全 文 :园艺学报,2015,42 (10):1889–1898.
Acta Horticulturae Sinica
doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0092;http://www. ahs. ac. cn 1889
柑橘种质抗柑橘蒂腐病菌扩展能力的评价
周 娜 1,胡军华 1,*,姚廷山 1,王雪莲 1,2,王 娟 1,彭凤格 1,洪棋斌 1,
江 东 1
(1 西南大学柑橘研究所,国家柑橘工程技术研究中心,西南地区果树科学观测实验站,重庆 400712;2 西南大学园
艺园林学院,重庆 400715)
摘 要:采用柑橘离体叶片和果实室内人工接种柑橘蒂腐病菌的方法建立柑橘种质抗柑橘蒂腐病
菌扩展能力的评价方法,对不同柑橘种质进行抗扩展能力评价,并采用病情指数法、病斑平均直径法
和聚类分析方法对柑橘种质进行抗性分级。3 种分析方法均将 73 个柑橘种质划分为 5 类:高抗、抗病、
中抗、感病和高感,未发现免疫种质。柠檬和柚子类种质大多数为高抗品种,甜橙类和宽皮橘类易感
病。
关键词:柑橘;柑橘蒂腐病菌;抗扩展能力
中图分类号:S 666 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2015)10-1889-10
Evaluation of Anti-expansion Capacity of Different Citrus Germplasm
Against Diaporthe citri
ZHOU Na1,HU Jun-hua1,,YAO Ting-shan1,WANG Xue-lian1,2,WANG Juan1,PENG Feng-ge1,
HONG Qi-bin1,and JIANG Dong1
(1Citrus Research Institute,Southwest University,National Citrus Engineering Research Center,Scientific Observing and
Experimental Station of Fruit Tree Science,Southwest Region,Ministry of Agriculture,Chongqing 400712,China;2College
of Horticulture and Landscape Architecture,Southwest University,Chongqing 400715,China)
Abstract:To evaluate the anti-expansion capacity of different citrus germplasm against Diaporthe
citri. In order to evaluate the anti-expansion capacity of 73 citrus germplasm,this study selected the in
vitro citrus leaves and fruits to establish evaluation system. The resistance was evaluated with the methods
of disease system clustering analysis,average diameter of the speckle and disease index method. The 73
citrus varieties were grouped into five groups:High resistant,medium resistant,resistant,susceptible and
high susceptible varieties taken advantage of three analysis methods. Most of lemon and grapefruit
varieties were highly resistant,sweet orange and Citrus reticulate was susceptible to D. citri.
Key words:citrus;Diaporthe citri;anti-expansion capacity
柑橘砂皮病和柑橘褐色蒂腐病的致病菌是同一病原菌(Diaporthe citri),在田间表现为柑橘砂
皮病,在贮藏室表现为柑橘褐色蒂腐病。由该病菌引起的蒂腐病是一种严重危害柑橘嫩梢、嫩叶及
收稿日期:2015–05–13;修回日期:2015–08–14
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项项目(201203034,201303093);重庆市科技攻关计划项目(CSTC2012GG-YYJS0475);
国家科技支撑计划项目(2013BAD01B04-22)
* 通信作者 Author for correspondence(E-mail:hujunhua@cric.cn)
Zhou Na,Hu Jun-hua,Yao Ting-shan,Wang Xue-lian,Wang Juan,Peng Feng-ge,Hong Qi-bin,Jiang Dong.
Evaluation of anti-expansion capacity of different citrus germplasm against Diaporthe citri.
