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Determination and Comparison of 10 Phenolic Compounds in Peach with Three Types of Flesh Color

桃3种颜色果肉中10种酚类物质的测定及比较



全 文 :园 艺 学 报 2014,41(2):319–328 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期:2013–08–16;修回日期:2014–01–10
基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-31);农业部种质资源保护项目(NB2013-2130135-07)
* 通信作者 Author for correspondence(E-mail:mly1008@aliyun.com)
桃 3 种颜色果肉中 10 种酚类物质的测定及比较
严 娟,蔡志翔,沈志军,张斌斌,钱 巍,俞明亮*
(江苏省农业科学院园艺研究所,南京 210014)
摘 要:优化了桃酚类物质分析的高效液相色谱法(HPLC),并测定和比较了红、黄、白色类型桃
果肉酚类物质组分。以甲醇(0.1% H3PO4)为提取剂,采用 C18 柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm),以甲醇(0.1%
H3PO4)和水(0.1% H3PO4)为流动相梯度冲洗,流速 1.0 mL · min-1,温度 30 ℃,检测波长 280 nm,适
于桃果肉酚类组分分析。在桃果肉中检出了绿原酸、新绿原酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、槲皮素、没
食子酸、阿魏酸、根皮苷和根皮素。不同肉色类型桃的主要酚类组成和含量存在差异,红肉桃主要成分
为表儿茶素、绿原酸、儿茶素和新绿原酸,黄肉桃为新绿原酸、绿原酸和儿茶素,白肉桃为新绿原酸、
儿茶素和芦丁;红肉桃含量最高的酚类为表儿茶素最高(78.91 ~ 673.90 mg · kg-1FW),黄肉桃为新绿原酸
(7.28 ~ 25.57 mg · kg-1FW),白肉桃中含量最高的酚类因品种而异,规律不明显,以新绿原酸(3.17 ~ 6.16
mg · kg-1FW)和儿茶素(4.21 ~ 14.55 mg · kg-1FW)较高;各酚类含量差异显著,对于绿原酸、新绿原酸、
儿茶素、表儿茶素和芦丁等桃果肉中的主要组分而言,红肉桃的含量均显著高于白肉和黄肉桃。同一肉
色不同品种间一些酚类物质的含量差异显著,可用于筛选桃特异种质。
关键词:桃;肉色;酚类物质;高效液相色谱法
中图分类号:S 662.1 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2014)02-0319-10

Determination and Comparison of 10 Phenolic Compounds in Peach with
Three Types of Flesh Color
YAN Juan,CAI Zhi-xiang,SHEN Zhi-jun,ZHANG Bin-bin,QIAN Wei,and YU Ming-liang*
(Institute of Horticulture,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Nanjing 210014,China)
Abstract:In this study,we optimized the High-performance liquid chromatography(HPLC)
determination system for phenolic compounds in peach,and determined and compared phenolic
compounds in three types of color peach flesh,i.e. blood,yellow and white. The phenolic compounds of
peach flesh were extracted with ethanol(0.1% H3PO4)via ZORBAX SB-C18 column(4.6 mm × 250 mm,
5 μm),by using ethanol(0.1% H3PO4)and water(0.1% H3PO4)as solvents at the flow rate of 1.0
mL · min-1 under the temperature of 30 and UV of 280 nm. Thi℃ s method was particularly suitable for the
determination of phenolic compounds of peach flesh. The results showed that chlorogenic acid,
neochlorogenic acid,catechin,epicatechin,rutin,quercetin,gallic acid,ferulic acid,phlorizin and phloretin
were detected in peach flesh. The main components and content of phenolic compounds were different in
the three types of flesh color peaches. In details,epicatechin,chlorogenic acid,catechin and

