全 文 ：第 v|卷 第 x期
u s s v年 | 月
林 业 科 学
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蒙古栎天然群体遗传多样性的 „ƒ°分析 3
李文英
k中国林业科学研究院科技信息研究所 北京 tsss|tl
顾万春
k中国林业科学研究院林业研究所 北京 tsss|tl
周世良
k中国科学院植物研究所系统与进化植物学开放研究实验室 北京 tsss|vl
摘 要 } 以黑龙江省小兴安岭嘉荫 !内蒙古大青沟和河北省雾灵山的 v个蒙古栎群体及北京东灵山辽东栎
群体为供试材料 o用筛选出的 w对荧光引物 o对 w个群体共计 |y个个体进行 „ƒ°分析 o每对 „ƒ°引物扩增
出 yv ∗ ttv条 o共得到 vwy条多态带 ~群体特异带及群体间共有带的差异与分布揭示了群体间的遗传差异及
相似性 ~蒙古栎遗传多样性主要存在于群体内 o群体间的遗传分化系数 Γστ为 s1szz ∀蒙古栎在种级水平的遗
传多样性参数略高于群体水平 o多态带百分率 Π分别为 |y1{ h !yz1u h o有效等位基因数 Αε 分别为 t1uus !
t1us{ o‘¨¬基因多样性指数 Η分别为 s1twx !s1tvw o≥«¤±±²±多样性指数 Ι 分别为 s1uwy !s1us{ ∀东灵山辽东栎
群体的 Π为 yz1y h o≥«¤±±²±多样性指数 Ι为 s1uus o‘¨¬基因多样性指数 Η为 s1tvw ∀ ˜°Š „聚类分析结果表
明 o蒙古栎自然群体间的遗传距离有随地理距离跨度增加而递增的趋势 ∀蒙古栎遗传多样性偏低可能与其在
历史上长期用作经济树种 !人为干预和环境破坏较为严重 !现存林分基本上为次生林等因素有关 ∀
关键词 } 蒙古栎 o辽东栎 o群体 o „ƒ°标记 o遗传多样性
收稿日期 }ussu p tu p sy ∀
基金项目 }国家/十五0科技攻关/林木种质资源保存技术创新与利用研究0k项目编号 }usst…„xtt…tsl !国家重大基础性工作项目/林
木种质资源收集与保存0k项目编号 }科技部 usst年 tv号l的部分内容 ∀
3 顾万春为通讯作者 ∀本文为李文英博士论文部分内容 ∀在野外采样过程中得到陈德龙高工 !那顺站长 !翟永生高工 !姚冬梅高
工 !乔滨杰高工 !仝廷宇高工 !冯学全高工的大力支持 o特此致谢 ∀
ΑΦΛΠ ΑΝΑΛΨΣΙΣ ΟΝ ΓΕΝΕΤΙΧ ∆Ις ΕΡΣΙΤΨ ΟΦ ΘΥΕΡΧΥΣ
ΜΟΝΓΟΛΙΧΑ ΠΟΠΥΛΑΤΙΟΝΣ
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kΙνστιτυτε οφ Σχιεντιφιχ ανδ ΤεχηνολογιχαλΙνφορµατιον o ΧΑΦ Βειϕινγtsss|tl
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k Ρεσεαρχη Ινστιτυτε οφ Φορεστρψo ΧΑΦ Βειϕινγtsss|tl
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kΛαβορατορψοφ Σψστεµατιχ ανδ Εϖολυτιοναρψ Βοτανψo Ινστιτυτε οφ Βοτανψo Χηινεσε Αχαδεµψοφ Σχιενχεσ Βειϕινγtsss|vl
Αβστραχτ} ׫µ¨¨ Θυερχυσ µονγολιχα ³²³∏¯¤·¬²±¶ ²¯¦¤·¨§¤·¬¤¼¬±o ÷¬¤²¬¬±ªχ¤±¯¬±ª ²∏±·¤¬±¬± ‹ ¬¨¯²±ª­¬¤±ª°µ²√¬±¦¨ o
⁄¤´¬±ªª²∏¬±Œ±±¨ µ²±ª²¯¬¤„∏·²±²°²∏¶• ª¨¬²±o¤±§ • ∏¯¬±ª¶«¤±¬± ‹ ¥¨¨¬°µ²√¬±¦¨ o¤±§²±¨ Θqλιαοτυνγενσισk¤√¤µ¬¨·¼
²© Θq µονγολιχαl ³²³∏¯¤·¬²± ¤·⁄²±ª¯¬±ª¶«¤± ¬± …¨ ¬­¬±ªo ·²·¤¯ ¼¯ |y ¬±§¬√¬§∏¤¯¶ º¨ µ¨ ¶¨¯¨ ¦·¨§ ¤±§ ¤±¤¯¼½¨ § ¥¼
¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±¶∏¶¬±ªw ³¤¬µ¶²© „ƒ° ³µ¬°¨ µ¶¶¦µ¨ ±¨¨ §o ¤¨¦«³µ¬°¨ µ³¤¬µ³µ²§∏¦¨§yv ∗ ttv ¥¤±§¶¤±§vwy ³²¯¼°²µ³«¬¦
¥¤±§¶º¨ µ¨ ²¥·¤¬±¨ §q„¶©²µΘqµονγολιχα¤·¶³¨¦¬¨¶¯¨ √¨ ¯o·«¨ ©¨©¨¦·¬√¨ ±∏°¥¨µ²©¤¯¯¨ ¯¨ ¶³¨µ¯²¦∏¶kΑεl º¤¶t1uus o·«¨
³¨µ¦¨±·¤ª¨ ²© ³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§ k Πl º¤¶|y1{ h o ¤±§·«¨ ‘¨¬ª¨ ±¨ §¬√¨ µ¶¬·¼ ¬±§¨¬ k Ηl º¤¶s1twx o ≥«¤±±²±. ¶