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果实的真菌病害,该病表现为在嫩枝、嫩叶和幼果上有褐色硬胶质小粒点,即柑橘砂皮病。植株主
干上表现为流胶、干枯;成熟果实上表现为褐色蒂腐症状,即柑橘褐色蒂腐病(Timmer et al.,1998;
Bushong & Timmer,2000;Mondal et al.,2007a;Chen et al.,2010;Jiang et al.,2012;Ko et al.,
2014;Udayanga et al.,2014)。D. citri 引起的柑橘蒂腐病在美国、韩国、泰国、日本均有发生(Mondal
et al.,2004;Huang et al.,2013),在中国,江西和广西的南丰蜜橘、福建的永春芦柑、赣南脐橙、
湖南麻阳和福建顺昌的柑橘上都有发生,并且发病面积逐年扩增。Huang 等(2013)将中国的蒂腐
病菌分为 3 个种,D. citri、D. citriasiana 和 D. citrichinensis(后两者是新发现的种),这 3 个种均能
造成果实中柱腐烂,其中仅 D. citri 能引起叶片黑变。
蒂腐病菌为弱寄生菌,具有潜伏特性(Mondal et al.,2007b),一旦大发生主要依靠化学药剂
防治,每年需喷洒杀菌剂 3 ~ 6 次。杀菌剂的持续使用易导致病原菌产生抗药性和农药残留,对人
类健康构成潜在威胁。建立准确可靠的种质资源抗病性评价方法是获得抗病种质资源和提高抗病育
种效率的重要途径。本研究中通过建立室内人工接种抗病性评价方法,对 73 个柑橘种质进行抗蒂腐
病菌评价,明确不同柑橘种质间的抗病性差异,为柑橘抗蒂腐病育种提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与处理
供试GLSP2-1、GLSP1-1和GLSP1-3菌株分离自蒂腐病发病严重的四川广安龙安柚的枝和叶上,
这 3 个菌株经形态学和分子生物学检测(ITS 引物测序)依次鉴定为 Diaporthe citri、Phomopsis sp.
和 Phomopsis sp.。CSXC 1 菌株分离自重庆长寿夏橙病叶上,经形态学和分子生物学(ITS 引物测序)
鉴定为 Diaporthe sp.。菌株均保存于西南大学柑橘研究所植保室。上述 4 种菌株接种于 PDA 培养基
上 25 ℃光照培养 7 d,置于 4 ℃冰箱保存备用。
2014 年 9—11 月,以重庆市北碚区歇马镇中国农业科学院柑桔研究所国家果树种质重庆柑橘圃
的温州蜜柑叶片和 73 个柑橘种质的果实为试材,其中大部分是重要的柑橘育种种质资源。选取刚转
绿的嫩叶和无病健康果实,清水冲洗后用 75%乙醇表面消毒 15 s,无菌水冲洗 3 次,置于托盘中保
湿备用。
叶片接种:采用穿刺接种法(刘弘 等,2011),设置无伤和在叶片正、反面针刺 1 针、10 针的
处理,在叶片正、反面无伤和伤口处接种直径 5 mm 的致病菌菌饼。
果实接种:参照韦洁玲等(2010)和林月莉等(2011)的方法,设置去皮(用打孔器刺破并去
除果皮,露出直径为 5 mm 的果肉区)、针刺 10 针、1 针和无伤 4 个处理,接种直径 5 mm 的致病菌
菌饼。
上述每个处理 60 个重复。以接种无菌 PDA 培养基作为对照。接种后的叶片和果实置于托盘内
25 ℃保湿培养,每隔 48 h 测量一次病斑直径。
运用 SPSS 20.0 软件对各处理病斑直径进行统计分析,采用 Tukey HSD 和邓肯氏新复极差法对
不同处理病斑直径进行差异显著性检验。
1.2 抗病性评价方法
1.2.1 病情指数法
参考《柑橘种质资源描述规范和数据标准》中柑橘疮痂病抗性标准(江东和龚桂芝,2006),
周 娜,胡军华,姚廷山,王雪莲,王 娟,彭凤格,洪棋斌,江 东.