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neochlorogenic acid were the main components in blood flesh peach. Neochlorogenic acid,chlorogenic
acid and catechin were the first most components in yellow flesh peach,while neochlorogenic acid,
catechin and rutin in white flesh peach. Epicatechin and neochlorogenic acid were the highest phenolic
compounds in blood flesh peach and yellow flesh peach,respectively,with the content of 78.91–673.90
mg · kg-1FW and 7.28–25.57 mg · kg-1FW. However,the phenolic compounds in white flesh peach was
distinct among cultivars,and neochlorogenic acid(3.17–6.16 mg · kg-1FW)and catechin(4.21–14.55
mg · kg-1FW)contents were higher than the other components. In particular,the contents of phenolic
compounds varied significantly in different color flesh peaches. As the main phenolic compounds in peach
flesh,chlorogenic acid,neochlorogenic acid,catechin,epicatechin and rutin were significant higher in
blood flesh peach than that of white and yellow flesh peach. In addition,the content of some phenolic
compounds was significantly different among cultivars within the same color flesh,which may be
favorably used to screen specific germplasms in peach.
Key words:peach;flesh color;phenolic compounds;high-performance liquid chromatography

酚类物质是植物中含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素的天然次生代谢产物,直接影响果品
和蔬菜的色泽、口感、硬度、风味以及贮藏加工特性,特别是因其具有抗氧化功能而备受关注(Robards
et al.,1999;Vinson et al.,2001)。果实中富含酚类物质,从酚类角度对功能性果品的研究与开发
已成为热点及果树育种的重要方向(Karakurt et al.,2000;Kris-Etherton et al.,2002)。
研究表明桃果实的抗氧化能力与酚类物质紧密相关(Chang et al.,2000;Leontowicz et al.,2002;
Byrne et al.,2004;Celia et al.,2009),明确酚类物质的组成及含量是对其进行挖掘利用的重要方
向之一(Cevallos-Casals et al.,2006)。酚类物质分为酚酸类、黄酮醇、黄烷醇和花青素 4 类,其
中自然条件下游离状态的花青素极少见,主要以各种花色苷形式存在。对于有色蔬菜和果实而言,
研究者们多将其抗氧化能力归结于花色苷的贡献(Pascual-Teresa & Sanchez-Ballesta,2008)。但是对
桃的相关研究表明总酚的抗氧化能力显著超过花色苷(Gil et al.,2002;沈志军 等,2012),因此
除花色苷之外的其它酚类物质对抗氧化能力有着不容忽视的作用。
近年来,国内外桃研究者已开始从酚类角度进行以有益健康为目标的桃种质评价和创新研究,
包括桃品种总酚含量的测定及抗氧化能力评价(Gil et al.,2002;Byrne et al.,2004;Claudio et al.,
2008;沈志军 等,2012)、酚类物质种类及含量分析(Celia et al.,2009;Scordino et al.,2012)以
及不同发育时期(Andreotti et al.,2008;周君 等,2009)、栽培措施(Tavarini et al.,2011)和贮
藏条件(Asami et al.,2003)对酚类组分的影响等。对桃酚类组分分析方法包括薄层色谱法(TLC)、
高效液相色谱法(HPLC)和液质联用(HPLC–MS)。其中 HPLC 法应用最为广泛,但是还存在一
些不足,如局限于少数酚类、各类型酚分别在不同的条件下测定、流动相毒性大和价格昂贵、流动
相组成及梯度洗脱条件复杂、检测时间长等(Chang et al.,2000;Andreotti et al.,2008;Claudio et al.,
2008;Scordino et al.,2012)。同时,已有的研究对桃酚类组分的分析均集中在黄肉桃和白肉桃资
源(Francisco et al.,2001;Gil et al.,2002;Claudio et al.,2008;Scordino et al.,2012),基于 HPLC
测定和比较红、黄、白 3 种果肉颜色桃酚类物质组分尚未见系统报道。
本研究中优化了桃果肉酚类物质测定的 HPLC 法,并比较分析了不同肉色桃酚类组成和含量差
异,旨在为从酚类组分的角度更好地理解桃不同肉色类型的异同,为桃种质的深入挖掘利用提供检
测方法的参考和数据材料的基础。
2 期 严 娟等:桃 3 种颜色果肉中 10 种酚类物质的测定及比较 321

