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Somatic Embryogenesis and Plantlet Regeneration from Leaves of Euphorbia cotinifolia

紫锦木叶片体细胞胚发生和植株再生


Somatic embryogenesis and regeneration plantlets were successfully induced from leaves of Euphorbia cotinifolia by tissue culture. The highest callus induction rate was 57.2% on MS medium with 6-BA 1.0 mg·L-1,NAA 0.5 mg·L-1and 2,4-D 0.01 mg·L-1. Embryonic callus could be induced on MS medium with ZT 1.0 mg·L-1, 2,4-D 0.5 mg·L-1and NAA 0.05 mg·L-1after 3 times of subculture of callus, and the induction rate was 56.4%. Somatic embryogenesis was induced on MS medium with ZT 1.0 mg·L-1and NAA 0.1 mg·L-1,and the induction rate could be up to 35.4%.The regeneration plantlets and somatic embryogenesis were rooted on MS medium without hormones. The plantlets with root were successfully transplanted to the medium with vermiculite and ruby mica and sands by 3 to 2 to 1 in volume, and the survival rate could be up to 83.3%.


全 文 :第 wv卷 第 ts期
u s s z年 ts 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯1wv o‘²1ts
’¦·qou s s z
紫锦木叶片体细胞胚发生和植株再生 3
韩 珊 石大兴 王米力 麦苗苗
k四川农业大学林学园艺学院 雅安 yuxstwl
关键词 } 紫锦木 ~叶片 ~组织培养 ~体细胞胚
中图分类号 }≥zt{1wy ~ ±|wv1t 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kusszlts p stvw p sw
收稿日期 }ussy p s| p uu ∀
基金项目 }四川省重点学科建设项目k≥⁄swt|l ∀
3 石大兴为通讯作者 ∀
Σοµατιχ Ε µ βρψογενεσισ ανδ Πλαντλετ Ρεγενερατιον φροµ Λεαϖεσ οφ Ευπηορβια χοτινιφολια
‹¤± ≥«¤± ≥«¬⁄¤¬¬±ª • ¤±ª ¬¯¬ ¤¬¬¤²°¬¤²
kΧολλεγε οφ Φορεστρψανδ Ηορτιχυλτυρε o Σιχηυαν Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ Ψα. αν yuxstwl
Αβστραχτ} ≥²°¤·¬¦ °¨¥µ¼²ª¨ ±¨ ¶¬¶¤±§µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²± ³¯¤±·¯¨·¶º¨ µ¨ ¶∏¦¦¨¶¶©∏¯¯ ¼¬±§∏¦¨§©µ²° ¯¨ ¤√¨ ¶²© Ευπηορβια χοτινιφολια ¥¼
