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Identification and Genetic Diversity of Reciprocal Hybrids in Longan (Dimocarpus longan)by SSR

龙眼正反交后代的SSR鉴定及遗传多样性分析



全 文 :园艺学报,2015,42 (10):1899–1908.
Acta Horticulturae Sinica
doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0131;http://www. ahs. ac. cn 1899
龙眼正反交后代的SSR鉴定及遗传多样性分析
胡文舜 1,2,*,黄爱萍 2,3,*,姜 帆 1,2,蒋际谋 1,2,陈秀萍 1,2,郑少泉 1,2,**
(1福建省农业科学院果树研究所,福州 350013;2 福建省龙眼枇杷育种工程技术研究中心,福州 350013;3 福建省
农业科学院农业经济与科技信息研究所,福州 350003)
摘 要:以龙眼早熟优质品种‘石硖’与浓香型晚熟新品种‘香脆’的正、反交 F1 代共 124 株为试
材,利用 SSR 标记鉴定杂种真实性,结合高接后的始花年龄和果实香气性状对杂交群体进行遗传多样性
分析。结果表明:在 20 对龙眼基因组 SSR 引物与 50 对荔枝表达序列标签 SSR 引物中,筛选出双亲多态
性引物 9 对,多态性引物占比为 12.86%,其中 6 对引物可鉴定出 112 株‘石硖’ב香脆’杂交苗中的
110 株真杂种,真杂种比例为 98.21%;4 对引物可鉴定出 12 株‘香脆’ב石硖’杂交苗中的 11 株真杂
种,真杂种比例为 91.67%。UPGMA 聚类分析显示,121 株正、反交后代的遗传变异较大,可划分为 3
个大类 5 个亚类。正交与反交后代中,短始花年龄的植株(2.5 年生)比例为 31.58%和 28.57%,中等始
花年龄的植株(3.5 ~ 4.5 年生)比例为 68.42%和 57.14%,长始花年龄的植株(≥ 5.5 年)比例为 0 和 14.29%;
果实香气表现出无、淡、浓的广泛变异。
关键词:龙眼;正反杂交;SSR;杂种鉴定;遗传多样性
中图分类号:S 667.2 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2015)10-1899-10

Identification and Genetic Diversity of Reciprocal Hybrids in Longan
(Dimocarpus longan)by SSR
HU Wen-shun1,2,*,HUANG Ai-ping2,3,*,JIANG Fan1,2,JIANG Ji-mou1,2,CHEN Xiu-ping1,2,and ZHENG
Shao-quan1,2,**
(1Fruit Research Institute,Fujian Academy of Agricultrual Sciences,Fuzhou 350013,China;2Fujian Breeding Engineering
Technology Research Center for Longan & Loquat,Fuzhou 350013,China;3Information Institute of Agricultural Economy
and Scitechnological,Fujian Academy of Agricultural Sciences,Fuzhou 350003,China)
Abstract:The hybrid authenticity of 124 offsprings from the reciprocal cross between Shixia(a
early-maturing and high-quality cultivar)and Xiangcui(a novel late-maturing and full aroma type)was
detected using SSR markers,and the genetic diversity of top-grafting longan(Dimocarpus longan Lour.)
seedlings were analyzed by phenotypic traits at age first-bloom and fruit flavor. The results showed that 9
pairs of primers that generated polymorphic bands in parental lines were selected from 20 pairs of longan
genomic SSR and 50 pairs of litchi(Litchi chinensis Sonn.)EST-SSR,the percentage of polymorphic