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根据病斑占果实面积的比例分级,统计各个级别的病斑数,计算病情指数(DI)和抗性分级。病情
指数 = ∑(各级病斑数 × 相对级数值)/(最高发病级数 × 调查总病斑数)× 100。抗性分级标准,
免疫(I):DI = 0;高抗(HR):0 < DI ≤ 20;抗病(R):20 < DI ≤ 30;中抗(MR):30 < DI ≤
45;感病(S):45 < DI ≤ 60;高感(HS):DI > 60。
1.2.2 病斑平均直径法
参考李文杨等(2009)对尖孢炭疽菌抗性的评价方法,AD = ∑接种点病斑直径/接种点数。抗
性分级标准为免疫(I),AD = 0、高抗(HR),0 < AD ≤ 10、抗病(R),10 < AD ≤ 15、中抗(MR),
15 < AD ≤ 22.5、感病(S),22.5 < AD ≤ 35、高感(HS)AD > 35。
1.2.3 系统聚类分析法
参考陈红梅等(2012)对镰刀菌干腐病抗性评价分析的方法,依据平均病斑直径,采用 SPSS 20.0
软件对不同处理方法、聚类距离和聚类方法的组合进行数据分析,筛选出最合适的系统聚类分析方
法。
2 结果与分析
2.1 抗病性评价方法的建立
2.1.1 温州蜜柑接种 GLSP2-1菌株方法比较
GLSP2-1 菌株接种温州蜜柑叶片后,在整个观察期内对照和无伤接种不发病,其他处理发病程
度不同。6 d 时叶片正面较叶片反面接种发病严重;叶片正面和反面均是 10 针接种的病斑最大、发
病最严重,说明伤口大小影响叶片的发病程度(图 1,A)。
GLSP2-1 菌株接种温州蜜柑果实,整个观察期内,对照和无伤接种不发病,其余处理发病程度
不同。与对照和无伤接种相比较,发病果实提前变黄、失水、干枯,接菌部位先出现褐色点状病斑,
随后逐渐向外扩展,出现黄褐色病斑,最后呈深褐色,病健交界部位明显。去皮处理 2 d 时不发病,
随后病斑快速扩展;接种 6 d 时,去皮处理病斑最大。针刺 10 针处理比 1 针处理发病快,病斑大(图
1,B)。
图 1 GLSP2-1 菌株侵染温州蜜柑叶片或果实 6 d 时的发病特征
Fig. 1 The characteristics of satsuma mandarin leaves or fruits at 6 d post inoculated with GLSP2-1 strain
Zhou Na,Hu Jun-hua,Yao Ting-shan,Wang Xue-lian,Wang Juan,Peng Feng-ge,Hong Qi-bin,Jiang Dong.
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2.1.2 不同柑橘品种 10针穿刺接种 GLSP2-1菌株比较
在 8 个品种上采用 10 针处理方法接种 GLSP2-1 菌株,接种 6 d 后品种间病斑大小存在较大差异,
其中日南 1 号病斑最大,其次是早津温州,砂糖橘病斑最小(图 2)。
图 2 不同柑橘品种果实接种 GLSP2-1 菌株 6 d 时病斑平均直径比较
1:八月橘;2:砂糖橘;3:武隆酸橘;4:早津温州;5:日南 1 号;6:湘慈 43 号;7:砂柑;8:胜山伊予柑。
Fig. 2 Mean diameter of the lesions on fruits of difference citrus cultivars at 6 d post inoculation with GLSP2-1 strain
1:Bayueju;2:Shatangju;3:Wulong Suanju;4:Early Okitsu Satsuma;5:Nichinan 1;6:Xiangci 43;7:Shagan;8:Katsuyama Iyo Kan.
2.1.3 温州蜜柑 10针穿刺接种不同菌株比较
采用叶片正面 10 针和果实 10 针处理的方法在温州蜜柑上接种 GLSP2-1、GLSP1-1、GLSP1-3
和 CSXC1 菌株,对照在观察期内不发病;4 个致病菌株在叶片上均可产生褐色病斑;接种 2 d 时,
各菌株之间的差异充分显示,并且在 3 ~ 6 d 内表现稳定;GLSP1-3 菌株病斑最大,致病力最强;
GLSP1-1 菌株次之;CSXC1 和 GLSP2-1 最弱(图 3,A;表 1)。
果实接种 10 针,4 d 时各菌株致病力差异明显,6 d 时 GLSP1-3 和 GLSP2-1 的病斑大小无显著
差异,明显小于 CSXC1 病斑,但是显著大于 GLSP1-1 病斑(图 3,B;表 1)。
由此得出,采用离体柑橘果实或刚转绿叶片正面 10 针穿刺接种,25 ℃培养 6 d 时的病斑大小
可作为抗蒂腐病菌评价标准方法。
图 3 温州蜜柑叶片正面和果实 10 针接种 4 个菌株 6 d 时的发病特征
Fig. 3 The characteristics of satsuma mandarin leaves and fruits at 6 d post inoculated with four strains by picking ten times
周 娜,胡军华,姚廷山,王雪莲,王 娟,彭凤格,洪棋斌,江 东.
柑橘种质抗柑橘蒂腐病菌扩展能力的评价.
