全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（6）：1089–1096 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期：2010–12–13；修回日期：2011–02–21
基金项目：国家自然科学基金项目（30771377）；浙江省科技计划项目（2009C32029）；浙江省自然科学基金项目（Y3090294）；教育部
留学回国人员科研启动基金项目（2009-1001）；浙江省人事厅留学回国基金项目（J20090028）
* 通信作者 Author for correspondence（E-mail：xlyu@zju.edu.cn）
芜菁 NAC 转录因子 BcNAC2基因的分离及其表
达
张海娟，吴剑锋，胡 帅，余小林*
（浙江大学蔬菜科学研究所，农业部园艺植物生长发育与品质调控重点开放实验室，杭州 310029）
摘 要：根据拟南芥 NAC2 的全长序列设计引物，从芜菁中成功分离了 NAC 转录因子 BcNAC2 基因，
该基因最大开放阅读框为 1 683 bp，编码 560 个氨基酸，共包含 6 个外显子和 5 个内含子。将 BcNAC2
与其他 30 个 NACs 蛋白进行序列比对以及重构系统进化树分析发现，BcNAC2 与十字花科的拟南芥的同
源性最高，芜菁 BcNAC2 与拟南芥 NAC2 蛋白功能结构域内的特征序列有显著的差异。半定量 RT-PCR
的结果表明，BcNAC2 呈部分组成型表达特征，在授粉 8 d 的嫩角果中表达丰度最高，而且组织原位杂交
结果显示，BcNAC2 在胚囊中有较高的表达，由此推测，BcNAC2 与芜菁的种子或胚的发育相关。
关键词：芜菁；NAC 转录因子；基因分离；半定量 RT-PCR；组织原位杂交
中图分类号：S 631.3 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）06-1089-08

Isolation and Expression Analysis of BcNAC2，a NAC Transcription Factor
Gene in Turnip
ZHANG Hai-juan，WU Jian-feng，HU Shuai，and YU Xiao-lin*
（Institute of Vegetable Sciences，Zhejiang University，Key Laboratory of Horticultural Plant Growth，Development and
Quality Improvement，Ministry of Agriculture，Hangzhou 310029，China）
Abstract：BcNAC2，a NAC transcription factor gene，has been successfully isolated from
turnip[Brassica campestris L. ssp. rapifera（Matzg）Sinsk，syn. B. rapa L.]using the primers designed
from the sequence of the NAC2 gene in Arabidopsis thaliana. Sequence analysis results showed that the
full length of genomic DNA contained six extrons and five introns，and the open reading frame（ORF）
was 1 683 bp coding 560 amino acids. In addition，the sequence of BcNAC2 was much conserved
comparing with those of other 30 NAC proteins，and it shared the highest homology with A. thaliana
among them. In addition，there are significant difference for the motif numbers between the BcNAC2 and
AtNAC2 functional domains. Moreover，RT-PCR results indicated that BcNAC2 gene presented the
character of constitutive expression partially，and highest expression at 8 days after pollination. In situ
hybridization result also proves that it is one of the high expression abundance genes during embryo sac
development. Therefore，BcNAC2 probably involved in the development of seed or embryo in the turnip.


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Key words：turnip；Brassica campestris L. ssp. rapifera（Matzg）Sinsk，syn. B. rapa L.；NAC
transcription factor；gene isolation；RT-PCR；in situ hybridization

