全 文 ：园 艺 学 报 2012，39（1）：119–126 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期：2011–06–07；修回日期：2011–12–20
基金项目：财政部公益性行业（农业）科研专项经费项目（200903020）；农业部‘948’重点滚动课题（2008-G3）
* 通信作者 Author for correspondence（E-mail：gaojp@cau.edu.cn）
月季 Rh-ADF1 基因在花瓣扩展中响应乙烯的表
达特性分析
陈 翔 1，田 佶 1，易根发 2，裴海霞 1，李 静 1，陈继玮 1，马 男 1，
左志锐 3，高俊平 1,*
（1 中国农业大学观赏园艺与园林系，北京 100193；2北京市昌平区园林绿化局，北京 102200；3江苏省花卉种质创
新工程技术研究中心，江苏张家港 215617）
摘 要：为探讨肌动蛋白解聚因子（actin depolymerizing factor，ADF）是否参与乙烯对月季花瓣细
胞扩展的调节，以切花月季‘Samantha’为试材，从花瓣中分离到响应乙烯的 ADF 基因，并将其命名为
Rh-ADF1，在 GenBank 中的登录号为 JN048105。推定的氨基酸序列分析表明，Rh-ADF1 的开放阅读框长
度为 423 bp，编码 140 个氨基酸。半定量 RT-PCR 分析结果表明，Rh-ADF1 在花朵的各个器官中均有表
达，在花瓣中略高于其他器官；该基因表达能够被乙烯处理强烈诱导升高，被乙烯作用抑制剂 1-MCP
（1-Methylcyclopropene）处理明显降低。在洋葱表皮细胞中进行的瞬时表达分析表明，Rh-ADF1 蛋白分
布在整个细胞中，主要与 actin 组成的微丝网络结合。据此推测，Rh-ADF1 基因在转录水平上参与乙烯对
花瓣扩展的调节，乙烯可能通过 Rh-ADF1 基因调控了花瓣细胞骨架的动态变化，进而影响花瓣细胞扩展
和形态变化。
关键词：月季；切花；花瓣扩展；乙烯；Rh-ADF1；表达调节；亚细胞定位
中图分类号：S 685.12 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2012）01-0119-08

Characterization of Rh-ADF1 in Ethylene-regulated Petal Expansion in
Roses
CHEN Xiang1，TIAN Ji1，YI Gen-fa2，PEI Hai-xia1，LI Jing1，CHEN Ji-wei1，MA Nan1，ZUO Zhi-rui3，
and GAO Jun-ping1,*
（1Department of Ornamental Horticulture and Landscape Architecture，China Agricultural University，Beijing 100193，
China；2Changping Municipal Bureau of Landscape and Forestry，Beijing 102200，China；3Engneering research center for
floriculture，Zhangjiagang，Jiangsu 215617，China）
Abstract：In the present work，we isolated an ADF gene（actin depolymerizing factor）from petals
of roses（Rosa hybrid‘Samantha’）and named it as Rh-ADF1 with accession NO. JN048105 and deposited
in GenBank datebase. The cDNA full length of Rh-ADF1 contains an open reading frame with 423 bp in
length，encoding a protein of 140 amino acids. Semi-quantitative RT-PCR analysis showed that expression
level of Rh-ADF1 was slightly higher in petals than other four floral organs，including sepals，gynoecia，
androecia，receptacles. The accumulation of Rh-ADF1 transcripts was strongly increased by ethylene in

120 园 艺 学 报 39 卷
petals，and was obviously suppressed by 1-MCP，an action inhibitor of ethylene. Transient expression of
GFP-Rh-ADF1 fusion gene in onion epidermal cells showed that Rh-ADF1 protein distributedubiquitously
in the cell，while it preferentially located on filament networks of actins. Together，our results suggested
that Rh-ADF1 may be involved in ethylene-regulated petal cell expansion at transcriptional level.
