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Insecticidal Activity of Juglans regia Extracts against Tetranychus cinnabarinus

核桃青皮提取物对朱砂叶螨的毒力及相关酶活性的测定


研究核桃青皮不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力作用与相关酶活性的影响,结果表明:核桃青皮石油醚提取物的杀螨活性较高,浓度为1 mg·mL-1时,对朱砂叶螨雌成螨24 h后的死亡率可达到83.44%,明显高于氯仿、甲醇提取物(P<0.05)。通过对核桃青皮石油醚提取物进一步萃取、柱层析分离,发现萃取物中石油醚相的杀螨活性明显大于甲醇相,浓度为1 mg·mL-1时,对朱砂叶螨雌成螨24 h后的死亡率可达到84.39%(P<0.05)。对石油醚萃取物的柱层析分离最终得到19个流分,其中以第6、7、13、17流分杀螨效果较好,死亡率均达到60%以上,且经高压液相检测得第6流分纯度可达90%以上,对其毒力作用进行浓度梯度检测,发现浓度为10 mg·mL-1时,提取率与死亡率分别为6.34%,98.45%。采用比色法测定第6流分对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶(AchE)与Na+ ,K+ATPase活性的影响,表明浓度为10 mg·mL-1,AchE与Na+,K+ATPase的活性低于对照,8 h后分别为对照的0.47 与0.62倍。

The toxicity and relative enzymes activity were studied based on the resistance of three different extracts of walnut green husk against Tetranychus cinnabarinus in the laboratory. The mortality from petroleum ether extract of walnut green husk was 83.44% at 24 h after treatment,which showed that the acaricidal activity of the petroleum ether extract was significantly higher than the chloroform and methanol ones in the concentration of 1 mg·mL (P<0.05). After parted and purified by extracting and chromatography,the acaricidal activity of petroleum ether part of the petroleum ether extract was significantly greater (P<0.05) than the methanol one’s in the concentration of 1 mg·mL and its mortality to female adults of T. cinnabarinus has reached 84.39% at 24 h after treatment. Then,the petroleum ether part was purified by chromatography,there were 19 parts gained in which the toxicity of 4 parts (6th,7th,13th,17th parts) were stronger than the others,their mortalities have been all above 60%. The 6th part’s purity has been above 90% by HPLC. After detailed gradient detection,the extraction rate and the mortality were 6.34% and 98.45%,respectively,in the concentration of 10 mg·mL-1. The activity of AchE and Na+,K+ ATPase in T. cinnabarinuswere assayed by colorimetric method after application of the 6th part’s purity. In the concentration of 10 mg·mL-1,the two enzymes’ activities lower than CK,the activities of AchE and Na+,K+ATPase were 0.47 and 0.62 times as control at 8 h after treatment.


全 文 :第 ww卷 第 x期
u s s {年 x 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯1ww o‘²1x
¤¼ou s s {
核桃青皮提取物对朱砂叶螨的毒力及
相关酶活性的测定 3
王海香t 申照静u 杜 娟u 王有年u 师光禄u
kt q山西农业大学农学院 太谷 svs{st ~ u q北京农学院农业应用新技术北京市重点实验室 北京 tsuusyl
摘 要 } 研究核桃青皮不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力作用与相关酶活性的影响 o结果表明 }核桃青皮石油醚
提取物的杀螨活性较高 o浓度为 t °ª#°pt时 o对朱砂叶螨雌成螨 uw «后的死亡率可达到 {v1ww h o明显高于氯仿 !
