全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2638 http: // www. ahs. ac. cn
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收稿日期：2011–05–27
基金项目：长春市科技支撑计划项目（2009KZ22）；吉林大学大学生创新实验计划项目（2011–351）
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抑菌剂在东北红豆杉开放式组培中的应用研究
王淑杰*，袁丽娜，张健雄，刘丽丽，王赵玉
（吉林大学生物与农业工程学院，长春 130022）
东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb. et zucc）是国家一级保护植物，天然种群处于濒危状态，人
们利用栽培种的枝叶可以提取抗癌药物紫杉醇（Taxol），它也可以作为绿化植物。近些年来人们利
用组织培养的方法快速繁育东北红豆杉苗木，但传统的组培技术有许多缺欠，为了有效地控制培养
过程中的污染问题，使培养程序简化，采用开放式组培技术来快速繁育苗木。该技术的关键问题是
找到一种可以添加到培养基中的广谱性杀菌剂来代替高压灭菌。本试验通过添加不同的抑菌剂，在
不影响组培效果的情况下选择抑菌剂最佳种类与最适浓度，降低组培污染率，解决开放式组培中的
技术难题，使植物组培育苗在开放的条件下可以进行操作，从根本上简化了操作环节，降低了生产
成本，为植物组织微繁、工厂化育苗提供新技术。
将当年生红豆杉嫩枝剪成长 2 ~ 3 cm的插穗，用 75%酒精浸泡 10 s，次氯酸钠 5 min，用无菌
水冲洗 3 ~ 5次，制成无菌扦插材料。对 B5培养基进行改良，添加琼脂 6 g · mL-1，萘乙酸 2 mg · L-1，
pH 5.8 ~ 6.0，然后分别添加不同浓度的山梨酸钾、百菌清、绿茶提取物和农用链霉素等抑菌剂进行
培养并进行观察记录。
试验结果表明，培养基中添加 0.08 mg · mL-1山梨酸钾抑菌时间较长；浓度为 0.04 mg · mL-1的
山梨酸钾培养基使出愈时间提前 4 d；添加 0.10 mg · mL-1山梨酸钾对控制污染率、对外植体诱导效
果明显。山梨酸钾可以作为东北红豆杉开放式组织培养的前期抑菌剂。
添加 4种浓度百菌清的培养基抑菌效果较差，对青霉菌、细菌抑制作用小，百菌清不宜作东北
红豆杉开放式组培的抑菌剂。
低浓度的绿茶提取物抑菌作用较好，在开放式组培前期可以应用，添加量为 3% ~ 5%绿茶提取
物的培养基抑菌效果较好，可将外植体污染率控制在 10%之内，培养基污染率控制在 5%左右，对
诱导率不产生影响，可以促进其提前产生愈伤组织。
农用链霉素在东北红豆杉组织培养中的抑菌作用最显著，培养基中添加农用链霉素的浓度以 0.4
mg · mL-1为最优，可使培养基污染率控制在 3%以内，外植体污染率控制在 5%；培养中添加 0.2
mg · mL-1的农用链霉素使东北红豆杉外植体诱导愈伤组织的出愈时间提前了 6 d左右，这可以大大
提高植物组培育苗的效率。

关键词：东北红豆杉；抑菌剂；简化培养；B5培养基
中图分类号：S 68 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2638-01