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Breeding and Utilization of the Genetic Male Sterile Line in Purple Stalk Chinese Cabbage

紫菜薹核基因雄性不育系的创制与利用



全 文 :园 艺 学 报 2011,38(6):1097–1103 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期:2011–02–28;修回日期:2011–04–26
基金项目:国家自然科学基金项目(31071792)
* E-mail:fenghuiaaa@263.net
紫菜薹核基因雄性不育系的创制与利用
冯 辉*,娄广学
(沈阳农业大学园艺学院,辽宁省十字花科蔬菜遗传育种重点实验室,沈阳 110866)
摘 要:以复等位基因遗传的白菜核基因雄性不育系 00S107 为不育源,采用连续回交转育同时测交
筛选基因型的方法,向紫菜薹自交系 XA500中转育核不育基因,育成了园艺学性状与 XA500 相近,不育株
率和不育度均达到 100%的紫菜薹雄性不育系 GMS500。用该不育系配成的杂交组合整齐一致,园艺学性
状优异,单位面积产量显著高于对照品种‘紫婷 11 号’。
关键词:紫菜薹;核基因雄性不育系;选育
中图分类号:S 634.6 文献标识码:A 文章编号:0513-353X(2011)06-1097-07

Breeding and Utilization of the Genetic Male Sterile Line in Purple Stalk
Chinese Cabbage
FENG Hui* and LOU Guang-xue
(College of Horticulture,Shenyang Agricultural University,Liaoning Key Laboratory of Genetics and Breeding in
Cruciferous Vegetable Crops,Shenyang 110866,China)
Abstract:In order to solve the problems in the transfer and utilization of genic male sterile line in
purple stalk Chinese cabbage,‘00S107’which is a multiple allele inherited genetic male sterile line was
used as a source of male sterility in Brassica campestris L. ssp. chinensis var. purpurca Hort. Methods of
crossing and backcrossing were applied to transfer the male sterility to a male fertile line‘XA500’. A new genetic
male sterile line‘GMS500’with 100% of male sterile plants was obtained,which was similar to ‘XA500’
in horticultural characteristics. An excellent hybridized combination was developed,which is uniform and
superior to‘Ziting 11’in yield.
Key words:purple stalk Chinese cabbage;genetic male sterile line;breeding

紫菜薹(Brassica campestris L. ssp. chinensis var. purpurca Hort.)又名红菜薹,是我国湖南、湖
北、四川等长江流域地区普遍栽培的蔬菜作物。紫菜薹两性花,异花授粉,杂种优势十分显著,雄
性不育系的利用是其杂交制种有效途径(汪李平,2005)。冯辉(1995)在大白菜中发现了复等位基
因遗传的雄性不育材料,并育成了具有 100%不育株率的大白菜核基因雄性不育系。研究表明,该
不育材料的不育性受同一位点 3 个基因控制:Ms 为显性不育基因;ms 为 Ms 的等位隐性可育基因;
Msf 为 Ms 的等位显性恢复基因,三者之间的显隐关系为 Msf > Ms > ms(Feng et al.,1996)。不育基
因 Ms 已被定位于大白菜基因组的第 7 号染色体上,并获得了多个与其连锁的 SCAR 标记,其中一
些标记已经用于分子标记辅助选择(Feng et al.,2009;Wei et al.,2009;王丽丽 等,2010)。


