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Clon ing and Expression Analysis of a Zinc Finger Protein Gene AcRCHY1 from Pineapple

菠萝锌指蛋白基因AcRCHY1的克隆与表达分析



全 文 :园  艺  学  报  2009, 36 (11) : 1589 - 1596
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2009 - 05 - 22; 修回日期 : 2009 - 08 - 25
基金项目 : 农业部 ‘948’项目 [ 20062G34 (A) ] ; 农业部行业科技项目 ( nyhyzx072030)3 通讯作者 Author for correspondence ( E2mail: gm2sun@1631com)
菠萝锌指蛋白基因 AcRCH Y1的克隆与表达分析
杨祥燕 1, 2 , 蔡元保 3 , 吴青松 1 , 孙光明 1, 43
(1 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 , 广东湛江 524091; 2 海南大学园林园艺学院 , 海南儋州 571737; 3 海南
大学农学院 , 海口 570228; 4 国家重要热带作物工程技术研究中心 , 海口 571101)
摘  要 : 根据植物 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白的功能保守区设计简并引物 , 通过 RT2PCR结合 RACE
方法从菠萝 (A nanas com osus L. Merr) 幼苗中克隆获得了一个新的菠萝锌指蛋白基因 cDNA全长 , 将其命
名为 A cRCHY1。该基因 cDNA全长 1 261 bp, 开放阅读框 ORF为 918 bp, 推测其编码一个含有 306个氨基
酸残基的多肽。AcRCHY1蛋白具有保守的 C3HC4 (R ING finger) 和 CHY两个锌指结构域 , 与其它植物锌
指蛋白的同源性高达 81% ~91%。半定量 RT2PCR分析表明 , A cRCHY1在菠萝中呈组成性表达 , 在子房、
花瓣和小花中的表达量明显高于根和叶 ; 低温、高盐、干旱和 ABA等非生物胁迫处理后 , A cRCHY1在叶片
中的表达明显增强。因此 , AcRCHY1蛋白可能与花器官生长发育的调控有关 , 而且可能作为一个转录调控
因子在菠萝响应低温、高盐和渗透胁迫过程中参与了依赖 ABA的信号转导途径。
关键词 : 菠萝 ; 锌指蛋白 ; A cRCHY1; 基因表达
中图分类号 : S 66813  文献标识码 : A  文章编号 : 05132353X (2009) 1121589208
C lon ing and Expression Ana lysis of a Z inc F inger Prote in Gene A cRCH Y1
from P ineapple
YANG Xiang2yan1, 2 , CA I Yuan2bao3 , WU Q ing2song 1 , and SUN Guang2m ing1, 43
(1 Sou th Subtropica l C rop Research Institu te, Chinese A cadem y of Tropica l A gricultural Sciences, Zhanjiang, Guangdong 524091,
China; 2 College of Landscape and Horticu lture, Hainan U niversity, D anzhou, Hainan 571737, Ch ina; 3 College of A gronom y,
Hainan U niversity, Haikou 570228, Ch ina; 4N ational Cen ter of Im portan t Tropical C rops Engineering and Technology Research,
Haikou 571101, China)
Abstract: Emp loying a pair of degenerate p rimers designed from the conserved domain of p lant C3HC4
type and CHY type zinc2finger p roteins, a novel zinc2finger p rotein gene A cRCHY1 was isolated from p ineapp le
(A nanas com osus) by RACE2PCR and RT2PCR techniques. The full length cDNA has 1 261 bp nucleotides
with an open reading frame (ORF) of 918 bp encoding a p recursor p rotein of 306 am ino acid residues. AcR2
CHY1 p rotein sharing 81% - 91% homology with zinc2finger p roteins from other p lants contains two conserva2
tive zinc finger motif, C3HC4 zinc finger (R ING finger) and CHY zinc finger. Sem i2quantitive RT2PCR anal2
ysis indicated that A cRCHY1 was constitutively exp ressed in all p lant organs, but stronger in ovaries, petals
and florets than in roots and leaves, and the abiotic stresses such as low temperature, high salt , drought
(20% PEG6000) and ABA, could trigger a significant induction of A cRCHY1 in leaves. A ll these results sug2
gest that the AcRCHY1 p rotein may be involved in the regulation of floral organ growth and development, and
p lay an important role in signal transduction pathway of dependent ABA through responses to cold, high salt
and osmotic stresses as a transcrip tion factor.