1 材料与方法
1.1 材料
红果肉桃品种 5 个(‘半斤桃’、‘北京一线红’、‘红桃’,‘大红袍’、‘小红袍’),黄果肉桃 4
个(‘阿姆肯’、‘曙光’、‘早红宝石’、‘香金蟠’),白果肉桃 4 个(‘红清水’、‘千代姬’、‘早美’、
‘早红露’),均取自国家果树种质南京桃资源圃,按照常规栽培方法种植,统一田间管理。为尽量
保证不同试材间果实成熟度一致,按照牛景等(2006)的方法采集食用成熟期的果实。采集后的果
实进行随机分组(Cevallos-Casals et al.,2006),每组至少 5 个果,重复 3 组。果实洗净后用吸水
纸吸干,迅速刨皮(为了保持去皮厚度的均匀性,所有品种都是用统一的刨皮刀),果肉用液氮速
冻后置于–70 ℃冰箱备用。
1.2 试剂与设备
选择桃果实中已确定的绿原酸、新绿原酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、槲皮素和没食子酸(Paulson
et al.,1980;Bengoechea et al.,1997),以及其它果品中存在的阿魏酸、根皮苷和根皮素(Robards et
al.,1999)共 10 种酚类,标准品均购自 Sigma 公司。甲醇、磷酸、甲酸等试剂均为色谱纯。
Agilent 高效液相色谱系统:1100 系列,VWD 紫外检测器,Agilent ZORBAX SB-C18 色谱分析
柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。
1.3 测定桃酚类物质的 HPLC 方法的优化
1.3.1 标准溶液的配制
各标准品用两组提取剂溶解(为了保证液相系统稳定,一般选用流动相作为提取剂,因进行了
两组流动相的筛选,所以配制了两组标准溶液)。提取剂分别为甲醇(用 0.1% H3PO4 调节甲醇的
pH 值,体积比为 1︰999)和 80%甲醇水溶液(用 0.1% HCOOH 调节甲醇水溶液的 pH 值,体积比
为 1︰999)。以各提取剂溶解标准品制得浓度为 1 000、500、100、50、10、5、1、0.5、0.1、0.05、
0.01 mg · L-1 的标准溶液,–20 ℃保存备用。
1.3.2 色谱条件的确定
检测波长为 280 nm(Francisco et al.,2001)。对流动相种类及其配比进行筛选,通过采用浓度
梯度洗脱和改变柱温及调整流速的方法达到各物质完全分离的目的;进样量为 5 μL。
1.3.3 样品的制备
为了防止酚类物质损耗,酚类提取过程尽量快速和避光,选用一次超声浸提(Senter et al.,1989);
另外,桃果肉中一些微量酚类物质只有在浓缩后才能检出,但是有些物质在浓缩的过程中会降解消
失(Bengoechea et al.,1997),所以为了能同时分离检测到多种酚类,本试验中采用较大的料液比
以提高浓度(果肉鲜质量与提取剂体积比为 1︰2),再结合一次浸提的方法提取桃果肉酚类(Francisco
et al.,2001;周君 等,2009)。即称取桃果肉匀浆 1 g,加入所筛选的提取剂甲醇(0.1% H3PO4)2 mL,
避光超声波提取 10 min,4 ℃下 10 000 r · min-1 离心 5 min,取上清液经 0.22 mm 有机滤头过滤后进
色谱柱。
1.3.4 标准曲线绘制及方法评价
在确定的色谱条件下,分别将不同浓度的酚类标准溶液进样分析,根据峰面积与标准物质的含
量关系进行线性回归。对线性范围、最低检出限、回收率和精密度进行测定。取各酚类标准品溶液
0.5 mL 加入到 0.5 g 桃果肉匀浆样品中,进行提取和 HPLC 测定,重复 6 次,根据结果计算加标回
