全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2612 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com

收稿日期：2011–09–01
基金项目：国家自然科学基金项目（30800755，30871712）；国家‘863’计划项目（2009AA10Z104）
* 通信作者（E-mail：zbye@mail.hzau.edu.cn；Tel：027-87286867）
甜瓜高效遗传转化体系的研究
刘丽锋 1,2，张俊红 1，古勤生 2，李汉霞 1，叶志彪 1,*
（1华中农业大学园艺林学学院，武汉 430070；2中国农业科学院郑州果树研究所，郑州 450009）
目前转基因技术手段已经成功运用于模式植物，在甜瓜上虽然也有报道，但转化体系仍不成熟，
转化效率低。本研究中主要利用含 GUS 报告基因的植物表达载体进行甜瓜遗传转化技术体系的探
讨，针对基本培养基、子叶切割方式、侵染时间、共培养时间、移栽方法等进行研究，以建立高效、
稳定的甜瓜遗传转化体系，为利用转基因技术改良甜瓜品质和抗性提供参考。
材料为甜瓜常规品种‘白玉堂’，由郑州市蔬菜研究所提供；农杆菌菌株 GV3101等由本实验室
保存。将甜瓜种子去皮，75%酒精消毒 1 min，0.1% HgCl2消毒 10 min。无菌水冲洗 3次以上。接种
于 1/2MS固体培养基中，光下培养 3 ~ 4 d。将子叶取出，一分为二，切下距离下胚轴 1 ~ 2 mm处
的子叶块，在MS + BA 1.0 mg · L-1 的培养基上预培养 3 d，与农杆菌在MS0中侵染 15 min，然后转
移到MS + BA 1.0 mg · L-1 + Kan 100 mg · L-1 + Cef 500 mg · L-1 筛选培养基上，继代两次，约 30 d后，
转移到伸长培养基MS + BA 0.05 mg · L-1 + Kan 100 mg · L-1 + Cef 500 mg · L-1，15 d后，将伸长的甜
瓜苗转移到生根培养基 1/2MS + IBA 0.5 mg · L-1上，当根长到 1 cm左右，将其移植到蛭石上，炼苗
半个月，即可以移栽到温室。
由于甜瓜组培苗容易发生黄化及玻璃化，难以长时间继代繁殖，通过改良 MS 培养基中的铁盐
以及微量元素，解决了黄化问题；将组培室的培养架进行适当改装，组培瓶壁上水汽消除，有效地
缓解了玻璃化问题；用以上方法切割的子叶块，不定芽诱导率达到 90%以上；通过对以上几个方面
的改良，转化效率能达到 2%；利用 PCR 和 GUS 检测表明，GUS 报告基因已经整合进入甜瓜基因
组中，并能稳定表达。

关键词：甜瓜；遗传转化；GUS染色
中图分类号：S 652 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2612-01