NAC 转录因子（矮牵牛 NAM 基因、拟南芥 ATAF1/2 和 CUC2 基因）是植物特有的同时也是最
大的转录因子家族之一（Olsen et al.，2005），广泛存在于各种陆地植物中。NAC 转录因子的结构包
括极其保守的 N–末端的 DNA 结合结构域和高度变异的 C–端的转录激活域（Ernst et al.，2004）。
据统计，从 1996 年分离得到第一个 NAC 基因至今，在拟南芥中已经发现了 110 多个 NAC 成员，
水稻中则发现了 140 多个。研究表明，高等植物自身的生长发育过程和胁迫应答过程都需要 NAC
转录因子的参与，并且调控相关目的基因的表达（Singh et al.，2002；Jeong et al.，2009）。植物生
长处在一个动态变化的环境中，经常会遇到病原体、真菌、干旱、低温、机械损伤、盐胁迫等生物
和非生物胁迫的侵扰。在逆境条件下生存需要多种机制抵御逆境造成的伤害，引起一系列的生理和
新陈代谢反应，比如与逆境相关的 NAC 转录因子的表达（Ren et al.，2000；Tran et al.，2004；Hu et
al.，2006；Meng et al.，2009）。同时 NAC 蛋白家族成员也在植物生长发育和模式建成（Aida et al.，
1997；Takada et al.，2001；Vroemen et al.，2003；Kunieda et al.，2008）、器官衰老（Guo，2006）、
侧根形成（He et al.，2005）和次生壁增厚（Mitsuda et al.，2007）、细胞的程序性死亡（Kaneda et al.，
2009）等过程中发挥着重要作用。
本实验室前期利用 ATH1 基因芯片和 cDNA-AFLP 技术分析了芜菁雌蕊退化突变体 tpa（turnip
pistil abortion）及其野生型植株花序的基因表达差异，发现两者在转录组上具有明显的不同。其中
A12T5 cDNA 转录差异片段（246 bp）在可育系植株花序中高表达，该片段与拟南芥 NAC2 基因的
相似性高达 98%，且授粉后一直高表达（卢海宇，2009）。最近的研究结果显示，拟南芥 NAC2 蛋
白通过外珠被影响胚的生成，并通过乙烯和生长素途径参与了盐胁迫和侧根的发育（He et al.，2005；
Kunieda et al.，2008）。那么，芜菁中 NAC2 蛋白和拟南芥 NAC2 蛋白的功能结构域序列是否保守，
及其生物学功能是否一致，目前还知之甚少。芜菁是芸薹属芸薹种肉质根膨大的 2 年生草本植物栽
培亚种，在十字花科蔬菜种质资源分类中具有重要地位。本研究中从芜菁野生型植株花序中分离获
得 BcNAC2 全长基因，并对其序列特征及其表达特性进行了分析比较。本研究结果将为揭示 NAC2
转录因子在芸薹种植物种子形成过程中的分子遗传机制奠定研究基础，并为人工调控其种子的发育
进程提供客观的研究依据。
1 材料与方法
1.1 材料
本实验室在 2002 年从高代自交的芜菁 021-03 株系中发现了一株雌蕊明显退化，但其它植物学
性状与野生型植株没有明显差异的突变植株。取突变株的花药对同一群体的野生型植株的正常雌蕊
进行授粉，经过多代测交，获得了芜菁雌蕊退化株系，其退化性状稳定，将此突变体株系命名为 tpa，
其可育株为其对应的野生型。2008 年 9 月将 tpa 及其野生型种植于浙江大学蔬菜研究所试验圃中，
在抽薹期和开花期分别取根，茎，叶，小蕾，中蕾，大蕾，开放花和野生型植株授粉后 4、8、12、
16 d 的嫩角果，用锡箔纸包好后即投入液氮固定，于–76 ℃保存备用。
1.2 cDNA 和基因组 DNA 全长的扩增
参照曹家树等（1995）的方法并作适当改良，进行基因组 DNA 的提取。采用 Trizol 法提取总
RNA。cDNA 第一、二链合成根据 Clonetech 公司的 SMARTTM PCR cDNA Synthesis Kit User Manual
6 期 张海娟等：芜菁 NAC 转录因子 BcNAC2 基因的分离及其表达 1091