¬±©²µ°¤·¬²±¬±§¨¬kΙl º¤¶s1uwy q„·³²³∏¯¤·¬²±¯¨ √¨ ¯o·«¨ ¶¨·¬°¤·¨¶º¨ µ¨ Αε € t1us{ oΠ€ yz1u h o¤±§ Η€ s1tvw oΙ €
s1us{ qŒ± ¦²±·µ¤¶·o·«¨ ¶¨·¬°¤·¨¶©²µ Θqλιαοτυνγενσισ º¨ µ¨ ¤¯°²¶··«¨ ¶¤°¨ k Αε € t1x oΠ€ yz1y h o Η € s1tvw o Ι €
s1uusl q„¶©²µΘqµονγολιχαoª¨ ±¨·¬¦§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ¦²¨©©¬¦¬¨±·¤°²±ª³²³∏¯¤·¬²±¶k Γστl º¤¶s1szz q „¦¦²µ§¬±ª·²·«¨
˜°Š„ ¦¯∏¶·¨µ¤±¤¯¼¶¬¶o·«¨ ª¨ ±¨·¬¦§¬¶·¤±¦¨ ¤°²±ª Θq µονγολιχα ³²³∏¯¤·¬²±¶ ¥¨¦¤°¨ ¤¯µª¨µ º¬·«·«¨ ¬±¦µ¨¤¶¨ ²©
ª¨²ªµ¤³«¬¦¤¯ §¬¶·¤±¦¨ q ׫¨ ²¯º ¯¨ √¨ ¯ ²© ª¨ ±¨ ·¬¦§¬√¨ µ¶¬·¼ ²© Θq µονγολιχα °¬ª«·µ¨ ¤¯·¨ ·²·«¨ ²¯±ª2·¨µ° ∏·¬¯¬½¤·¬²± ¤¶
¦¨²±²°¬¦·µ¨¨¶³¨¦¬¨¶¬± «¬¶·²µ¼o¦²°³¤µ¤·¬√¨ ¼¯ ¶¨µ¬²∏¶§¬¶·∏µ¥¤±¦¨ ¤±§ ±¨√¬µ²±°¨ ±·¤¯ §¤°¤ª¨ ¥¼ «∏°¤± ¥¨¬±ª¶o¤±§
¶¨¦²±§¤µ¼©²µ¨¶·¶²©·«¨ ¬¨¬¶·¨§¶·¤±§¶q
Κεψ ωορδσ} Θυερχυσ µονγολιχαo Θυερχυσλιαοτυνγενσισo°²³∏¯¤·¬²±o„ƒ° °¤µ®¨µoŠ¨ ±¨·¬¦§¬√¨ µ¶¬·¼
蒙古栎k Θυερχυσ µονγολιχαl为落叶栎中抗逆性较强的一个种 o主要分布于我国的东北和华北地区 o
是东北夏绿阔叶林的重要建群种 ~辽东栎k Θqλιαοτυνγενσισl主要分布于暖温带北部落叶林亚地带 o是华
北暖温带落叶阔叶林的主要建群种k马恩伟 ot||sl o这 u个种是温带和暖温带地区重要的生态经济树种
和造林树种k吴征镒 ot|{s ~郑万钧 ot|{xl ∀这 u个树种在形态学 !细胞生物学 !生态学等方面已有较多
研究 ∀张金谈等kt|{yl和王良民kt|{yl研究表明 o蒙古栎 !辽东栎的花粉及核型显微结构略有差异 o但
与其它落叶栎差异明显 ∀这 u种栎树形态特征相似 o虽有一定差异 o但其分布区重叠 o多出现在同一地
区 o鉴定和区分它们非常不易k唐宇丹等 ot|||l ∀对这 u个种遗传多样性及其种间关系研究较少 o恽锐
等kt||{l利用同工酶和 • „°⁄技术研究了蒙古栎和辽东栎遗传多样性以及遗传分化 o认为 u种栎树遗
传分化较少 o东灵山群体是典型蒙古栎群体和辽东栎群体的中间类型 ∀夏铭等kusstl利用 • „°⁄方法
对中国东北地区 w个蒙古栎天然群体的研究表明 o蒙古栎遗传多样性水平较高k≥«¤±±²±多样性指数 Ι
€ t1u|{l o群体间遗传分化较高k遗传分化系数 Γστ € s1vxxl ∀李文英等kussvl对中国蒙古栎分布区内
k从黑龙江大兴安岭到河北赞皇l{个群体和北京东灵山辽东栎群体的等位酶研究表明 o蒙古栎群体遗
传多样性为中等水平 o平均杂合度k Ηεl为 s1s{x o群体间遗传分化中等偏高k Γστ € s1tsz yl ∀由于上述
研究仅局限于某一地区 o或分析的样本量少以及研究方法的局限性 o不足以代表蒙古栎的遗传多样性 o
而且东灵山群体是蒙古栎还是辽东栎尚处于争论之中k恽锐等 ot||{l ∀本研究尝试利用 „ƒ°分子标记
技术 o以蒙古栎全分布区内地理跨度较大的黑龙江嘉荫群体 !内蒙古大青沟群体 !河北雾灵山群体以及
北京东灵山辽东栎群体为研究对象 o研究蒙古栎 !辽东栎群体间 !群体内遗传多样性分布 o探讨 ⁄‘„分
子水平上这 u种栎树种内 !种间遗传多样性差异 o以加深对东灵山群体与典型蒙古栎关系的认识 o为栎
属种质资源的保护和利用以及生物分子进化和物种分化提供基础资料和实验依据 ∀
„ƒ°是一种新近用于群体分子生态 !群体遗传研究的有效方法k¤¥¨¤∏ ετ αλqot||vl o特别是近几
年在种群生态 !作物品系鉴别 !基因定位作图 !遗传多样性研究等方面表现出广泛的应用价值 ∀ „ƒ°标
记是显性标记 o且按典型的孟德尔方式遗传 o迄今为止 o已利用 „ƒ° 技术对栎属k Θυερχυσl !杨属
k Ποπυλυσl !大叶相思kΑχαχια αυριχυλιφορµισl等树种群体遗传结构与种间 !种内遗传多样性进行了广泛的研
究k≤ µ¨√¨ µ¤ ετ αλqousss ~usst ~张军丽 ousstl ∀该技术不但具备了其它 ⁄‘„ 分子标记 o如 • ƒ°¶! ≥≥•¶!