收稿日期:2015–05–22;修回日期:2015–09–23
基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-33-05);农业部农业科研杰出人才及其创新团队项目(20120911);
农业部作物种质资源保护项目(2014NWB008);农业部热带作物种质资源保护项目(2014RZZY-04)
* 并列第一作者
** 通信作者 Author for correspondence(E-mail:zsq333555@163.com)
致谢:华南农业大学园艺学院刘成明教授提供龙眼 SSR 引物。
Hu Wen-shun,Huang Ai-ping,Jiang Fan,Jiang Ji-mou,Chen Xiu-ping,Zheng Shao-quan.
Identification and genetic diversity of reciprocal hybrids in longan(Dimocarpus longan)by SSR.
1900 Acta Horticulturae Sinica,2015,42 (10):1899–1908.
bands was 12.86%. One hundred and ten true hybrids were identified from 112 F1 offsprings of Shixia ×
Xiangcui by 6 pairs SSR primers,accounting for 98.21%. Eleven true hybrids was identified from 12
offsprings of Xiangcui × Shixia by 4 pairs SSR primers,accounting for 91.67%. The UPGMA based
dendrograms indicated that the genetic variation of 121 reciprocal hybrids was significant and these
offsprings could be classified into 3 groups and 5 subgroups. The rate of short first-bloom age(2.5 years
old) between direct and reciprocal cross were 31.58% and 28.57%,medium first-bloom age(3.5–4.5
years old)were 68.42% and 57.14%,long first-bloom age(≥ 5.5 years old)were 0 and 14.29%. The fruit
flavor traits varied widely and showed three types as‘absent’,‘weak’and‘strong’.
Key words:longan;reciprocal crosses;SSR;hybrid identification;genetic diversity