进行。
根据 NCBI 上拟南芥 NAC2 基因（At5g04410）序列设计两对引物，进行同源扩增，F1：
5′-ATGGGTCGTGGCTCAGTGACGTCGC-3′；R1：5′-CTTGTTCAGGAAGCGCATCTTCAG-3′；F2：
5′-GAATGATCTCGGCAATGCTCTA-3′；R2：5′-TATTGACAGCAAAGCACTGCCA-3′。用 tpa 野生
型植株的 DNA 和 cDNA 为模板，扩增芜菁 NAC2 基因的 DNA 和 cDNA 全长。PCR 体系：cDNA 或
DNA 模板（100 ng · μL-1）0.5 μL，上游引物（20 μmol · L-1）0.5 μL，下游引物（20 μmol · L-1）0.5 μL，
10 × PCR Buffer 2.5 μL（含 20 mmol · L-1 Mg2+），dNTPs（10 mmol · L-1）0.5 μL，Taq 酶（2 U）0.5 μL，
加 ddH2O 至 25 μL。PCR 程序：94 ℃，3 min，变性 94 ℃，1 min；退火 56 ℃，1 min；72 ℃延伸，
1 min。共 35 个循环，72 ℃延伸 7 min，4 ℃冰箱保存。PCR 产物经 DNA 凝胶回收试剂盒回收，插
入 pGEM- Easy vector，转化 DH5α 感受态细胞，蓝白斑筛选阳性克隆，经过菌液 PCR 检测正确后
送上海英骏生物技术有限公司测序。
1.3 序列特征分析、同源比对及进化树分析
利用 GENETYX 软件分析芜菁 BcNAC2 基因 cDNA 及 DNA 全长序列，编码的氨基酸组成、理
论等电点和分子量；利用 NPSA 中的 MLRC 方法预测其二级结构；利用网站 Expasy 中 Swiss Model
程序可同源建模，推测芜菁 BcNAC2 蛋白的三维结构；TMHMM 2.0 Server 进行跨膜区域分析；
SignalP 3.0 对蛋白质序列的信号肽进行预测（http：// www. cbs. dtu. dk/services/SignalP/）；Prosite 数
据库和 SMART 数据库分析 BcNAC2 基因的 NAC 结构域（http：// www. expasy. ch/prosite/），并分析
与拟南芥NAC2基因功能域的差异；利用 Prosite数据库进行 motif搜索，分析生物学意义位点；PSORT
（http：// psort. hgc. jp/form. html）预测亚细胞定位信息；应用 ClustalX 软件分析 BcNAC2 蛋白与
其它相关 NAC 蛋白的进化关系，构建分子进化树。
1.4 基因的表达分析
1.4.1 基因的半定量 RT-PCR 表达分析
以提取的总 RNA 反转录，合成 cDNA 一链，设计的引物为 F3：5′-CTCAATTGTTGGGATCTGAA
GATG-3′，R3：5′-GAGGTTATTGTTCTTGTCATATG-3′，扩增片段长度为 377 bp。内对照为 F4：5′-CTC
CGTGCAGTGGACTCATAC-3′，R4：5′-GAGGTTATTGTTCTTGTCATATG-3′，扩增片段长度为 318
bp。PCR 体系同上。PCR 程序：94 ℃，3 min，变性 94 ℃，30 s；退火 56 ℃，30 s；72 ℃延伸，30
s。共 26 个循环；72 ℃延伸 7 min。4 ℃冰箱保存。重复 3 次。
1.4.2 基因的组织原位杂交分析
开花期用同株芜菁野生型植株的花粉授粉，用授粉后 4 d 和 8 d 的嫩角果为试材，采用地高辛
标记的寡核苷酸探针的方法试验。利用 BLAST 系统对基因序列进行比对，获取特异性序列（一般
16 ~ 30 bp），应用 Primer Premier 5 验证和检测设计的寡核苷酸探针。反义探针：5′-TCTTTCTCTAC
CGCCTCTTTGCCTTGT-3′（27 bp）；正义探针：5′-ACAAGGCAAAGAGGCGGTAGAGAAAGA-3′
（27 bp）。用核固红复染，阳性表达为蓝黑色。具体操作步骤按照 Roche 公司的产品说明书进行。
2 结果与分析
2.1 BcNAC2 基因核苷酸及其氨基酸的序列分析
试验结果表明，BcNAC2 基因的最大开放阅读框为 1 683 bp。该基因有 6 个外显子，5 个内含子。
外显子—内含子交接处序列有 4 处遵循 GT-AG 的普遍规律，属于典型的剪接体识别序列。该基因
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共编码 560 个氨基酸序列（图 1）。该序列在第 9 ~ 159 个氨基酸编码 1 个 NAC 结构域，初步判断为
NAC 基因。利用 SMART 数据库进一步分析，发现其为 NAM 亚家族蛋白，并与拟南芥 NAC2 蛋白
进行比较，发现拟南芥 NAC2 在第 1 ~ 124 个氨基酸编码 1 个 NAC 功能结构域，同样为 NAM 亚家
族蛋白。