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表 1 温州蜜柑叶片和果实 10 针接种 4 个菌株病斑直径比较
Table 1 Comparison of average lesion diameter inoculated with four strains on satsuma mandarin leaves and fruits by picking ten times
不同时期病斑直径/cm Lesion diameter at different time 植物材料
Plant material 菌株 Stain 2 d 4 d 6 d
GLSP1-1 0.33 ± 0.0785 b 0.44 ± 0.0839 b 0.86 ± 0.0863 b
GLSP1-3 0.43 ± 0.1300 a 1.04 ± 0.1294 a 1.55 ± 0.1215 a
CSXC1 0.11 ± 0.0200 c 0.33 ± 0.0702 c 0.78 ± 0.0584 c
叶片 Leaf
GLSP2-1 0.16 ± 0.0418 c 0.30 ± 0.0500 c 0.73 ± 0.0725 c
果实 Fruit GLSP1-1 0.36 ± 0.0394 a 0.38 ± 0.0688 d 0.67 ± 0.0755 d
GLSP1-3 0.34 ± 0.0376 a 0.52 ± 0.0267 c 3.10 ± 0.2070 b
CSXC1 0.32 ± 0.0557 a 0.70 ± 0.0829 b 4.04 ± 0.1981 a
GLSP2-1 0.33 ± 0.0350 a 1.36 ± 0.1061 a 3.00 ± 0.0986 c
2.2 抗病性评价
试验结果(表 2)表明,73 个种质的果实接种 GLSP2-1 菌株 6 d 时,宽皮橘中大丰黄皮橘、不
知火、金诺橘、台湾椪柑、兴义大红袍和春见等发病严重、病斑较大,平均病斑直径 2.5 cm 以上,
而岩溪晚芦、苏红、十月橘、砂糖橘和金橘病斑较小,平均病斑直径小于 1 cm;柚子类中除琯溪蜜
柚、火焰葡萄柚、粉红汤姆逊葡萄柚和胡柚病斑较大之外,岭南砂田柚、通贤柚、强德勒柚、梁平
柚 1 号和龙安柚等病斑均小于 1 cm;粗柠檬的平均病斑直径 2.03 cm,其余柠檬平均病斑直径小于
1.5 cm;甜橙类中康贝尔夏橙、新会橙、路德红夏橙和塔罗科血橙等平均病斑直径大于 1 cm。
3 种评价方法均可将 73 份柑橘属种质划分为高抗、抗、中抗、感和高感 5 类(表 2)。当聚类
分析法采用病斑直径原始数值不转换、聚类距离采用欧式距离,聚类方法采用 Ward’s 法时,聚类效
果与接种结果吻合度最好。以欧式距离 3.2 作为最佳聚类分割点,将供试种质划分为 5 类,包括高
抗品种 18 个,抗病品种 17 个、中抗品种 14 个、感病品种 15 个、高感品种 9 个(图 4)。AD 法将
供试种质划分为高抗品种 18 个,抗病品种 17 个、中抗品种 14 个、感病品种 14 个、高感品种 10
个。病情指数法将供试种质划分为高抗品种 15 个,抗病品种 19 个、中抗品种 15 个、感病品种 15
个、高感品种 9 个。岭南砂田柚、通贤柚、强德勒柚、岩溪晚芦和梁平柚 1 号等为高抗品种,胡柚、
晚蜜 2 号、日南 1 号温州、兴义大红袍、春见和朱红等为高感品种。
除了路比血橙的划分结果不同(AD 法为高感,聚类分析法为感病)之外,AD 法和聚类分析法
对其余种质的划分结果相同。与 AD 法和聚类分析法对佛拉柠檬(高抗)、金橘(高抗)、汉源黄果
柑(高抗)、奥灵达夏橙(抗)、福橘(抗)、晚棱脐橙(抗)、哈姆林甜橙(中抗)划分结果不同,
病情指数法划分结果为:佛拉柠檬(抗)、金橘(抗)、汉源黄果柑(抗)、奥灵达夏橙(中抗)、福
橘(中抗)、晚棱脐橙(中抗)、哈姆林甜橙(感病)。
AD 法与聚类分析法结果较相似,高抗品种、抗病品种和中抗品种分别约占评价品种总数的
25%、21%和 14%。
表 2 柑橘种质对柑橘蒂腐病菌 GLSP2-1 菌株的抗病性反应
Table 2 Resistance response of citrus germplasms to D. citri GLSP2-1
抗病性反应 Resistance response 种
Species
种质
Germplasm
平均病斑
直径/cm
Mean lesion
病情指数
Disease
index
AD 法
AD method
聚类分析
Clustering tree
病情指数
Disease index
柚 Citrus grandis (L.) 岭南砂田柚 Lingnan Shatianyou 0.39 9.26 HR HR HR
Osbeck 通贤柚 Tongxianyou 0.47 11.11 HR HR HR
强德勒柚 Candler Pomelo 0.47 10.83 HR HR HR
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
岩溪晚芦 Yanxi Wanlu 0.49 12.56 HR HR HR
Zhou Na,Hu Jun-hua,Yao Ting-shan,Wang Xue-lian,Wang Juan,Peng Feng-ge,Hong Qi-bin,Jiang Dong.