1098 园 艺 学 报 38 卷
为扩大该类不育材料的应用范围,一些学者采用有性杂交方法,已将不育基因转入多种生态型
的大白菜以及奶白菜中,育成了新的雄性不育系(冯辉 等,2004;岳艳玲和冯辉,2005;李骋宇和
冯辉,2006;冯辉 等,2007)。王玉刚等(2005)将还大白菜核不育复等位基因转入白菜品种‘苏
州青’,育成了白菜核基因雄性不育系 00S107。本项研究中以 00S107 为不育源,采用连续回交转育
性状的同时测交筛选基因型的方法,向紫菜薹自交系 XA500 中转育核不育基因,创制出园艺学性状
与 XA500 相近,不育株率和不育度均达到 100%的紫菜薹雄性不育系 GMS500。
1 材料与方法
供试材料为沈阳农业大学选育成的白菜核基因雄性不育系 00S107(图版,1),紫菜薹自交系
XA500(图版,2)、XA100、XA200、XA300、XA400。
试验于 2008—2010 年在辽宁省十字花科蔬菜遗传育种重点实验室进行。首先用转育目标品系
XA500 与白菜核不育系 00S107 杂交,根据后代植株育性分离比率鉴定 XA500 的基因型。一般可育品
系在不育位点上的基因型有 3 种:MsfMsf、msms 和 Msfms,这 3 种基因型可通过与不育系(Msms)
杂交后代的育性分离比率加以鉴别,遗传模型如下:
MsfMsf → Msfms,MsfMs(全可育)
Msms × Msfms → msms,MsfMs,Msfms,Msms(可育株︰不育株为 3︰1)
msms → msms,Msms(可育株︰不育株为 1︰1)
根据转育目标品系的基因型,选择不育源材料,设计转育方案。采用连续回交方法转育园艺学
性状,并在测交鉴定基因型的基础上转育核不育基因,最终获得与转育目标品系园艺学性状相近的
新的雄性不育系。
每年完成两个有性世代繁殖。3 月初穴盘播种育苗,4 月初定植于花盆,5 月初进行育性鉴定、
授粉。下一代加代繁殖试材于 8 月初进行春化处理,萌动种子在 2 ℃冰箱中处理 7 d 后播于穴盘,
幼苗长至 5 ~ 6 片真叶时移栽到直径 22 cm 的花盆中,放在温室中待开花后授粉。用回交 3 代后配
制成的不育系与紫菜薹自交系配制杂交组合。以‘紫婷 11 号’为对照进行品种比较试验。随机区组
设计,3 次重复,每小区种植 20 株,株距 30 cm,行距 40 cm。
样本容量按公式 n ≥ lg 0.01/lg(1–p)计算,适合性测验取公式 X2 =∑(O–E)2/E,其中 p
为样品出现的概率,O 为实测数值,E 为理论数值。
2 结果与分析
2.1 紫菜薹品系 XA500 基因型的鉴定
用白菜核不育系 00S107(Msms)与紫菜薹可育品系 XA500 杂交,F1 全部为可育株(可育株︰不
育株 = 49︰0),说明 XA500 的基因型为 MsfMsf。
2.2 紫菜薹不育系的转育
00S107(Msms)与 XA500(MsfMsf)杂交的 F1 植株基因型有 MsfMs 和 Msfms 两种,表现型均为
可育。取 8 株 F1 自交,根据其后代育性分离比率鉴定各 F1 植株基因型,遗传模型如下:
MsfMs  → 1/4 MsfMsf,2/4 MsfMs,1/4 MsMs(3︰1 分离)
Msms × MsfMsf →
Msfms  → 1/4 MsfMsf,2/4 Msfms,1/4 msms(全可育)
6 期 冯 辉等:紫菜薹核基因雄性不育系的创制与利用 1099

实际鉴定结果列于表 1。根据自交后代分离比率,可以确定(00S107 × XA500)-1 的基因型为
MsfMs,(00S107 × XA500)-7 的基因型为 Msfms。
表 1 白菜核不育系 00S107 与紫菜薹自交系 XA500 杂交 F1 的自交后代植株育性分离比率
Table 1 Fertility expression of progenies from F1 of‘00S107 × XA500’
杂交组合
Combinations
可育株︰不育株
Fertile plants︰Sterile plants
理论比例(χ20.05, 1 = 3.841)
Theoretical ratio
基因型
Genotype
(00S107 × XA500)-1 38︰11 3︰1 (0.061) MsfMsf,MsfMs,MsMs
(00S107 × XA500)-2 50︰0 全可育 Fertile MsfMsf,Msfms,msms
(00S107 × XA500)-3 47︰13 3︰1 (0.200) MsfMsf,MsfMs,MsMs
(00S107 × XA500)-4 38︰9 3︰1 (0.574) MsfMsf,MsfMs,MsMs
(00S107 × XA500)-5 29︰0 全可育 Fertile MsfMsf,Msfms,msms
(00S107 × XA500)-6 35︰0 全可育 Fertile MsfMsf,Msfms,msms
(00S107 × XA500)-7 85︰0 全可育 Fertile MsfMsf,Msfms,msms
(00S107 × XA500)-8 47︰0 全可育 Fertile MsfMsf,Msfms,msms
回交世代材料基因型鉴定遗传模型如下:
MsfMsf → MsfMs,Msfms(全可育)
Msms ×
MsfMs → MsfMs,Msfms,MsMs,Msms(可育株︰不育株为 1︰1)