• „°⁄所具有的优点 o而且还具有带纹丰富 !用样量少 !灵敏度高 !快速高效等特点k„­°²±¨ ετ αλqot||{ ~
°²º¨ ¯¯ ετ αλqot||y ~‹¬¯¯ ετ αλqot||yl o一次分析可获得基因组大量的遗传信息 o并表现大量的多态带 o特
别是对具亲缘关系及遗传上区别不大的种类来说是比较合适的分子标记方法k°²º¨ ¯¯ ετ αλqot||zl ∀
t 材料与方法
111 材料
在蒙古栎分布区内 o选择位于黑龙江省小兴安岭嘉荫ktvsβvtχ∞ow{βwwχ‘o海拔 vus °l !内蒙古自治
区通辽市大青沟自然保护区ktuuβtwχ∞owuβwyχ‘o海拔 tus °l和河北省雾灵山kttzβuyχ∞owsβvuχ‘o海拔
t txs °l的 v个蒙古栎群体以及北京东灵山kttxβuyχ∞owsβssχ‘o海拔 t tss °l的 t个辽东栎群体共计 w
个群体作为研究对象 o每个群体选择 uw个植株 o群体内每 u个植株间距保持在 vs ∗ xs °之间 ∀于 usst
年 |月从选定的每株树上剪取带有饱满顶芽和侧芽的 ts ∗ tx¦°长的枝条 o立即装入预先放有湿润滤纸
的塑料袋内 o带回实验室置于 p w ε 冰箱内保存 ∀将去掉芽鳞后的顶芽在硅胶中快速干燥后备用 ∀
112 总 ⁄‘„制备
采用改进的 ≤ׄ…法k⁄²¼¯¨ ετ αλqot|{z ~邹喻苹等 ousstl从硅胶干燥好的蒙古栎冬芽中提取总
⁄‘„ ∀将提取出的总 ⁄‘„溶于 s1t ≅ ×∞ ≈t °°²¯#pt ×µ¬¶2‹≤¯ k³‹ {1sl os1t °°²¯#pt ∞⁄ׄk³‹ {1sl 
中 o标定浓度后用于 „ƒ°2°≤• 扩增 ∀
113 „ƒ°实验
t1v1t 接头和引物 利用 °∞ „³³¯¬¨§…¬²¶¼¶·¨°¶公司的试剂盒及其实验指南进行 ∀从 uw对 „ƒ°引物
中筛选出能获得清晰条带 !反应稳定的 w对引物k∞2„ŠŠΠ2≤„„ o∞2„ŠŠΠ2≤ׄ o∞2„≤„А2≤„≤ o∞2„≤„Π
sv 林 业 科 学 v|卷
2≤׊l进行 „ƒ°标记分析 ∀
t1v1u 酶解与连接 各样品基因组 ⁄‘„的酶切和接头的连接在同一反应中进行 ∀在 tt1s ˏ反应体
系中含 t1s ˏ的 x Λ°²¯ ∞¦²• Œ接头 ot1s ˏ的 x Λ°²¯ ¶¨ Œ接头 ouss ∗ vss ±ª总 ⁄‘„ oy ∗ z ˜ ×w 连接
酶 oxs ˜ ∞¦²• Œot ˜ ¶¨ Œo室温下k约 us ∗ uu ε l过夜后 o加入 t{| ˏ的 s1t ≅ ×∞溶液进行稀释 o作为预
扩增反应用工作液 ∀
t1v1v „ƒ°2°≤• 扩增反应 在 us ˏ的预扩增反应体系中含有 tx ˏ°∞ ¦²µ¨ °¬¬ot1s ˏ的 x Λ°²¯
°µ¬°¨ µ∞ot1s ˏ的 x Λ°²¯ °µ¬°¨ µ ov ˏ酶解和连接处理后的预扩增反应用 ⁄‘„工作液 ot ˜ פ´ ⁄‘„
聚合酶 ∀预扩增反应条件为 }zs ε v °¬±~|w ε 变性 u °¬±oxy ε vs¶ozu ε 延伸 u °¬±ovw个循环 ~ys ε 保
温 vs °¬±~w ε 保温 x °¬±∀取 ts ˏ预扩增产物 o用 s1t ≅ ×∞溶液稀释 us倍 o置于 p us ε 冰箱内保存 o作
为下一步选择性扩增反应用工作液 ∀
选择性扩增反应选用 °∞公司的荧光引物如表 u和表 v所示 ∀在 us ˏ的选择性扩增反应体系中含
有 tx ˏ°∞¦²µ¨ °¬¬ot1s ˏ的 x Λ°²¯ °µ¬°¨ µ∞ot1s ˏ的 x Λ°²¯ °µ¬°¨ µ ov ˏ选择性扩增反应用 ⁄‘„
工作液k预扩增产物稀释液l ot ˜ פ´ ⁄‘„聚合酶 ∀°≤• 反应条件为 }zs ε |s¶~|w ε 变性 txs¶oyy ε vs
¶ozu ε 延伸 u °¬±ou{个循环 ~ys ε 保温 vs °¬±~w ε 保温 ∀
„ƒ°标记的 °≤• 扩增在 ×2³¨µ¶²±¤¯ w{型 °≤• 仪k…¬²°¨ ·µ¤ο• o °¤§¨ ¬± Š¨ µ°¤±¼l上薄壁管中进行 ∀
t1v1w „ƒ°选择性扩增产物的检测 取 u ˏ选择性扩增产物样品 o在 vzz ⁄‘„ 自动测序仪k„…Œ
°µ¬¶°× vzz ⁄‘„ ≥¨ ∏´¨±¦¨µl上 o在 x h聚丙烯酰胺凝胶上电泳 u1w «o在 • ∏± ²§∏¯¨}Š≥ •∏± vyƒ2uwss下 o
自动采集电泳胶图 ∀
114 数据分析
利用 Š¨ ±¨ ≥¦¤± v1t¥软件将 |y个个体 !w对荧光引物产生的电泳胶图转换为一个 s ot 矩阵 o用
°’°Š∞‘∞ √¨ µ¶¬²± t1vu 软件k‘¨¬ot|{zl计算以下遗传多样性各参数 } ktl多态带数 ΑΠk±∏°¥¨µ²©
³²¯¼°²µ³«¬¦ ²¯¦¬l和多态带百分率 Π k³µ²³²µ·¤·¬²± ²© ³²¯¼°²µ³«¬¦ ²¯¦¬l ~kul 等位基因平均数 Α k¤√¨ µ¤ª¨
±∏°¥¨µ²©¤¯¯¨ ¯¨ ¶³¨µ¯ ²¦¬l ~kvl 有效等位基因数 Αε k ©¨©¨¦·¬√¨ ±∏°¥¨µ²©¤¯¯¨ ¯¨ ¶³¨µ¯ ²¦¬l ~kwl‘¨¬基因多样性
指数 Η kª¨ ±¨ §¬√¨ µ¶¬·¼l o≥«¤±±²±信息指数 Ιk≥«¤±±²±. ¶¬±©²µ°¤·¬²±¬±§¨¬l ~kxl ‘¨¬的遗传距离 ∆kª¨ ±¨ ·¬¦
§¬¶·¤±¦¨¶l和遗传一致度 Ι‘kª¨ ±¨ ·¬¦¬§¨±·¬·¼l o并采用 ‘¨¬的遗传一致度 Ι‘进行非加权算术平均聚类分析
k∏±º¨ ¬ª«·¨§³¤¬µªµ²∏³º¬·«¤µ¬·«°¨ ·¬¦¤√¨ µ¤ª¨ o˜°Š„lk≥∏± ετ αλqot||zl ~kyl应用 ‘¨¬kt|zvl基因多度法计
算遗传分化度 Γστk·«¨ ¦²¨©©¬¦¬¨±·²©ª¨ ±¨ §¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ¤°²±ª³²³∏¯¤·¬²±¶º¬·«¬± ¶³¨¦¬¨¶l o其关系式为 Γστ €