·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨ q׫¨ «¬ª«¨¶·¦¤¯ ∏¯¶¬±§∏¦·¬²±µ¤·¨ º¤¶xz1u h ²± ≥ °¨ §¬∏° º¬·«y2…„ t1s °ª#pt o‘„„ s1x °ª#pt ¤±§
u ow2⁄s1st °ª#pt q∞°¥µ¼²±¬¦¦¤¯ ∏¯¶¦²∏¯§¥¨ ¬±§∏¦¨§²± ≥ °¨ §¬∏° º¬·«× t1s °ª#pt ou ow2⁄s1x °ª#pt ¤±§‘„„
s1sx °ª#pt ¤©·¨µv·¬°¨ ¶²©¶∏¥¦∏¯·∏µ¨ ²©¦¤¯ ∏¯¶o¤±§·«¨ ¬±§∏¦·¬²±µ¤·¨ º¤¶xy1w h q≥²°¤·¬¦ °¨¥µ¼²ª¨ ±¨ ¶¬¶º¤¶¬±§∏¦¨§²±
≥ °¨ §¬∏° º¬·« × t1s °ª#pt ¤±§ ‘„„ s1t °ª#pt o¤±§·«¨ ¬±§∏¦·¬²± µ¤·¨ ¦²∏¯§ ¥¨ ∏³·² vx1w h q׫¨ µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²±
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·µ¤±¶³¯¤±·¨§·²·«¨ °¨ §¬∏° º¬·«√¨ µ°¬¦∏¯¬·¨¤±§µ∏¥¼ °¬¦¤¤±§¶¤±§¶¥¼v·²u·²t¬± √²¯∏°¨ o¤±§·«¨ ¶∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨¦²∏¯§¥¨ ∏³
·²{v1v h q
Κεψ ωορδσ} Ευπηορβια χοτινιφολια~¯¨ ¤©~·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨ ~¶²°¤·¬¦ °¨¥µ¼²ª¨ ±¨ ¶¬¶
紫锦木k Ευπηορβια χοτινιφολιαl为大戟科k∞∏³«²µ¥¬¤¦¨¤¨ l大戟属常绿灌木或小乔木k中国植物志编委会 o
t||{l o又名红叶乌桕 !非洲红 o具有很高的观赏价值k图版 ´ p tl o适合各种庭园绿化利用 o紫锦木叶片提取
的红色素可用于饮料 !食品 !化妆品等产品中k黄卓烈等 oussul ∀目前 o对紫锦木组织培养的报道还很少 ∀紫
锦木虽可用扦插或嫁接繁殖 o但繁殖系数低 o用组织培养方法可在短期内得到大量试管苗k韩珊等 oussyl ∀
现在 o对体胚的研究较多kŒ®µ¤°2∏¯2‹¤´ oussx ~¬± ετ αλqousss ~ •¤°¤µ²¶¤±§µ¤·¤±¤ ετ αλqousst ~杜丽等 oussyl ∀
而本试验的目的在于研究紫锦木叶片离体培养诱导胚状体发生 !植株再生的适宜条件 o通过对紫锦木组织培
养的初步研究 o以期建立基于胚状体再生植株的技术体系 o为利用组织培养进行繁殖提供科学依据 ∀
1 材料与方法
t1t 材料 试材为四川农业大学植物苑内盆栽健壮紫锦木植株的幼嫩叶片 ∀
t1u 方法 用 t h的洗衣粉水浸泡 ts °¬±后用毛笔刷清洗外植体表面 o再用流水冲洗 u «∀在无菌条件下 o
用 zs h酒精消毒 vs ¶o再用 s1t h升汞处理 { °¬±o无菌水冲洗 x ∗ y次后 o用无菌滤纸吸去表面水分 o切割成
t1s ¦°u大小的方块接种于诱导愈伤组织的培养基上 o黑暗培养 t周后转至光培养 ot个月后 o转至胚性愈伤
组织诱导培养基上 ∀培养基均附加蔗糖 vs ª#pt !琼脂 z ª#pt o³‹x1{ ∀所有材料均在光照培养室内培养 o
光照时间 tu «#§pt o光照强度 u sss ¬¯o温度kux ? tl ε ∀
愈伤组织和胚性愈伤组织的观察参见范国强等kusswl ∀愈伤组织诱导率 € k诱导出愈伤组织外植体的
数量Π放置外植体的数量l ≅ tss h ~胚性愈伤组织诱导率 € k诱导出胚性愈伤组织外植体的数量Π放置外植体