MsfMsf → MsfMs,Msfms(全可育)
Msms ×
Msfms → MsfMs,Msfms,msms,Msms(可育株︰不育株为 3︰1)
实际鉴定结果见表 2。表 2 中测交育性为 1︰1 的,被测植株基因型为 MsfMs;测交育性为 3︰1
的, 被测植株基因型为 Msfms。
表 2 紫菜薹核不育系转育各回交世代基因型鉴定
Table 2 Genotype identification of BC1,BC2 and BC3 in the purple stalk Chinese cabbage
转育方向
Transfer direction
代号
Code
组合
Combinations
可育株︰不育株
Fertile plants︰Sterile plants
理论比例
(χ20.05,1 = 3.841)
Theoretical ratio
BC1 00S107 × [(00S107 × XA500)-1 × XA500]-6 26︰23 1︰1(0.082)
BC2 00S107 ×(BC1 × XA500)-1 32︰26 1︰1(0.431)
两用系转育方向
AB line direction
BC3 00S107 ×(BC2 × XA500)-4 16︰13 1︰1(0.138)
BC1 00S107 × [(00S107 × XA500)-7 × XA500]-5 65︰18 3︰1(0.325) 保持系转育方向
Maintainer line direction BC2 00S107 ×(BC1 × XA500)-2 48︰15 3︰1(0.005)
BC3 00S107 ×(BC2 × XA500)-4 28︰8 3︰1(0.032)
鉴于回交 3 代材料的园艺学性状已经与转育目标品系 XA500 十分接近,故选择两个转育方向的
BC3 植株自交,分别选育“两用系”和“临时保持系”。植株自交后代育性调查结果见表 3。
选取表 3 中两用系转育方向回交 3 代材料自交后代的不育株(MsMs)与同一系统中的 5 株可育
株(1/3 MsfMsf,2/3 MsfMs)兄妹交,选育“两用系”,结果见表 4。表 4 中,组合“A-3 × B-3”和
“A-5 × B-5”即为紫菜薹“两用系”。
表 3 紫菜薹回交 3 代植株 MsfMs 和 Msfms 自交后代育性分离比率
Table 3 Fertility expression of progenies from BC3 selfing in the purple stalk Chinese cabbage
组合
Combinations
可育株︰不育株
Fertile plants︰Sterile plants
理论比例(χ20.05, 1 = 3.841)
Theoretical ratio
基因型
Genotype
两用系转育方向 BC3-4
AB line direction BC3-4
29︰7 3︰1(0.333) MsfMsf,MsfMs,MsMs
保持系转育方向 BC3-4
Maintainer line direction BC3-4
46︰0 全可育 Fertile MsfMsf,Msfms,msms
1100 园 艺 学 报 38 卷
表 4 紫菜薹回交 3 代材料“两用系”测配结果
Table 4 Test cross result of the“AB line”in BC3 in the purple stalk Chinese cabbage
组合
Combinations
可育株︰不育株
Fertile plants︰Sterile plants
理论比例(χ20.05, 1 = 3.841)
Theoretical ratio
基因型
Genotype
A-1 × B-1 42︰0 全可育 Fertile MsfMsf,MsfMs
A-2 × B-2 46︰0 全可育 Fertile MsfMsf,MsfMs
A-3 × B-3 27︰23 1︰1(0.180) MsfMs,MsMs
A-4 × B-4 49︰0 全可育 Fertile MsfMsf,MsfMs
A-5 × B-5 21︰26 1︰1(0.340) MsfMs,MsMs
注:A-1 ~ A-5 为两用系方向 BC3-4的不育株;B-1 ~ B-5 为保持系方向 BC3-4的可育株。