图 1 BcNAC2 编码的氨基酸序列分析
斜体部分为 NAC 结构域（9 ~ 159），双下划线为 N–糖基化位点（79 ~ 82，103 ~106，242 ~ 245，374 ~ 377），加粗部分为蛋白激酶 C
磷酸化位点（83 ~ 85，87 ~ 89，95 ~ 97，110 ~ 112，426 ~ 428，550 ~ 552，558 ~ 560），点短线部分为环腺苷酸和鸟苷酸依赖的蛋白磷酸
化激酶（446 ~ 449），虚下划线为酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点（18 ~ 21，42 ~ 45，71 ~ 74，95 ~ 98，137 ~ 140，269 ~ 272，303 ~ 306，329 ~
332，401 ~ 404，427 ~ 430，434 ~ 437），波浪形线为酪氨酸激酶磷酸化位点（61 ~ 68，85 ~ 91），灰色部分为 N–酰基化位点（4 ~ 9，79 ~
83，109 ~ 114，347 ~ 352，372 ~ 377，384 ~ 389，453 ~ 458，471 ~ 476，519 ~ 524，528 ~ 533，529 ~ 534，554 ~ 559），
字体较大的序列为亮氨酸拉链结构（375 ~ 396）。
Fig. 1 Analysis of the deduced amino acid sequence from BcNAC2 gene
Italic is NAC domains（9–159），double underline are N-glycosylation sites（79–82，103–106，242–245，374–377），overstriking are
protein kinase C phosphorylation sites（83–85，87–89，95–97，110–112，426–428，550–552，558–560），short break point is cAMP- and
cGMP-dependent protein kinase phosphorylation site（446–449），virtual underline are casein kinase II phosphorylation sites（18–21，42–45，
71–74，95–98，137–140，269–272，303–306，329–332，401–404，427–430，434–437），wave-shaped line are tyrosine kinase
phosphorylation sites（61–68，85–91），grisaille are N-myristoylation sites（4–9，79–83，109–114，347–352，372–377，384–389，
453–458，471–476，519–524，528–533，529–34，554–559），big script is Leucine zipper pattern（375–396）.

基于 SignalP 3.0 Server 的神经网络和隐马尔科夫模型分析，该蛋白不含信号肽序列。应用
TMHMM2.0 服务器预测BcNAC2蛋白很可能为跨膜蛋白。Protscale在线软件分析，根据Hphob./Kyte
& Doolittle 评分标准（Kyte & Doolittle，1982）预测在 C 端有疏水性区域，与该蛋白质的跨膜区域
分析结果一致。对 BcNAC2 蛋白功能结构域利用 Prosite Scan 进行 motif 搜索，并与拟南芥的 NAC2
蛋白比较（表 1），发现二者有显著的差异。此外，利用 NPSA 中的 MLRC 方法预测 BcNAC2 蛋白
的二级结构包含 19.64%的 α–螺旋，15.00%的 β–折叠和 65.36%的无规则卷曲结构。应用 Swiss
Model 程序的同源建模，推测芜菁 BcNAC2 蛋白的三维结构呈马鞍形。