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收率和相对标准偏差。取各标准品溶液逐级稀释,进样测定,当信噪比等于 3 时所对应的标准溶液
的质量浓度为最低检出限。
1.4 HPLC 法测定桃果肉酚类组分
将制备好的桃样品按上述筛选确立的 HPLC 检测条件进行测定,单位为 mg · kg-1FW。
2 结果与分析
2.1 测定桃酚类物质的 HPLC 方法的确定
2.1.1 流动相的选择
桃酚类的 HPLC 测定多采用不同浓度不同配比的乙腈、甲醇和水为流动相,流动相的 pH 值通
过甲酸或磷酸来调节。本试验中先选用 5%甲醇水溶液(用 0.1% HCOOH 调节 pH)和 80%甲醇水
溶液(用 0.1% HCOOH 调节 pH)作为流动相,检测时间长达 75 min,分离效果不理想,仅能同时
分离出 6 种酚类。后改用甲醇(0.1% H3PO4)和水(0.1% H3PO4)作为流动相,适当设定高比例的
水(0.1% H3PO4),缩短检测时间,采用浓度梯度洗脱,慢慢加大甲醇(0.1% H3PO4)的比例,可使
各物质达到有效分离。
2.1.2 流速对分离度的影响
试验设 0.5、0.8、1.0 mL · min-1 3 个流速,发现 1.0 mL · min-1 出峰效果好。
2.1.3 温度对分离度的影响
设定了 20、25、30、35 和 40 ℃ 5 个柱温。柱温 30 ℃以上时分离度均能达到要求。考虑到柱
温太高可能会对酚类物质和色谱柱造成损耗,因此确定柱温为 30 ℃。
2.1.4 HPLC 法检测桃酚类物质条件的确定
根据以上试验确定了酚类物质的 HPLC 条件:进样量 5 μL;流动相 A 为甲醇(0.1% H3PO4),
流动相 B 为水(0.1% H3PO4);流速 1.0 mL · min-1;温度 30 ℃;时间 35 min;检测波长 280 nm;
梯度冲洗:95% ~ 29% B,0 ~ 22 min;29% ~ 95% B,22 ~ 30 min;95% B,30 ~ 35 min。在此条件
下得到了 10 种酚类混合标准溶液色谱图(图 1,A)和桃样品图(图 2,B),分离效果好,在桃样
品中共分离出约 23 个明显的物质峰。整个样品检测过程只需 25 min,延长至 35 min,可让机器回
到原初检测平衡状态,利于下一个样品的检测。
2.1.5 HPLC 检测方法的评价
线性回归方程、相关系数、线性范围、相对标准偏差、最低检出限和回收率的结果见表 1。在
相应的线性范围内,各种酚类线性关系好,决定系数均达 0.9999 以上,相对标准差(RSD)在 0.45% ~
2.13%,回收率为 92% ~ 106%,精密度较高,结果准确。
2.2 桃果肉中酚类物质组成及含量分析
2.2.1 桃果肉酚类物质的构成评价
桃果肉酚类物质 HPLC 分析结果见表 2。本试验所试 10 种酚类组分中,有的组分如没食子酸、
表儿茶素、槲皮素和根皮素在部分品种中未检出。各酚类含量区间分别为:没食子酸 0.41 ~ 1.36
mg · kg-1FW、新绿原酸 3.17 ~ 65.98 mg · kg-1FW、儿茶素 4.21 ~ 74.25 mg · kg-1FW、绿原酸 2.17 ~ 240.6
mg · kg-1FW、表儿茶素 1.89 ~ 637.9 mg · kg-1FW、阿魏酸 0.98 ~ 1.84 mg · kg-1FW、芦丁 0.27 ~ 21.38
mg · kg-1FW、根皮苷 1.72 ~ 4.88 mg · kg-1FW、槲皮素 2.29 ~ 9.31 mg · kg-1FW、根皮素 1.38 ~ 1.64
mg · kg-1FW。
2 期 严 娟等:桃 3 种颜色果肉中 10 种酚类物质的测定及比较 323