Note:A-1–A-5 represents the male sterile plants separated from AB line direction BC3-4;B-1–B-5 represents the male fertile plants from
the maintainer line direction BC3-4.
随机选取表 3 中保持系转育方向 BC3-4后代的 16 株(1/4MsfMsf,2/4Msfms,1/4msms),与表
4 中的不育株(MsMs)杂交,筛选“临时保持系”,结果见表 5。
表 5 紫菜薹回交 3 代“临时保持系”测配结果
Table 5 Test cross result of the maintainer line in BC3 in the purple stalk Chinese cabbage
组合
Combinations
可育株︰不育株
Fertile plants︰Sterile plants
理论比例(χ20.05, 1 = 3.841)
Theoretical ratio
基因型
Genotype
A-1 × C-1 21︰24 1︰1(0.089) MsfMs,Msms
A-1 × C-2 0︰35 全不育 Sterile Msms
A-1 × C-3 23︰19 1︰1(0.214) MsfMs,Msms
A-1 × C-4 0︰38 全不育 Sterile Msms
A-2 × C-5 30︰0 全可育 Fertile MsfMs
A-2 × C-6 36︰0 全可育 Fertile MsfMs
A-2 × C-7 20︰15 1︰1(0.457) MsfMs,Msms
A-2 × C-8 19︰13 1︰1(0.781) MsfMs,Msms
A-3 × C-9 0︰40 全不育 Sterile Msms
A-3 × C-10 16︰18 1︰1(0.029) MsfMs,Msms
A-4 × C-11 0︰36 全不育 Sterile Msms
A-4 × C-12 33︰0 全可育 Fertile MsfMs
A-4 × C-13 17︰20 1︰1(0.108) MsfMs,Msms
A-5 × C-14 0︰39 全不育 Sterile Msms
A-5 × C-15 21︰0 全可育 Fertile MsfMs
A-5 × C-16 38︰0 全可育 Fertile MsfMs
注:C-1 ~ C-16 为保持系转育方向 BC3-4 自交后代植株。
Note:C-1–C-16 represents the plants separated from BC3-4.
表 5 中,‘A-1 × C-2’、‘A-1 × C-4’、‘A-3 × C-9’、‘A-4 × C-11’和‘A-5 × C-14’即为转育成
的雄性不育系;对应的 C-2、C-4、C-9、C-11 和 C-14 的自交后代即为“临时保持系”。选取不育系
“A-5 × C-14”命名为 GMS500(图版,3),其不育株率为 100%,雄蕊彻底退化,雄蕊以外的其他
花器官发育正常(图版,4;表 6)。
表 6 回交 3 代育成的紫菜薹核基因雄性不育系的不育株率和不育度调查结果
Table 6 Fertility identification of the genetic male sterile line of BC3 of the purple stalk Chinese cabbage
不育系
Male sterile line
调查总株数
Total plant
number
不育株数
Sterile plant
number
不育株率/%
Rate of male
sterile plants
调查总花数
Total flower
number
完全败育花数
Sterile flower
number
不育度/%
Rate of male
sterile flowers
GMS500 150 150 100 900 900 100
注:不育株率为雄性不育植株占全部调查植株的百分率;不育度为雄蕊完全败育花数占调查总花数的百分率。
Note:Rate of male sterile plants is the percentage of male sterile plants in all plants checked;Rate of male sterile flowers is the percentage of
male sterile flowers in all flower checked.
6 期 冯 辉等:紫菜薹核基因雄性不育系的创制与利用 1101