Key words：rose；cut flower；petal expansion；ethylene；Rh-ADF1；transcription regulation

肌动蛋白（actin）聚合/解聚的动态变化在细胞骨架重排方面发挥着重要作用（Wasteneys et al.，
2003），从而影响细胞的扩展（Bobkov et al.，2004；Hussey et al.，2006；Augustine et al.，2008）。
肌动蛋白解聚因子（actin depolymerizing factor，ADF）广泛存在于各种真核生物中（Smertenko et al.，
1998），主要参与调节肌动蛋白的聚合与解聚的平衡。目前已在拟南芥（Dong et al.，2001a，2001b）、
烟草（Chen et al.，2002）、小麦（Ouellet et al.，2001）、棉花（Li et al.，2010）、葡萄（Thomas &
Schiefelbein，2002）等植物中得到证明。ADF 基因能够受低温、伤害、生长素、茉莉酸等条件诱导。
在月季中，几乎所有的品种都对乙烯处理敏感（高俊平 等，1997；蔡蕾 等，2002；马男 等，
2005；Tan et al.，2006；薛璟祺 等，2011）。乙烯处理可抑制月季花瓣细胞伸长，甚至导致细胞畸
形（Ma et al.，2008），推测乙烯可能对与细胞扩展相关的细胞骨架动态变化具有重要影响。
为探讨 ADF 是否参与乙烯对月季花瓣细胞扩展的调节，本研究中以切花月季‘Samantha’为试
材，进行了研究。结果发现，乙烯可以诱导月季花瓣中 ADF 基因（Rh-ADF1）的表达，乙烯作用抑
制剂 1-MCP（1-methylcyclopropene）处理明显降低其表达。在洋葱表皮细胞中进行的瞬时表达分析
表明，Rh-ADF1 蛋白分布在整个细胞中，主要与 actin 组成的微丝网络结合。据此推测，Rh-ADF1
基因在转录水平上参与乙烯对花瓣扩展的调节，乙烯可能通过 Rh-ADF1 基因调控了花瓣细胞骨架的
动态变化，进而影响花瓣细胞扩展和形态变化。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验于 2009—2010 年在中国农业大学完成。供试材料切花月季‘Samantha’采自北京市十八里
店园艺场。切花于开花级数 2 级（Ma et al.，2005）时采收，采后插于自来水中，2 h 内运回实验室。
按照花枝长 25 cm，留 3 复叶的标准修剪。
乙烯和 1-MCP 处理：修剪后的花枝插于去离子水中进行处理。以密闭于不含乙烯和 1-MCP 气
体的 64 L 密封箱中的花枝为对照。乙烯处理浓度为 10 μL · L-1；1-MCP 浓度为 2 μL · L-1，分别处理
1、6、12 和 24 h。各时间点处理结束后，将花瓣取下，立即用液氮冷冻，存于–80 ℃冰箱备用。
瓶插室温度 23 ~ 25 ℃，相对湿度 30% ~ 40%，光强 40 µmol · m-2 · s-1，光/暗周期为 12 h/12 h。
1.2 月季花瓣大小和细胞形态观察
月季花瓣大小和细胞形态观察依照 Ma 等（2008）的方法进行。乙烯和 1-MCP 处理结束后随机
选取花朵由外向内第 2 层中的任一花瓣，用游标卡尺测量长度和宽度。每个处理测量 15 个样本。
在距离花瓣顶端 25%的位置选取 0.5 cm × 0.4 cm 大小的花瓣样本，FAA 固定，然后用酒精脱色。
在 Nikon IX-71 显微镜下观察，拍摄花瓣亚下表皮细胞图像。花瓣细胞的轮廓用 Photoshop 7.0 软件
描绘。ImageJ 软件统计 1 360 μm × 1 024 μm 的视野面积下花瓣亚下表皮细胞数。每个处理观察 15
个样本。
1 期 陈 翔等：月季 Rh-ADF1 基因在花瓣扩展中响应乙烯的表达特性分析 121

表 1 Rh-ADF1基因克隆所用引物
Table 1 Primers used to isolation of Rh-ADF1
引物名称 Primer name 引物序列 Primer sequence
ADF upper primer 5′-GAGGAGAAGCAAAAGCAAGT-3′
ADF lower primer 5′-CTGTCCTTTGAGCTTGCATA-3′