∆στΠΗ× o其中 Η× € Η≥ n ∆στ oΗ× 为总遗传多样性 oΗ≥ 为群体内的遗传多样性 o∆στ为群体间遗传多样
性 ~kzl按照 • µ¬ª«·kt|xtl的方法计算反映基因流强度的群体每代迁移数k Ν°l o其关系式为 }Φστ € tΠkt n
w Ν°l o Ν° € kt p ΦστlΠwΦστ o在此 oΦστ值等同于 Γστ∀
„’∂ „k¤±¤¯¼¶¬¶²© °²¯ ¦¨∏¯¤µ√¤µ¬¤±¦¨l是一套适合于单套基因组k«¤³¯²·¼³¨ l或 • „°⁄的遗传计算程
序 o现在也用于 „ƒ°等以 sΠt计数的表型扩增带的遗传变化分析 ∀利用 „’∂ „ √¨ µ¶¬²± t1xxk∞¬¦²©©¯ µ¨
ετ αλqot||ul软件进行分子方差分析 o计算反映群体遗传结构及变化的平方和 !均方 !方差分量以及遗传
距离 5στ∀
u 结果
211 „ƒ°扩增片段的多态性
在扩增片段长度 zs ∗ wss¥³的范围内 o其中 vss ∗ wss¥³的片段较多 ∀|y个个体经过 w对荧光引物
扩增共获得 vxt条清晰的谱带 o其中多态带 vwy条 o多态位点百分率为 |{1y h ∀每对引物扩增出 yv ∗
ttu条多态带 o平均 {z1zx条k表 t o图 tl ∀
tv 第 x期 李文英等 }蒙古栎天然群体遗传多样性的 „ƒ°分析
表 1 ΑΦΛΠ选择性扩增引物产生的条带多态性
Ταβ . 1 Πολψµορπηισµ οφ ΑΦΛΠ βανδσ οβταινεδ βψσελεχτιϖε αµ πλιφιχατιον βασεδ ον τηε φουρ πριµερ παιρσ
引物编号
≤²§¨ ²©·«¨ ³µ¬° µ¨
引物组合
°µ¬°¨ µ³¤¬µ¶
总条带数
ײ·¤¯ ±∏°¥¨µ²©
„ƒ° ¥¤±§¶
带长范围
•¤±ª¨ ²©¥¤±§
¶¬½¨Π¥³
多态带数
‘∏°¥¨µ²©
³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶
多态带百分率
°¨ µ¦¨±·¤ª¨ ²©
³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶Πh
…z2u ∞2„≤„А2≤„≤ tss zs ∗ wss |{ |{1s
…z2z ∞2„≤„А2≤׊ ttv zs ∗ wss ttu ||1t
Šy2t ∞2„ŠŠΠ2≤„„ zx zs ∗ vvs zv |z1v
Šy2x ∞2„ŠŠΠ2≤ׄ yv zs ∗ wss yv tss1s
合计 ײ·¤¯ vxt vwy
平均 „√¨ µ¤ª¨ {z1zx {y1x |{1y
图 t 利用 …z2u和 Šy2t u对引物对蒙古栎和辽东栎的 „ƒ°扩增图谱
ƒ¬ªqt „ƒ° ©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª³¤·¨µ±¶²© Θq µονγολιχα ¤±§ Θqλιαοτυνγενσισ∏¶¬±ª·«¨ ³µ¬°¨ µ³¤¬µ¶²© …z2u ¤±§Šy2t
泳道 t ∗ |为蒙古栎个体 o泳道 ts ∗ vv为辽东栎个体 ∀
‘²qt ∗ | o¬±§¬√¬§∏¤¯¶²© Θq µονγολιχα ~‘²qts ∗ vv o¬±§¬√¬§∏¤¯¶²© Θqλιαοτυνγενσισq
„ƒ°扩增片段在不同群体中出现的频率有差异 o如 …z2u2tt{位点在大青沟 !雾灵山 !东灵山 v个群
体中的频率均为 t o而在嘉荫群体中的频率为 s1ztt v ~Šy2t2{{位点在东灵山群体的频率为 s o而嘉荫 !
大青沟 !雾灵山群体的频率分别为 s1tx{ w !s1tx{ w !s1s{z t ∀根据不同群体在同一位点频率的差异 o统
计了 w个群体的特有带数及群体间共有带数k表 ul ∀从 w个群体所具有的特异扩增带来看k表 ul ow个
群体特异带占多态带总数的 u1vt h ∗ v1wz h ou个群体共有带比例为 tt1{x h ∗ tz1sx h ov个群体共有
带比例为 {1|t h ∗ tw1ty h ow个群体的共有带为 twx个 o占多态带总数的 wt1|t h o群体特异带及群体间
共有带的不同揭示了各群体间的遗传差异及遗传相似性 o可为遗传资源的保护和利用提供依据 ∀
212 群体遗传多样性参数
多态位点百分率k Πl是目前应用较为广泛的多样性指标 o在 w个群体中 o大青沟群体的 Π最高 o嘉
荫群体的 Π最低k表 vl o按所检测的多态位点丰富程度 ow个群体的排序为 }大青沟群体k Π€ zt1z h l 
东灵山群体k Π€ yz1y h l 雾灵山群体k Π€ y|1| h l  嘉荫群体k Π€ yx1| h l ∀
uv 林 业 科 学 v|卷
表 2 4 个群体的 ΑΦΛΠ扩增带统计结果 ≠
Ταβ . 2 Στατιστιχσ οφ ΑΦΛΠ βανδσ οφ τηε φουρ ποπυλατιονσ
树种
×µ¨¨¶³¨¦¬¨¶
群体
°²³∏¯¤·¬²±
特异带数k占总位点数百分比l
k特有带编号l
‘∏°¥¨µ²©¶³¨¦¬©¬¦¥¤±§¶
k°¨ µ¦¨±·¤ª¨ ¬±·«¨ ·²·¤¯ ¥¤±§¶l
k׫¨ ¥¤±§¦²§¨ l
u群体共有带数
k占总带数百分比l
‘∏°¥¨µ²©¶«¤µ¨§¥¤±§¶¥¨·º¨¨ ±
u ³²³∏¯¤·¬²±¶k°¨ µ¦¨±·¤ª¨
¬±·«¨ ·²·¤¯ ¥¤±§¶l
v群体共有带数
k占总带数百分比l
‘∏°¥¨µ²©¶«¤µ¨§¥¤±§¶¤°²±ª
v ³²³∏¯¤·¬²±¶k°¨ µ¦¨±·¤ª¨
¬±·«¨ ·²·¤¯ ¥¤±§¶l
嘉荫
¬¤¼¬±
tu kv1wz h lk…z2u2z| o…z2u2vwt oŠy2t2zt o
Šy2t2zw oŠy2t2z{ oŠy2t2z| oŠy2t2{| o
Šy2t2uyx oŠy2t2vs| oŠy2t2vus o
Šy2x2t|w oŠy2x2vx|l
wz ktv1x{ h l vt k{1|t h l
蒙古栎
Θq µονγολιχα