甲醇提取物k Π s1sxl ∀通过对核桃青皮石油醚提取物进一步萃取 !柱层析分离 o发现萃取物中石油醚相的杀螨活
性明显大于甲醇相 o浓度为 t °ª#°pt时 o对朱砂叶螨雌成螨 uw «后的死亡率可达到 {w1v| h k Π s1sxl ∀对石油醚
萃取物的柱层析分离最终得到 t|个流分 o其中以第 y !z !tv !tz流分杀螨效果较好 o死亡率均达到 ys h以上 o且经高
压液相检测得第 y流分纯度可达 |s h以上 o对其毒力作用进行浓度梯度检测 o发现浓度为 ts °ª#°pt时 o提取率与
死亡率分别为 y1vw h o|{1wx h ∀采用比色法测定第 y流分对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶k„¦«∞l与 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 活
性的影响 o表明浓度为 ts °ª#°pt o„¦«∞与 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 的活性低于对照 o{ «后分别为对照的 s1wz与 s1yu倍 ∀
关键词 } 朱砂叶螨 ~核桃青皮 ~乙酰胆碱酯酶 ~‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨
中图分类号 }≥zt{1z 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kuss{lsx p sszs p sx
收稿日期 }ussz p tt p t{ ∀
基金项目 }北京市自然科学基金重点项目kysztsstl !北京市科委区县专项资金项目kussyl !北京市教委平台建设项目kussyl !北京市都市
农业学科群项目k÷Žtsst|sxxvl !北京市属市管高校人才强教计划k°÷ ussz p stwusz p swwxvyl !北京市属市管高校人才引进计划k°÷ ussz p
stwusz p swwxv{l ∀
3 师光禄为通讯作者 ∀
Ινσεχτιχιδαλ Αχτιϖιτψ οφ ϑυγλανσρεγια Εξτραχτσ αγαινστ Τετρανψχηυσχινναβαρινυσ
• ¤±ª ‹¤¬¬¬¤±ªt ≥«¨ ± «¤²­¬±ªu ⁄∏∏¤±u • ¤±ª≠²∏±¬¤±u ≥«¬Š∏¤±ª¯∏u
kt1 Χολλεγε οφ Αγριχυλτυρε oΣηανξι Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ Ταιγυ svs{st ~ u1 ΚεψΛαβορατορψοφ Νεω Τεχηνολογψοφ Αγριχυλτυραλ
Αππλιχατιον οφ Βειϕινγ Βειϕινγ tsuusyl
Αβστραχτ} ׫¨ ·²¬¬¦¬·¼ ¤±§µ¨ ¤¯·¬√¨ ±¨½¼°¨ ¶¤¦·¬√¬·¼ º¨ µ¨ ¶·∏§¬¨§¥¤¶¨§²±·«¨ µ¨¶¬¶·¤±¦¨ ²©·«µ¨¨§¬©©¨µ¨±·¨ ¬·µ¤¦·¶²© º¤¯±∏·
ªµ¨ ±¨ «∏¶®¤ª¤¬±¶·Τετρανψχηυσχινναβαρινυ󬱷«¨ ¤¯¥²µ¤·²µ¼q׫¨ °²µ·¤¯¬·¼©µ²° ³¨·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ ¬¨·µ¤¦·²© º¤¯±∏·ªµ¨ ±¨ «∏¶®
º¤¶{v1ww h ¤·uw «¤©·¨µ·µ¨¤·°¨ ±·oº«¬¦«¶«²º¨ §·«¤··«¨ ¤¦¤µ¬¦¬§¤¯ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ³¨·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ ¬¨·µ¤¦·º¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼
«¬ª«¨µ·«¤± ·«¨ ¦«¯²µ²©²µ° ¤±§ °¨ ·«¤±²¯ ²±¨ ¶¬± ·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©t °ª# °k Π  s1sxl q „©·¨µ³¤µ·¨§¤±§³∏µ¬©¬¨§¥¼