Rh-ADF GSP upper primer 5′-CTCCTGATACATCAAGGGTGA-3′
Rh-ADF GSP lower primer 5′-CTGTCCTTTG AGCTTGCATA-3′
1.3 月季 ADF 基因的分离
花瓣总 RNA 的提取采用 Hot borate 法（Wan & Wilkins，1994），反转录生成 cDNA 作为模板用
于 PCR 扩增。根据 GenBank 中公布的 ADF 基因家族的功能保守区域设计引物（表 1）。PCR 扩增条
件为：94 ℃预变性 5 min，94 ℃变性 30 s，53 ℃退火 30 s，72 ℃延伸 1 min，共 30 个循环。根据得
到的 cDNA 片段序列，分别设计 3′端引物和 5′端引物（表 1），按 Clontech 公司 SMART RACE cDNA
Amplification kit说明书进行 cDNA末端快速扩
增（RACE）。扩增产物采用 Axygen DNA 凝胶
回收试剂盒回收。插入 Promega 公司生产的
pGEM T-Easy vector，转化大肠杆菌 DH5，鉴
定阳性克隆后送北京三博远志生物技术有限公
司测序。测序结果利用 DNAMAN 5.2.2、NCBI
BLAST、MEGA 4.0 进行分析。
1.4 半定量 RT-PCR 检测
为选取合适的内标基因，参考之前的报道（Liu et al.，2008；Hinz et al.，2010），对月季中 5 个
Actin 和 4 个 Tublin 基因进行乙烯处理条件下的表达分析，结果表明其中 Actin5 的表达不受乙烯处
理的影响，因此选取 Actin5 作为内参基因。Rh-ADF1 表达检测引物：Upper：5′-TCTGGTATGGCTGT
GCACGATG-3′；Lower：5′-CTCAGATGGATCAGTTGCCTGC-3′。内标 Actin5 引物：Upper：5′-CCATGA
GACCACATACAATTCG-3′；Lower：5′-CAGCAGTAAGCCTACAAGGTCATA-3′。Rh-ADF1 的 PCR
扩增条件为：94 ℃预变性 5 min 后 29 个循环：94 ℃变性 30 s，59 ℃退火 30 s，72 ℃延伸 30 s。Actin5
的扩增条件为：94 ℃预变性 5 min 后 27 个循环：94 ℃变性 30 s，59 ℃退火 30 s，72 ℃延伸 30 s。
PCR 产物用 1.5%琼脂糖凝胶分离。每个时间点至少 3 个样本重复。每个样本均有 3 个以上生物学重复。
1.5 Rh-ADF1 的亚细胞定位
1.5.1 瞬时表达载体构建 根据目的基因 Rh-ADF1 序列设计引物对 GFP-Rh-ADF1 lower KpnⅠ：
5′-ACTGGTACCTTAGCTGGCACGGCTCTTAATAAC-3′/GFP-Rh-ADF1 upper NcoⅠ：5′-TATCCATGG
TCAAGGGCGAGGAGCT-3′；根据 GFP 基因的序列设计引物对 GFP-overlow：5′-GCTGCATTGGA
GGCCATCTTGTACAGCTCGTCCA-3′；GFP-overup：5′-GAGCTGTACAAGATGGCCAATGCAGCA
TCTGGT-3′，分别扩增 Rh-ADF1 基因和 GFP 基因开放阅读框（不包含终止子），产生的 PCR 回收
产物通过 overlapping PCR 扩增，得到 GFP-Rh-ADF1 融合基因。扩增产物回收纯化后连接到克隆载
体 pGM T-easy 上，测序验证后获得重组质粒，用 NcoⅠ/KpnⅠ进行双酶切，回收目的片段后，与经
用 NcoⅠ /KpnⅠ双酶切的 pRTL2 载体用 T4 连接酶进行连接，构建成瞬时表达载体 pRTL-
GFP-Rh-ADF1。获得的连接产物转化到 E. coli DH5α，经酶切和测序鉴定正确后，筛选阳性克隆并
提取质粒。
1.5.2 微粒子弹的制备 1 μg 的 pRTL2-GFP 和 pRTL-GFP-Rh-ADF1 重组质粒 DNA 分别与 8.34 μL
金粉悬液（60 mg · mL-1）、4 μL 亚精胺（0.1 mol · L-1，过滤灭菌）、8.34 μL CaCl2（2.5 mol · L-1）