由该 10 种酚类检测结果可见,桃果肉中酚类物质构成主要为绿原酸、新绿原酸、儿茶素、表儿
茶素,其次为芦丁、槲皮素和根皮苷,另外还存在微量的没食子酸、阿魏酸和根皮素。


图 1 酚类物质混合标准溶液(A)和‘半斤桃’果肉样品(B)中酚类物质的 HPLC 图
各标品浓度为 100 mg · L-1。1:没食子酸;2:新绿原酸;3:儿茶素;4:绿原酸;5:表儿茶素;6:阿魏酸;
7:芦丁;8:根皮苷;9:槲皮素;10:根皮素。
Fig. 1 Chromatogram of standard mixture(A)and sample solution extracted from‘Banjintao’peach flesh(B)
Concentration is 100 mg · L-1(A). 1:Gallic acid;2:Neochlorogenic acid;3:Catechin;4:Chlorogenic acid;
5:Epicatechin;6:Ferulic acid;7:Rutin;8:Phlorizin;9:Quercetin;10:Phloretin.


表 1 标准曲线回归方程和方法评价结果
Table 1 Logistic equation and evaluation results of the method
酚类物质
Phenolic compounds
回归方程
Logistic equation
决定系数
R2
线性范围/
(mg · L-1)
Linear range
相对标准差/%
RSD
检出限/
(mg · L-1)
LOD
回收率/%
Recovery
没食子酸 Gallic acid y = 23.0693x–1.0062 0.99996 0.05 ~ 500 2.06 0.01 97
新绿原酸
Neochlorogenic acid
y = 9.1833x + 0.4870 0.99992 0.25 ~ 500 0.68 0.05 104
儿茶素 Catechin y = 4.3848x–0.2013 0.99999 0.50 ~ 500 2.13 0.25 94
绿原酸 Chlorogenic acid y = 9.8774x + 0.7648 0.99998 0.25 ~ 500 1.04 0.05 92
表儿茶素 Epicatechin y = 4.9874x + 0.6666 0.99996 0.50 ~ 500 1.09 0.25 106
阿魏酸 Ferulic acid y = 18.9783x–1.2543 0.99993 0.25 ~ 500 0.45 0.25 93
芦丁 Rutin y = 4.5011x + 0.2461 0.99997 0.25 ~ 500 0.62 0.05 95
根皮苷 Phlorizin y = 15.7656x + 1.8445 0.99996 0.25 ~ 500 0.69 0.10 95
槲皮素 Quercetin y = 6.2498x + 0.5489 0.99994 0.25 ~ 500 1.18 0.10 98
根皮素 Phloretin y = 24.0881x–1.1475 0.99991 0.50 ~ 500 1.67 0.05 94
324 园 艺 学 报 41 卷
表 2 桃果肉中酚类物质组成及含量
Table 2 Phenolic compounds in peach flesh (mg · kg-1FW)
肉色类型
Flesh color
品种名称
Cultivar
没食子酸
Gallic acid
新绿原酸
Neochlorogenic acid
儿茶素
Catechin
绿原酸
Chlorogenic acid
表儿茶素
Epicatechin
半斤桃 Banjintao 0.78 ± 0.22 AB 65.98 ± 3.63 A 74.25 ± 2.62 A 240.60 ± 6.39 A 637.90 ± 14.90 A
北京一线红
Beijing Yixianhong
0.75 ± 0.16 AB 59.46 ± 4.48 A 52.31 ± 3.45 B 153.23 ± 9.03 B 318.84 ± 16.06 B
红桃 Hongtao 0.61 ± 0.01 B 38.82 ± 0.28 B 56.26 ± 0.08 B 181.24 ± 5.93 B 156.41 ± 9.8 C
小红袍 Xiaohongpao 0.86 ± 0.23 AB 17.66 ± 1.76 CD 16.70 ± 0.22 C 35.33 ± 2.23 C 79.81 ± 8.45 D
红肉桃
Blood flesh
peach



大红袍 Dahongpao 1.36 ± 0.34 A 44.49 ± 2.01 AB 12.01 ± 1.05 C 45.57 ± 2.77 C 150.88 ± 10.1 C
阿姆肯 Armking – 25.57 ± 0.53 C 9.03 ± 0.19 C 19.09 ± 0.68 C 2.65 ± 0.27 E
曙光 Shuguang 0.41 ± 0.03 B 8.72 ± 1.22 D 8.57 ± 0.1 C 6.46 ± 0.94 D 2.33 ± 0.14 E
香金蟠 Xiangjinpan 0.68 ± 0.01 AB 7.28 ± 1.3 DE 5.45 ± 0.43 CD 4.93 ± 0.32 DE –
黄肉桃
Yellow flesh
peach



早红宝石
Zaohong Baoshi
– 9.35 ± 0.1 D 8.81 ± 0.04 C 5.82 ± 0.07 D 1.92 ± 0.04 E
千代姬 Qiandaiji – 6.16 ± 0.12 DE 4.34 ± 0.12 D 4.58 ± 0.12 DE –
早红露 Zaohonglu – 3.34 ± 0.14 E 4.21 ± 0.31 D 3.24 ± 0.21 E 2.06 ± 0.15 E
早美 Zaomei – 4.32 ± 0.09 E 4.75 ± 0.1 D 3.50 ± 0.07 DE 1.89 ± 0.05 E
白肉桃
White flesh
peach