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ªµ¨¤·¨µk Π  s1sxl ·«¤± ·«¨ °¨ ·«¤±²¯ ²±¨ . ¶¬± ·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© t °ª# °¤±§¬·¶ °²µ·¤¯¬·¼ ·² ©¨ °¤¯¨ ¤§∏¯·¶²© Τq
χινναβαρινυ󫤶µ¨¤¦«¨§{w1v| h ¤·uw «¤©·¨µ·µ¨¤·°¨ ±·q׫¨ ±o·«¨ ³¨·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ³¤µ·º¤¶³∏µ¬©¬¨§¥¼¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼o·«¨µ¨
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‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ ¬± Τq χινναβαρινυσ º¨ µ¨ ¤¶¶¤¼¨ §¥¼ ¦²¯²µ¬°¨ ·µ¬¦ °¨ ·«²§¤©·¨µ¤³³¯¬¦¤·¬²± ²©·«¨ y·«³¤µ·. ¶³∏µ¬·¼qŒ±·«¨
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¤±§s1yu·¬°¨ ¶¤¶¦²±·µ²¯ ¤·{ «¤©·¨µ·µ¨¤·°¨ ±·q
Κεψ ωορδσ} Τετρανψχηυσχινναβαρινυσ~ ϑυγλανσρεγια~¤¦¨·¼¯¦«²¯¬±¨ ¶·¨µ¤¶¨ ~‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨
植食性害螨个体小 !繁殖快 !种群密度高 !为害重 o是农业生产上的一个重要有害生物类群k师光禄等 o
t||w ~李连昌等 ot||ul ∀我国每年在柑橘 !梨 !苹果 !桃等林果上使用化学杀螨剂防治此类有害生物 o要花
费巨额费用k曹挥等 ousszl ∀然而频繁使用单一化学杀虫剂 o不但会造成害螨天敌的大量死亡 o而且会很
快发展成一个具有该杀螨剂抗性的种群k≥¤¦«¬®² ετ αλqot|||l ∀目前 o从植物体内提取有效杀虫抑菌活性
物质防治病虫害是国内外农药主要研究方向之一k张兴 oussvl ∀植物源农药对环境污染小 !害虫较难产生
抗药性 o且对有益生物较安全 o可能具有降低害螨迅速产生农药抗性的潜能k何衍彪等 oussw ~张兴 oussv ~
• ¤±ª ετ αλqousszl ∀很多学者纷纷应用现代科学技术 o研制和开发了许多高效的植物源杀虫剂 ∀
核桃kϑυγλανσρεγιαl在我国栽培历史悠久 o资源丰富 o具有显著的经济效益和药用价值 ∀有关核桃叶 !
青果皮等的提取物在抗虫抑菌方面的活性作用已有较多的报道k翟梅枝 oussv¤~ussv¥l ∀但对杀螨方面的
研究甚少 o尤其对其机理方面的研究尚未见报道 ∀朱砂叶螨k Τετρανψχηυσ χινναβαρινυσl是农林生产上的重要
有害生物 o危害的林果及农作物已达百余种之多k‹¤½¤± ετ αλqot|zw ~ ‹² ετ αλqot||zl ∀为了有针对性的控
制此类有害生物的危害 o减少环境污染 o笔者对核桃青皮提取物的杀螨活性成分及其机理进行了初步的研
究 o旨在为开发一种经济 !安全 !有效的植物源杀螨剂提供科学支撑 ∀
t 材料与方法
111 供试材料
核桃青皮采自北京市平谷区苏子峪 o将收集的核桃青皮洗净阴干 o磨碎后备用 ∀供试朱砂叶螨为敏感品
系 o采自北京科技大学碧桃树k Πρυνυσ περσιχαl o以大豆k Γλψχινε µαξl幼苗为螨的食料 o温度为kux ? tl ε o相对
湿度为 xs h ? x h o光照kΒ⁄l为 tyΒ{的条件下饲养后获得 ∀
112 核桃青皮活性成分的提取与分离
t1u1t 提取方法 准确称取一定量的植物干粉 o装入广口瓶内 o加入干粉 x倍量的有机溶剂k石油醚 !氯仿 !