中国是龙眼(Dimocarpus longan Lour.)的原产地和最大生产国。但龙眼存在童期长、遗传杂合
度高、树体大等多年生果树特点,其杂交育种周期长、进展慢(郑少泉 等,2010),目前国内外已
报道选育的杂交品种仅‘冬宝 9 号’(郑少泉 等,2006)、‘高宝’(郑少泉 等,2008)、‘东
丰’(范妍 等,2012)、‘东良’(尹金华 等,2012)等 4 个。因此,需要扩大龙眼杂交后代群
体数量,并利用有效的方法进行早期杂种真实性鉴定及辅助选择,以降低育种成本,提高育种效率。
目前关于龙眼杂种后代真实性鉴定的研究报道较少,主要采用形态学标记法、同工酶法、DNA
标记法等。传统的形态学鉴定法具有一定的方便性,但鉴定周期长(童期一般 6 ~ 9 年或更长),工
作量大,经验要求高,目前大多作为辅助手段。同工酶是结构基因编码的直接产物,由于酶种类有
限,主要用于区分亲缘关系较远的材料,如 Mcconchie 等(1994)选用磷酸葡糖异构酶(phosphoglucose
isomerase,PGI)鉴定荔枝与龙眼的属间杂种。DNA 分子标记是遗传变异在 DNA 水平上的直接反
映,具有可靠性高、信息量大、检测迅速、操作方便等突出优点,已成为理想的快速鉴定杂种纯度
的方法之一,赵玉辉等(2008)利用 SRAP-PCR 分析,在以‘紫娘喜’荔枝为母本,‘石硖’龙眼
为父本的属间杂交组合中鉴定出 2 株真杂种苗;卢博彬等(2013)应用 RAPD 标记对龙眼‘凤梨
朵’ב大乌圆’杂交群体中的 230 个单株进行杂种真实性鉴定,确定 223 个单株为真杂种。
SSR标记根据其来源可分为基因组SSR(gSSR)和表达序列标签SSR(EST-SSR),具有高度的
重复性、相对简单的带型和共显性遗传模式,已成功应用于柑橘(韩国辉 等,2010;Wang et al.,
2013)、葡萄(樊秀彩 等,2012)、苹果(Gonai et al.,2006)、杏(刘梦培 等,2012)、桃(刘文 等,
2007)等多种果树的杂种真实性鉴定,但未见龙眼的杂种鉴定应用报道。本研究中对在成熟期和果
实大小、果实香气等性状存在明显差异的龙眼品种‘石硖’和‘香脆’进行正、反杂交,采用SSR
标记对获得的 124 株F1 后代进行杂种真实性鉴定,并探讨其遗传多样性,以期为龙眼重要经济性状
的遗传研究和新品种选育提供基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
2009 年 5 月,依据丰产、优质、香气浓郁的育种目标,选用中国主栽早熟龙眼品种‘石硖’(无
香气)与浓香型晚熟新品种‘香脆’(泰国主栽品种‘苗翘’的芽变优株)为亲本,进行人工授粉。
对父本花粉进行收集、干燥、保存,在母本花穗雌花始花期进行彻底去雄并套袋隔离,待雌花盛开
期授以父本花粉。2009 年 10 月采收杂交果实,剥取种子并播种于 20 cm × 35 cm 规格的营养袋(内
胡文舜,黄爱萍,姜 帆,蒋际谋,陈秀萍,郑少泉.
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园艺学报,2015,42 (10):1899–1908. 1901
装菜园土)中,共获得正交组合‘石硖’ב香脆’的幼苗 112 株,反交组合‘香脆’ב石硖’的
幼苗 12 株(反交组合坐果率极低,故杂交苗少)。
2011 年 4 月选取生长健壮(离地面 3 cm 处茎粗度 ≥ 0.6 cm)的正交组合幼苗 96 株、反交组
合幼苗 8 株,剪取接穗后进行多头高位嫁接缩短童期。砧木为 1998 年实生龙眼树,株行距 2 m × 3 m。
试验地点设在福建省农业科学院果树研究所龙眼育种园,为山坡地开成的梯田,田间管理水平一致。
2013 年 7 月合成 70 对 SSR 引物,其中 20 对龙眼基因组 SSR 引物由华南农业大学园艺学院刘
成明教授提供,50 对荔枝 EST-SSR 引物(GLE1-GLE50)参考孙清明等(2011)的文献合成。
1.2 SSR-PCR扩增
2013 年 8 月,采取亲本及 F1 实生苗的嫩叶,基因组 DNA 提取采用改良的 CTAB 法,DNA 质
量和浓度的检测采用 1%的琼脂糖电泳和微量紫外分光光度计(GENEQUANT,Eppendorf)。稀释
DNA 浓度至 50 ng · μL-1,–20 ℃保存。
PCR 扩增反应总体积为 10 μL,其中 PCR Master Mix 5 μL,10 μmol · L-1 正、反向 SSR 引物各
0.5 μL,模板 DNA 1 μL,ddH2O 3 μL,应用 ABI 9700 PCR system 进行扩增。反应程序为:95 ℃预
变性 5 min;94 ℃变性 45 s,52 ~ 55 ℃退火 30 s,72 ℃延伸 50 s,30 个循环;最后 72 ℃延伸 7 min。
扩增产物在 6%聚丙烯酰胺凝胶上恒压电泳(120 V 90 min),用 GeneGreen 核酸染料(北京天根生
化科技有限公司)染色 15 min,最后在 BIO-RAD 凝胶成像系统上拍照记录。
1.3 杂交后代的真实性鉴定
筛选在父母本间有明显特征性条带的多态性 SSR 引物,用于杂种后代真假鉴定。杂种扩增结果
中具有双亲特征条带的即为真杂种,只有母本特征带而无父本特征带的后代为假杂种或自交种(刘
昔辉 等,2012)。对于条带模糊或双亲特异位点缺失或出现新条带的植株样本,进行 PCR 重复验
证 3 次。
1.4 杂交后代SSR遗传多样性分析
根据亲本与后代扩增的 SSR 图谱,对扩增清晰且易于辨认的条带进行统计,在相同的迁移位置
上有带标记为“1”,无带标记为“0”,建立 0/1 矩阵。采用 NTSYS-pc2.10e 软件计算 Dice 遗传相
似系数,按 UPGMA(unweighted pairgroup method using arithmetic averages)方法进行聚类分析。
1.5 杂种群体部分表型性状观测
在龙眼开花期和果实成熟期,2012—2014 年对高接后的始花年龄和果实香气性状进行田间调
查,分析杂交群体的表型。果实果肉香气评价依据《龙眼种质资源描述规范和数据标准》(郑少泉 等,
2006),具体方法为,在果实成熟期,选取正常果实 10 粒,参照GB/T 12316-1990 感官分析方法“A”–
非“A”检验方法(李伟格 等,1991),请 3 ~ 5 名品尝员对每株样品进行品尝,感官判定香味的有
无和浓淡。要求参与鉴评的人员感官正常并具有相当的鉴评经验。
2 结果与分析
2.1 杂交后代及其亲本间多态性引物的筛选
20 对龙眼基因组 SSR 引物中双亲多态性引物 4 对,占 20.0%;50 对荔枝 EST-SSR 引物在亲本