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续表 1
抗病性反应 Resistance response 种
Species
种质
Germplasm
平均病斑
直径/cm
Mean lesion
病情指数
Disease
index
AD 法
AD method
聚类分析
Clustering tree
病情指数
Disease index
柚 Citrus grandis (L.) 梁平柚 1 号 Liangpingyou 1 0.55 10.81 HR HR HR
Osbeck 晚白柚 Wanbaiyou 0.66 16.53 HR HR HR
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
苏红(四川)
Suhong(Sichuan)
0.72 15.00 HR HR HR
柠檬 Citrus limon 蒙纳盖洛柠檬 Mengnagailuo 0.79 17.09 HR HR HR
(L.) Burm.f. 费诺柠檬 Fino 0.79 13.84 HR HR HR
酸橘 Citrus sunki
(Hayata)hort.ex
Tanaka
岑溪酸橘 Cenxi Suanju 0.80 16.78 HR HR HR
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
十月橘 Shiyueju 0.88 17.86 HR HR HR
柠檬 Citrus limon (L.) 费米耐劳 Femminello 0.88 17.26 HR HR HR
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
砂糖橘 Shatangju 0.90 17.46 HR HR HR
柚 Citrus grandis (L.)
Osbeck
龙安柚 Longanyou 0.94 17.06 HR HR HR
柠檬 Citrus limon 维拉佛兰卡柠檬 Villafranca 1.00 18.91 HR HR HR
(L.) Burm.f. 佛拉柠檬 Fola 0.96 20.13 HR HR R
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
金橘 Jinju 0.90 20.23 HR HR R
橘橙 Citrus tangor 汉源黄果柑
Hanyuan Huangguogan
0.93 20.31 HR HR R
橘柚 Citrus tangelo 诺瓦橘 Nova Mandarin 1.05 22.88 R R R
柠檬 Citrus limon
(L.) Burm.f.
尤力克柠檬 Eureka Lemon 1.05 24.07 R R R
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
八月橘 Bayueju 1.05 24.15 R R R
地中海橘
Citrus deliciosa Ten.
茶枝柑 Chazhigan 1.10 23.11 R R R
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
康贝尔夏橙
Campbell Valencia
1.19 23.70 R R R
岛仔 51 号甜橙 Daozi 51 1.19 22.99 R R R
五月红选系(51-13)
Wuyuehong Selection
1.20 23.70 R R R
伊予柑 Citrus iyo
hort.ex Tanaka
胜山伊予柑
Katsuyama Iyo Kan
1.21 24.89 R R R
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
红江橙
Gailiangcheng(Lianjiang)
1.28 28.44 R R R
酸橘 Citrus sunki
(Hayata)hort.ex
Tanaka
武隆酸橘 Wulong Suanju 1.29 28.07 R R R
广橘 Citrus nobilis
Loureiro
砂柑
Shagan
1.34 29.80 R R R
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
阿尔及尔夏橙
Algiers Valencia Orange
1.34 27.16 R R R
冰糖橙 Bingtangcheng 1.35 25.25 R R R
粗柠檬 Citrus
jambhiri Lush.
粗柠檬 Rough Lemon 1.37 29.29 R R R
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
奥林达夏橙(美)
Olinda Valencia Orange(USA)
1.35 34.05 R R MR
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
福橘 Fuju 1.44 30.30 R R MR
甜橙 Citrus sinensis 晚棱脐橙
Lane’S Late Navel Orange
1.48 32.93 R R MR
(L.) Osbeck 蜜奈夏橙 Midknight Valencia 1.56 32.28 MR MR MR
柚 Citrus grandis (L.)