的数量l ≅ tss h ∀将诱导的愈伤组织分别放在诱导体细胞胚发生的培养基上 ovs §后观察 ∀培养产物定期
进行解剖学观察 o记录胚状体的形态发生过程 o对不同发育阶段的胚状体用解剖镜显微照相 ∀组织切片取
胚状体发生高峰期的材料 o用 ƒ„„固定液固定 o爱氏苏木精整体染色 o常规石蜡切片kts Λ°l o在 ²·¬¦数码
显微镜下观察体细胞胚发生情况并照相 o研究胚状体发生的形态和组织 ∀
2 结果与分析
u1t 不同激素配比对愈伤组织发生的影响 将剪切好的带柄叶片接入愈伤组织诱导培养基中 o经 z §暗培
养 o再经 t周光照后 o可明显看到叶片表面皱缩 o继续观察发现 o皱缩部分分裂成更小的红色颗粒状愈伤组织
k图版 ´ p u ovl ∀试验采用三因素三水平完全试验设计 |kvwl o每处理重复 v次 ∀
表 1 叶片愈伤组织诱导结果及多重比较 ≠
Ταβ .1 Χαλλυσινδυχτιον φροµ λεαϖεσ ανδ µ υλτιπλε χοµ παρισονσ
处 理
×µ¨¤·° ±¨·
激素浓度 ‹²µ°²±¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±Πk°ª#ptl
y2…„ ‘„„ u ow2⁄
外植体数k个l
‘∏°¥¨µ²© ¬¨³¯¤±·¶
愈伤组织块数
≤¤¯ ∏¯¶
愈伤组织诱导率
≤¤¯ ∏¯¶¬±§∏¦·¬²±µ¤·¨Πh
t s1x s1t s1ss ys t{ vs1z ≤¨
u s1x s1x s1st ys us vv1w ≤§¨
v s1x t1s s1sx ys uw v|1| …≤¦§
w t1s s1t s1st ys vs w|1y „…¤¥
x t1s s1x s1sx ys vw xz1u „¤
y t1s t1s s1ss ys u| w{1v „…¥¦
z u1s s1t s1sx ys t| vt1v ≤§¨
{ u1s s1x s1ss ys us vv1w ≤§¨
| u1s t1s s1st ys uw v|1| …≤¦§
≠多重比较采用最小显著极差法k≥• l o检验用新复极差法k≥≥• l ∀不同小写 !大写字母分别表示在 s1sx !s1st水平上差异显著 ∀下同 ∀
¨¤¶·¶¬ª±¬©¬¦¤±·µ¤±ª¨ ·¨¶·k≥• l ¬¶∏¶¨§¬± °∏¯·¬³¯¨¦²°³¤µ¬¶²±o¤±§·«¨ ¶«²µ·¨¶·¶¬ª±¬©¬¦¤±·µ¤±ª¨¶k≥≥• l ¬¶∏¶¨§¬± ·¨¶·¬±ªq⁄¬©©¨µ¨±·¶°¤¯¯ ¤±§¦¤³¬·¤¯ ¯¨ ·¨µ¶
¬±§¬¦¤·¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¬©©¨µ¨±¦¨ ¤·s1sx ¤±§s1st ¯¨ √¨¯ oµ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ q׫¨ ¶¤°¨¥¨ ²¯º q
从表 t各处理之间多重比较的结果看 ox !w !y号处理与其他处理间差异极显著 o但 x号与 v号差异极显
著 o而 w号与 v号差异却不显著 ~x号启动率最高 o达 xz1u h ow号次之 o为 w|1y h ~t号处理虽然与 u !{ !z号
处理差异不显著 o但其平均值最低 o只有 vs1z h o故 t号处理最差 ∀
方差分析结果表明 }y2…„ !‘„„和 u ow2⁄对愈伤组织诱导率影响达极显著 ∀比较各因素的 Φ值大小可
知 oy2…„为影响愈伤组织发生的主导因子 ∀采用 ≥⁄法进一步对 y2…„ !‘„„和 u ow2⁄的各浓度水平进行多
重比较 ∀y2…„为 t1s °ª#pt时结果极显著高于另外 u个浓度 o即 y2…„浓度为 t1s °ª#pt对紫锦木叶片愈
伤组织诱导效果最好 ∀ ‘„„ v浓度水平间差异极显著 o浓度 s1x °ª#pt与 t1s °ª#pt间差异不显著 o因此根
据平均值大小 o‘„„浓度为 s1x °ª#pt效果最佳 ∀u ow2⁄ v浓度水平间差异极显著 ~浓度为 s1sx °ª#pt !