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上有扩增条带的 40 对,其中多态性引物 5 对,占 12.5%。根据父本特征带的有无,筛选出 LY4、LY5、
LY14、GLE-3、GLE-26、GLE-47 共 6 对 SSR 引物用于‘石硖’ב香脆’组合的后代鉴定,LY14、
GLE-3、GLE-6、GLE-26 共 4 对 SSR 引物用于‘香脆’ב石硖’组合的后代鉴定(表 1)。

表 1 可在两个杂交组合亲本间产生特异位点的 SSR 引物序列
Table 1 Information of SSR markers with special bands between parents
引物序列(5′–3′)Primer sequence 杂交组合
Combination of
crosses
引物
Primer 正向 Forward 反向 Reverse
具父本特异带的株数
Number of the hybrids
with special bands of male
parent
真杂种率/%
Hybrid purity
LY4 CGTTTTATCTGGGTAGTT ATGTCAAGTAATGGTTCC 108 96.43
LY5 GTCTTGCTTTACGAGTAC GAGGATAGGTTGGCTTCT 52 46.43
LY14 TGGACCACAACCCTTATC TGCTGGCACTGCTCATCT 110 98.21
GLE-3 TTCGGCTGAAGAGGAATT GCCATCAAGCAAGAAGAG 64 57.14
石硖 × 香脆
Shixia × Xiangcui
GLE-26
GLE-47
ACTTGTGTTGCTTATCCTC
ACCTCTCTCTTTGGCTCTTT
AAACACAACAATGAAATACC
TTGATCCATTGCTCTCTCTT
106
59
94.64
52.68
香脆 × 石硖 LY14 TGGACCACAACCCTTATC TGCTGGCACTGCTCATCT 7 58.33
Xiangcui × Shixia GLE-3 TTCGGCTGAAGAGGAATT GCCATCAAGCAAGAAGAG 11 91.67
GLE-6 GATAGTGTGTAGGGCTAGTT CGGCACTAACTCATCTCATA 5 41.67
GLE-26 ACTTGTGTTGCTTATCCTC AAACACAACAATGAAATACC 11 91.67
注:石硖 × 香脆杂种后代 112 株;香脆 × 石硖杂种后代 12 株。
Note:One hundred and twelve F1 offsprings of Shixia × Xiangcui;Twelve F1 offsprings of Xiangcui × Shixia.

2.2 杂种真实性鉴定
应用选出的 6 对特异引物对 112 株‘石硖’ב香脆’杂种后代进行检测,其中引物 LY14 的鉴
定效率最高,110 株具有父本特异位点(图 1 显示部分结果),真杂种率达到 98.21%,;引物 LY4 和
GLE-26 扩增图谱中出现父本特异带的有 108 株和 106 株,真杂种率分别为 96.43%和 94.64%;引物
GLE-3 出现父本特异带的有 64 株,但在其检测的 112 个样中,有 34 个样本出现了双亲中没有的新
条带;GLE-47 和 LY5 杂种鉴定效率较低,分别为 52.68%和 46.43%。通过 6 对引物的相互验证,在
检测到的 110 株真杂种中除了 2 株(19 号、53 号)仅获得 LY14 的支持外,其余样本均得到至少 3
对引物的证实,这也说明这些 SSR 引物的鉴定结果可靠。






图 1 引物 LY14 对部分‘石硖’ב香脆’杂种苗的扩增结果
M:Marker;S:石硖;X:香脆;23–73:杂交 F1 实生苗;箭头表示亲本特异位点。
Fig. 1 Amplification of primer LY14 in F1 seedlings from‘Shixia’בXiangcui’
M:Marker;S:Shixia;X:Xiangcui;23–73:F1 seedlings;Arrows indicate specific bands of parent.