混合制作成金粉悬浮液，振荡器上震荡 3 min，10 000 r · min-1 离心 15 s，收集金粉沉淀，重复 3 次
后，20 μL 无水乙醇悬浮金粉–DNA 混合物。
1.5.3 轰击受体材料 撕取幼嫩的洋葱表皮平放在 MS 固体培养基上，采用 PDS 1 000/He 型基因枪
（Bio-Rad）进行轰击。轰击后的洋葱表皮 25 ℃暗培养 24 h 后，在共聚焦显微镜（C1 Nikon）下观
察 GFP 的表达情况。
122 园 艺 学 报 39 卷
2 结果与分析
2.1 切花月季响应乙烯的花瓣表型变化分析
用乙烯和乙烯作用抑制剂 1-MCP 分别处理花朵，乙烯处理能够显著降低花瓣的宽度和长度，显
著减小花瓣上部细胞的面积，并导致细胞畸形；而 1-MCP 能够显著增加花瓣的长度，显著增大花瓣
上部细胞的面积（图 1）。该结果与本实验室前期研究结果（Ma et al.，2008）相一致，表明乙烯可
通过影响细胞的扩展来调控花瓣的大小和形状。


图 1 乙烯处理对月季切花花瓣大小（A）和花瓣细胞形态（B）的影响
Fig. 1 Effects of ethylene upon petal（A）and cell size（B）of cut rose flowers
2.2 切花月季 ADF 基因的克隆和序列分析
通过 PCR 扩增，从月季花瓣中获得了约为 200 bp 的 cDNA 片段。通过 BLAST 分析发现，该片
段编码的氨基酸序列与 ADF 类蛋白高度同源。在此基础上进行 RACE 反应，测序拼接后共得到长
度为 846 bp 的 cDNA 全长序列，将其命名为 Rh-ADF1，GenBank 登录号为 JN048105。
Rh-ADF1 包含 1 个 58 bp 的 5′非翻译区和 365 bp 的 3′非翻译区，其开放阅读框长度为 423 bp，
编码 1 个含 140 个氨基酸的蛋白质，推定的分子量为 15.99 kD，等电点为 6.60。Rh-ADF1 蛋白具有
典型的 ADF 蛋白结构，含有 6 个 actin（Lappalainen et al.，1998；Bamburg et al.，1999）和 4 个 F-actin
（Moon & Drubin，1995）结合位点，均匀分布在整个蛋白质的各部分。在蛋白的 N 端具有两个核
定位信号（Bamburg et al.，1999），表明其能够在细胞核中发挥作用。同时，在蛋白质的 N 端还具
有 1 个磷酸化位点（Moon & Drubin，1995），表明该蛋白水平的调节可能涉及到磷酸化作用（图 2）。
2.3 Rh-ADF1 氨基酸序列同源性分析
对进化树（图略）分析表明，Rh-ADF1 与锦葵科的棉花 GhADF 和车前科的大车前 PmADF 亲缘
关系最近，同源性分别为 82.14%和 82.56%；与葡萄科的葡萄 VvADF 亲缘关系最远，同源性为 54.17%。
2.4 Rh-ADF1 蛋白的亚细胞定位
如图 3 所示，融合蛋白结合在主要为肌动蛋白网络的微丝结构上；同时肌动蛋白纤维数量和长度
都减少，并且加粗，表明在短时间内过表达 Rh-ADF1 基因就能促进肌动蛋白的聚合。氨基酸序列分
析表明Rh-ADF1 蛋白结构上存在核定位信号，在转化细胞的细胞核中也发现了Rh-ADF1 蛋白的存在。

1 期 陈 翔等：月季 Rh-ADF1 基因在花瓣扩展中响应乙烯的表达特性分析 123

图 2 Rh-ADF1 基因推定的氨基酸序列与其他物种 ADF 氨基酸序列比对
F-actin 特定结合位点用五角星标出，核定位信号用箭头标出，actin 结合位点用三角标出，磷酸化位点用菱形标出。
Fig. 2 Alignment of the deduced amino-acid sequences of Rh-ADF1 with ADF proteins from other species
The pentacles indicate the specific F-actin binding site，the arrows indicate the nuclear localization signal sequence，the triangles indicate
actin binding site，and the diamond indicates phosphorylation site，respectively.