甲醇l o室温下kux ? ul ε 分别浸提 v次 o每次 v ∗ x §o分别合并 v种提取液并减压浓缩至膏状后 o称重 ∀
t1u1u 萃取分离 采用液 p液分配法 ∀生物测定结果表明 }核桃青皮石油醚提取物生物活性较强 o因此 o对
其进一步分离纯化 ∀称取核桃青皮提取物 y ªo用 ts倍量石油醚溶解 o装入分液漏斗中 o用甲醇萃取 v次 o合
并萃取液并减压浓缩至稠膏状 o称重 ∀
t1u1v 柱层析分离 将规格为 x ¦° ≅ {s ¦°的层析柱 o洗净后烘干 o垂直固定在铁架台上备用 ∀称取需分离
萃取物 tss倍量的硅胶ktss ∗ uss目l o与适量的洗脱液混匀 o迅速注入层析柱中 o并用橡胶锤轻敲柱壁 o排除
溶液中的气泡 o同时 o打开层析柱底端的旋塞 o使溶液缓慢下移 o带动硅胶颗粒向下移动 o紧密沉集在柱底 ∀
取萃取物 x ª用少量初始洗脱液溶解 o待柱内溶液表面距硅胶表面 t ¦°左右时 o用吸管将待分离物质沿柱内
壁均匀注入 o待需分离物质移动到硅胶表面以下时 o覆盖一层石英砂 o然后用石油醚 !氯仿 !甲醇溶剂系统进
行洗脱淋柱 }洗脱液的流速为 v ∗ w滴#¶pt o每流分收集 ys °o共得流分 u||个 o经薄层层析k׏≤l后 o置于碘
蒸气中进行检测 o做好标记 ∀将相同成分者合并 o最终得到流分 t|个 o分别将其减压浓缩后 o进行生物活性
测定 o确定活性成分所在部位 ∀
113 触杀作用
采用玻片浸渍法kƒ„’ ot|{sl进行生物活性测定 ∀用双面胶条将健康活泼 !大小一致的 vs头雌成螨粘于
载玻片的一端 o于药液中浸 x ¶后取出 o并用滤纸吸掉虫体周围多余药液 o处理后置于室温kux ? tl ε 下 ouw «
后观察其死亡情况 o接触动者为活 o不动者为死 o按 „¥¥²·公式计算校正死亡率k„¥¥²µ·ot|{zl ∀
114 症状观察
叶碟浸渍法k朱丽梅等 oussul }将洗净的平展的大豆叶片于水培养台上 o每一叶片挑入成螨 vs头以上 o
待成螨稳定后 o夹取叶片浸入药液kts °ª#°ptl中 x ¶o以清水处理为对照 ∀叶片边缘用湿棉条围住 o以防螨
体逃逸 ∀每 y «观察 t次成螨的活动及反应状况 ouw «记录 w次 ∀
115 酶液制备
试虫采用触杀方法处理 o分别取处理后 w !{ !tu !ty !us !uw «的雌成螨 txs头 o加 s1ux °生理盐水在冰浴
中匀浆后 ots sss µ#°¬±pt ow ε 下离心 tx °¬±o取上清液备用 ∀
116 蛋白质含量测定
采用考马斯亮蓝 Š2uxs法k慕立义 ot||tl进行蛋白质含量的测定 ∀加酶液 s1t °于 x °考马斯亮蓝
Š2uxs试剂中混匀 oux ε 水浴中恒温加热 u °¬±o于 x|x ±°波长处比色测定 ’⁄值 o然后根据标准曲线得出蛋
白质含量 ∀
tz 第 x期 王海香等 }核桃青皮提取物对朱砂叶螨的毒力及相关酶活性的测定
117 酶活性测定
乙酰胆碱酯酶和 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 酶活性测定使用南京建成生物研究所的乙酰胆碱酯酶测试盒 o超微量
‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 测试盒进行测定 ∀

表 1 核桃青皮不同溶剂提取物的提取率及其对朱砂叶螨
的触杀作用 ≠