用 4 对特异引物对 12 株‘香脆’ב石硖’杂种苗进行扩增分析,11 株具有双亲互补带型或父
本特征带型,确认为真杂种,鉴定率为 91.67%(表 1)。其中,引物 GLE-3 和 GLE-26(图 2)鉴定
效率最高,均为 91.67%,同时在 11 个样本中扩增出父本特异带;引物 LY14 和 GLE-6 的杂种鉴定
效率较低,分别为 58.33%和 41.67%。检测出的 11 株真杂种,也均得到至少 3 对引物的验证。
胡文舜,黄爱萍,姜 帆,蒋际谋,陈秀萍,郑少泉.
龙眼正反交后代的 SSR 鉴定及遗传多样性分析.
园艺学报,2015,42 (10):1899–1908. 1903

图 2 引物 GLE-26 对 12 株‘香脆’ב石硖’杂种苗的扩增结果
M:Marker;S:石硖;X:香脆;113 ~ 124:杂交 F1 实生苗;箭头表示亲本特异位点。
Fig. 2 Amplification of primer GLE-6 in 12 seedlings from ‘Xiangcui’בShixia’
M:Marker;S:Shixia;X:Xiangcui;113–124:F1 seedlings;Arrows indicate specific bands from parents.


对鉴定后的所有 121 株真杂种进行了田间形态学观察,其在叶形、叶柄大小、枝条颜色等性状
特征方面表现出明显的父本特征或双亲共有特征;而另外 3 株(20 号、30 号和 118 号)疑似假杂种,
田间观察的形态特征与母本高度相符,结合其 SSR-PCR 扩增带型大多呈母本类型,可以初步判定为
自交杂种苗。
2.3 正、反交后代群体与亲本的聚类分析
综合 LY4、LY5、LY14、GLE-3、GLE-26、GLE-47、GLE-6 等 7 对 SSR 引物(表 1)对杂种后
代和亲本材料的 PCR 扩增结果,共获得 17 个位点,以此建立 0、1 矩阵,应用 NTSYSpc 2.20v 软件
得出 Dice 相似系数。两个亲本材料间遗传背景差异较大,相似系数仅为 0.300。排除 3 个疑似假杂
种,121 株杂种后代材料间的相似系数介于 0.220 ~ 1.000,其中 19 号与 31 号的遗传相似性最小,
为 0.220;102 号和 107 号、44 号和 121 号等 24 株材料遗传相似性最大,为 1.000。正交、反交后
代与‘石硖’的平均遗传相似系数均为 0.607,与‘香脆’的平均遗传相似系数分别为 0.707 和 0.723。
UPGMA 聚类分析(图 3)结果显示,在相似系数 0.588 处,可将 121 株杂种后代分为 3 类:第
Ⅰ类和亲本‘石硖’聚在一起,有 2 株,占 1.65%;第Ⅱ类和亲本‘香脆’聚在一起,有 116 株,
占 95.87%,在相似系数 0.672 处可进一步细分为群体数量相近的 3 个亚类;第Ⅲ类有 3 株,占 2.48%。
11 株反交组合的杂种后代分散在第Ⅱ类的 3 个亚类中,与正交组合的后代没有明显区分。上述表明,
两个组合的杂交后代产生了广泛的遗传变异,多样性丰富。
2.4 杂种后代始花年龄与果实香气性状多样性分析
大树高接的正、反交后代中各有 1 株(30 号和 118 号,20 号没有高接)为假杂种,即实际观测
的群体数量为‘石硖’ב香脆’后代 95 株、‘香脆’ב石硖’后代 7 株。与大田定植的杂种实
生苗相比,小苗大树高接后表现出植株树势旺、茎干粗和分支级数多的明显生长量优势。
2012 年部分植株开始开花结果。至 2014 年,‘石硖’ב香脆’后代 95 株全部结果,‘香
脆’ב石硖’后代有 1 株未见开花,杂种群体的始花年龄和果实香气性状多样性丰富。正交与反
交组合后代中短始花年龄(2.5 年生,即 2009 年 9 月播种开始至 2012 年 3 月出现花芽分化)的植
株分别占 31.58%和 28.57%,中等始花年龄(3.5 ~ 4.5 年生)的植株分别占 68.42%和 57.14%,长始
花年龄(≥ 5.5 年)的植株分别为 0 和 14.29%;同时,果实香气性状在后代群体中表现出香气无、
淡、浓的广泛变异,正交组合后代果香型植株占 45.95%(以鉴定的 74 株计),反交组合后代果香
型植株占 60.00%(以鉴定的 5 株计)。