图 3 Rh-ADF1 和 GFP 蛋白在洋葱内表皮细胞中的亚细胞定位
共聚焦显微镜下 GFP 蛋白，绿色荧光信号为 GFP-Rh-ADF1 融合蛋白。箭头指出部分为 actin 与 Rh-ADF1 的结合区域。
Fig. 3 Subcellular localization of Rh-ADF1and GFP proteins in onion epidermal cells
Images of green fluorescence of GFP-Rh-ADF1 and GFP protein in onion epidermal cells under the cofocal microscope.
Arrows indicated the binding region of actin and Rh-ADF1.
124 园 艺 学 报 39 卷
2.5 Rh-ADF1 在切花月季不同花器官和乙烯处理条件下的表达分析
半定量 RT-PCR 检测结果表明，在正常条件下 Rh-ADF1 基因表达没有明显的变化，在瓶插 12 h
后表达量略有升高。乙烯处理后，从 1 h 开始，Rh-ADF1 的表达量显著升高，并且表达量随乙烯处
理的时间增加而升高，在处理 24 h 后达到最高。在乙烯抑制剂 1-MCP 处理后，Rh-ADF1 基因的表
达水平相比对照减弱，随着 1-MCP 处理时间的增加而表达量进一步降低，表达量在处理 24 h 后达
到最低（图 4）。
Rh-ADF1 基因在雌蕊、雄蕊、花托、萼片、花瓣中均有表达，在雌蕊和雄蕊中表达量较低，而
在花瓣中表达量略高于其它 4 个器官。


图 4 Rh-ADF1 表达的花器官特异性和在花瓣内中对乙烯的响应
Fig. 4 Expression of Rh-ADF1 in response to ethylene and in different tissues
3 讨论
通常，花器官的分化在花朵开放前便已基本完成，花朵开放过程主要受控于花器官，尤其是花
瓣的扩展（van Doorn & van Meeteren，2003）。本研究中观察到乙烯处理后月季花瓣扩展受到抑制，
花瓣亚下表皮细胞出现了严重畸形，同时发现 Rh-ADF1 的表达受到乙烯的显著上调。推测 Rh-ADF1
基因的高表达可能导致花瓣细胞内微丝蛋白解聚/聚合的动态平衡发生改变，从而引起了细胞扩展能
力的下降和形状的改变。
大多数植物的 ADF 基因具有表达特异性，从而调节植物各器官的发育。拟南芥中共有 12 个 ADF
基因，分属 4 个亚类，不同亚类间的 ADF 基因具有特异的表达模式。Ⅰ类 ADFs 主要在除花粉外的
营养和生殖器官中表达；Ⅱ类 ADFs 在成熟花粉和花粉管以及根部毛细胞（trichoblast）中表达；Ⅲ
类 ADFs 在营养组织中微弱表达，而在快速生长和分化的细胞中强烈表达；Ⅳ类 ADFs 则在所有组
织中组成型表达（Dong et al.，2001a；Maciver & Hussey，2002；Ruzicka et al.，2007；Burgos-Rivera，
2008）。在其它植物中也发现了类似特异表达的现象，如烟草中花粉管特异表达的 NtADF1 在一定剂
量时可以抑制花粉管的生长（Chen et al.，2003；Christensen，2003）、棉花 GhADF7（Li et al.，2010）、
百合 LiADF1 基因可能在花粉萌发及花粉管伸长时期，对肌动蛋白重新组合的信号转导和调控过程
中起着重要作用。但是一些 ADF 基因并没有明显的表达特异性，在棉花茎、花瓣、子叶中，都检测
到了 GhADF3 和 GhADF4 高效表达。本研究中从切花月季花瓣中克隆到月季 ADF 同源基因，氨基
酸序列和进化树分析表明，Rh-ADF1 与棉花 GhADF3 存在较高的同源性，半定量 RT-PCR 结果表明，
Rh-ADF1 与 GhADF3 同样没有明显的组织表达特异性，属于广泛分布的类型。在花朵各个器官中均