Ταβ .1 Εξτραχτ ρατε ανδ µ ορταλιτψ οφ διφφερεντ εξτραχτσφροµ ϑυγλανσ
ρεγια αγαινστ Τετρανψχηυσ χινναβαρινυσ
提取物 ∞¬·µ¤¦·¶kt °ª#°ptl 提取率 ∞¬·µ¤¦·¬²±µ¤·¨Πh 死亡率 ²µ·¤¯¬·¼Πh
石油醚提取物 °¨ ·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ ¬¨·µ¤¦· t1sx ? s1vs {v1ww ? v1xx¤
氯仿提取物 ≤«¯²µ²©²µ° ¬¨·µ¤¦· t1tv ? s1sx vu1ty ? y1z{¥
甲醇提取物  ·¨«¤±²¯ ¬¨·µ¤¦· v1zz ? s1v| vx1sz ? t1vz¥
≠表中数据为 v次试验重复结果k平均值 ? 标准误l o同一列的不同字母表示差异显著k Π
s1sxl下同 ∀ ∂¤¯∏¨¶¤µ¨ ° ¤¨± ? ≥∞ ²©·«µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²±¶o·«¨ ¤√¨ µ¤ª¨¶ º¬·«¬± ·«¨ ¶¤°¨ ¦²¯∏°± ±²·
©²¯ ²¯º §¨¥¼·«¨ ¶¤°¨ ¯¨ ·¨µ¤µ¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¬©©¨µ¨±·¤·x h ¯¨ √¨ ¯ ²©¦²±©¬§¨±¦¨ o·«¨ ¶¤°¨ ¥¨ ²¯º q
u 结果与分析
211 核桃青皮提取物对朱砂
叶螨的触杀作用
核桃青皮 v种溶剂提取物
的提取率分别为甲醇kv1zz ?
s1v|l h  氯仿kt1tv ? s1sxl
h  石油醚kt1sx ? s1vsl h ∀
将石油醚 !氯仿和甲醇提取物
分别配制成浓度为 t °ª#°pt
药液 o对害螨进行触杀试验 ouw «后 o毒力测定结果表明k表 tl o核桃青皮石油醚提取物的触杀活性明显大于
其余 u种有机溶剂的提取物kπ  s1sxl o对朱砂叶螨的触杀效果达到 {s1yt h ∀为此作者选择了核桃青皮石
油醚提取物作进一步的萃取与纯化 ∀

表 2 核桃青皮不同醚萃取物萃取率及其对朱砂
叶螨的触杀作用
Ταβ .2 Εξτραχτ ρατε ανδ µ ορταλιτψ οφ πετρολευµ ετηερ εξτραχτσφροµ
ϑ . ρεγια αγαινστ Τ . χινναβαρινυσ
萃取物 ∞¬·µ¤¦·¶kt °ª#°ptl 提取率 ∞¬·µ¤¦·¬²±µ¤·¨Πh 死亡率 ²µ·¤¯¬·¼Πh
石油醚萃取物 °¨ ·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ ¬¨·µ¤¦· wz1|u ? y1xw {w1{| ? u1y{¤
甲醇萃取物  ·¨«¤±²¯ ¬¨·µ¤¦· xu1s{ ? u1vz vy1tt ? u1su¥
212 核桃青皮萃取物对朱砂
叶螨的触杀作用
对触杀效果较好的石油醚
提取物用甲醇进行萃取分离
k表 ul ∀u种溶剂之间萃取率
分别为 }甲醇kxu1s{ ? u1vzl h
石油醚kwz1|u ? y1xwl h ~u
种溶剂萃取物生物测定结果表明 }石油醚萃取物的死亡率为k{w1{| ? u1y{l h o明显高于甲醇萃取物kvy1tt ?