Hu Wen-shun,Huang Ai-ping,Jiang Fan,Jiang Ji-mou,Chen Xiu-ping,Zheng Shao-quan.
Identification and genetic diversity of reciprocal hybrids in longan(Dimocarpus longan)by SSR.
1904 Acta Horticulturae Sinica,2015,42 (10):1899–1908.














































图 3 121 株杂种后代与亲本遗传关系的聚类图
S:石硖;X:香脆;A1 ~ A19、A21 ~ A29、A31 ~ A112:110 株正交后代;B113 ~ B117、B119 ~ B124:11 株反交后代。
Fig. 3 Dendrograms of parens and 121 offsprings
S:Shixia;X:Xiangcui;A1–A19,A21–A29,A31–A112:One hundred and ten offsprings of direct cross;
B113–B117,B119–B124:Eleven offsprings of reciprocal cross.
胡文舜,黄爱萍,姜 帆,蒋际谋,陈秀萍,郑少泉.
龙眼正反交后代的 SSR 鉴定及遗传多样性分析.
园艺学报,2015,42 (10):1899–1908. 1905
表 2 龙眼杂种后代始花年龄及果实香气的差异
Table 2 The differences of first-bloom age and fruit flavor in longan offsprings
石硖 × 香脆 Shixia × Xiangcui 香脆 × 石硖 Xiangcui × Shixia
年份
Year
始花株数
Number of
first-bloom
比率/%
Rate
果香型株数(鉴定总株数)
Number of the hybrids with fruit
aroma(Number of hybrids analysed)
始花株数
Number of
frist-bloom
比率/%
Rate
果香型株数(鉴定总株数)
Number of the hybrids with fruit
aroma(Number of hybrids analysed)
2012 30 31.58 16(30) 2 28.57 2(2)
2013 43 45.26 12(32) 2 28.57 1(2)
2014 22 23.16 6(12) 2 28.57 0(1)
3 讨论
3.1 龙眼SSR标记的开发应用
龙眼中常用的分子标记主要有 ISSR(朱建华 等,2013)、ScoT(陈虎 等,2010,2012)、
AFLP(Lin et al.,2005;彭宏祥 等,2008)、RAPD(卢博彬 等,2013)及 SRAP(赵玉辉 等,
2008;郭印山 等,2009)等。SSR 标记具有多态性高、共显性遗传、检测易等优点,但其引物开
发一般需要建立 DNA 文库或 cDNA 文库,步骤繁琐、工作量大、开发成本高,目前龙眼上仅见傅
嘉欣(2010)采用磁珠富集法开发了 48 对龙眼 SSR 引物。本研究中进行了荔枝(龙眼近缘属)EST-SSR
引物的通用性筛选,实验花费小,鉴定效率高。随着高通量测序技术的快速发展和测序成本的降低,
将会有越来越多的基因组或转录组测序信息产生,如华南农业大学刘成明教授课题组完成了‘裂叶
龙眼’的基因组 de novo 测序(私人通信)、作者所在课题组完成了龙荔(龙眼近缘种)不同发育
期果皮的转录组测序,利用这些数据搜索并开发龙眼 gSSR 或 EST-SSR 标记将是今后主流方向。
3.2 杂种后代的真实性鉴定
应用纯合显性标记,理论上只需一个即可鉴定出全部的真杂种,如本试验中筛选出的引物
GLE26 对‘石硖’ב香脆’组合的鉴定,除去两个假杂种、4 个‘假阴性’(虽然是真杂种,但
父本特异条带缺失),其余 106 株真杂种均获得证实,杂种鉴定效率为 94.64%。而选用杂合的显性
标记,在引物具有两条父本特异带时,杂种鉴定效率也可大大提高,如 LY4、LY14 分别鉴定出‘石
硖’ב香脆’组合 110株真杂种中的 108株、110株,GLE-3和GLE-26均全部鉴定出‘香脆’ב石
硖’组合的 11 株真杂种。最终从两个杂交组合 124 株杂交后代中鉴定出 121 株真杂种,除了 19 号
和 53 号外其余均得到至少 3 对引物的验证支持,说明 SSR 引物的鉴定结果可靠。
杂交后代即使被判定为真杂种,其扩增谱带也不一定是双亲条带之和,而会出现条带的缺失或
新增。条带的缺失可能是由于配子形成过程中染色体的交换及 DNA 分子碱基修饰引起的突变(房
经贵 等,2000),或某些杂种位点在和个别引物结合时受到干扰或抑制而无法显示出来(韩国辉 等,
2010)等原因造成的位点丢失。此外,乔燕春等(2010)在枇杷 RAPD 纯度鉴定中认为杂交后代出
现新带型的几率并不高,可直接判断其为真杂种。本试验中 GLE-3 引物的图谱有 34 个后代出现了
双亲都没有的新条带,作者通过多对引物亦证实了这些后代全部为真杂种。
3.3 龙眼杂交群体遗传多样性及其研究利用
具有优良性状的品种间杂交,能够通过基因重组打破不利基因间的连锁,或改善位点间的互作
关系而产生新的遗传效应(景士西,2000)。本试验中两个亲本材料的遗传差异大(相似系数仅 0.300),