有表达，但在花瓣中的表达水平略高于其它器官。
1 期 陈 翔等：月季 Rh-ADF1 基因在花瓣扩展中响应乙烯的表达特性分析 125

之前的研究发现，细胞骨架动态变化主要涉及微丝（actin）和微管（microtubule）的变化（Smith
& Oppenheimer，2005）。乙烯可改变豌豆和拟南芥下胚轴和根细胞微管的排列方式，抑制其伸长生
长并促进径向加粗（Roberts et al.，1985；Le et al.，2004）。在棉花中，乙烯对棉纤维伸长的促进与
1 个微管蛋白基因 GhTUB1 的表达相关联（Shi et al.，2006）。橡树 HbADF 基因在乙烯、茉莉酸和
伤害处理后表达水平明显上调，但是变化的规律各不相同。在乙烯处理 4 h 后，HbADF 表达缓慢增
加，处理 3 d 后达到最大值，并且持续 7 d，表明乙烯能够通过 HbADF 基因的转录调节来影响到橡
胶液再生和流出过程（Deng et al.，2010）。乙烯导致月季采后品质下降的主要原因在于影响了花朵
的正常开放。本研究中采用的品种‘Samantha’对外源乙烯非常敏感。Rh-ADF1 基因能够响应乙烯
的诱导，在花瓣中高效的表达，但与 HbADF 基因不同，Rh-ADF1 基因的表达水平能够在乙烯诱导
后短时间内显著增加，并且其表达水平在乙烯处理 24 h 后达到峰值；同时乙烯作用抑制剂 1-MCP
能够显著抑制 Rh-ADF1 基因的表达，这从反面验证了乙烯对 Rh-ADF1 基因的诱导作用。这些结果
表明，Rh-ADF1 是一类特殊的肌动蛋白解聚因子，它能够响应乙烯的诱导，与乙烯处理月季花朵的
效果相吻合，由此推测 Rh-ADF1 可能参与乙烯对月季花瓣的扩展调节过程。乙烯如何调节 Rh-ADF1
的表达，以及是否存在其他形式的调节机制，将是今后本领域研究的新问题。
因此探讨月季花朵开放过程中乙烯诱导的生理反应与肌动蛋白调节因子间的相互关系，分析
Rh-ADF1 基因在乙烯和 1-MCP 诱导条件下对 actin 的调控作用，从而进一步了解 Rh-ADF1 基因对花
瓣细胞扩展和花朵开放的影响，对于理解月季切花开放过程中细胞的调控机理，培育采后性状更为
优良的切花月季新品种将具有一定的意义。

References
Augustine R C，Vidali L，Kleinman K P，Bezanilla M. 2008. Actin depolymerizing factor is essential for viability in plants，and its phosphoregulation
is important for tip growth. Plant J，54：863–875.
Bamburg J R，McGough A，Ono S. 1999. Putting a new twist on actin：ADF/cofilins modulate actin dynamic. Trends Cell Biol，9 (9)：364–370.
Bobkov A A，Muhlrad A，Shvetsov A，Benchaar S，Scoville D，Almo S C，Reisler E. 2004. Cofilin（ADF）affects lateral contacts in F-actin. Journal
of Molecular Biology，337：93–104.
Burgos-Rivera B，Ruzicka D R，Deal R B，McKinney E C，King-Reid L，Meagher R B. 2008. ACTIN DEPOLYMERIZING factor 9 controls
development and gene expression in Arabidopsis. Plant Mol Biol，686：619–632.