u1sul h k Π s1sxl o由此可确定核桃青皮的杀螨活性物质主要存在于石油醚萃取物中 ∀
图 t 核桃青皮提取物流分 y高压液相图谱
ƒ¬ªqt ‹×≤ ©¬ª∏µ¨ ²©·«¨ ¶¬¬·«©µ¤¦·¬²± ²© ϑq ρεγια
213 石油醚萃取物的最佳流份及其生物活性测定
将柱层析分离及 ׏≤ 检测后得到 t|个流分k表 vl o生
测结果表明 o流分 y !z !tv !tz对朱砂叶螨的触杀效果较好 o
均达到 ys h 以上 o其中 o流分 y !z 的提取率较好 o分别为
y1vw h oy1zw h ∀ ׏≤ 检测结果表明 o流分 y的纯度高于其
他几种有效物质 o通过高压液相色谱k图 tl证实 o其纯度达
|s h以上 o因此选择该物质首先进行毒理研究 ∀
将所得流分 y配制成 y个不同浓度的药液kt !u !w !x !{ !
ts °ª#°ptl进行生物活性测定 o分别求出毒力回归方程kψ
€ w1wsu n u1tzsξl及致死中量 ≤xskt1{{y °ª#°ptl o可见
其有较好的生物活性 ∀药液浓度为 ts °ª#°pt时 ouw «后
害螨死亡率为 |{1wx h o已大于 |x h o适于进行后续酶活性的进一步研究 ∀因此选择 ts °ª#°pt这一药剂浓
度 o进行症状观察及乙酰胆碱酯酶与 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 的活性测定 ∀
214 症状观察
用流分 ykts °ª#°ptl及清水处理雌成螨后 o进行症状观察 o发现 s ∗ y «间 o处理组害螨表现的十分兴
奋 o四处爬动 o并急剧产卵 o而对照组则缓慢的爬动 o正常的取食叶片 ~y ∗ tu «间 o处理组试虫背部出现体液
外渗现象 o四处窜动或抽搐 o产卵量有所下降 o而对照组行为正常 o并开始产卵 ~tu ∗ t{ «间 o处理组试虫体
液一直保持外渗状态 o兴奋与静止交替出现 o身体开始收缩 o对照组则正常爬动 o未见异常 ~t{ ∗ uw «间 o处
理组试虫身体逐渐收缩至死亡 o对照组则身体饱满 o活动正常 ∀
经流分 y处理后 o表现的症状与神经毒剂有相似之处 o如兴奋 !抽搐等 o由此推测 o该活性物质对神经系
uz 林 业 科 学 ww卷
表 3 石油醚萃取物各流份对朱砂叶螨成螨的触杀作用(1 µ γ# µ Λ− 1 )
Ταβ .3 Εξτραχτ ρατε ανδ µ ορταλιτψ οφ φραχτιονσ οφ χηροµ ατογραπηψ εξτραχτ οφ ϑ . ρεγια αγαινστ Τ . ϖιεννενσισ
分离所得物质
Œ¶²¯¤·¬²±©µ¤¦·¬²±
分离率
Œ¶²¯¤·¬²±µ¤·¨Πh
死亡率
²µ·¤¯¬·¼Πh
分离所得物质
Œ¶²¯¤·¬²±©µ¤¦·¬²±
得率
Œ¶²¯¤·¬²±µ¤·¨Πh
死亡率
²µ·¤¯¬·¼Πh
t s1tz uz1zs ? z1vy¥¦ tt t1sx wv1{w ? tw1sv¤¥¦
u s1tw uy1t{ ? z1s{¥¦ tu t1ys w|1x{ ? v1zz¤¥¦
v s1tt vu1{{ ? y1ux¤¥¦ tv s1zy zu1vt ? tv1uz¤
w s1us xs1{| ? v1vs¤¥¦ tw t1w| wu1wu ? z1t{¤¥¦
x uz1xz ux1|z ? v1sz¥¦ tx s1wx xx1vy ? |1ut¤¥¦
y y1vw yw1|{ ? tx1zv¤¥ ty s1zu wy1t| ? y1vu¤¥¦
z y1zw zt1vw ? z1uy¤ tz s1xs uy1|{ ? w1tu¥¦
{ ux1yt xw1vu ? s1ut¤¥¦ t{ s1vz zt1ws ? y1uu¤