Key words: p ineapp le; zinc2finger p rotein; A cRCHY1; gene exp ression
园   艺   学   报 36卷
锌指蛋白 ( Zinc finger p rotein) 是一个庞大的转录因子家族 , 这种蛋白质与 Zn2 +结合形成稳定的
手指结构 , 在基因表达调控、细胞分化、胚胎发育等生命过程中 ( Gerisman & Pabo, 1997; Laity et
a1. , 2001) , 特别是在抗逆基因表达调控中起着重要作用 (L i & Chen, 2000)。根据锌指蛋白中半胱
氨酸 (C) 和组氨酸 (H) 残基的数目和位置 , 可将含锌指结构域的转录因子分为 C2H2, C2C2, C3H,
C3HC4 (即 R ING finger) , C3HC5 (即 L IM finger) 等亚类。其中 C2H2型锌指蛋白研究的最多、最为
清楚 , 但 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白在植物中的报道甚少。目前为止 , 只从拟南芥、水稻、球蒴
藓、玉米等少数植物中分离到 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白基因 ( Stone et a1. , 2005; Ohyanagi et a1. ,
2006; Rensing et a1. , 2008; A lexandrov et a1. , 2009)。
目前菠萝抗病虫害基因工程已取得一些进展 (W akman, 1995; Melzer et a1. , 2001; Avallone et
a1. , 2003) , 但在抗非生物胁迫相关的重要功能基因方面研究甚少。为深入了解 C3HC4型兼 CHY型
锌指蛋白基因在菠萝生长发育和逆境胁迫应答中的功能 , 作者根据 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白的保
守结构域设计简并引物 , 利用 RT2PCR结合 RACE方法从菠萝幼苗中克隆获得了菠萝第 1个 C3HC4
型兼 CHY型锌指蛋白基因的全长序列 , 并通过转录水平的表达分析 , 研究了该基因的组织表达和非
生物逆境胁迫诱导下的表达特征 , 为深入研究该基因调控机制及其生理功能奠定了基础。
1 材料与方法
111 植物材料与逆境胁迫处理
菠萝 (A nanas com osus) 品种 ‘卡因 ’于 2008年 4—5月采自中国热带农业科学院南亚热带作物研
究所菠萝圃。选取处于花期的健壮植株 , 在同一植株上分别采集根、叶片、花瓣、子房以及小花 , 用
液氮速冻后 - 80 ℃保存备用。选取 60 d苗龄且长势一致的菠萝组培苗作为试验材料 , 在 1 /2 Hoag2
land营养液中恢复培养两周后 , 分别进行高盐处理 ( 200 mmol·L - 1 NaCl)、干旱处理 ( 20%
PEG6000)、低温处理 (4 ℃) 和 ABA处理 (100μmol·L - 1 ABA叶片喷施 ) , 处理后 6、12、24和 36
h分别取叶片 (其中 ABA处理时间为 3、6、12和 24 h) , 液氮速冻后 - 80 ℃保存备用。未进行处理
的植株作为对照。
112 植株总 RNA的提取与 cD NA第 1链的合成
用 CTAB改良法提取菠萝植株的总 RNA。分别取上述采集的材料 20 mg在液氮中研磨成粉 , 加到
含 1 mL CTAB提取液及适量巯基乙醇的离心管中 , 振荡悬浮后 65 ℃温育 30 m in, 加入等体积的酚 /
氯仿混匀 , 离心取上清加入 1 /5体积的 5 mol·L - 1 NaCl及等体积氯仿 /异戊醇混匀 , 4 ℃离心 , 取上
清加入等体积异丙醇 , 混匀后室温放置 10 m in; 离心后加入 75%乙醇清洗沉淀 , 4 ℃离心 , 弃上清后
干燥 ; 用无菌去离子水溶解植株总 RNA , 经 DNase I处理后参照 TaKaRa One Step RNA PCR试剂盒说
明进行 cDNA第 1链的合成。
113 锌指蛋白基因 A cRCH Y1克隆
根据水稻 (O ryza sa tiva, AY574990)、玉米 ( Zea m ays, EU959951和 EU956067) 以及拟南芥 (A r2