Cai Lei，Zhang Xiao-hong，Shen Hong-xiang，Gao Jun-ping. 2002. Effects of ethylene and its inhibitors on flower opening and senescence of cut
roses. Acta Horticulturae Sinica，29 (5)：467–472. (in Chinese)
蔡 蕾，张晓红，沈红香，高俊平. 2002. 乙烯对不同切花月季品种开花和衰老的影响. 园艺学报，29 (5)：467–472.
Chen C Y，Wong E I，Vidali L，Estavillo A，Hepler P K，Wu H M，Cheung A Y. 2002. The regulation of actin organization by actin depolymerizing
factor（ADF）in elongating pollen tubes. Plant Cell，14：2175–2190.
Chen C Y-H，Cheung A Y，Wu H M. 2003. Actin-depolymerizing factor mediates Rac/Rop GTPase-regulated pollen tube growth. Plant Cell，15：
237–249.
Christensen T M，Vejlupkova Z，Sharma Y K，Arthur K M，Spatafora J W，Albright C A，Meeley R B，Duvick J P，Quatrano R S，Fowler J E.
2003. Conserved subgroups and developmental regulation in the monocot rop gene family. Plant Physiol，133：1791–1808.
Deng Z，Liu X H，Chen C L，Tian W M，Xia Z H，Li D J. 2010. Molecular cloning and characterization of an actin depolymerizing factor gene in
Hevea brasiliensis. African Journal of Biotechnology，9 (45)：7603–7610.
Dong C H，Kost B，Xia G，Chua N H. 2001a. Molecular identification and characterization of the Arabidopsis AtADF1，AtADF5 and AtADF6 genes.
Plant Mol Biol，45：517–527.
Dong C H，Xia G X，Hong Y，Ramachandran S，Kost B，Chua N H. 2001b. ADF proteins are involved in the control of flowering and regulate F-actin
organization，cell expansion，and organ growth in Arabidopsis. Plant Cell，13：1333–1346.
Gao Jun-ping，Zhang Xiao-hong，Huang Mian-jia，Ye Xin-min，Sun Zi-ran. 1997. A preliminary study on change patterns of ethylene production
during flower opening and senescence in cut roses. Acta Horticulturae Sinica，24 (3)：274–278. (in Chinese)
126 园 艺 学 报 39 卷
高俊平，张晓红，黄绵佳，叶新民，孙自然. 1997. 月季切花开花和衰老进程中乙烯变化类型初探. 园艺学报，24 (3)：274–278.
Hinz M，Wilson I W，Yang J，Buerstenbinder K，Llewellyn D，Dennis E S，Sauter M，Dolferus R. 2010. Arabidopsis RAP2.2：An ethylene response
transcription factor that is important for hypoxia survival. Plant Physiol，153：757–772.
Hussey P J，Ketelaar T，Deeks M J. 2006. Control of the actin cytoskeleton in plant cell growth. Annu Rev Plant Biol，57：109–125.
Le Jie，van Denbussche Filip，van Der Straeten Dominique，Erbelen Jean-Pierre. 2004. Position and cell type-dependent microtubule reorientation
characterizes the early response of the Arabidopsis root epidermis to ethylene. Physiologia Plantarum，121：513–519.
Lappalainen P，Kessels M M，Cope M J，Drubin D G. 1998. The ADF homology（ADF-H）domain：A highly exploited actin-binding module. Mol
Biol Cell，9 (8)：1951–1959.
Li X B，Xu D，Wang L X，Huang G Q，Luo J，Li D D，Zhang Z T，Xu W L. 2010. Three cotton genes preferentially expressed in flower tissues
encode actin-depolymerizing factors which are involved in F-actin dynamics in cells. J Exp Bot，61 (1)：41–53.
Liu H，Wang Y，Xu J，Su T，Liu G，Ren D. 2008. Ethylene signaling is required for the acceleration of cell death induced by the activation of
AtMEK5 in Arabidopsis. Cell Res，18，422–432.
Ma Nan，Cai Lei，Lu Wang-jin，Tan Hui，Gao Jun-ping. 2005. Exogenous ethylene influences flower opening of cut roses（Rose hybrida）by
regulating the genes encoding ethylene biosynthesis enzymes. Science in China：C，35 (2)：104–114. (in Chinese)
马 男，蔡 蕾，陆旺金，谭 辉，高俊平. 2005. 外源乙烯对月季（Rosa hybrida）切花花朵开放的影响与乙烯生物合成相关基因表
达的关联. 中国科学：C 辑，35 (2)：104–114.