| t1{u w{1x{ ? s1t|¤¥¦ t| t1zs uu1sy ? t1s|¦
ts t1ys wv1uu ? s1sw¤¥¦ ≤Ž ty1sw ? w1zs¦
统有一定的作用 ∀
215 乙酰胆碱酯酶的活力测定
将流分 ykts °ª#°ptl和清水分别喷施于朱砂叶螨体表 o作为处理组和对照组 o经测定两者乙酰胆碱酯
比活力变化如图 u所示 }{ «时 o处理组比活力为 xzs1|s ˜#°ªpt ³µ²·o是对照组的 s1wz倍 o显著高于对照k Π
s1stl ~tu ∗ us «间 o处理组比活力分别为 w|w1{t owyt1zv oy{y1|{ ˜#°ªpt ³µ²·o对照组的分别为 u||1wx o
uzt1|| ouxx1wt ~uw «时 o处理组比活力低于对照组 o为对照的 s1{|倍 ∀从整体来看 o流分 y对朱砂叶螨的乙
酰胆碱酯酶具有一定的抑制作用 ∀
图 u 核桃青皮活性物质对朱砂叶螨乙酰胆
碱酯酶活性的影响
ƒ¬ªqu ∞©©¨¦·²±·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© „¦«¨ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·¶²© ϑq ρεγια
¤ª¤¬±¶·Τ q χινναβαρινυσ
3 表示差异极显著k Π s qstl o下同 ∀ 3 ¬¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¬©©¨µ¨±·
¤·t h ¯¨ √¨¯ ²©¦²±©¬§¨±¦¨ o·«¨ ¶¤°¨ ¥¨ ²¯º q
图 v 核桃青皮活性物质对朱砂叶螨
‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 活性的影响
ƒ¬ªqv ∞©©¨¦·²±·«¨ ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·¶²©
ϑq ρεγια ¤ª¤¬±¶·Τ q χινναβαρινυσ
216 Να+ , Κ+ 2ΑΤΠασε的活力测定
从图 v可以看出 o害螨经流分 y处理后 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 比活力变化趋势与对照k清水l基本相同 ow ∗ { «
间 o处理组比活力从 tux1wy降至 wt1y{ ˜#°ªpt ³µ²·o{ «时 o其为对照组的 s1yu倍 o抑制效果显著k Π s1stl ~
tu !ty «时 o处理组比活力分别为对照组的 s1yz !s1z{倍 ~uw «时 o处理组比活力为 ttu1xw ˜#°ªpt ³µ²·o是对
照的 s1yz倍 ∀
v 结论与讨论
大多数杀螨剂是通过干扰神经系统来发挥致死作用的 o而且其中毒特征多表现为战栗 !痉挛 !麻痹或是
其他行为上的改变 ∀神经细胞间的化学信息传递主要依靠神经传递素的合成与分解 o已经报道了许多被公
vz 第 x期 王海香等 }核桃青皮提取物对朱砂叶螨的毒力及相关酶活性的测定
认的神经传递素 o如乙酰胆碱 !伽马氨基丁酸 !真硝胺等 o其中已有一些被证明为杀螨剂的靶标 k¤µ® ετ αλqo
t||wl ∀作者所观察到的害螨施药后的症状与上述神经毒剂的症状有相似之处 o因此作者选择神经系统中 u
个重要酶系 o即乙酰胆碱酯酶与 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ u种酶的活性进行测定 ∀乙酰胆碱存在于突触间隙中并可
被乙酰胆碱酯酶分解 o从而终止神经兴奋的传导 o一旦该酶被一定程度的抑制昆虫会过度兴奋后死亡k林忠
莲等 ousstl ∀试验结果表明 o核桃青皮提取物流分 y对乙酰胆碱酯酶的活性有一定的抑制作用 o{ «时 o与