abidopsis tha liana, NM _122198) 等植物 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白基因的保守序列设计简并性引物
P1 (5′2TG (C /T) ATGGGGAAGTACTTCTGT23′) 和 P2 ( 5′2TG ( T/C) GACATGTC ( G/T) A (A /T)
T (A /G) TGG23′) 用于扩增基因保守序列 (引物合成由上海生工生物工程技术服务有限公司完成 ,
下同 ) , 获得的 DNA片段连接到 pMD182T载体上 , 并送大连宝生物工程有限公司进行测序 (下同 )。
根据所获得保守序列的测序结果设计特异引物 RACE5 ( 5′2GAAAAAGTTCTCCCGACCACCAAT23′) 和
RACE3 ( 5′2CATTGCTATAGATGCGGCTG23′) , 分别和通用引物 UPM ( 5′2CTAATACGACTCACTAT2
AGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT23′) 配对扩增基因 cDNA 5′端和 3′端序列。具体操作参照
CLOTECH公司 SMARTTM RACE cDNA Amp lification Kit说明书进行。扩增的 DNA片段连接到 pMD182T
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 11期 杨祥燕等 : 菠萝锌指蛋白基因 A cRCHY1的克隆与表达分析  
载体上进行测序 , 利用 DNAMAN软件进行序列拼接获得基因 cDNA 全长序列信息。在 cDNA 全长序
列的起始密码子 ATG和终止密码子 TAG处设计一对特异引物 AcF1 (5′2ATGGGAGTTGTGCTGATTG2
GAG23′) 和 AcR1 (5′2 CGCTAGGTCTGACGGGTATTGT23′) 用于克隆 A cRCHY1的 ORF并进行序列校
正 , 采用 25μL扩增体系 : cDNA 模板 110μL, 10 ×EX2Taq Buffer (含有 15 mmol·L - 1 MgCl2 ) 215
μL, 215 mmol·L - 1 dNTP 210μL, 5 U·μL - 1 EX2Taq酶 015μL, 引物 AcF1和 AcR1各 110μL,
ddH2 O补足 25μL; 扩增程序 : 94 ℃预变性 3 m in, 94 ℃变性 30 s, 53 ℃退火 30 s, 72 ℃延伸 1 m in,
32个循环后 72 ℃再延伸 10 m in。
114 生物信息学分析
用 NCB I blastn和 blastp ( http: ∥www1ncbi1nlm1nih1gov/BLAST/) 程序分别进行核苷酸和推导的
氨基酸序列比对 , 在 NCB I站点上利用 ORF finder分析软件识别开放阅读框 (ORF)。高同源蛋白的氨
基酸序列比对和蛋白进化树构建采用 DNAMAN512 软件完成。利用 SignalP 软件 ( http: ∥
www1cbs1dtu1dk / services/SignalP / ) 进 行 信 号 肽 分 析。采 用 网 上 TMp red 程 序 ( http: ∥
www1ch1embnet1org/ software /TMPRED_ form1htm l) 进行蛋白质跨膜区段的预测分析。利用 ProtParam
软件 ( http: ∥us1expasy1org/ tools/ProtParam1htm l) 预测推导蛋白的分子量及其等电点。利用 PlantsP
( http: ∥p lantsp1genom ics1purdue1edu /htm l/ ) 和 ScanProsite软件 ( http: ∥us1expasy1org/p rosite / ) 进
行蛋白功能结构域分析。用 Psort软件 ( http: ∥www1p sort1org) 分析 AcRCHY1蛋白的亚细胞定位。
用 Protfun软件 ( http: ∥www1cbs1dtu1dk / services/ProtFun / ) 预测 AcRCHY1蛋白的功能分类。
115 基因表达特性分析
以菠萝 A ctin基因为内部参照 , 用半定量 RT2PCR方法检测菠萝锌指蛋白基因 A cRCHY1在花期不
同组织和苗期不同胁迫下叶片中的表达情况。根据已克隆的 cDNA片段设计特定引物 AcF2 (5′2CG2