大青沟
⁄¤´¬±ªª²∏
{ ku1vt h l k…z2u2tsu o…z2z2z| o…z2z2ts{ o
…z2z2tuw o…z2z2uuy oŠy2t2tvu o
Šy2t2tv| oŠy2x2t{tl
x| ktz1sx h l w| ktw1ty h l
雾灵山
• ∏¯¬±ª¶«¤±
tv kv1zy h l k…z2u2twu o…z2u2uux o…z2u2u{w o
…z2u2vsz o…z2z2{y o…z2z2{{ o…z2z2ttt o
…z2z2uwx o…z2z2uyx o…z2z2u|| o
Šy2t2usz oŠy2x2{x oŠy2x2utvl
x| ktz1sx h l wx ktv1st h l
辽东栎
Θqλιαοτυνγενσισ
东灵山
⁄²±ª¯¬±ª¶«¤±
{ ku1vt h lk…z2u2tvv o…z2u2vtv o…z2z2tvv o
…z2z2tzt o…z2z2uus o…z2z2uvx o
Šy2t2usw oŠy2x2uvwl
wt ktt1{x h l wy ktv1u| h l
合计 ײ·¤¯ wt ktt1{x h l tsv ku|1zz h l xz kty1wz h l
≠只出现在 t个群体的谱带为该群体特异带 ~同时在 u个群体出现的谱带为 u个群体共有带 o以此类推 ∀特有带编号 …z2u2z|表示 …z2u
引物扩增产生 z| ¥³的谱带 o以此类推 ∀ ≥³¨¦¬©¬¦¥¤±§µ¨³µ¨¶¨±·¬±ª·«¨ ²±¯¼ ¥¤±§ §¨·¨¦·¨§¬± ²±¨ ³²³∏¯¤·¬²±o¶«¤µ¨§¥¤±§¶¥¨·º¨¨ ± u ³²³∏¯¤·¬²±¶
µ¨³µ¨¶¨±·¬±ª·«¨ ¥¤±§¶§¨·¨¦·¨§¶¬°∏¯·¤±¨ ²∏¶¯¼¬± u ³²³∏¯¤·¬²±¶o¤±§¶²²±q׫¨ ¦²§¨ ²©·«¨ ¶³¨¦¬©¬¦¥¤±§…z2u2z| ° ¤¨±¶¤¥¤±§¤¶¯ ²±ª¤¶z|¥³³µ²§∏¦¨§
¥¼ ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²± ∏¶¬±ª³µ¬° µ¨…z2u o¤±§¶²²±q
≥«¤±±²±信息指数kΙl分析结果显示 o以雾灵山群体最低 o大青沟群体最高 ow个群体的排序为 }大青
沟群体kΙ € s1uv{l 东灵山群体kΙ € s1uusl 嘉荫群体k Ι € s1utyl 雾灵山群体k Ι € s1us{l ∀蒙古栎
种级水平的 Ι为 s1uwy o群体内的平均 Ι为 s1uut o群体间遗传多样性和群体内遗传多样性分别占总遗
传多样性的 ts1vy h和 {|1yw h o群体内遗传多样性大于群体间遗传多样性 ∀
‘¨¬基因多样性指数k Ηl是衡量群体遗传分化最常用的指标 o表示在总的遗传变异中群体间变异所
占的比例 ∀本研究结果显示 o大青沟群体具有稍高的 ‘¨¬基因多样性 o雾灵山群体的最低k表 vl ow个群
体的 ‘¨¬基因多样性指数依次为 }大青沟群体k Η € s1twxl 东灵山群体k Η € s1tvwl 嘉荫群体k Η €
s1tvul 雾灵山群体k Η€ s1tuxl ∀蒙古栎种级水平的 Η× 为 s1twx o群体内平均 Η≥ 为 s1tvw o群体间的
遗传分化指数 Γστ为 s1szz o即群体间的遗传变异占总变异的 z1zs h ∀由此可见 o‘¨¬基因多样性指数
和 ≥«¤±±²±信息指数的 „ƒ°统计结果 o都显示出蒙古栎遗传多样性主要存在于群体内 ∀
对蒙古栎种级水平的 „ƒ° 检测表明 o每个位点的等位基因数k Αl为 t1|y{ o多态位点k Πl占
|y1{ h o≥«¤±±²±信息指数kΙl为 s1uwy k表 vl ∀在蒙古栎群体水平 o上述指标要低得多 oΑ!Π!Ι范围分别
为 }t1yx| ∗ t1ztz oyx1| h ∗ zt1z h os1us{ ∗ s1uv{ ∀东灵山辽东栎群体的遗传变异水平为 }Π为 yz1y h o
Α为 t1yzy oΑε为 t1usz oΗ为 s1tvw ∀东灵山群体的 „ƒ°遗传多样性各参数与蒙古栎非常相近 o但在
⁄‘„水平上未检测到明显的遗传差异 ∀
213 群体遗传变异的 „’∂ „分析
群体遗传变异的 „’∂ „分析表明 o群体间差异极显著k Π s1sstl ∀研究群体的遗传多样性主要
分布在群体内 o占变化成分的 |w1tt h o而只有 x1{| h分布在不同群体间 o即群体间的分子分化不到总
遗传多样性的 y h k表 wl ∀v个不同蒙古栎群体与辽东栎群体两两间的 °«¬¶·遗传分化k 5 στl也不大k表
xl ∀从 w个不同群体间的 „’∂ „遗传多样性及遗传分化的 5 στ值的比较来看 o嘉荫群体与雾灵山群体
间的遗传结构较远k yστ值较大l o大青沟群体与雾灵山群体间的遗传结构关系较近k yστ值较小l o嘉荫
群体与大青沟群体间 !东灵山群体与雾灵山群体间的遗传关系介于两者间 ∀
vv 第 x期 李文英等 }蒙古栎天然群体遗传多样性的 „ƒ°分析
表 3 ΑΦΛΠ检测的蒙古栎 !辽东栎 4 个群体的遗传多样性水平 ≠
Ταβ . 3 Γενετιχ διϖερσιτψ οφ τηε φουρ ποπυλατιονσ δετεχτεδ βψ ΑΦΛΠ
群体 °²³∏¯¤·¬²± Ν ΑΠ Π Α Αε Η Ι
蒙古栎 Θq µονγολιχα
种级水平 ≥³¨¦¬¨¶¯¨ √¨ ¯ zu vvx |y1{ t1|y{ ks1tzyl t1uus s1twx ks1txvl s1uwy
嘉 荫 ¬¤¼¬± uw uu{ yx1| t1yx| ks1wzxl t1usy s1tvu ks1tytl s1uty
大青沟 ⁄¤´¬±ªª²∏ uw uw{ zt1z t1ztz ks1wxtl t1uuy s1twy ks1tyvl s1uv{
雾灵山 • ∏¯¬±ª¶«¤± uw uwu y|1| t1y|| ks1wx|l t1t|v s1tux ks1txyl s1us{
平 均  ¤¨± uw uv|1v yz1u t1y|u t1us{ s1tvw s1uut
