全 文 ：园 艺 学 报 ， （增刊）： 2011 38 2518 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com

收稿日期：2011–05–03
基金项目：国家自然科学基金项目（31101534）；福建省自然科学基金项目（2010J0111）；福建省科技重大专项（2008NZ0002）；福建
省属公益类科研院所基本科研专项（2010R1028-5）；福建省农业科学院科技创新团队重点科研项目（CXTD2011-20）；福建省农业科学院博
士科研启动基金项目（BS04）
* 通信作者（E-mail：zhs0246@163.com；Tel：13809543070）
草莓 9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶基因
（FaNCED）的克隆及表达分析
朱海生，李永平，温庆放*
（福建省农业科学院作物研究所，福建省农业科学院蔬菜研究中心，福建省蔬菜工程技术研究中心，福州 350013）
从草莓果实中克隆了一个 NCED 基因（FaNCED）。研究 FaNCED 基因表达与 ABA 信号积累及
果实成熟的相关性，为继续开展草莓 ABA 合成代谢的调控机制研究提供实践基础，为在草莓上应
用 ABA 调控果实成熟提供理论依据。
试验于 2010—2011 年在福建省农业科学院作物研究所进行。供试植物材料为草莓（Fragaria ×
ananassa Duch.）品种‘法兰地’。
采用 RT-PCR 和 RACE 技术从草莓果实中克隆 ABA 合成途径中关键基因 FaNCED，用生物信
息学方法对获得的 cDNA 序列及推定氨基酸序列进行分析，通过实时荧光定量 PCR 法研究 FaNCED
基因在草莓不同组织、不同成熟阶段及采后不同时间点的表达，采用高效液相色谱法测定 ABA 含
量。
成功分离到FaNCED基因，该cDNA全长2 228 bp，具有完整的开放阅读框（ORF），共1 827个
碱基，编码609氨基酸。编码产物的分子量为66 927.8 kD，理论等电点为6.12。两端含有53 bp的5′
非编码区和345 bp的3′非编码区。该序列已登录GenBank，登录号为：HQ399498（未公开，专利申
请号201010589511.3）。
该序列完整的开放阅读框推导的氨基酸序列与湖北海棠NCED（ACH85193）、温州蜜柑NCED3
（BAE92960）、柠檬NCED2（BAE92962）、葡萄NCED1（AAR11193）等的氨基酸序列同源性为 78%、
77%、77%、75%。利用DNAMAN5.0 软件对草莓和其他植物NCED基因的氨基酸序列进行多重比较
表明，不同植物NCED基因的氨基酸序列在N末端差异较大，而在中、后部具有很高的保守性。蛋白
质系统进化分析发现草莓NCED与同为蔷薇科的湖北海棠聚为同一类，与橙、柠檬、温州蜜柚、葡
萄等非跃变型果实NCED蛋白亲缘关系比较近。
实时荧光定量 PCR 分析发现，FaNCED 基因在草莓根、茎、叶、花萼和果实中都有表达，在果
实成熟过程中 FaNCED 表达出现两次高峰，分别是在大白果和红果阶段，在红果中达到最高，与
ABA 积累相对应；FaNCED 在果实采后 1 d 表达略有下降，之后急剧上升，ABA 含量与 FaNCED
基因的表达基本一致。推测该基因可能参与调控 ABA 的合成并在草莓成熟中起重要作用。

关键词：草莓；9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶；NCED；基因克隆
中图分类号：S 668.4 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2518-01