红清水 Hongqingshui – 3.17 ± 0.13 E 14.55 ± 1.23 C 2.17 ± 0.11 E 2.38 ± 0.15 E
肉色类型
Flesh color
品种名称
Cultivars
阿魏酸
Ferulic acid
芦丁
Rutin
根皮苷
Phlorizin
槲皮素
Quercetin
根皮素
Phloretin
红肉桃 半斤桃 Banjintao 1.07 ± 0.07 B 19.47 ± 0.79 A 4.88 ± 0.41 A 7.73 ± 1.35 B 1.64 ± 0.80 A
Blood flesh
peach
北京一线红
Beijing Yixianhong
1.31 ± 0.12 B 19.39 ± 1.46 A 3.49 ± 0.20 AB 4.99 ± 0.26 C –
红桃 Hongtao 1.61 ± 0.03 AB 21.38 ± 0.15 A 4.23 ± 0.10 A 9.31 ± 0.30 A –
小红袍 Xiaohongpao 1.38 ± 0.11 B 4.03 ± 0.56 CD 3.40 ± 0.13 AB 3.28 ± 0.35 D –
大红袍 Dahongpao 2.01 ± 0.12 A 13.60 ± 1.23 B 4.51 ± 0.15 A – –
黄肉桃 阿姆肯 Armking 0.98 ± 0.06 B 2.74 ± 0.14 D 2.30 ± 0.06 BC 3.14 ± 0.03 D –
Yellow flesh 曙光 Shuguang 1.20 ± 0.02 B 4.01 ± 0.07 CD 3.10 ± 0.09 B 3.30 ± 0.09 D –
peach 香金蟠 Xiangjinpan 1.31 ± 0.05 B 10.85 ± 0.52 B 2.84 ± 0.15 B 6.84 ± 0.56 B –
早红宝石
Zaohong Baoshi
1.19 ± 0.08 B 3.93 ± 0.14 CD 2.26 ± 0.01 BC – –
白肉桃 千代姬 Qiandaiji 1.30 ± 0.04 B 4.25 ± 0.03 C 1.72 ± 0.05 C 2.90 ± 0.05 D 1.38 ± 0.03 A
White flesh 早红露 Zaohonglu 1.84 ± 0.03 A 12.44 ± 0.23 B 3.45 ± 0.12 AB 4.36 ± 0.15 C 1.38 ± 0.04 A
peach 早美 Zaomei 1.33 ± 0.08 B 5.55 ± 0.07 C 1.72 ± 0.05 C 10.10 ± 0.13 A –
红清水 Hongqingshui 1.59 ± 0.07 AB 0.27 ± 0.07 E 2.65 ± 0.19 B 2.29 ± 0.10 D 1.48 ± 0.25 A
注:–示未检出;同列不同大写字母表示差异极显著(P < 0.01)。
Note:–shows no detected;Different small letters within the same column indicate significant difference at P < 0.01 level.

2.2.2 不同肉色类型桃酚类物质组成及含量比较
不同肉色类型桃主要酚类物质组成有明显差异(表 2)。红肉桃中酚类组成主要为表儿茶素
(78.91 ~ 673.90 mg · kg-1FW)、绿原酸(35.33 ~ 240.60 mg · kg-1FW)、儿茶素(21.01 ~ 74.25
mg · kg-1FW)和新绿原酸(17.66 ~ 65.98 mg · kg-1FW),以表儿茶素含量最高;黄肉桃中酚类组成主
要为新绿原酸(7.28 ~ 25.57 mg · kg-1FW)、绿原酸(4.93 ~ 19.09 mg · kg-1FW)和儿茶素(5.45 ~ 9.03
mg · kg-1FW),以新绿原酸最高;白肉桃中各酚类组分含量接近,含量最高的酚类因品种差异较大,
没有明显规律,相对而言以新绿原酸(3.17 ~ 6.16 mg · kg-1FW),儿茶素(4.21 ~ 14.55 mg · kg-1FW)
和芦丁(0.27 ~ 12.44 mg · kg-1FW)较高。红肉桃品种的新绿原酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素和芦
丁等物质的含量均显著高于黄肉桃和白肉桃,其中表儿茶素和绿原酸是黄肉桃和白肉桃的几十到几
百倍;黄肉桃的新绿原酸显著高于白肉桃。