Osbeck
琯溪蜜柚 Guanxi Miyou 1.63 32.28 MR MR MR
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
太田椪柑 Oota Ponkan 1.61 33.33 MR MR MR
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
奉节 95-1 脐橙
Fengjie 95-1 Navel Orange
1.65 35.08 MR MR MR
刘金刚夏橙 Liujingang Valencia 1.68 30.65 MR MR MR
周 娜,胡军华,姚廷山,王雪莲,王 娟,彭凤格,洪棋斌,江 东.
柑橘种质抗柑橘蒂腐病菌扩展能力的评价.
园艺学报,2015,42 (10):1889–1898. 1895
续表 1
抗病性反应 Resistance response 种
Species
种质
Germplasm
平均病斑
直径/cm
Mean lesion
病情指数
Disease
index
AD 法
AD method
聚类分析
Clustering tree
病情指数
Disease index
宽皮橘 Citrus unshiu
Macf./Citrus sinensis
Osbeck.
清见 Kiyomi Tangor 1.69 36.67 MR MR MR
葡萄柚 Citrus
paradis Macfad
火焰葡萄柚 Flame Grapefruit 1.90 32.28 MR MR MR
乳橘 Citrus kinokuni
hort.ex Tanaka
大果南丰 Daguo Nanfeng 1.96 41.04 MR MR MR
甜橙 Citrus sinensis 长叶橙 Changyecheng 1.97 41.92 MR MR MR
(L.) Osbeck 开县 72-1 Kaixian 72-1 2.01 44.93 MR MR MR
元江甜橙(新会橙)
Yuan Jiang Sweet Orange
2.01 40.17 MR MR MR
柠 檬 Citrus limon
(L.) Burm.f.
库脱狄肯柠檬 Kutuodiken 2.03 38.89 MR MR MR
乳橘 Citrus kinokuni
hort.ex Tanaka
纪州蜜橘 Kishu Mikan 2.07 40.33 MR MR MR
甜橙 Citrus sinensis 哈姆林甜橙 Hamlin 2.05 47.53 MR MR S
(L.) Osbeck 伏令夏橙 Valencia Nucellar 2.30 53.94 S S S
Citrus aurantium L.
(酸橙)/Citrus unshiu
Macf.(温州蜜柑)
湘慈 43 号 Xiangci 43 2.44 46.22 S S S
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
鹅蛋柑 8 号 Edangan 8 2.46 46.38 S S S
葡萄柚 Citrus
paradis Macfad
粉红汤姆逊葡萄柚
Pink Thompson Grapefruit
2.46 46.38 S S S
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
大丰黄皮橘 Huangpiju 2.50 49.81 S S S
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
锦橙(铜水 72-1)
Jincheng(Tongshui 72-1)
2.70 52.20 S S S
宽皮橘 Citrus
reticulata Blanco
不知火 Shiranui 2.71 48.15 S S S
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
路德红夏橙
Rhod Red Valencia Orange
2.84 51.61 S S S
锦橙北碚 447 Jincheng 447 2.90 53.65 S S S
宽皮橘 Citrus 金诺橘 Kinnow Mandarin 3.02 54.81 S S S
reticulata Blanco 台湾椪柑 Taiwan Ponkan 3.14 53.70 S S S
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
梨橙 2 号 Licheng 2 3.14 54.01 S S S
橘橙 Citrus tangor 少核默科特 W · Murcott 3.24 56.52 S S S
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
华盛顿脐橙
Washington Navel Orange
3.44 58.64 S S S
路比血橙 Lu Bi Blood 3.51 60.49 HS S S
温州蜜柑
Citrus unshiu Macf.
早津温州
Early Okitsu Satsuma
3.76 61.82 HS HS HS
甜橙 Citrus sinensis
(L.) Osbeck
塔罗科血橙 Tarocco 3.82 63.47 HS HS HS
克里曼丁 Citrus
clementina hort.ex.
Tanaka
克里曼丁 Clementine 3.98 60.00 HS HS HS
柚 Citrus grandis (L.)
Osbeck
胡柚 Huyou 4.01 65.02 HS HS HS
Citrus sinensis (L.)
Osb.(甜橙)/Citrus
unshiu Macf.(宽皮
橘)
晚蜜 2 号 Wanmi 2 4.32 69.55 HS HS HS
温州蜜柑
Citrus unshiu Macf.