6 期 张海娟等：芜菁 NAC 转录因子 BcNAC2 基因的分离及其表达 1093

表 1 芜菁 BcNAC2 蛋白与拟南芥 AtNAC2 蛋白功能域中 motif 数量的比较
Table 1 Comparison of motifs’ number in functional domains between the BcNAC2 and AtNAC2
位点 Site BcNAC2（amino acid） AtNAC2（amino acid）
N–糖基化位点 N-glycosylation sites 2（79 ~ 82，103 ~ 106） 2（57 ~ 60，79 ~ 82）
蛋白激酶 C 磷酸化位点
Protein kinase phosphorylation sites
4（83 ~ 85，87 ~ 89，95 ~ 97，110 ~ 112） 3（42 ~ 44，61 ~ 63，72 ~ 74）
酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点
Casein kinase Ⅱphosphorylation sites
5（18 ~ 21，42 ~ 45，71 ~ 74，95 ~ 98，137 ~ 140） 3（30 ~ 33，37 ~ 40，72 ~ 75）
N–酰基化位点 N-acylation sites 2（80 ~ 85，109 ~ 114） 3（4 ~ 9，58 ~ 63，85 ~ 90）
酪氨酸激酶磷酸化位点
Tyrosine kinase phosphorylation sites
2（61 ~ 68，85 ~ 91） 2（11 ~ 17，11 ~ 18）
2.2 BcNAC2 蛋白的同源比对和系统树构建
序列分析结果显示，BcNAC2为NAC蛋白。利用NAC的保守结构域检索NCBI，搜寻与BcNAC2
较高相似性的蛋白共30个，如拟南芥中的CUC1、CUC2、CUC3、NAC1、NAC2、NAM、NAP、ATAF1、
ATAF2、TIP；小麦中的GRAB1和GRAB2；水稻中的OsNAC1、OsNAC2、OsNAC3、OsNAC4、OsNAC5、
OsNAC6、OsNAC7、OsNAC8；大豆中的GmNAC1、GmNAC2、GmNAC3、GmNAC4、GmNAC5、
GmNAC6；烟草中的TERN和花生中的AhNAC1、AhNAC2、AhNAC3。
应用ClustalX 软件重建其分子进化树， BcNAC2与NAC2、TERN和GmNAC6的亲缘关系较近，
可以归为一类，均属于NAM亚家族。其中BcNAC2与NAC2的亲缘关系更近，说明同科植物的亲缘
关系较近（图2）。该结果同时显示，BcNAC2也可作为一个候选标记基因用于植物的系统进化分析。
通过对NAM亚家族的蛋白进行序列比对发现，在N端的NAC保守结构域处相似性较高，而在C端序
列呈现多样性，符合NAC转录因子的结构特点。
图2 BcNAC2与相关NAC蛋白的进化树分析
CUC1、CUC2、CUC3、NAC1、NAC2、NAM、NAP、ATAF1、ATAF2和TIP来自于拟南芥，GRAB1和GRAB2来自于小麦，OsNAC1、
OsNAC2、OsNAC3、OsNAC4、OsNAC5、OsNAC6、OsNAC7和OsNAC8来自于水稻，GmNAC1、GmNAC2、GmNAC3、GmNAC4、
GmNAC5和GmNAC6来自于大豆，TERN来自于烟草，AhNAC1、AhNAC2和AhNAC3来自于花生。
Fig. 2 Phylogenetic analysis about BcNAC2 and others NAC proteins
CUC1，CUC2，CUC3，NAC1，NAC2，NAM，NAP，ATAF1，ATAF2 and TIP came from Arabidopsis；GRAB1 and GRAB2 came from triticum；
OsNAC1，OsNAC2，OsNAC3，OsNAC4，OsNAC5，OsNAC6，OsNAC7 and OsNAC8 came from rice；GmNAC1，GmNAC2，GmNAC3，
GmNAC4，GmNAC5 and GmNAC6 came from soybean；TERN came from tobacco；AhNAC1，AhNAC2 and AhNAC3 came from peanut.
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2.3 BcNAC2 基因的表达分析
不同器官的半定量RT-PCR结果显示，BcNAC2基因呈部分组成型表达特征，在小蕾、中蕾中的
表达量较高，而在授粉受精后的嫩角果中，授粉后8 d的嫩角果表达量最高（图3）。研究结果表明，
BcNAC2基因可能参与了种子或胚的形成过程，这与拟南芥的AtNAC2的研究结果基本一致。该基因
不仅在前期营养器官中能正常表达，而且在后期的种子或胚的形成过程中也有较高丰度的表达，暗
示该基因在植物整个生长发育过程中都可能发挥着重要的作用。

图 3 不同植物器官的半定量 RT-PCR 结果
R：根；S：茎；L：叶片；SB：小蕾；MB：中蕾；BB：大蕾；F：开放花；4 d：授粉 4 d 的嫩角果；8 d：授粉 8 d 的嫩角果；
12 d：授粉 12 d 的嫩角果；16 d：授粉 16 d 的嫩角果；w：野生型；m：突变体。
Fig. 3 RT-PCR result of different plant organs
R：Root；S：Stem；L：Leave；SB：Small floral buds；MB：Middle floral buds；BB：Big floral buds；F：Flower；4 d：The silique of 4 days
after pollination；8 d：The silique of 8 days after pollination；12 d：The silique of 12 days after pollination；
16 d：The silique of 16 days after pollination； w：Wild type；m：Mutant of tpa.