GCTGCTGCTACTCAACTAT23′) 和 AcR2 (5′2ATTTGCACTTCTGGCATTTCT23′) 用于 A cRCHY1片段扩增 ,
PCR扩增体系和程序同 ORF序列校正。菠萝 Actin基因正向引物 actF为 5′2CAGTGGTCGTACAACTGG2
TAT23′, 反向引物 actR为 5′2ATCCTCCAATCCAGACACTGT23′, PCR扩增体系同 ORF序列校正 , 扩增
程序 : 94 ℃预变性 3 m in, 94 ℃变性 30 s, 53 ℃退火 30 s, 72 ℃延伸 1 m in, 25个循环后 72 ℃再延
伸 10 m in。每个反应进行 3次重复 , 1%琼脂糖凝胶电泳分析。
2 结果与分析
211 锌指蛋白基因 A cRCH Y1全长 cD NA克隆
以菠萝幼苗 cDNA第 1链为模板 , 利用引物
P1和 P2进行扩增获得了与预测结果相一致的约
350 bp的保守区 cDNA片段。根据保守区的测序
结果 , 分别设计了特异性引物 RACE5和 RACE3,
分别与通用引物 UPM组合 , 克隆获得了约 750 bp
的 5′端序列和约 520 bp的 3′端序列。将这两个分
离得到的 cDNA 片段测序后 , 与中间片段利用
DNAMAN软件拼接得到了一条长度为 1 261 bp的
cDNA序列。利用 AcF1和 AcR1引物组合 , 以菠
萝幼苗 cDNA 第 1链为模板 , 扩增获得了 A cR 2
CHY1基因约 1 050 bp的 cDNA片段 , 测序结果与
拼接序列相应片段完全一致 (图 1)。
图 1 A cRCH Y1基因的 PCR扩增结果
M. Marker DL2000; 1. 保守域 ; 2. 5′RACE;
3. 3′RACE; 4. AcRCHY1编码区。
F ig. 1 Am plif ica tion results of A cRCH Y1 gene
M. Marker DL2000; 1. Domain; 2. 5′RACE;
3. 3′RACE; 4. AcRCHY1 ORF.
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  经 ORF finder软件分析显示 (图 2) , 该基因序列的长度为 1 261 bp, 包括一个长 918 bp的开放阅
读框序列 (ORF) , 编码 306个氨基酸残基 , 而且含有 C3HC4和 CHY两个锌指结构域。经 ProtParam
软件预测 , 其蛋白分子量约为 3418 kD , 理论等电点约为 810。在 NCB I网站进行序列比对后发现 , 该
序列与其他植物来源的 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白基因具有较高的相似性 , 其中与水稻 (O ryza sa ti2
va) 和玉米 ( Zea m ays) 相应锌指蛋白 (AY574990和 EU959951) 基因的核酸序列相似性分别高达
82%和 81% , 氨基酸序列 (AAS87371和 ACG24303) 相似性分别高达 81%和 84%。可见 , 我们分离
获得的 cDNA序列为菠萝 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白基因 , 命名为 A cRCHY1 ( GeneBank登录号 :
FJ647191) , 其编码的多肽在 GeneBank中的登录号为 ACN43326。
图 2 扩增的 cD NA片段序列及由此推测的氨基酸序列
CHY锌指结构域用单划线标出 ; C3HC4锌指结构域用双划线标出 ;
方框内表示起始密码子和终止密码子 ; 3 表示终止密码子。
F ig. 2 The partia l cD NA sequence and deduced am ino ac id sequence of A cRCH Y1 from A nanas com osus
The zinc finger domain CHY is underlined and the other zinc finger domain C3HC4 is double underlined.
The start codon and the stop codon are boxed; 3 indicated the stop codon.