辽东栎 Θqλιαοτυνγενσισ
东灵山 ⁄²±ª¯¬±ª¶«¤± uw uvw yz1y t1yzy ks1wy|l t1usz s1tvw ks1tx|l s1uus
≠ Ν为样本大小 ~括号内为标准误差 ∀ Νo≥¤°³¯¨¶¬½¨ ~≥·¤±§¤µ§ µ¨µ²µ¶¬± ³¤µ¨±·«¨ ¶¨¶q
表 4 ΑΦΛΠ检测获得的 4 个群体的分子方差分析
Ταβ . 4 Αναλψσισ οφ µ ολεχυλαρ ϖαριανχε (ΑΜΟς Α) οφ τηεφουρ ποπυλατιονσ δετεχτεδ βψ ΑΦΛΠ
变异来源
≥²∏µ¦¨ ²©√¤µ¬¤·¬²±
自由度
§©
平方和
≥≥
均方
≥
方差分量
∂¤µ¬¤±¦¨ ¦²°³²±¨ ±·
方差分量百分率 °¨ µ¦¨±·¤ª¨
²©√¤µ¬¤±¦¨ ¦²°³²±¨ ±·Πh
°«¬¶·系数
yστ
显著性检测
Π2√¤¯∏¨
群体间 „°²±ª³²³∏¯¤·¬²±¶ v t1||| w s1yyy s1sty yz x1{| s1sx|  s1sst
群体内 •¬·«¬± ³²³∏¯¤·¬²± |u uw1xsu y s1uyy s1uyy vv |w1tt
表 5 两两群体间的 Πηιστ遗传分化比较
Ταβ . 5 Γενετιχ διφφερεντιατιον οφ Πηιστ αναλψσισ βετωεεν παρι ποπυλατιονσ
两群体间 …¨ ·º¨¨ ± ³¤µ¬³²³∏¯¤·¬²±¶ °«¬¶·系数 yστ 显著性检测 Π2√¤¯∏¨
嘉荫群体 p东灵山群体 ¬¤¼¬± √¶⁄²±ª¯¬±ª¶«¤± s1sx| w  s1sst
嘉荫群体 p大青沟群体 ¬¤¼¬± √¶⁄¤´¬±ªª²∏ s1sy| u  s1sst
嘉荫群体 p雾灵山群体 ¬¤¼¬± √¶ • ∏¯¬±ª¶«¤± s1sz| v  s1sst
东灵山群体 p雾灵山群体 ⁄²±ª¯¬±ª¶«¤± √¶ • ∏¯¬±ª¶«¤± s1syu t  s1sst
东灵山群体 p大青沟群体 ⁄²±ª¯¬±ª¶«¤± √¶⁄¤´¬±ªª²∏ s1sxs y  s1sst
大青沟群体 p雾灵山群体 ⁄¤´¬±ªª²∏√¶ • ∏¯¬±ª¶«¤± s1svs z  s1sst
214 群体间的遗传一致度和遗传距离
为了进一步分析群体间的遗传分化程度 o计算了 ‘¨¬的遗传一致度 Ι‘和遗传距离 ∆ o群体的遗传
一致度在 s1|z{ u ∗ s1||s |之间 o遗传距离在 s1ss| u ∗ s1suu s之间 o说明群体间的相似程度较高 o遗传
距离较小 ∀其中 o雾灵山群体与大青沟群体之间的相似性最高 o遗传距离为 s1ss| u ~雾灵山群体与嘉
荫群体之间的遗传距离较大k ∆为 s1suul o遗传分化程度较大 ∀
215 群体间遗传关系的 ˜°Š„聚类分析
w个群体间的遗传一致度相当高 o均大于 s1|z{ ∀根据 w个群体间的遗传一致度进行的 ˜°Š„聚
类分析结果显示 o雾灵山蒙古栎群体与嘉荫蒙古栎群体间的遗传距离最大 o大青沟蒙古栎群体与雾灵山
蒙古栎群体间的遗传距离最小 o东灵山辽东栎群体与大青沟蒙古栎群体间的遗传距离居中 ∀东灵山辽
东栎群体与地理上较远的嘉荫蒙古栎群体聚类在一起k图 ul ∀
v 讨论
311 遗传多样性水平
从蒙古栎群体 „ƒ°检测结果看 o用 w对 „ƒ°引物共扩增出 vwy条多态带 o平均每对引物检测到
{z1zx个多态位点k表 tl o与 ≤ µ¨√¨ µ¤kusssl用 u对 „ƒ°引物对夏栎k Θq ροβυρl和无柄栎k Θq πετραεαl的
研究得到的平均每对引物检测到 {s1s个多态带数的结果大体相当 o说明本试验选择的 „ƒ°引物扩增
wv 林 业 科 学 v|卷
遗传一致度 Š¨ ±¨ ·¬¦¬§¨±·¬·¼
图 u w个群体基于 „ƒ°分析的 ˜°Š„聚类结果
ƒ¬ªqu ⁄¨ ±§µ²ªµ¤° ²© ˜°Š„ ¤±¤¯¼¶¬¶²©·«¨ ©²∏µ³²³∏¯¤·¬²±¶¬±
Θq µονγολιχα ¤±§ Θqλιαοτυνγενσισ ¥¤¶¨§²± „ƒ° °¤µ®¨µ¶
的高效性 ∀本研究结果揭示蒙古栎的遗传多样性偏
低 o平均 ≥«¤±±²±信息指数为 s1uut o平均 ‘¨¬遗传多
样性k Η≥l为 s1tvwk表 vl ∀栎属植物的核遗传多样性
水平在长命的木本植物中是最高的 o平均杂合度
k Ηεl为 s1t{y o显著高于其它树种kŽµ¨°¨ µ ετ αλqo
t||t ~t||vl ∀ ¨ ≤²µµ¨ 等kt||zl用 • „°⁄对无柄栎 ut
个群体的遗传多样性研究表明 o无柄栎群体内的平
均遗传多样性k Η≥ l和总遗传多样性k Η× l分别为
s1uvv和 s1uv| ∀ Šµ¨ ©¨kt||{l用 • „°⁄技术对无柄栎
的 | 株优树 t|v 个子代个体的研究表明 oΗ≥ 为
s1u|{ o Η× 为 s1wsy ∀与之相比 o蒙古栎的遗传多样
性要低于欧洲栎的研究结果 oΗ≥ 和 Η× 分别为 s1tvw
和 s1twx o这可能由于现存蒙古栎林多为次生林 o长期受人为因素干扰 o萌生起源多 o甚至为多代萌生林
k于顺利等 ousssl ∀无性繁殖也能影响片段化的遗传效应 o由于是无性繁殖体 o在各无性繁殖世代个体
间的基因型基本一致 o降低了遗传变异程度 o使得群体内的遗传多样性大大降低 ∀本研究表明蒙古栎天
然群体遗传多样性偏低 o与其天然群体受叠代破坏 !存在繁殖群体的繁殖瓶颈效应 !现存林分基本上为
次生林等有很大关系 ∀
w个群体特异带 !群体间共有带数的不同k表 ul o说明不同的环境选择压以及各群体等位基因频率
分化有差异 ∀蒙古栎群体k Πl平均为 yz1tz h o东灵山辽东栎群体 Π为 yz1y h ∀ Š¨ µ√¨ µ¤kusssl用 u对
„ƒ°引物对夏栎和无柄栎的研究表明 o种内扩增的多态带比率为 xw h ∗ xy h o种间扩增的多态带比率
为 x{ h ∀在检测到的 vwy个多态带中 o东灵山辽东栎有 {条带表现为种特异带 o占多态带的 u1v h o说明