uw «内其他时间段相比 o抑制效果较好 ∀
神经细胞的离子组成不同于周围介质 o它取决于细胞膜对不同离子的渗透性 o周围介质中这些离子的浓
度以及在细胞膜上离子泵的的活性k林忠莲等 ousstl ∀ ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 广泛分布于细胞膜及内质网等膜成
分之中 o与 ‘¤n oŽn的传递有关 o该酶受抑制时 o膜对离子的通透性降低 o‘¤n流受抑制 o引起膜内 ‘¤n浓度升
高 o造成神经膜处于持续的兴奋状态 o继而引发神经系统功能紊乱 o最终导致昆虫死亡k张宗炳 ot|{ul ∀试验
结果表明 o施以药剂的害螨 ‘¤n oŽn 2„×°¤¶¨ 活性变化趋势与对照基本相同 o且在 { «时抑制效果要好于 uw «
内其他时间段 o与乙酰胆碱酯酶较强抑制点出现的时间段相同 o且与观察到的与之相应症状出现的时间段也
基本相符 o由此可推断 o活性物质可能通过对这两种酶活性的影响 o引起神经传递的阻断从而导致螨体死亡 ∀
核桃具有 u千多年的栽培历史 o我国是核桃的起源地之一 o资源十分丰富 o早在隋唐时期 o其药用价值就
已得到肯定并广泛应用k唐静成 oussvl ∀现代研究表明 o核桃叶提取物对粘虫k Λευχανια σεπαραταl与小菜蛾
k Πλυτελλα ξψλοστελλαl具有一定的拒食作用 ~核桃青皮提取物对粘虫与小菜蛾也均有一定的拒食和胃毒作用 o
对粘虫的作用效果更为明显 o且其对杨毒蛾的触杀作用弱于对蚜虫的触杀作用k翟梅枝等 ousst ~ussvl ∀本
研究中 o作者利用相似相溶的原理 o以朱砂叶螨为试虫 o从核桃青皮中分离出纯度为 |s h以上的杀螨活性物
质 o并探索性地对朱砂叶螨神经系统 u个重要酶活性进行了初步的测定 o为将来该活性物质的结构鉴定 o毒
理的深入研究及新型植物源农药的研发等后续工作奠定了良好的基础 ∀今后将对其毒理进行深入的研究 o
并对该物质的结构进行鉴定 o以求得到一种新型的植物源杀螨剂 ∀
参 考 文 献
曹 挥 o王有年 o刘素琪 o等 qussz1 地肤提取物对山楂叶螨体内几种酶活性的影响 q林业科学 owvkul }y{ p zu q
何衍彪 o詹儒林 o赵艳龙 qussw1 植物源农药的研究和应用 q热带农业科学 ouw kvl }x{ p yu q
林忠莲 o张立力 qusst1 磷化氢对谷蠢和玉米象成虫体内乙酰胆碱酯酶的影响 q郑州工程学院学报 ouukwl }vx p wt q
李连昌 o李利贞 o范永亮 o等 qt||u1 中国枣树害虫 q北京 }中国农业出版社 q
师光禄 o郑王义 o党泽普 o等 qt||w1 果树害虫 q北京 }中国农业出版社 q
唐静成 qussv1 核桃叶生物活性成分的研究 q西北农林科技大学硕士学位论文 q
张 兴 qussv1植物性农药在生防中的地位和作用 q世界农业 ouktl }vt p vu q
翟梅枝 o李晓明 o林奇英 o等 qussv¤1 核桃叶抑菌成分的提取及其抑菌活性 q西北林学院学报 ot{kwl }{| p |t q
翟梅枝 o杨秀萍 o林奇英 o等 qussv¥1 核桃叶提取物对杨毒蛾生物活性的研究 q西北林学院学报 ot{kul }yx p yz q
翟梅枝 o杨秀萍 o刘 路 qusst1 核桃叶提取物对蚜虫的触杀作用 q西北林学院学报 otykwl }xx p xy q
张宗炳 qt|{u1昆虫毒理学的新进展 q北京 }北京大学出版社 q
朱丽梅 o倪钰萍 o黄春霞 o等 qussu1 螨的综合测试方法的研究 q南京农专学报 otzktl }tv p tz q
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k责任编辑 朱乾坤l
wz 林 业 科 学 ww卷