2 期 严 娟等:桃 3 种颜色果肉中 10 种酚类物质的测定及比较 325

2.2.3 同一肉色类型桃不同品种间酚类含量比较
由表 2 可见,同一肉色桃不同品种间一些酚类的含量也有显著差异。在红肉桃中,新绿原酸、
儿茶素、绿原酸、表儿茶素品种间差异显著,其中‘半斤桃’的儿茶素、绿原酸、表儿茶素含量都
显著高于其它品种,尤其是表儿茶素含量达到了 637.90 mg · kg-1FW;‘红桃’的槲皮素最高,为 9.31
mg · kg-1FW。在黄肉桃中,新绿原酸、绿原酸、芦丁和槲皮素品种间差异显著,表现为‘阿姆肯’
的新绿原酸和绿原酸均显著高于其它品种,分别为 25.57 和 19.09 mg · kg-1FW;‘香金蟠’的芦丁和
槲皮素含量突出,分别为 10.85 和 6.84 mg · kg-1FW。在白肉桃中,儿茶素、芦丁和槲皮素品种间差
异显著,表现为‘红清水’的儿茶素含量最高,为 14.55 mg · kg-1FW;‘早红露’的芦丁(12.44
mg · kg-1FW)显著高于其它品种;‘早美’的槲皮素含量高达 10.1 mg · kg-1FW,是供试品种中含量
最高的。
3 讨论
3.1 基于 HPLC 的桃果实酚类物质测定方法
HPLC 法一直是果品酚类组分分析最常用和可靠的方法(Robards et al.,1999;张晋芬 等,2007;
李学鹏 等,2008),其在桃上的应用多以高比例的乙腈(高毒)作为流动相之一(周君 等,2009;
Scordino et al.,2012);流动相配比复杂,多采用 3 种或 4 种流动相(Chang et al.,2000;Francisco
et al.,2001);梯度条件改变均较频繁冗长,检测时间多为 70 min 以上(Francisco et al.,2001;
Asami et al.,2003;Tavarini et al.,2011;Scordino et al.,2012)。针对目前 HPLC 法测定桃酚类物
质的不足之处,本研究重点从流动相组成、温度和流速等方面对其进行了优化。优化后的方法流动
相组成只有甲醇和水。一些研究也采用不同体积比的甲醇水溶液作为提取剂和流动相,但并没有考
虑到 pH 值和二者组成一致性的问题(Cheng & Crisosto,1995;Chang et al.,2000;Francisco et al.,
2001;Scordino et al.,2012)。酚类提取的酸碱条件不恰当,会引起酚类物质的氧化、聚合或者沉淀
析出(杜丽娟 等,2008),另外分析时样品溶剂和流动相的有机相最好一致,避免出现倒峰和杂峰,
因此本研究中以 0.1% H3PO4 调节提取剂和流动相的 pH 值,有效保护了样品溶液中的酚类物质,同
时分离出多种酸性酚和中性酚,避免了如一些研究需要分别对二者进行提取分离的情况(李学鹏 等,
2008)。
本试验优化后的方法梯度洗脱条件简单,检测时间仅为 25 min,同时可较好地分离和检出多种
酚类物质。10 种酚类标准品分离好,并且该 10 种酚类在桃果肉中都得到了检出。其中,绿原酸、
新绿原酸、儿茶素、表儿茶素为主要成分,其次为芦丁、槲皮素和根皮苷,另外还存在微量的没食
子酸、阿魏酸和根皮素。本方法操作简单,回收率为 92% ~ 106%,相对标准偏差(RSD)小于 2.13%,
稳定性良好,精密度高,适合桃酚类组分分析。该方法从桃样品中共分离出 20 多个物质峰,其它未
知峰有待进一步确定。
3.2 桃果肉酚类组分
对桃果肉酚类组分的研究始于 20 世纪 50、60 年代(Luh et al.,1967),目前从桃中分离鉴定出
约 25 种酚酸类和类黄酮类酚类物质及其各种同分异构体、衍生物和糖苷,前人研究表明桃果肉中的
主要酚类有绿原酸、新绿原酸、儿茶素和表儿茶素(Senter et al.,1989;Bengoechea et al.,1997;