s1st °ª#pt的结果在 Α€ s1sx差异显著 o根据平均值的大小选择 u ow2⁄浓度为 s1st °ª#pt o紫锦木愈伤组
织诱导效果最好培养基为 } ≥ n y2…„ t1s °ª#pt n ‘„„ s1x °ª#pt n u ow2⁄s1st °ª#pt ∀
u1u 不同植物激素配比对胚性愈伤组织诱导的影响 将获得的愈伤组织转移至诱导胚性愈伤组织的培养
基上连续继代 v次后 o可观察到有紫红色 !生长紧密 !表面有发亮的球状突起的愈伤组织形成 ∀试验采用三
因素三水平完全试验设计 |kvwl o每处理重复 v次 ∀
表 2 不同植物激素配比对胚性愈伤组织诱导的影响及多重比较
Ταβ .2 Εφφεχτσ οφ διφφερεντ ηορµ ονε προπορτιον ον εµ βρψογενιχ
χαλλυσ ανδ µ υλτιπλε χοµ παρισονσ
处理
×µ¨¤·°¨ ±·
激素浓度 ‹²µ°²±¨
¦²±¦¨±·µ¤·¬²±Πk°ª#ptl
× u ow2⁄ ‘„„
接种外植体数
‘∏°¥¨µ²© ¬¨³¯¤±·¶
¬±²¦∏¯¤·¨§
胚性愈伤组织
‘∏°¥¨µ²©
°¨¥µ¼²ª¨ ±¬¦¦¤¯ ∏¯¶
胚性愈伤组织诱导率
Œ±§∏¦·¬²±µ¤·¨ ²©
°¨¥µ¼²ª¨ ±¬¦¦¤¯ ∏¯¶Πh
t s1x s1t s wx | us1u ∞§
u s1x s1x s1st wx tv u{1u ≤¦
v s1x t1s s1sx wx ts uu1v ⁄∞§
w t1s s1t s1st wx ut wy1w …¥
x t1s s1x s1sx wx ux xy1w „¤
y t1s t1s s wx us wx1w …¥
z u1s s1t s1sx wx ts uu1v ⁄∞§
{ u1s t1s s wx tu uy1{ ≤⁄¦
| u1s s1x s1st wx y tv1| Ĭ
从表 u各处理之
间多重比较的结果
看 ox号处理极显著
地高于其他处理 o诱
导率达 xy1w h ~y号
与 w号处理差异不显
著 o但 w号的诱导率
平均值高于 y 号 o故
w号为次选 ~ | 号处
理诱导率极显著地低
于其他处理 o仅为
tv1| h o为最差处理 ∀
方差分析结果表明 }× !u ow2⁄和 ‘„„各浓度水平间胚性愈伤组织诱导率差异达极显著 o故采用 ≥⁄法
进一步对 v个因素的各水平进行多重比较 ∀ × v水平间 ot1s °ª#pt的平均值极显著地高于 u1s °ª#pt和
xvt 第 ts期 韩 珊等 }紫锦木叶片体细胞胚发生和植株再生
s1x °ª#pt的 o故选择 t1s °ª#pt× ∀u ow2⁄v水平间 os1x °ª#pt的平均值极显著地高于 t1s °ª#pt和 s1t
°ª#pt的 o因此选择 s1x °ª#ptu ow2⁄∀ ‘„„ v水平间 o‘„„浓度为 s1sx °ª#pt的平均值极显著地高于 s1st
°ª#pt‘„„和不加 ‘„„ 的 o故选择 s1sx °ª#pt ‘„„ ∀胚性愈伤组织诱导的最佳培养基 } ≥ n × t1s
°ª#pt n u ow2⁄s1x °ª#pt n ‘„„ s1sx °ª#pt ∀
表 3 不同植物激素配比对体细胞胚胎发生的影响及多重比较
Ταβ .3 Εφφεχτ οφ διφφερεντ ηορµ ονε προπορτιον ον σοµατιχ εµ βρψογενεσισ