日南 1 号温州 Nichinan 1 4.35 69.65 HS HS HS
宽皮橘 Citrus 兴义大红袍 Xingyi Dahongpao 4.71 71.93 HS HS HS
reticulata Blanco 春见 Harumi 4.82 76.47 HS HS HS
朱橘 Citrus erythrosa
Hort.ex Tan.
朱红 Zhuhong 5.10 76.51 HS HS HS
注:HR:高抗;R:抗;MR:中抗;S:感病;HS:高感。
Note:HR:Highly resistance;R:Resistance;MR:Moderate resistance;S:Susceptible;HS:Highly susceptible.
Zhou Na,Hu Jun-hua,Yao Ting-shan,Wang Xue-lian,Wang Juan,Peng Feng-ge,Hong Qi-bin,Jiang Dong.
Evaluation of anti-expansion capacity of different citrus germplasm against Diaporthe citri.
1896 Acta Horticulturae Sinica,2015,42 (10):1889–1898.
图 4 柑橘属 73 个种质对柑橘蒂腐病菌抗性的聚类分析
Fig. 4 Cluster analysis of seventy-three kind of citrus germplasm to D. citri
周 娜,胡军华,姚廷山,王雪莲,王 娟,彭凤格,洪棋斌,江 东.
柑橘种质抗柑橘蒂腐病菌扩展能力的评价.
园艺学报,2015,42 (10):1889–1898. 1897
3 讨论
Huang 等(2013)在盆栽柑橘的枝和叶上接种 D. citri 后枝条会产生流胶和干枯现象,叶片产生
褐色病斑,本研究中叶片发病症状与之一致。但是,利用盆栽柑橘喷洒孢子悬浮液接种大约需要 7 ~
10 d,用时较长,且在对种质资源评价过程中接菌量难以控制,全部使用盆栽苗评价需要的时间较
长,工作量非常大,对于极易流行的病害接菌控制比较困难。因此,本研究中采用方便获得的离体
柑橘叶片和果实,在室内通过不同处理进行接种,2 d 后,各菌株和品种之间的差异充分显示,3 ~ 6
d 内表现稳定。以完全展开的嫩叶、幼果作为接种材料进行抗病性评价,材料均一性较好,采用接
菌饼的方法,误差小、测量方便、用时较短,结果稳定可靠且操作简便,为柑橘种资资源的抗砂皮
病鉴定、抗源发掘、加快抗病育种进程提供技术方法。
本研究中采用 3 种分析方法对抗病性进行分级,供试的 73 份柑橘属种质可划分为高抗、抗、
中抗、感和高感等 5 类,未发现免疫种质。高抗种质有 18 种,包括柚子类中岭南砂田柚、通贤柚、
强德勒柚、梁平柚 1 号和龙安柚;柠檬中的蒙纳盖洛柠檬、费诺柠檬、费米耐劳、维拉佛兰卡柠檬
和佛拉柠檬 5 种;宽皮橘和杂交柑橘共 7 种。高感种质有 9 种,包括宽皮橘和杂交柑橘早津温州、
克里曼丁、晚蜜 2 号、日南 1 号温州、兴义大红袍、春见、朱红,塔罗科血橙(甜橙类)和胡柚(柚
子类)。据此,柚子类和柠檬类种质大部分为高抗品种,部分宽皮橘和杂交柑橘易受柑橘砂皮病菌
侵染。
Mondal 等(2004)认为所有的柑橘品种均易感染砂皮病,尤其是柠檬和柚子。然而,本研究中
的抗性评价结果显示:蒙纳盖洛柠檬、费诺柠檬和费米耐劳柠檬在 3 种分析方法中均划分为高抗品
种;AD 法和聚类分析法将佛拉柠檬划分为高抗品种,指数法将其划分为抗病品种;3 种分析方法将
尤力克柠檬、库脱狄肯柠檬和粗柠檬划分为中抗品种;火焰葡萄柚表现为中抗,粉红汤姆逊葡萄柚
表现为感病;这与 Mondal 等(2004)的研究结果部分一致。
在蒂腐病流行区域建议种植岭南砂田柚、通贤柚、岩溪晚芦、强德勒柚、砂糖橘、维拉佛兰卡
柠檬等高抗品种,同时减少早津温州、日南 1 号温州、兴义大红袍、朱红、塔罗科血橙和胡柚等高
感品种的种植面积,针对高感病种应加强砂皮病的监测和综合防控。今后需要进一步寻找抗砂皮病
相关基因,为抗性品种选育奠定基础。
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