2.3 紫菜薹不育系 GMS500 植物学性状调查结果
转育成的紫菜薹不育系 GMS500 与转育目标品系 XA500 的植物学性状调查结果列于表 7,GMS500
的植株形态与 XA500 已十分相近(图版,2、3)。
表 7 紫菜薹不育系及其转育品系植物学性状调查结果
Table 7 Major botanical characters of the male sterile line and its transfer line in purple stalk Chinese cabbage
试材
Materials
株高/cm
Plant height
主薹长/cm
Main stalk length
主薹粗/cm
Main stalk diameter
侧薹数
Lateral stalk number
侧薹粗/cm
Lateral stalk diameter
GMS500 32.27 25.87 1.496 3 ~ 4 1.160
XA500 33.59 24.69 1.718 3 ~ 4 1.204


图版说明:1. 白菜不育系‘00S107’;2. 紫菜薹目标品系‘XA500’;3. 紫菜薹雄性不育系‘GMS500’;4. 紫菜薹雄性不育系‘GMS500’花
序;5. 紫菜薹杂交组合‘GMS500 × XA200’;6. 紫菜薹杂交组合品比试验。
Explanation of plates:1. Genetic male sterile line of Chinese cabbage‘00S107’;2. Target line of purple stalk Chinese cabbage‘XA500’;3. Male
sterile line of purple stalk Chinese cabbage GMS500;4. Inflorescence of the genetic male sterile line of GMS500;5. A combination of purple stalk
Chinese cabbage‘GMS500 × XA200’;6. Compare test of the combinations in the purple stalk Chinese cabbage.

2.4 紫菜薹杂交组合产量比较


组合
Combinations
小区产量/kg
Plot yield
GMS500 × XA200 10.10 A
紫婷 11 号 Ziting 11 9.58 B
GMS500 × XA400 9.29 B
GMS500 × XA300 8.58 C
GMS500 × XA100 8.45 C




以转育成的紫菜薹不育系 GMS500 为母本,
与紫菜薹自交系 XA100、XA200、XA300 和 XA400
配制杂交组合,以‘紫婷 11 号’为对照,进行
品种比较试验,结果列于表 8。
‘GMS500 × XA200’的小区产量显著高于
对照品种‘紫婷 11 号’,并且侧薹数较多,是
一个优异的紫菜薹杂交组合(表 8;图版,5、
6),在沈阳地区秋季大棚栽培,从播种到始收
约 60 d。
表 8 紫菜薹杂交组合品种比较试验结果
Table 8 Plot yield of combinations in the purple stalk Chinese cabbage
注:邓肯氏新复极差测验,α = 0.01。
Note:Duncan’s test. α = 0.01.
1102 园 艺 学 报 38 卷
3 讨论
鉴于紫菜薹雄性不育系在杂种优势利用上的重要意义,已有一些学者开展了紫菜薹不育系选育
与利用研究。黄邦全和李薇(1999)、黄邦全等(2001a,2001b,2002a,2002b)在 1995 年用甘蓝
型油菜 Ogura CMS 雄性不育材料与紫菜薹杂交,获得了种间杂种,并连续 3 年用紫菜薹与其回交,
获得了蜜腺发育正常的紫菜薹细胞质雄性不育系。但是,用 Ogura CMS 转育成的紫菜薹雄性不育材
料,常存在低温叶片黄化、雌蕊畸形、结实不良等缺陷。向长萍等(2000)和晏儒来等(2000)用
紫菜薹品种‘大股子’为转育亲本,转育成了 Pol CMS 雄性不育系。然而,利用 Pol CMS 转育成的
紫菜薹不育系存在一定程度的温度敏感性,经常出现嵌合植株,影响到杂交制种的纯度。许明和魏
毓棠(2003)利用复等位基因遗传的大白菜核基因雄性不育材料 98107-1 与紫菜薹 ZB3 品系杂交,
获得了具有 100%不育株率的雄性不育材料,但因其园艺学性状处于大白菜与紫菜薹之间,经济性
状不良,遗传性不稳定而未能应用。
本试验利用复等位基因遗传的白菜核基因雄性不育系为不育源,设计了定向转育方案,采用连
续回交转育性状的同时测交筛选基因型的方法,育成了不育株率和不育度均达到 100%,园艺学性
状与转育目标品系相近的紫菜薹核基因雄性不育系,实现了不育性与园艺学性状的同时转育,解决
了以往一次杂交转育获得的不育系综合性状不良的问题。用新转育成的紫菜薹核基因雄性不育系
GMS500 配制杂交组合,经过品种比较试验,筛选到一个优异组合‘GMS500 × XA200’。本研究中结
果为紫菜薹杂种优势的利用开辟了一条新途径。

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