212 菠萝锌指蛋白 AcRCHY1的生物信息学分析
菠萝锌指蛋白 AcRCHY1与其他植物来源的锌指蛋白具有较高的相似性。经过多序列比较结果表
明 , 菠萝锌指蛋白 AcRCHY1和植物 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白成员中的水稻 (O ryza sa tiva) 锌指蛋
白 (AAS87371)、拟南芥 (A rabidopsis tha liana) 锌指蛋白 (NP_197938) 及球蒴藓 ( Physcom itrella pa t2
ens) 锌指蛋白 (XP_001783611) 都具有 CHY锌指结构域和 C3HC4 (即 R ING finger) 锌指结构域 (图
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 11期 杨祥燕等 : 菠萝锌指蛋白基因 A cRCHY1的克隆与表达分析  
3)。对菠萝锌指蛋白 AcRCHY1的结构分析发现 , AcRCHY1在 55~131氨基酸处有 1个 CHY锌指结
构域 , 110~155处有 1个 PHD锌指结构域 , 133~197处有 1个 CTCHY锌指结构域 , 198~241氨基
酸处有 1个 C3HC4锌指结构域 ; 此外该蛋白的氨基酸序列上预测到 5个豆蔻酰化位点 (MYR ISTYL) ,
1个苷酸激酶活性位点 (ADK lid) , 1个半胱氨酸富含区 ; 但没有预测到信号肽和跨膜结构。因此 ,
从蛋白质分子结构而言 , 菠萝锌指蛋白 AcRCHY1是 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白。
图 3 推测的 AcRCHY1氨基酸序列片段和其他已知的锌指蛋白的比较
ACN43326: 菠萝 (Ananas com osus) ; AAS87371: 水稻 (O ryza sativa) ; NP_197938: 拟南芥 (A rabidopsis tha liana) ;
XP_001783611: 球蒴藓 ( Physcom itrella patens)。CHY锌指结构域和 C3HC4
(即 R ING finger) 锌指结构域分别用实线框标记。
F ig. 3 Partia l of deduced am ino ac ids sequence of AcRCHY1 is com pared w ith tha t of other z inc f inger prote in s
ACN43326: From Ananas com osus; AAS87371: From O ryza sativa; NP_197938: From
A rabidopsis tha liana; XP_001783611: From Physcom itrella patens.
CHY domain and C3HC4 (R ING finger) domain are marked with the solid box respectively.
利用 Psort和 Protfun软件预测表明 , AcRCHY1蛋白定位于细胞核的可能性为 60% , 其具有转录
调控、转录和信号传导的可能性分别达到 2215%、2118%和 615% , 远远高于其他可能性。已有的研
究结果证实 , 许多植物来源的锌指蛋白家族基因能够在转录调控、转录和信号传导等多方面发挥重要
功能 ( Kim et a1. , 2006; M itsuya et a1. , 2007; Kim et a1. , 2008)。因此 , 在菠萝生长发育过程中锌指
蛋白 AcRCHY1可能作为一个核调控因子在转录调控、转录和信号传导中发挥重要作用。
213 菠萝锌指蛋白的进化分析
将推测的菠萝锌指蛋白 AcRCHY1和其他已知的 C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白一起构建进化树
(图 4) , 这个进化树包括了目前已知的动物、植物和微生物锌指蛋白。系统进化分析表明 , 菠萝锌指
蛋白 AcRCHY1在植物中与水稻 (O ryza sa tiva) 锌指蛋白 (AAS87371) 及拟南芥 (A rabidopsis tha liana)
锌指蛋白 (NP_197938和 NP_001078621) 亲缘关系最相近 , 说明它们具有类似的结构和功能 ; 与动物
(特别是低等动物 ) C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白亲缘关系较近 ; 但与微生物 C3HC4型兼 CHY型锌指
蛋白亲缘关系最远。
3951
园   艺   学   报 36卷
图 4 菠萝锌指蛋白 AcRCHY1同其他生物克隆的锌指蛋白的进化树分析
F ig. 4 Phylogenetic ana lysis of AcRCHY1 and other z inc f inger prote in s
214 菠萝锌指蛋白基因 A cRCH Y1在不同组织和
不同胁迫下的表达
菠萝花期不同组织半定量 RT2PCR结果表明 ,
AcRCHY1在菠萝花期不同组织中都有表达 , 而且