组织原位杂交分析发现，BcNAC2基因在授粉后4 d胚珠的胚囊部位有较高的表达，而授粉8 d的
胚珠内部也有较高丰度的表达（图4），与半定量的分析结果基本一致，由此可以推测，BcNAC2基因
确实参与了种子或胚的形成过程。

图 4 芜菁 BcNAC2 组织原位杂交分析
A：正义探针，授粉后 4 d 嫩角果的胚珠；B：反义探针，授粉后 4 d 嫩角果的胚珠；C：正义探针，授粉后 8 d 嫩角果的胚珠；
D：反义探针，授粉后 8 d 嫩角果的胚珠。箭头所指为杂交信号部位，标尺为 200 µm。
Fig. 4 Results of in situ hybridization for BcNAC2 in turnip
A：Sense probe，ovule of 4 days after fertilization；B：Anti-sense probe，ovule of 4 days after fertilization；C：Sense probe，ovule of 8 days
after fertilization；D：Anti-sense probe，ovule of 8 days after fertilization. Arrows indicate the positive position and Bar = 200 µm.
6 期 张海娟等：芜菁 NAC 转录因子 BcNAC2 基因的分离及其表达 1095

3 讨论
应用同源序列扩增法分离获得了 BcNAC2 基因的全长序列，经 Promite 和 SMART 数据库软件
分析，该蛋白属于 NAC 蛋白家族的 NAM 亚家族。利用 NAC 的保守结构域检索 NCBI，从中挑选
相关的 NAC 蛋白，并进行多序列比对，结果发现，在 N–端的 NAC 保守结构域处相似性较高，而
在 C 端序列差异较大，同源性较低，表明不同的 NAC 转录因子可能通过不同的 C–端序列调控转
录活性，符合 NAC 转录因子的结构特点（Olsen et al.，2005）。
经过与拟南芥 NAC2 蛋白的功能结构域的比对发现，BcNAC2 与 AtNAC2 之间的 motif 数量差
异较大，结果表明，BcNAC2 的功能可能与 AtNAC2 的不完全一样，但是否因结构域内的特征序列
不同而发生变化还需要做进一步的分析和验证。研究发现，N–糖基化位点与蛋白质定位以及黏附、
细胞内信号转导等过程有关，并且糖基化位点还与转运有关（Asano et al.，1991；Buteau et al.，1998；
Li et al.，2004）。而 BcNAC2 蛋白的功能结构域中有两个 N–糖基化位点，预测这与 NAC 蛋白的定
位及粘附相关。最近的研究发现，拟南芥 NAC2 基因在高光下可以促进类黄酮的生物合成，原因可
能是在高光下会诱导相关的类黄酮基因表达，促使花青素积累（Morishita et al.，2009）。应用 CASTing
技术（cyclic amplification and selection of targets）找到 ANAC078 的识别序列，它能调控蛋白酶体、
过氧化物酶体、蛋白激酶相关的基因的表达（Yabuta et al.，2010）。
本研究中的RT-PCR结果显示，BcNAC2基因在 tpa突变体及其野生型花序中的表达并不像ATH1
基因芯片和 cDNA-AFLP 的结果那样有较大的差异，其原因可能有：（1）基因芯片和 cDNA-AFLP
分析方法更为敏感，且 RT-PCR 容易达到平台期；（2）取样时间稍早，幼期花蕾比例过多，由于幼
期花蕾的表达量明显高于后期花蕾的，因此，幼期花蕾比例过多容易对前期表达基因的真实表达水
平造成干扰。由于 BcNAC2 基因呈部分组成型表达特征，在生长发育的各个阶段都有表达，说明该
基因在植物整个生长发育期间都发挥作用，这与该基因具有多种生物学功能的结果是相吻合的。值
得一提的是，BcNAC2 基因在授粉后 8 d 的嫩角果中表达丰度最高，暗示该基因可能在种子或胚的发
育过程中起重要作用，但与雌蕊的组织发生关系不大。同时，根据基因表达预测网站（http: //
aramemnon. botanik. uni-koeln. de/request. ep）的结果显示，AtNAC2 基因在嫩角果和胚珠中有较高的
表达丰度。而组织原位杂交分析结果也表明，BcNAC2 基因在胚囊中有较高的表达，由此可以推测，
该基因在芜菁的种子或胚的形成过程中起着重要的作用。为进一步验证 BcNAC2 基因的功能，作者
已经构建了该基因的反义 RNA 抑制载体以及 RNAi 干涉载体，目前为止已经获得了 10 多株 KanR
植株，正对其可能的生物学功能进行进一步的研究。

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