫学报袁 圆园园愿袁 缘员渊远冤院 远远缘 原 远苑园
咱员缘暂 江幸福袁 王 摇 蕾袁 张 摇 蕾袁 等援 蔬菜蚜虫感染沃尔巴克氏体
渊宰燥造遭葬糟澡蚤葬冤的分子检测咱允暂 援 植物保护袁 圆园园怨袁 猿缘渊源冤院 远猿 原 远缘
咱员远暂 悦燥责藻造葬灶凿 悦 杂袁 酝葬贼贼澡藻憎泽 砸 宰袁 郧燥灶扎佗造藻扎 允 酝袁 藻贼 葬造援 宰燥造遭葬糟澡蚤葬 蚤灶
贼憎燥 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 燥枣 酝藻造蚤贼贼燥遭蚤葬 凿蚤早蚤贼葬贼葬 阅葬澡皂泽 渊匀赠皂藻灶燥责贼藻则葬院 耘怎造燥鄄
责澡蚤凿葬藻冤 咱允暂 援 晕藻燥贼则燥责蚤糟葬造 耘灶贼燥皂燥造燥早赠袁 圆园园愿袁 猿苑渊远冤院 远猿猿 原 远源园
咱员苑暂 焦摇 懿袁 赵摇 苹援 白蜡虫啮小蜂对白蜡虫花翅跳小蜂种群控制
作用的研究咱允暂 援 动物学研究袁 圆园园园袁 圆员渊源冤院 圆怨员 原 圆怨远
咱员愿暂 田英芳袁 黄摇 刚袁 郑哲民袁 等援 一种简易的昆虫基因组 阅晕粤提
取方法咱允暂 援 陕西师范大学学报院自然科学版袁 员怨怨怨袁 圆苑渊源冤院
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