这 u个近缘种的相似性较高 ∀东灵山群体地处蒙古栎 !辽东栎的交界处 o是典型蒙古栎群体和辽东栎群
体的中间类型k恽锐 ot||{l o胡志昂kt||yl认为蒙古栎 !辽东栎从形态 !生态上虽有区别 o但不是截然分
明的 u个物种 ∀关于蒙古栎 !辽东栎种间关系研究 o尚需进一步扩大取样范围深入研究 ∀
312 遗传结构与基因流
栎属植物为风媒异交植物 o靠重力 !风力等传播种子 o花粉的长距离传播和后代有限的向外扩展能
力 o对形成群体遗传结构起着十分关键的作用 o并与基因流的强度密切相关 ∀ „ƒ°标记测得蒙古栎遗
传多样性主要存在于群体内 o群体间占 z1z h ov个蒙古栎群体间基因流 Ν° 为 x1|| o说明蒙古栎不同群
体间有一定的基因交流 o但不同群体地域上跨越了几个省区 o地理隔离大 o群体间存在一定程度的遗传
分化k Γστ为 s1szzl ~另一方面 o蒙古栎是生长于演替中后期群落中的种 o适于在中生条件下生长k陈大
珂 ot|{ul o在分布类型上属于北方狭域类型k刘茂松 ot|||l o所以群体间分化作用比其它演替早期的物
种要低 ∀ ‘¨¬的遗传多样性分析方法与分子方差分析k„’∂ „l得出的研究结果一致 o群体内遗传变异
大于群体间遗传变异 o自然群体间的遗传距离有随地理距离跨度增加而递增的趋势 ∀
313 遗传多样性保护
了解物种遗传变异的空间分布格局对于制定科学的保护策略具有重要作用 ∀蒙古栎群体内遗传多
样性较高 o群体间遗传多样性较低 ∀从群体特异带分布来看 o各群体都检测到程度相近的特异带 o但所
占比例并不大ku1vt h ∗ v1wz h l o群体间共有带比例相对较大ktt1{x h ∗ wt1|t h l o说明每个群体有一
定的独特性 o可为基因资源的保护和利用提供依据 ∀在就地保护时尽可能在蒙古栎自然分布范围内均
匀布点划分保护区域 o以利于保护群体的遗传特异性 ~进行易地保护时应从同一天然群体内选择环境异
质性差异较大的地段尽可能多地保存个体 o以达到基因资源保护的目的 ∀有关中国蒙古栎遗传多样性
分布中心的确定尚需扩大取样群体的数量和规模深入开展研究 ∀
xv 第 x期 李文英等 }蒙古栎天然群体遗传多样性的 „ƒ°分析
参 考 文 献
陈大珂 o周晓峰 o赵惠勋等 q天然次生林四个类型的结构 !功能 !演替 q东北林业大学学报 ot|{u okul }t p t|
胡志昂 o张亚萍k主编l q中国动植物的遗传多样性 q杭州 }浙江科学技术出版社 ot||y }txx p tx|
李文英 o顾万春 q蒙古栎天然群体等位酶遗传多样性研究 q林业科学研究 oussv otykwl }uy| p uzy
刘茂松 o刘必恭 q中国壳斗科的分布格局类型分析 q南京林业大学学报 ot||| ouvkxl }t{ p uu
马恩伟 q内蒙古植物志k新版第二册l }栎属 q呼和浩特 }内蒙古人民出版社 ot||s }tst p tsu
唐宇丹 o张会金 q辽东栎与蒙古栎形态特征的比较研究 q植物引种驯化集刊 ot||| }yy p zv
王良民 q我国落叶栎的聚类分析和核型分析 q植物研究 ot|{y oyktl }xx p y|
吴征镒主编 q中国植被 q北京 }科学出版社 ot|{s }uxx p uxz
夏 铭 o周晓峰 o赵士洞等 q天然蒙古栎群体遗传多样性的 • „°⁄分析 q林业科学 ousst ovzkxl }tuy p tvv
于顺利 o马克平 o陈灵芝等 q中国北方蒙古栎林起源和发展的初步探讨 q广西植物 ousss ouskul }tvt p tvz
恽 锐 o王洪新 o胡志昂等 q蒙古栎 !辽东栎的遗传分化 }从形态到 ⁄‘„ q植物学报 ot||{ owskttl }tsws p tswy
张金谈 o王萍莉 q中国栎属花粉形态研究 q植物分类学报 ot|{y ouwkxl }vyu p vy|
张军丽 o王峥峰 o王伯荪等 q鹤山人工林大叶相思种群遗传结构的 „ƒ°分析 q应用生态学报 ousst otukwl }w|t p w|x
郑万钧主编 q中国树木志k第 u卷l }栎属 q北京 }中国林业出版社 ot|{x }uvuw p uvx{
周浙昆 q中国栎属的起源演化及其扩散 q云南植物研究 ot||u otwkvl }uuz p uvy
邹喻苹等k编著l q系统与进化植物学中的分子标记 q北京 }科学出版社 ousst
„­°²±¨  ° o≤¤¶·¬ª¯¬²±² ° oƒ∏¶¤µ¬ƒ ετ αλqŠ¨ ±¨ ·¬¦§¬√¨ µ¶¬·¼¤±§¬·¶µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³·²«¼¥µ¬§³¨µ©²µ°¤±¦¨ ¬± °¤¬½¨ ¤¶µ¨√¨ ¤¯ §¨¥¼ • ƒ° ¤±§„ƒ° °¤µ®¨µ¶q
׫¨ ²µ„³³¯ Š¨ ±¨ ·ot||{ o|y }ut| p uuz
≤ µ¨√ µ¨¤  × o • °¨¬±ª·²± ⁄oƒµ¬ª¨µ¬²  ετ αλqŒ°³µ²√¨ § „ƒ° ¤±¤¯¼¶¬¶²©·µ¨¨¶³¨¦¬¨¶q≤¤± ƒ²µ• ¶¨ousss ovs }tys{ p tyty
≤ µ¨√ µ¨¤  × o≥·²µ°¨ ∂ oŒ√ ±¨¶… ετ αλq⁄¨ ±¶¨ ª¨ ±¨ ·¬¦ ¬¯±®¤ª¨ °¤³¶²©·«µ¨¨ Ποπυλυ󶳨¦¬¨¶k Πq δελτοιδσo Πq νιγρα o¤±§ Πq τριχηοχαρπαl ¥¤¶¨§²±
„ƒ° ¤±§ °¬¦µ²¶¤·¨¯ ¬¯·¨ °¤µ®¨µ¶qŠ¨ ±¨ ·¬¦¶ousst otx{kul }z{z p {s|
⁄²¼¯¨o⁄²¼¯¨q„ µ¤³¬§⁄‘„ ¬¶²¯¤·¬²± ³µ²¦¨§∏µ¨ ©²µ¶°¤¯¯ ∏´¤±·¬·¬¨¶²©©µ¨¶«¯¨ ¤©·¬¶¶∏¨ q°«¼·²¦«¨ °¬¦¤¯ …∏¯¯¨·¬±ot|{z ot| }tt p tx