ανδ µ υλτιπλε χοµ παρισονσ
处 理
×µ¨¤·° ±¨·
激素浓度 ‹²µ°²±¨
¦²±¦¨±·µ¤·¬²±Πk°ª#ptl
× ‘„„
接种愈伤组织数
‘∏°¥¨µ²©¦¤¯ ∏¯¶
¬±²¦∏¯¤·¨§
形成体胚的愈伤组织
‘∏°¥¨µ²©¶²°¤·¬¦
°¨¥µ¼²¦¤¯ ∏¯¶
再生率
• ª¨¨ ±¨ µ¤·¬²±
µ¤·¨Πh
t s1x s ws t u1x ڤ
u s1x s1sx wx u w1y ⁄¦§
v s1x s1t wu v x1| ≤⁄¦§
w t1s s wx | us1u …¥
x t1s s1sx w{ tz vx1w „¤
y t1s s1t w| tx vs1y „¤
z u1s s xs x ts …≤⁄¥¦§
{ u1s s1sx wy { tz1w …≤¥
| u1s s1t ww y tv1y …≤⁄¥¦
u1v 不同激素配比对
体细胞胚胎发生的影响
将所获得胚性愈伤组织
转接在含 × !u ow2⁄!
‘„„ 的 ≥ 培养基上 o
tx §后 o陆续形成紫红
色 !表面发亮的原胚细
胞和球形胚k图版 ´ p
wl o颗粒状的突起较容
易从愈伤组织表面脱
落 ∀继续培养 o进而发
生再生植株和不定芽
k图版 ´ p xl ∀切片后在显微镜下观察 o可看到其球形期 !心形期及成熟期各阶段发育情况k图版 ´ p z o{ o
|l ∀试验采用二因素三水平完全试验设计 o每处理重复 v次 ∀
从表 v各处理之间多重比较的结果看 ox号和 y号处理差异不显著 o但极显著地高于其他处理 o平均诱
导率为 vx1w h oy号稍差一些 o诱导率为 vs1y h ~t号处理与 u !v !z !|号处理差异不显著 ~x号诱导率最低 o
仅为 u1x h o故为最差处理 ∀
方差分析结果表明 }×和 ‘„„各浓度水平间体胚再生频率差异达极显著 o采用≥⁄法进一步对两因素
的各水平进行多重比较 ∀ × v水平间差异极显著 o选择 × t1s °ª#pt效果最好 ∀加 ‘„„与不加 ‘„„差异
极显著 ~浓度为 s1sx °ª#pt !s1t °ª#pt的 ‘„„在 Α€ s1sx水平上差异不显著 o但浓度为 s1t °ª#pt的平均
值显著高于 s1sx °ª#pt o故 ‘„„为 s1t °ª#pt时紫锦木体细胞胚胎发生最多 ∀诱导体细胞胚胎发生的最
佳培养基为 } ≥ n × t1s °ª#pt n ‘„„ s1t °ª#pt ∀
表 4 不同栽培基质对试管苗移栽成活率的影响及多重比较
Ταβ .4 Εφφεχτσ οφ διφφερεντ πλαντινγ µεδια ον πλαντλετ συρϖιϖαλ ρατεσ ανδ µ υλτιπλε χοµ παρισονσ
处理号
×µ¨¤·°¨ ±·¶
kςΒςl
移栽株数
‘∏°¥¨µ²©³¯¤±·¯¨·¶
·µ¤±¶³¯¤±·¨§
成活株数
‘∏°¥¨µ²©
¬¯√¬±ª³¯¤±·¯¨·¶
成活率
≥∏µ√¬√¤¯
µ¤·¨Πh
tk珍珠岩Β河砂 € tΒt
∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨Β¶¤±§€ tΒtl vs tv wv1v ⁄§
uk珍珠岩Β蛭石 € tΒt
∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨Βµ∏¥¼ °¬¦¤€ tΒtl vs tz xy1z ≤¦
vk珍珠岩Β蛭石Β河砂 € tΒtΒt
∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨Βµ∏¥¼ °¬¦¤Β¶¤±§€ tΒtΒtl vs ut zs1s …¥
wk珍珠岩Β蛭石Β河砂 € vΒuΒt
∂ µ¨°¬¦∏¯¬·¨Βµ∏¥¼ °¬¦¤Β¶¤±§€ vΒuΒtl vs ux {v1v „¤
u1w 体细胞胚的植株再生和移栽 将诱导出体胚的胚性愈伤组织转接到 ≥ n × t1s °ª#pt n ‘„„ s1t
°ª#pt的再生培养基上 o有的体胚直接发育为具有根茎分化的完整植株 o有的只有芽的分化 o将不定芽剪下
转入不含任何激素的 ≥培养基中 ots §后可看到剪下的不定芽上有白色根长出 o发育成完整植株k图版 ´
p yl ∀
当根数达到 u ∗ w条 !根长 v ∗ w ¦°时 o可以移栽驯化 ∀先将封口薄膜揭开 o在培养室内放置 u ∗ v §o然
后用镊子取出植株 o洗掉根部附着的培养基 o栽于备用基质上 o炼苗基质包括珍珠岩 !蛭石和河砂 ∀炼苗
前 o使用 s1t h的高锰酸钾对基质进行消毒处理 ∀苗栽后浇透水 o初期加盖遮阳网 o保温保湿 o管理期间 o土
壤切忌太湿和注意保持
空气湿度 ∀us §后小植
株成活 o成活率可达
{v1v h 以上k图版 ´ p
tsl ∀
表 w 结果表明 o紫
锦木炼苗的 w个处理结
果差异极显著 ∀处理 w
的结果极显著地高于其
他处理 o即在珍珠岩Β蛭
石Β河砂体积比为 vΒuΒt
中的移栽成活率最高 o
yvt 林 业 科 学 wv卷
为 {v1v h ~处理 t o即珍珠岩Β河砂ktΒtl中的成活率最低 o为 wv1v h o移栽基质中加入蛭石后成活率增高 ∀分
析其原因可能是 }根系的生长需要较湿润的基质 o蛭石的保湿性 !保温性均较好 o珍珠岩吸水能力强 o纯砂的
透水性好 o但保湿性差 ∀珍珠岩与河砂混合保水 !保温性差 o珍珠岩与蛭石混合透气透水性差 o故珍珠岩 !蛭
石 !河砂的合理配比可以部分克服以上的缺点 ∀
3 讨论
将愈伤组织转至诱导胚性愈伤组织培养基后发现 o一旦有胚状体形成 o将带有胚状体的愈伤组织转至合
适的培养基中进一步发育是一个关键的步骤 o长时间的植物激素的刺激反而不利于胚的进一步发育 o导致胚
状体脱分化 o愈伤组织继续增殖 !扩大或形成次级胚 o或由于早熟萌发中的体胚跳过正常体胚发育的某些阶
段 o而形成畸形苗k• ¤¨ °¤®¨µ¶ ετ αλqot||xl ∀探索出合适的转移和分化时期是非常重要的工作环节 o试验中
发现 o当部分愈伤组织形成体细胞胚后 o有些体胚能正常发育成成熟的体胚 o直至植株再生 o有些愈伤组织外
形上开始转变为非胚性愈伤组织 o同时有些未成熟的胚状体逐渐死掉 o故在胚性愈伤组织形成后 o需要适时
降低 u ow2⁄含量或去除 u ow2⁄∀有大量试验验证了 u ow2⁄在胚性愈伤组织诱导中起着重要作用 o金惠等
kussvl试验结果表明 ou ow2⁄是通过改变细胞内源 Œ„„代谢而起作用 ∀另外在本试验中 o非胚性愈伤组织经
过 u次转接 o少量非胚性愈伤组织才逐渐发育成胚性愈伤组织而进入分化期 ∀由此说明 o愈伤组织由分裂期