呈组成性表达 , 在子房中表达最强 , 其次是花瓣
和小花 , 根和叶最弱 (图 5)。
由于 A cRCHY1在菠萝花器官中的表达明显比
根和叶强 , 因此 A cRCHY1可能与花器官生长发育
的调控有关。
利用半定量 RT2PCR 分析方法 , 以菠萝 A ctin
为内参对照 , 分析了菠萝锌指蛋白基因 A cRCHY1
图 5 菠萝锌指蛋白基因 A cRCH Y1在不同
组织中的表达分析
F ig. 5 Expression ana lysis of A cRCH Y1
in var ious tissues of p ineapple
在不同胁迫下叶片中的表达变化。结果分析表明 (图 6) , 菠萝幼苗在 4 ℃低温和模拟干旱 ( 20%
PEG6000) 处理 6 h后 , A cRCHY1的表达量明显增加 , 随后基本上都逐渐恢复到原来的表达水平 ; 幼
苗在高盐 (200 mmol·L - 1 NaCl) 处理 24 h后 , A cRCHY1的表达量也明显增加 , 随后表达量有所减少 ;
幼苗在 ABA (100μmol·L - 1 ) 处理后 , A cRCHY1的表达量呈 “一小一大 ”的波峰 , 可能是受菠萝内
外源 ABA共同诱导的结果。从以上的结果可以看出 A cRCHY1的表达受到低温、干旱、高盐和 ABA的
正调控作用。因此 , A cRCHY1可能在菠萝响应低温、高盐和渗透胁迫过程中 , 参与了依赖 ABA的信
号转导途径。
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 11期 杨祥燕等 : 菠萝锌指蛋白基因 A cRCHY1的克隆与表达分析  
图 6 菠萝锌指蛋白基因 A cRCH Y1在不同胁迫下的表达分析
F ig. 6 Expression ana lysis of A cRCH Y1 in d ifferen t stress of p ineapple
3 讨论
锌指蛋白属于转录因子家族 , 是真核生物中总数最大的 DNA结合蛋白 ( Takatsuji, 1998)。近年
的研究还证实 , 植物锌指蛋白可以促进营养生长向生殖生长的转变 (W u et a1. , 2008) , 并参与了生
殖器官特别是花、胚珠和种子的发育等 ( Sakai et a1. , 1995; Huang et a1. , 2006; Sicard et a1. ,
2008)。菠萝花期中 A cRCHY1在子房、花瓣和小花中的表达强度明显高于营养器官 , 说明 A cRCHY1
可能参与了菠萝生殖器官生长发育的调控。
同源性和聚类分析表明 , C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白都存在于动植物和微生物中 , 但目前也只
是从少数植物中分离到该类型锌指蛋白基因。C3HC4型兼 CHY型锌指蛋白都含有 C3HC4锌指结构
域和 CHY锌指结构域。C3HC4锌指结构域也称为环指结构域 , 是特殊的新型锌指蛋白结构域 (Bari2
naga, 1999) , 对植物锌指蛋白功能具有重要的贡献 (Borden & Freemont, 1996; Serrano & Guzmán,
2004) , 而 CHY锌指结构域的功能在植物中还未见报道。菠萝锌指蛋白 AcRCHY1同时含有这两个功
能结构域 , 对其发挥生物学功能可能具有重要作用。近年的研究表明 , 锌指蛋白转录因子除了参与植
物生长发育的调控 , 还与干旱、低温、高盐等非生物逆境胁迫密切相关 , 参与了植物抗逆代谢调控
( Sakamoto et a1. , 2004; Serrano & Guzmán, 2004)。干旱、低温、高盐等逆境胁迫可以明显提高矮牵
牛 ZPT223 ( Sugano et a1. , 2003)、水稻 O sZFP1 (Mukhopadhyay et a1. , 2004)、拟南芥 A ZF2和 STZ
( Sakamoto et a1. , 2004) 等植物锌指蛋白基因在自身体内的表达水平 , 而且提高过表达转基因植株的
抗逆性。同样 , 菠萝幼苗受干旱、低温、高盐胁迫后 A cRCHY1的表达水平明显提高。因此 , 菠萝锌
指蛋白基因 A cRCHY1可能在其逆境胁迫应答中发挥重要作用。此外 , 一些植物锌指蛋白基因的表达
水平还受 ABA的诱导 , 如拟南芥 AZF2 ( Sakamoto et al. , 2000) 和水稻 O sZFP1 ( Kong et al. , 2004)
等。受外源 ABA胁迫诱导后 , AcRCHY1在菠萝体内的表达水平也明显提高 , 可见 A cRCHY1可能参与
依赖于 ABA的信号转导途径。
锌指蛋白基因 A cRCHY1 是菠萝中第一个报道的 C3HC4 型兼 CHY型锌指蛋白基因。结合
AcRCHY1蛋白结构、功能的预测以及表达特性的分析结果表明 , AcRCHY1可能作为一个核调控转录
因子在菠萝响应低温、高盐和渗透胁迫过程中 , 参与了依赖 ABA的信号转导途径。
References
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