Francisco et al.,2001)。本研究中对酚酸类和类黄酮两类酚类物质,即主要选择了桃中几种重要的
酚类和目前其它果品中普遍检测到的酚类做了测定;本研究中除分离到桃中已确定存在的绿原酸、
326 园 艺 学 报 41 卷
新绿原酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、槲皮素和没食子酸,还分离出了阿魏酸、根皮苷和根皮素。
目前研究表明苹果中存在根皮苷和根皮素(聂继云 等,2009),在其它果树中尚未见报道。本研究
结果表明桃部分品种中也存在这两种物质。因此,根皮苷和根皮素可能还存在于其它果树种类的果
实中。
大多数研究报道绿原酸是桃果肉中含量最丰富的酚类(Chang et al.,1990,2000;Bengoechea et
al.,1997;Francisco et al.,2001;Brandelli & Lopes,2005;周君 等,2009),但也有个别研究表
明表儿茶素含量高于绿原酸(Cheng & Crisosto,1995)。本研究结果显示不同肉色类型桃含量最丰
富的酚类成分各异,除了‘红桃’品种的表儿茶素与绿原酸含量接近以外,总体表现为红肉桃表儿
茶素的含量最高,黄肉桃新绿原酸含量最高,白肉桃的新绿原酸、儿茶素和芦丁含量相近。这可能
与品种和肉色类型不同有关,还需扩大品种数量进一步分析佐证。
3.3 桃酚类物质评价与种质资源挖掘利用
桃作为国际市场上的重要果品,开发功能性品种对促进鲜食和加工用桃品种的选育意义重大,
进行酚类物质组分研究可作为其切入点之一。国外对桃酚类组分及抗氧化功能性评价等方面已有较
多报道。特别是随着对红肉桃资源研究的逐渐深入,发现其含有大量酚类物质,抗氧化能力明显高
于白肉、黄肉桃品种(Byrne et al.,2004)。美国、意大利、西班牙、智利等国已开始重视富含有益
的酚类化合物的红肉桃品种选育(Gil et al.,2002;Cevallos-Casals et al.,2006;Desmond & Daniele,
2008)。中国学者也开始对红肉桃资源进行评价和挖掘,包括生物学特性观察(龚林忠 等,2008)、
分子标记与亲缘关系研究(章秋平 等,2008;陆苏瑀 等,2010),果实总酚含量及其抗氧化能力
评价(沈志军 等,2012)等。本研究结果明确了桃果肉中的主要酚类组成,并且发现桃中主要酚类
物质含量在红肉桃品种中均极显著高于白肉桃和黄肉桃,说明红肉桃品种作为当前主要育种目标之
一的重要性。同时,比较同一肉色不同品种间酚类组成及含量的差异,可以从中筛选表现特异的种
质,为后续种质利用和理论研究提供基础数据和材料。如红肉桃品种‘半斤桃’,黄肉桃品种‘香金
蟠’和白肉桃品种‘早美’等。
中国是桃的起源地,资源丰富,为了更有效地从酚类角度开展健康功能性桃品种选育工作,适
应市场对健康果品的需求,带动桃产业的良性发展,还需对种质资源和抗氧化组分等方面的基础理
论作更广泛的评价和更深入的研究。

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《中国蔬菜栽培学》(第 2 版)
《中国蔬菜栽培学》(第 2 版)于 2009 年 10 月由中国农业出版社出版发行。全书约 250 万字,分总论、各论、
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栽培的生理生态基础以及环境污染与蔬菜的关系等;各论篇较详细地介绍了根菜类、薯芋类、葱蒜类、白菜类、芥
菜类、甘蓝类、叶菜类、瓜类、茄果类、豆类、水生类、多年生类、芽苗菜以及食用菌类蔬菜的优良品种、栽培技
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