∞¬¦²©©¯ µ¨o≥°²∏¶¨ ° ∞o ± ˜¤·µ²   q „±¤¯¼¶¬¶²© °²¯ ¦¨∏¯¤µ√¤µ¬¤±¦¨ ¬±©¨µµ¨§©µ²° ° ·¨µ¬¦§¬¶·¤±¦¨¶¤°²±ª ⁄‘„ «¤³¯²·¼³¨¶}¤³³¯¬¦¤·¬²± ·² «∏°¤±
°¬·²¦«²±§µ¬¤¯ ⁄‘„ µ¨¶·µ¬¦·¬²± §¤·¤q Š¨ ±¨ ·¬¦¶ot||u otvt }wz| p w|t
Šµ¨ ©¨ … ⁄o×µ¬¨¶·o≤∏¼³¨µ… ⁄ ετ αλq„¶¶¨¶¶°¨ ±·²©¬±·µ¤¶³¨¦¬©¬¦√¤µ¬¤·¬²±¬± «¤¯©2¶¬¥¶²© Θυερχυσ πετραεαk¤·ql ¬¨¥¯ q−³¯∏¶. ·µ¨¨q‹ µ¨¨§¬·¼ot||{ o
{t }u{w p u|s
‹¬¯¯  o •¬·¶¨¥¥²¨µ‹ o¤¥¨¤∏  ετ αλq°≤•2¥¤¶¨§©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª∏¶¬±ª „ƒ°¶¤¶¤·²²¯ ©²µ¶·∏§¼¬±ªª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³¶¬± Λαχτυχα ¶³³q׫¨ ²µ„³³¯
Š¨ ±¨ ·ot||y o|v }tusu p tuts
¨²±ª ‹² ¨¨o ‹¤¶«¬½∏°¨ ‹ o • ¤·¤±¤¥¨ „ ετ αλq • „°⁄ ∂¤µ¬¤·¬²± ¤°²±ª Θυερχυσ ¶³¨¦¬¨¶§¬¶·µ¬¥∏·¨§¬± ·¨°³¨µ¤·¨ §¨¦¬§∏²∏¶©²µ¨¶·¶²©·«¨ ‹¬µ∏½¨ ±
°²∏±·¤¬±¶qƒ²µ• ¶¨ot||z ou }tut p tuv
Žµ¨°¨ µ„ o°¨ ·¬·• q Š¨ ±¨ §¬√¨ µ¶¬·¼¬± ±¤·∏µ¤¯ ³²³∏¯¤·¬²± ²© ’¤®¶³¨¦¬¨¶q „±± ≥¦¬ƒ²µot||v oxs }t{y p usu
Žµ¨°¨ µ„ o°¨ ·¬·• o¤±¨ ·² „ ετ αλq‘∏¦¯ ¤¨µ¤±§²µª¤±¨ ¯¯¨ª¨ ±¨ §¬√¨ µ¶¬·¼¬± Θυερχυσροβυρ¤±§ Θq πετραεα qŒ±}∏¯¯ µ¨2≥·¤µ¦® ¬ª«¨ qŠ¨ ±¨ ·¬¦√¤µ¬¤·¬²±¬±
∞∏µ²³¨¤± ³²³∏¯¤·¬²± ²©©²µ¨¶··µ¨ ¶¨qƒµ¤±®∏µ·¤° ¤¬±}≥¤∏¨µ¤±§¨µ. ∂ µ¨¯¤ªot||t
¨ ≤²µµ¨ o⁄∏°²¯¬±2¯ ¤³¨ª∏¨ ≥ oŽµ¨°¨ µ„ q Š¨ ±¨ ·¬¦√¤µ¬¤·¬²± ¤·¤¯ ²¯½¼°¨¤±§ • „°⁄ ²¯¦¬¬± ¶¨¶¶¬¯¨ ²¤® Θυερχυσ πετραεα k¤·ql ¬¨¥¯ q}·«¨ µ²¯¨²©«¬¶·²µ¼
¤±§ª¨²ªµ¤³«¼q ²¯ ∞¦²¯ ot||z oy }xt| p xu|
¨µ¦¨·¨¤∏ ∞o≥½°¬§·„ ∞q ±×¤³³¬±ª º²²§³µ²§∏¦·¬²± ¤±§ º²²§ ∏´¤¯¬·¼·µ¤¬·¶¬± Πινυσ σψλϖεστρισ q∏¶¬±ª „ƒ° °¤µ®¨µ¶q ∞¬ª«·¨ ±¨·«Œ±·¨µ±¤ ≤²±ª
Š¨ ±¨ ·¬¦¶ot||{ otzyk{l }uws
‘¨¬ q „±¤¯¼¶¬¶²©ª¨ ±¨ §¬√¨ µ¶¬·¼¬± ¶∏¥§¬√¬§¨§³²³∏¯¤·¬²±¶q°µ²¦‘¤·¯ „¦¤§≥¦¬˜≥„ ot|zv oktul }vvut p vvuv
‘¨¬ q ²¯ ¦¨∏¯¤µ∞√²¯∏·¬²±¤µ¼ Š¨ ±¨ ·¬¦¶q ‘¨º ≠²µ®}≤²¯∏°¥¬¤ ˜±¬√ q°µ¨¶¶ot|{z }t{z p t|u
°²º¨¯¯ • o׫²°¤¶ • × …o…¤¬µ§∞ ετ αλq„±¤¯¼¶¬¶²© ∏´¤±·¬·¤·¬√¨·µ¤¬·¶¬± ¥¤µ¯¨ ¼ ¥¼·«¨ ∏¶¨ ²©¤°³¯¬©¬¨§©µ¤ª° ±¨·³²¯¼°²µ³«¬¶° q‹ µ¨¨§¬·¼ot||z oz| }w{
p x|
°²º¨¯¯ • o ²µª¤±·¨  o±§µ¨ ≤ q׫¨ ¦²°³¤µ¬¶²±²© • ƒ° o• „°⁄o„ƒ° ¤±§≥≥• k°¬¦µ²¶¤·¨¯ ¬¯·¨l °¤µ®¨µ¶©²µª¨µ°³¯¤¶° ¤±¤¯¼¶¬¶q²¯ …µ¨ §¨ot||y ou }
uux p uv{
≥∏± ≤ ± o • ¤±ª÷ Žo≠²¶«¬°∏µ¤„ ετ αλq• ƒ° ¤±¤¯¼¶¬¶²©±∏¦¯ ¤¨µ⁄‘„¬±¦²°°²± º¬¯§µ¬¦¨ k Οq Ρυφιπογον Šµ¬©©ql ¤±§¦∏¯·¬√¤·¨§µ¬¦¨k Οq Σατιϖαl q
≥¦¬¨±·¬¤ „ªµ¬¦∏¯·∏µ¤≥¬±¬¦¤ot||z ovs kwl }vz p ww
∂²¶° o ‹²ª¨µ¶• o …¯ ¨¨ §¨µ ετ αλq„ƒ° }¤ ±¨ º ·¨¦«±¬´∏¨ ©²µ⁄‘„ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ªq‘∏¦¯ ¬¨¦„¦¬§¶• ¶¨¨¤µ¦«ot||x ouvkutl }wwsz p wwtw
•µ¬ª«·q׫¨ ª¨ ±¨ ·¬¦¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¨ ²©³²³∏¯¤·¬²±q„±± ∞∏ª¨ ±ot|xt oktxl }vuv p vxw
¤¥¨¤∏  o ∂²¶° q≥¨ ¯¨ ¦·¬√¨µ¨¶·µ¬¦·¬²± ©µ¤ª°¨ ±·¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±}¤ ª¨ ±¨ µ¤¯ °¨ ·«²§©²µ⁄‘„ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ªq∞∏µ²³¨¤± °¤·¨±·„³³¯¬¦¤·¬²±o∞° xvw{x{„t o
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yv 林 业 科 学 v|卷