Ma N，Tan H，Liu X H，Xue J Q，Li Y H，Gao J P. 2006. Transcriptional regulation of ethylene receptor and CTR genes involved in ethylene induced
flower opening in cut rose（Rosa hybrida）cv. Samantha. J Exp Bot，57：2763–2773.
Ma N，Xue J Q，Li Y H，Liu X J，Dai F W，Jia W S，Luo Y B，Gao J P. 2008. Rh-PIP2；1，a rose aquaporin gene，is involved in ethylene-regulated
petal expansion. Plant Physiol，148：894–907.
Maciver S K，Hussey P J. 2002. The ADF/cofilin family：Actin-remodeling proteins. Genome Biology，3 (5)：reviews 3007.1–3007.12.
Moon A，Drubin D G. 1995. The ADF/cofilin proteins：Stimulus-responsive modulators of actin dynamics. Mol Biol Cell，6 (11)：1423–1431.
Ouellet F，Carpentier E，Cope M，Monroy A F，Sarhan F. 2001. Regulation of a wheat actin-depolymerizing factor during cold acclimation. Plant
Physiol，125：360–368.
Roberts I N，Lloyd C W，Roberts K. 1985. Ethylene-induced microtubule reorientations：mediation by helical arrays. Planta，164：439–447.
Ruzicka D R，Kandasamy M K，McKinney E C，Burgos-Rivera B，Meagher R B. 2007. The ancient subclasses of Arabidopsis ACTIN
DEPOLYMERIZING FACTOR genes exhibit novel and differential expression. Plant Journal，52：460–472.
Shi Y H，Zhu S W，Mao X Z，Feng J X，Qin Y M，Zhang L，Cheng J，Wei L P，Wang Z Y，Zhu Y X. 2006. Transcriptome profiling，molecular
biological，and physiological studies reveal a major role for ethylene in cotton fiber cell elongation. Plant Cell，18：651–664.
Smith L G，Oppenheimer D G. 2005. Spatial control of cell expansion by the plant cytoskeleton. Ann Rev Cell and Devel Biol，21：271–295.
Smertenko A P，Jiang C J，Simmons N J，Weeds A G，Davies D R，Hussey P J. 1998. Ser6 in the maize actin-depolymerizing factor，ZmADF3，
is phosphorylated by a calcium-stimulated protein kinase and is essential for control of functional activity. Plant Journal，14：187–193.
Tan H，Liu X H，Ma N，Xue J Q，LuW J，Bai J H，Gao J P. 2006. Ethylene2influenced flower opening and expression of genes encoding ETRs，
CTRs，and EIN3s in two cut rose cultivars. Postharvest Biology and Technology，40：97–105.
Thomas P，Schiefelbein J. 2002. Cloning and characterization of an actin depolymerizing factor gene from grape（Vitis vinifera L.）expressed during
rooting in stem cuttings. Plant Sci，162：283–288.
van Doorn W G，van Meeteren U. 2003. Flower opening and closure：A review. J Exp Bot，54：1801–1812.
Wan C Y，Wilkins T A. 1994. A modified hot borate method significantly enhances the yield of high quality RNA from cotton（Gossypium hisrstum
L.）Analytical Biochemistry，223：7–12.
Wasteneys G O，Galway M E. 2003. Remodeling the cytoskeleton for growth and form：An overview with some new views. Annu Rev Plant Biol，
54：691–722.
Xue Jing-qi，Yang Feng，Zuo Zhi-rui，Gao Jun-ping. 2011. Effect of ethylene and 1-MCP on ethylene production and related gene expression in floral
tissues of roses. Acta Horticulturae Sinica，38 (2)：311–316. (in Chinese)
薛璟祺，杨 丰，左志锐，高俊平. 2011. 乙烯和 1-MCP 的竞争性作用对月季花器官乙烯生成量及相关基因表达的影响. 园艺学报，38
(2)：311–316.