Hu Wen-shun,Huang Ai-ping,Jiang Fan,Jiang Ji-mou,Chen Xiu-ping,Zheng Shao-quan.
Identification and genetic diversity of reciprocal hybrids in longan(Dimocarpus longan)by SSR.
1906 Acta Horticulturae Sinica,2015,42 (10):1899–1908.
‘石硖’是中国主栽优质品种,花期 5 月上中旬,具有丰产、早熟(福州地区 9 月上旬)、肉质爽脆
等特点,但果实小(单果质量 8.2 g)、无香气;‘香脆’为泰国热带型品种‘苗翘’(Biew Khiewd)
的芽变优株,花期 5 月上中旬,具有晚熟(福州地区 10 月中下旬)、果大(单果质量 14.0 g 以上)、
肉质嫩脆、香气浓郁等特点,但丰产性差。通过杂交,其杂种后代群体产生了显著的遗传变异,121
株杂种后代在遗传相似系数 0.558 处分为 3 个大类。已经鉴定获得的数据显示,该杂种后代群体在
成熟期、丰产性、单果质量、可溶性固形物含量、可溶性糖含量、风味、香气组分等性状上均存在
广泛分离。目前课题组已从中选育出兼具丰产、优质、香气浓郁优良性状的‘福早 1 号’、‘福早
2 号’和‘福早 4 号’等 3 个龙眼新品系,极大地改善了中国龙眼的鲜食品质。
性状的遗传研究是育种的重要基础(陈学森 等,2014)。黄爱萍等(2006,2011)的研究表明,
龙眼杂种后代果实大小、果肉厚度、可溶性固形物含量、种子大小、可食率和果肉黄酮含量属于数
量性状遗传,果肉质地属于质量性状遗传;Guo 等(2011,2012)研究表明龙眼单果质量、可溶性
固形物含量、种子质量、果皮质量、可食率和干周长等性状受主效 QTL 位点或多个 QTL 位点影响,
为典型多基因控制的数量性状。果实香气是目前国际市场上鲜食龙眼品质的重要衡量指标(黄金松
等,2010),但现阶段对龙眼果实香气的遗传研究尚为空白,今后将进一步利用本试验中 F1 代分离
群体开展分子图谱构建、性状遗传分析、QTL 定位和基因克隆等相关研究。

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