到分化期是一个非常复杂的过程 o受多方面因素的影响 ∀
本试验通过紫锦木叶片进行愈伤组织的诱导 o再从愈伤组织成功诱导得到了胚性愈伤组织和胚状体 ∀
胚性愈伤组织经过体胚诱导 !体胚成熟 !体胚萌发等步骤的处理 o成功地诱导获得了体细胞胚的再生植株 o且
移栽成活 ∀但体细胞胚形成的数量较少 o在这方面仍需进一步研究 ∀
参 考 文 献
杜 丽 o叶要妹 o包满珠 qussy1 香樟未成熟合子胚体胚发生及植株再生研究 q林业科学 owukyl }vz p ws
范国强 o黎 明 o贺窑青 qussw1 悬铃木体细胞胚胎发生及植株再生 q林业科学 owskvl }zt p zx
韩 珊 o石大兴 o王米力 qussy1 红叶乌桕的离体培养和植株再生 q植物生理学通讯 owuktl }zx
黄卓烈 o詹福建 o巫光宏 qussu1 肖黄栌红色素的理化性质研究 q中国野生植物资源 outkul }ww p wz
金 惠 o施季森 o诸葛强 o等 qussv1 植物体细胞胚胎发生机理研究进展 q南京林业大学学报 }自然科学版 ouzktl }zx p {s
中国植物志编委会 qt||{1 中国植物志 q北京 }科学出版社 oxz
Œ®µ¤°2∏¯2‹¤´ qussx1≤¤¯ ∏¯¶³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§¶²°¤·¬¦ °¨¥µ¼²ª¨ ±¨ ¶¬¶¬± ¦²·²± k Γοσσψπιυµ ηιρσυτυµ ql q„©µ¬¦¤± ²∏µ±¤¯ ²© …¬²·¨¦«±²¯²ª¼ ow }usy p us|
¬± ‹ ≥ o ∂¤±§¨µ× ≤ o • ¤¨ °¤µ®¨µ¶Ž  o ετ αλqusss1 ⁄¨ √¨ ²¯³°¨ ±·²© ¤ ³¯¤±·µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²± ¶¼¶·¨° ¥¤¶¨§ ²± ©µ¬¤¥¯¨ °¨¥µ¼²ª¨ ±¬¦¦¤¯ ∏¯¶¬± ·«¨ ²µ±¤° ±¨·¤¯
Αλστροεµερια q°¯¤±·≤¨¯¯ • ³¨²µ·¶ot| }u| p xvw
• ¤¨ °¤®¨µ¶≤   o¤¦²¥¶¨± ∞o ∂¬¶¶¨µ• Š ƒ qt||x1≥ ¦¨²±§¤µ¼ ¶²°¤·¬¦ °¨¥µ¼²ª¨ ±¨ ¶¬¶¤±§¤³³¯¬¦¤·¬²±¶¬± ³¯¤±·¥µ¨ §¨¬±ªq∞∏³«¼·¬¦¤o{t }|v p tsz
•¤°¤µ²¶¤±§µ¤·¤±¤„ o ‹¤µ√¨ ±ª·o …²∏√¨ ·„ o ετ αλq usst1 ∞©©¨¦·¶²© ¦¤µ¥²«¼§µ¤·¨ ¶²∏µ¦¨ o ³²¯¼¨ ·«¯ ±¨¨ ª¯¼¦²¯ ¤±§ ª¨¯¯¤± ª∏° ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²± °¨¥µ¼²±¤¯
¶∏¶³¨ ±¶²µ°¤¶¶k∞≥l ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§ °¤·∏µ¤·¬²± ²© °¤µ¬·¬°¨³¬±¨ ¶²°¤·¬¦ °¨¥µ¼²¶qŒ± ∂¬·µ² ≤¨¯¯ ⁄¨ √ …¬²¯ °¯ ¤±·ovz }u| p vw
k责任编辑 徐 红l
zvt 第 ts期 韩 珊等 }紫锦木叶片体细胞胚发生和植株再生